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受体酪氨酸蛋白激酶Tyro3在大鼠脑的表达及定位分析(英文) 被引量：1
1
作者 赵全明 李灵敏 +1 位作者 张策 郭睿 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期905-910,共6页
目的:分析受体酪氨酸蛋白激酶(receptor tyrosine kinases,RTKs)亚家族TAM(Tyro3、Axl和Mer)在大鼠脑中的表达模式及细胞定位,并进一步探讨TAM在脑中表达的意义。方法:分别提取出生后3、9、15、30及52 d龄SD大鼠脑组织总RNA和总蛋白,实... 目的:分析受体酪氨酸蛋白激酶(receptor tyrosine kinases,RTKs)亚家族TAM(Tyro3、Axl和Mer)在大鼠脑中的表达模式及细胞定位,并进一步探讨TAM在脑中表达的意义。方法:分别提取出生后3、9、15、30及52 d龄SD大鼠脑组织总RNA和总蛋白,实时定量PCR(real time quantitative PCR)检测TAM mRNA水平的表达,Westernblotting检测TAM蛋白水平的表达,免疫组织化学染色检测Tyro3蛋白在大鼠脑中的定位。结果:Tyro3 mRNA在脑的表达水平显著高于Axl及Mer,从生后15 d龄开始有明显表达,随后呈现明显上调趋势,至生后52 d龄Tyro3mRNA的表达量达到15 d的3.2倍。Tyro3蛋白的表达水平也呈明显上调趋势,从生后15 d龄开始到52 d龄,Ty-ro3蛋白的表达量显著增高,生后52 d龄Tyro3蛋白的表达量是15 d龄的1.3倍;免疫组织化学染色结果显示Ty-ro3蛋白主要分布于皮层细胞,梨状皮层和海马区细胞内有Tyro3蛋白的强阳性着色;在亚细胞水平,Tyro3蛋白存在于锥体神经元的胞质和树突部分。结论:TAM受体酪氨酸蛋白激酶家族Tyro3基因及其编码产物在大鼠脑组织发育过程中呈阶段性上调表达,并且Tyro3蛋白在海马神经元胞体及轴突有显著高表达,提示Tyro3蛋白可能通过受体酪氨酸蛋白激酶信号转导途径参与了脑突触功能的调控。 展开更多
关键词 受体酪氨酸蛋白激酶 脑 实时定量聚合酶链反应 大鼠 SpragueDawley
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丰富环境对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠海马神经元凋亡及脑源性神经营养因子/酪氨酸蛋白激酶受体信号通路的影响 被引量：16
2
作者 赵彬 唐强 +2 位作者 朱路文 王艳 梁碧莹 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2019年第12期1418-1424,共7页
目的探讨丰富环境对缺血缺氧性脑损伤新生大鼠海马神经元凋亡及脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸蛋白激酶受体(TrkB)信号通路的影响。方法将48只7日龄Wistar大鼠幼仔,随机分成假手术组、模型组和丰富环境组,每组再分为14 d和28 d两个亚... 目的探讨丰富环境对缺血缺氧性脑损伤新生大鼠海马神经元凋亡及脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸蛋白激酶受体(TrkB)信号通路的影响。方法将48只7日龄Wistar大鼠幼仔,随机分成假手术组、模型组和丰富环境组,每组再分为14 d和28 d两个亚组,每个亚组8只。采用Rice方法制作缺氧缺血性脑损伤模型。模型组和假手术组不进行处理,丰富环境组在造模24 h后应用丰富环境进行刺激。造模后14 d和28 d,采用TUNEL法和双重免疫荧光染色法检测海马区神经元凋亡水平;采用免疫组化染色法检测海马区BDNF、TrkB蛋白表达情况。结果造模后14 d、28 d,与假手术组比较,模型组海马区TUNEL阳性细胞数、双标记阳性细胞数以及海马BDNF和TrkB阳性细胞数显著增加(t> 27.214, P <0.001),丰富环境组TUNEL阳性细胞数、双标记阳性细胞数显著少于模型组(t> 12.687, P <0.001),丰富环境组造模后28 d海马BDNF和TrkB阳性细胞数显著高于模型组(t> 137.998, P <0.001)。结论丰富环境刺激可以降低缺血缺氧性脑损伤新生大鼠海马神经元凋亡,上调BDNF、TrkB蛋白表达。 展开更多
