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反义RNA寡核苷酸及其与脂质体的复合物对于乙型肝炎病毒的抑制（英文）
1
作者
昝琰璐
田波
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2014年第4期362-370,共9页
我们设计合成了特异性靶向乙型肝炎病毒(HBV)mRNA的反义RNA寡核苷酸P-2987、X-60和X-519.在瞬时转染pHBV1.3质粒(含有1.3拷贝的HBV基因组)的HepG2细胞和整合了HBV基因组的HepG2.2.15细胞中,转染2μmol/L的反义RNA寡核苷酸,ELISA和实时定...
我们设计合成了特异性靶向乙型肝炎病毒(HBV)mRNA的反义RNA寡核苷酸P-2987、X-60和X-519.在瞬时转染pHBV1.3质粒(含有1.3拷贝的HBV基因组)的HepG2细胞和整合了HBV基因组的HepG2.2.15细胞中,转染2μmol/L的反义RNA寡核苷酸,ELISA和实时定量PCR结果表明,这3条寡核苷酸可以明显抑制HBV的复制和抗原表达.在HBV转基因鼠中,尾静脉注射反义RNA寡核苷酸,结果表明,肝脏中HBV的复制得到了抑制,但是血清中抗原含量和HBV DNA拷贝数没有明显变化.反义RNA寡核苷酸X-519与脂质体的复合物可以增强其对于HBV在肝脏中复制的抑制作用.在通过高压尾静脉注射pHBV1.3质粒建立的HBV急性感染模型中,反义RNA寡核苷酸X-519可以显著地抑制HBV在肝脏中的复制以及降低血清中病毒抗原水平和DNA拷贝数.上述实验结果说明,X-519及其与脂质体的复合物对于HBV的复制和抗原表达起到明显的抑制作用,可能作为一种潜在的针对HBV的基因治疗药物.
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关键词
乙型肝炎病毒
反义
rna
寡核苷酸
HBV转基因鼠
高压尾静脉注射
反义rna寡核苷酸与脂质体复合物
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职称材料
放射性碘标记反义寡核苷酸在荷人淋巴瘤裸鼠中的分布及显像研究
被引量：
13
2
作者
沈晶
王荣福
+2 位作者
张春丽
刘萌
郭凤琴
《北京大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第6期655-659,共5页
目的：探讨用放射性碘标记的框架区(framework region mRNA．FR)mRNA 反义寡核苷酸(antisense oligo-nucleotide，ASON)作为 B 细胞淋巴瘤反义显像剂及反义治疗药物的可能性 方法：通过氯胺-T 法用碘[^(125)I 与碘[^(131)I]标记含酪胺...
目的：探讨用放射性碘标记的框架区(framework region mRNA．FR)mRNA 反义寡核苷酸(antisense oligo-nucleotide，ASON)作为 B 细胞淋巴瘤反义显像剂及反义治疗药物的可能性 方法：通过氯胺-T 法用碘[^(125)I 与碘[^(131)I]标记含酪胺的18聚体寡核苷酸获得^(125)I-或^(131)I-FR-ASON，建立荷人淋巴瘤裸鼠动物模型 将148 kBq^(125)I-FR-ASON(2～μg)经尾静脉注入正常小鼠，于不同时间处死小鼠，测定不同组织及标准源的放射性计数 荷瘤裸鼠瘤内注入脂质体包裹的3.33 MBq ^(131)I-FR-ASON(7～9μg)，分别于注射后不同时间进行单光子发射计算机断层(single photon emission computer tomographv,SPECT)显像，以脂质体包裹的正义寡核苷酸作为对照，24h 显像后处死裸鼠，取出血液、重要器官和肿瘤组织，测定各组织的放射性计数，并计算每克组织摄取率及肿瘤与非瘤组织放射性摄取比值(T/NT) 结果：^(125)I-FR-ASON 注入正常小鼠体内后1h．各脏器的放射性摄取达高峰，24h 基本清除 肝、胃和肠放射性分布最高，骨、肌肉、脑中放射性分布较少 荷瘤裸鼠瘤内注入脂质体包裹的^(131)I 标记 ASON后立即用 SPECT 成像仅见肿瘤部位，1和2h 成像可见小踪剂从肿瘤到腹腔，24h 仍可见肿瘤显像 比较24h
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关键词
淋巴瘤
碘标记
裸鼠
放射性碘
脂质体
包裹
肿瘤
反义
寡核苷酸
正常小鼠
rna
器官
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职称材料
^(99)Tc^m标记反义miR208b寡核苷酸及其转染离体肥大心肌细胞的实验研究
3
作者
王静
冯会娟
+3 位作者
欧阳伟
孙云钢
吴菊清
陈盼
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第9期1316-1319,共4页
目的探索用放射性核素99Tcm标记反义mi R208b寡核苷酸,并转染离体早期肥大心肌细胞的实验过程及方法。方法合成针对mi R208b的反义mi R寡核苷酸(AMO),LNA(带锁核酸)修饰AMO,将双功能螯合剂NHS-MAG3(N-羟基琥珀酰亚胺-巯基乙酰基三甘氨酸...
