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非放射性反义RNA探针的原位杂交技术探讨
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作者 王一菱 郑乃刚 +3 位作者 丁一 吴景兰 张晋平 丰艳 《河南医科大学学报》 1996年第1期6-9,共4页
以自制的反义RNA探针研究了非放射性标记原位杂交技术。结果表明:①以小柱装置(minicolumn)提取质粒DNA,方法快速、简便、且纯度好;②以线性化的质粒DNA为模板进行体外转录,加Bio-14-CTP标记,需用... 以自制的反义RNA探针研究了非放射性标记原位杂交技术。结果表明:①以小柱装置(minicolumn)提取质粒DNA,方法快速、简便、且纯度好;②以线性化的质粒DNA为模板进行体外转录,加Bio-14-CTP标记,需用pH8.0的转录缓冲液;③实验中需防止RNase污染,但也可应用RNase作为实验对照和减低背景;④杂交液中以不加硫酸葡聚糖为宜,杂交温度以42℃为佳。 展开更多
关键词 反义rna探针 非放射性标记 原位杂交
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以反意义RNA为探针的原位杂交组织化学方法 被引量:1
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作者 马维骏 杨胜利 邹冈 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1990年第4期314-317,共4页
原位杂交组织化学方法是在组织及细胞水平上研究基因表达及调控的重要方法之一。我们利用一个由体外转录产生的与小鼠阿黑促皮原(POMC)mRNA顺序互补的反意义RNA为探针,直接在大鼠垂体的组织切片上进行杂交反应。结果表明,杂交在反意义RN... 原位杂交组织化学方法是在组织及细胞水平上研究基因表达及调控的重要方法之一。我们利用一个由体外转录产生的与小鼠阿黑促皮原(POMC)mRNA顺序互补的反意义RNA为探针,直接在大鼠垂体的组织切片上进行杂交反应。结果表明,杂交在反意义RNA探针及POMC mRNA之间进行,并形成稳定的杂交分子。放射自显影影像显示出垂体中POMC mRNA的分布及相对含量。 展开更多
关键词 原位杂交 组织化学 反义rna探针
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整体原位杂交法研究斑马鱼(Danio rerio)胚胎发育过程中胸苷酸合成酶(TS)的表达 被引量:1
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作者 牛荣丽 梁丽英 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期81-85,共5页
收集不同发育时期的斑马鱼胚胎,制备DIG标记的TS反义RNA探针,采用整体原位杂交方法研究胸苷酸合成酶(TS)基因在斑马鱼胚胎发育各期的时空表达状况。结果表明,在所取样的各个阶段,TS基因均有转录,但其部位不同,中囊胚过渡前后mRNA显现的... 收集不同发育时期的斑马鱼胚胎,制备DIG标记的TS反义RNA探针,采用整体原位杂交方法研究胸苷酸合成酶(TS)基因在斑马鱼胚胎发育各期的时空表达状况。结果表明,在所取样的各个阶段,TS基因均有转录,但其部位不同,中囊胚过渡前后mRNA显现的部位仅存在于受精卵的动物极,10hpf时存在于整个胚胎的外围,至24hpf后集中到头部及其躯干部。112hpf在心脏部位强表达,其余部位表达相对较弱。 展开更多
关键词 胸苷酸合成酶(TS) 斑马鱼 反义rna探针 整体原位杂交
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斑马鱼胚胎发育过程中Mef2c的表达
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作者 刘学飞 王跃祥 +5 位作者 蒋璆 钱林溪 高广文 董永新 钟涛 宋后燕 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期89-91,F0002,共4页
目的探讨Mef2c在斑马鱼胚胎骨骼肌和心肌中表达的时相变化。方法收集不同发育时期的AB野生型斑马鱼胚胎,采用整体原位杂交技术检测Mef2c在骨骼肌和心肌的转录情况。结果Mef2c在体节中的表达约在13hpf,而在心脏中的表达出现在13hpf以后,... 目的探讨Mef2c在斑马鱼胚胎骨骼肌和心肌中表达的时相变化。方法收集不同发育时期的AB野生型斑马鱼胚胎,采用整体原位杂交技术检测Mef2c在骨骼肌和心肌的转录情况。结果Mef2c在体节中的表达约在13hpf,而在心脏中的表达出现在13hpf以后,与体节中的表达时间基本平行。另外,Mef2c在体节和心脏中的表达一直维持到48hpf。结论明确了Mef2c在斑马鱼胚胎骨骼肌和心肌发育的表达时相变化,为研究斑马鱼早期骨骼肌和心肌发育的调控机制提供了一定的理论基础。 展开更多
关键词 Mef2c 斑马鱼 反义rna探针 整体原位杂交
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