关键词 缺血缺氧性脑损伤 丰富环境 脑源性神经营养因子 酪氨酸蛋白激酶受体 细胞凋亡 大鼠
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受体酪氨酸激酶EphA2在肾细胞癌发生及发展中的作用 被引量：3
3
作者 郭庆 王建东 石群立 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2012年第12期1333-1336,共4页
Eph(Erythropoietin producing hepatocellular carcinoma)基因家族属于受体酪氨酸激酶(receptor tyrosine kinases,RTKs)家族中最大的一个亚族,可分为EphA和EphB。Eph基因家族参与很多生理活动,同时Eph基因的过表达也可导致细胞的恶性... Eph(Erythropoietin producing hepatocellular carcinoma)基因家族属于受体酪氨酸激酶(receptor tyrosine kinases,RTKs)家族中最大的一个亚族,可分为EphA和EphB。Eph基因家族参与很多生理活动,同时Eph基因的过表达也可导致细胞的恶性转化。近年来,研究发现EphA2基因的表达与肾细胞癌的分级、淋巴结转移、无瘤生存期等都直接相关,也与肾细胞癌的发生、发展和预后有关。为此,EphA2基因可能成为诊断、预测肾细胞癌的恶性程度及判断预后的生物学标记物,为肾细胞癌的生物治疗提供新靶点和新思路。 展开更多
关键词 EPHA2 肾细胞癌 受体酪氨酸蛋白激酶
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Eph受体家族及其配体的信号转导途径及功能 被引量：8
4
作者 张晓光 药立波 苏成芝 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第4期498-501,共4页
Eph受体是已知最大的酪氨酸蛋白激酶受体家族 ,Eph受体和其膜附着型配体 (ephrin)在发育过程中呈现不同的表达模式 ,近来研究证明 ,Eph受体和其配体在包括神经网络形成 ,神经管和轴旁中胚层的成型(patterning) ,细胞迁移导向和轴突路径... Eph受体是已知最大的酪氨酸蛋白激酶受体家族 ,Eph受体和其膜附着型配体 (ephrin)在发育过程中呈现不同的表达模式 ,近来研究证明 ,Eph受体和其配体在包括神经网络形成 ,神经管和轴旁中胚层的成型(patterning) ,细胞迁移导向和轴突路径导引 ,血管形成等许多的发育过程中起重要作用 .Eph受体及其配体也与肿瘤发生有关 。 展开更多
关键词 EPH受体 ephrin配体 酪氨酸蛋白激酶受体 信号转导 生物功能
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脑源性神经营养因子及其受体在人卵巢的表达与卵泡发育的关系 被引量：9
5
作者 付娟 陈士岭 +4 位作者 邢福祺 张广亮 孔令红 朱亮 李红 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期40-44,共5页
目的 :研究脑源性神经营养因子 (BDNF)及其受体———酪氨酸蛋白激酶受体B(TrkB)在人卵巢中的表达。初步探讨其与卵泡发育的关系。方法 :取排卵前期人卵巢组织和来自体外受精 胚胎移植 (IVF ET)周期的取卵日卵泡液、人卵巢黄素化壁层... 目的 :研究脑源性神经营养因子 (BDNF)及其受体———酪氨酸蛋白激酶受体B(TrkB)在人卵巢中的表达。初步探讨其与卵泡发育的关系。方法 :取排卵前期人卵巢组织和来自体外受精 胚胎移植 (IVF ET)周期的取卵日卵泡液、人卵巢黄素化壁层颗粒细胞 (hMGLCs)、人卵巢黄素化卵丘颗粒细胞 (hCGLCs)、未受精卵母细胞或未成熟卵母细胞。用免疫组织化学SABC法研究BDNF在人卵巢组织中不同发育阶段卵泡的表达 ,酶联免疫吸附实验 (ELISA)方法检测BDNF在人卵泡液 ,hMGLCs和hCGLCs无血清培养上清液中的表达。用免疫组织化学SABC法研究TrkB在人卵巢组织不同发育阶段卵泡的表达 ,免疫细胞化学SABC法研究TrkB在hMGLCs,hCGLCs和未受精或未成熟卵母细胞的表达 ,Westernblotting方法检测TrkB在hMGLCs和hCGLCs的表达及其差异。结果 :人卵泡液中存在BDNF ,BDNF表达于初级卵泡和次级卵泡的颗粒细胞及窦状卵泡的卵丘颗粒细胞。TrkB表达于初级卵泡和次级卵泡的颗粒细胞、窦状细胞的卵丘颗粒细胞、壁层颗粒细胞及卵母细胞 ,壁层颗粒细胞表达量高于卵丘颗粒细胞。结论 :在人卵巢BDNF及其受体TrkB可能 (通过旁分泌和自分泌的方式 )参与颗粒细胞功能的完成和卵母细胞发育的调控。 展开更多