目的探索用放射性核素99Tcm标记反义mi R208b寡核苷酸,并转染离体早期肥大心肌细胞的实验过程及方法。方法合成针对mi R208b的反义mi R寡核苷酸(AMO),LNA(带锁核酸)修饰AMO,将双功能螯合剂NHS-MAG3(N-羟基琥珀酰亚胺-巯基乙酰基三甘氨酸)与LNA-AMO偶联后,用99Tcm标记,然后用Sep-Pak C18反相层析法对NHS-MAG3-LNA-AMO及其标记物进行洗脱纯化,前者同时经Gene Quant DNA/RNA calculator测定在260 nm波长处的吸光度;不同检测方法测定纯化后标记物的标记率、放化纯度、稳定性以及与靶基因杂交的活性;建立由血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的离体心肌肥大细胞模型,检验早期肥大心肌细胞内mi RNA208b的相对表达量以及经脂质体包裹的99Tcm-NHS-MAG3-LNA-AMO在早期肥大心肌细胞内的滞留率。结果纯化后的标记物标记率>84%,放化纯度>86%,标记物分别在新鲜人血清、生理盐水中孵育12 h后,放化纯度均大于80%,并具有与靶向基因杂合的能力。离体心肌肥大模型成功建立,测得早期心肌肥大细胞内mi RNA208b表达升高,且最终标记物转染细胞后6 h滞留率大于20%。结论在双功能螯合剂NHS-MAG3以及LNA的介导下,成功将放射性核素99Tcm标记于NHSMAG3-LNA-AMO,最后将反义探针顺利转染早期离体肥大心肌细胞,这为后续的在体心肌肥大核素显像提供重要实验基础。
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关键词
MI
rna
208b
99Tcm
反义
mi
R
寡核苷酸
(AMO)
NHS-MAG3
心肌肥大
脂质体
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职称材料
题名
反义RNA寡核苷酸及其与脂质体的复合物对于乙型肝炎病毒的抑制（英文）
1
作者
昝琰璐
田波
机构
中国科学院微生物研究所
中国科学院大学
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2014年第4期362-370,共9页
基金
supported by grants from The National Basic ResearchProgram of China(2011CB504703,2010CB530102)
The NationalNatural Science Foundation of China(81021003)~~
文摘
我们设计合成了特异性靶向乙型肝炎病毒(HBV)mRNA的反义RNA寡核苷酸P-2987、X-60和X-519.在瞬时转染pHBV1.3质粒(含有1.3拷贝的HBV基因组)的HepG2细胞和整合了HBV基因组的HepG2.2.15细胞中,转染2μmol/L的反义RNA寡核苷酸,ELISA和实时定量PCR结果表明,这3条寡核苷酸可以明显抑制HBV的复制和抗原表达.在HBV转基因鼠中,尾静脉注射反义RNA寡核苷酸,结果表明,肝脏中HBV的复制得到了抑制,但是血清中抗原含量和HBV DNA拷贝数没有明显变化.反义RNA寡核苷酸X-519与脂质体的复合物可以增强其对于HBV在肝脏中复制的抑制作用.在通过高压尾静脉注射pHBV1.3质粒建立的HBV急性感染模型中,反义RNA寡核苷酸X-519可以显著地抑制HBV在肝脏中的复制以及降低血清中病毒抗原水平和DNA拷贝数.上述实验结果说明,X-519及其与脂质体的复合物对于HBV的复制和抗原表达起到明显的抑制作用,可能作为一种潜在的针对HBV的基因治疗药物.
关键词
乙型肝炎病毒
反义
rna
寡核苷酸
HBV转基因鼠
高压尾静脉注射
反义rna寡核苷酸与脂质体复合物
Keywords
hepatitis B virus, antisense
rna
oligonucleotides, HBV transgenic mice, hydrodynamic injection, cationicliposome-
rna
complex
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
放射性碘标记反义寡核苷酸在荷人淋巴瘤裸鼠中的分布及显像研究
被引量：
13
2
作者
沈晶
王荣福
张春丽
刘萌
郭凤琴
机构
北京大学第医院核医学科
出处
《北京大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第6期655-659,共5页
基金
国家自然科学基金(30270410)资助~~
文摘
目的：探讨用放射性碘标记的框架区(framework region mRNA．FR)mRNA 反义寡核苷酸(antisense oligo-nucleotide，ASON)作为 B 细胞淋巴瘤反义显像剂及反义治疗药物的可能性 方法：通过氯胺-T 法用碘[^(125)I 与碘[^(131)I]标记含酪胺的18聚体寡核苷酸获得^(125)I-或^(131)I-FR-ASON，建立荷人淋巴瘤裸鼠动物模型 将148 kBq^(125)I-FR-ASON(2～μg)经尾静脉注入正常小鼠，于不同时间处死小鼠，测定不同组织及标准源的放射性计数 荷瘤裸鼠瘤内注入脂质体包裹的3.33 MBq ^(131)I-FR-ASON(7～9μg)，分别于注射后不同时间进行单光子发射计算机断层(single photon emission computer tomographv,SPECT)显像，以脂质体包裹的正义寡核苷酸作为对照，24h 显像后处死裸鼠，取出血液、重要器官和肿瘤组织，测定各组织的放射性计数，并计算每克组织摄取率及肿瘤与非瘤组织放射性摄取比值(T/NT) 结果：^(125)I-FR-ASON 注入正常小鼠体内后1h．各脏器的放射性摄取达高峰，24h 基本清除 肝、胃和肠放射性分布最高，骨、肌肉、脑中放射性分布较少 荷瘤裸鼠瘤内注入脂质体包裹的^(131)I 标记 ASON后立即用 SPECT 成像仅见肿瘤部位，1和2h 成像可见小踪剂从肿瘤到腹腔，24h 仍可见肿瘤显像 比较24h
关键词
淋巴瘤
碘标记
裸鼠
放射性碘
脂质体
包裹
肿瘤
反义
寡核苷酸
正常小鼠
rna
器官
Keywords
Lymphoma
Ohgonucleotides antisense
Iodine radioisotopes
Isotopelabeling
分类号
R817 [医药卫生—影像医学与核医学]
R733 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
^(99)Tc^m标记反义miR208b寡核苷酸及其转染离体肥大心肌细胞的实验研究
3
作者
王静
冯会娟
欧阳伟
孙云钢
吴菊清
陈盼
机构
南方医科大学珠江医院核医学科
出处
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第9期1316-1319,共4页
基金
广东省科技计划项目(2012B031800125)
广东省自然科学基金项目(10151051501000036)
广州市海珠区科技计划项目(048101040005589)
文摘
目的探索用放射性核素99Tcm标记反义mi R208b寡核苷酸,并转染离体早期肥大心肌细胞的实验过程及方法。方法合成针对mi R208b的反义mi R寡核苷酸(AMO),LNA(带锁核酸)修饰AMO,将双功能螯合剂NHS-MAG3(N-羟基琥珀酰亚胺-巯基乙酰基三甘氨酸)与LNA-AMO偶联后,用99Tcm标记,然后用Sep-Pak C18反相层析法对NHS-MAG3-LNA-AMO及其标记物进行洗脱纯化,前者同时经Gene Quant DNA/RNA calculator测定在260 nm波长处的吸光度;不同检测方法测定纯化后标记物的标记率、放化纯度、稳定性以及与靶基因杂交的活性;建立由血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的离体心肌肥大细胞模型,检验早期肥大心肌细胞内mi RNA208b的相对表达量以及经脂质体包裹的99Tcm-NHS-MAG3-LNA-AMO在早期肥大心肌细胞内的滞留率。结果纯化后的标记物标记率>84%,放化纯度>86%,标记物分别在新鲜人血清、生理盐水中孵育12 h后,放化纯度均大于80%,并具有与靶向基因杂合的能力。离体心肌肥大模型成功建立,测得早期心肌肥大细胞内mi RNA208b表达升高,且最终标记物转染细胞后6 h滞留率大于20%。结论在双功能螯合剂NHS-MAG3以及LNA的介导下,成功将放射性核素99Tcm标记于NHSMAG3-LNA-AMO,最后将反义探针顺利转染早期离体肥大心肌细胞,这为后续的在体心肌肥大核素显像提供重要实验基础。
关键词
MI
rna
208b
99Tcm
反义
mi
R
寡核苷酸
(AMO)
NHS-MAG3
心肌肥大
脂质体
Keywords
mi
rna
208b
99Tcm
anti-mi R oligonucleotide
NHS-MAG3
myocardial hypertrophy
liposome
分类号
R817 [医药卫生—影像医学与核医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
反义RNA寡核苷酸及其与脂质体的复合物对于乙型肝炎病毒的抑制（英文）
昝琰璐
田波
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2014
0
在线阅读
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职称材料
2
放射性碘标记反义寡核苷酸在荷人淋巴瘤裸鼠中的分布及显像研究
沈晶
王荣福
张春丽
刘萌
郭凤琴
《北京大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2004
13
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
^(99)Tc^m标记反义miR208b寡核苷酸及其转染离体肥大心肌细胞的实验研究
王静
冯会娟
欧阳伟
孙云钢
吴菊清
陈盼
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015
0
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