关键词 卵巢 脑源性神经营养因子 酪氨酸蛋白激酶受体B 颗粒细胞 卵母细胞
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人神经营养素-3受体基因的扩增及其重组腺病毒载体的构建
6
作者 王俊梅 曾园山 +5 位作者 刘然义 吴立志 薛刚 黄嘉凌 黄必军 黄文林 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期493-497,共5页
【目的】构建人神经营养素-3(neurotrophin-3,NT-3)受体(即酪氨酸蛋白激酶受体C,tyrosineproteinkinaseC,TrkC)基因重组的腺病毒表达载体。【方法】从人脑组织mRNA中扩增TrkC基因全长cDNA,定向克隆于穿梭质粒pShuttle中,获得一个带有CM... 【目的】构建人神经营养素-3(neurotrophin-3,NT-3)受体(即酪氨酸蛋白激酶受体C,tyrosineproteinkinaseC,TrkC)基因重组的腺病毒表达载体。【方法】从人脑组织mRNA中扩增TrkC基因全长cDNA,定向克隆于穿梭质粒pShuttle中,获得一个带有CMV启动子的表达盒。再将表达盒与腺病毒骨架DNA(Adeno-XviralDNA)体外连接,形成重组腺病毒质粒(pAd-TrkC)。用pAd-TrkC转染人胚肾293细胞后包装成有感染能力的重组腺病毒颗粒(Adeno-TrkC)。【结果】TrkC基因RT-PCR扩增产物为2478bp。Adeno-TrkC经PCR鉴定为正确重组子。【结论】应用体外连接法已构建了人TrkC重组腺病毒表达载体,这为进一步应用NT-3进行基因治疗中枢神经损伤奠定了基础。 展开更多
关键词 酪氨酸蛋白激酶受体C 基因克隆 重组腺病毒
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嵌合抗原受体T细胞治疗多形性胶质母细胞瘤的最新进展 被引量：1
7
作者 白玥 钟晓松 李文斌 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2017年第16期794-799,共6页
多形性胶质母细胞瘤(glioblastoma multiforme,GBM)是恶性程度最高的脑胶质瘤,传统手术结合放、化疗疗效有限。嵌合抗原受体是由单一分子组成的抗原重组受体,重新定向T细胞的特异性和功能,由CD28或4-1BB构成的第二代CAR-T能识别抗原,完... 多形性胶质母细胞瘤(glioblastoma multiforme,GBM)是恶性程度最高的脑胶质瘤,传统手术结合放、化疗疗效有限。嵌合抗原受体是由单一分子组成的抗原重组受体,重新定向T细胞的特异性和功能,由CD28或4-1BB构成的第二代CAR-T能识别抗原,完全活化T细胞并增强T细胞功能和持久性,是新兴GBM疗法的关注焦点。本文从CAR-T研究现状出发,主要介绍其发展历程和GBM相关的有效靶点,综述其理论基础,着重以白介素13受体α2、表皮生长因子受体变异Ⅶ、人表皮生长因子受体2和酪氨酸蛋白激酶受体A2这四种胶质瘤相关抗原为例,探讨靶点的结构、功能特性、前期研究和临床研究前景。选择性表达在GBM的白介素13受体α2在临床Ⅰ期治疗复发性GBM是安全有效的;表皮生长因子受体变异Ⅷ只存在于癌细胞和胶质母细胞瘤干细胞,与预后不良密切相关,正在进行Ⅰ、Ⅱ期临床试验;表皮生长因子受体2和酪氨酸蛋白激酶受体A也取得重大进展。这些特异性CAR-T可能成为治疗相应靶向阳性的GBM的重要免疫疗法。本文集中总结了目前CAR-T治疗GBM的应用价值及挑战。 展开更多
关键词 多形性胶质母细胞瘤 嵌合抗原受体T细胞 白介素13受体α2 表皮生长因子受体变异Ⅷ 人表皮生长因子受体2 酪氨酸蛋白激酶受体A2
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糖皮质激素抑制脉络膜新生血管的信号通道 被引量：1
8
作者 兰兰 徐建锋 王雨生 《眼科新进展》 CAS 2007年第12期940-944,共5页
脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)是老年人主要致盲眼病之一。研究证实,磷脂酰肌醇激酶、蛋白激酶C和Ca2+等参与活化受体酪氨酸蛋白激酶的信号通路,以及受体酪氨酸蛋白激酶的持续活化对CNV的发生发展起关键性作用。而... 脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)是老年人主要致盲眼病之一。研究证实,磷脂酰肌醇激酶、蛋白激酶C和Ca2+等参与活化受体酪氨酸蛋白激酶的信号通路,以及受体酪氨酸蛋白激酶的持续活化对CNV的发生发展起关键性作用。而糖皮质激素可以通过调节该通路的活性而抑制CNV。 展开更多
关键词 糖皮质激素 脉络膜新生血管 受体酪氨酸蛋白激酶 磷脂酰肌醇-3激酶 蛋白激酶C 钙离子
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腺病毒介导的ING4基因抑制人脑胶质瘤细胞增殖迁移的机制研究 被引量：1
9
作者 湛利平 李巧玉 +3 位作者 张焱 张铁军 袁志诚 陆培松 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1188-1190,1194,共4页
目的:观察ING4对人脑胶质瘤细胞株U251增殖及迁移的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:以Ad-ING4及腺病毒空载体转染U251细胞,RT-PCR法检测ING4基因的表达水平,Western blot法检测目的蛋白的表达。用MTT试验检测ING4对于U251细胞增殖... 目的:观察ING4对人脑胶质瘤细胞株U251增殖及迁移的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:以Ad-ING4及腺病毒空载体转染U251细胞,RT-PCR法检测ING4基因的表达水平,Western blot法检测目的蛋白的表达。用MTT试验检测ING4对于U251细胞增殖的影响,通过BoydenChamber试验检测其对U251细胞侵袭能力的影响。并用免疫印迹方法检测NGF、TrkA的表达变化,通过pull-down试验检测活性RhoA表达。结果:U251细胞感染Ad-ING4 48 h后,RT-PCR结果显示ING4在U251中过表达,且U251细胞的增殖及迁移能力受到明显抑制。免疫印迹方法显示感染AdING4的U251细胞中TrkA和NGF的表达降低,pull-down试验结果显示活性RhoA表达降低。结论:Ad-ING4可以抑制胶质瘤细胞株U251的增殖和迁移,这一作用可能是通过抑制NGF、TrkA和活性RhoA的表达实现的。 展开更多
关键词 生长抑制因子 神经生长因子 酪氨酸蛋白激酶受体 胶质瘤 RHOA
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EphB2配体结合域基因片段的高效表达
10
作者 张晓光 刘新平 +4 位作者 李福洋 茹晓荣 季少平 药立波 苏成芝 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期181-183,共3页
目的 :对酪氨酸蛋白激酶受体EphB2胞外的配体结合区基因进行表达研究。方法 :编码EphB2胞外的配体结合区基因片段克隆于pBluescriptSK(- )质粒中 ,经全自动序列分析仪测序正确后 ,再克隆重组入表达载体pGEX4T 1,构建高效表达克隆pHT ,... 目的 :对酪氨酸蛋白激酶受体EphB2胞外的配体结合区基因进行表达研究。方法 :编码EphB2胞外的配体结合区基因片段克隆于pBluescriptSK(- )质粒中 ,经全自动序列分析仪测序正确后 ,再克隆重组入表达载体pGEX4T 1,构建高效表达克隆pHT ,转化大肠杆菌DH5α表达。结果 :经IPTG诱导 5h ,蛋白表达即达高峰 ,SDS PAGE及凝胶密度扫描分析 ,表达出约41kD大小的蛋白 ,占菌体总蛋白的 35 %。结论 :该区基因片段的高效表达为进一步制备其抗体 ,研究其配体 展开更多
关键词 EphB2配体 酪氨酸蛋白激酶受体 基因表达 胃肿瘤
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