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原核生物类泛素蛋白Pup-蛋白酶体系统的研究进展
被引量：
13
1
作者
汪春军
林进
张俊杰
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2011年第12期1091-1098,共8页
真核泛素-蛋白酶体系统是细胞内蛋白质降解的重要机制,参与细胞生理功能调控,因此泛素-蛋白酶体通路的机制和功能研究备受关注.20世纪80年代,人们就发现放线菌中存在原核蛋白酶体,但是对于原核蛋白酶体的功能和作用机理长期以来了解甚少...
真核泛素-蛋白酶体系统是细胞内蛋白质降解的重要机制,参与细胞生理功能调控,因此泛素-蛋白酶体通路的机制和功能研究备受关注.20世纪80年代,人们就发现放线菌中存在原核蛋白酶体,但是对于原核蛋白酶体的功能和作用机理长期以来了解甚少.2008年,Pearce等在结核分枝杆菌中发现了原核类泛素蛋白(prokaryotic ubiquitin-like protein,Pup).在Dop、PafA、Mpa等辅助因子的作用下,Pup可以共价标记多种功能蛋白,并介导被标记蛋白质通过蛋白酶体降解,Pup-蛋白酶体系统的发现揭示了原核生物中一个崭新的蛋白质降解机制.Pup-蛋白酶体系统的靶蛋白涉及物质中间代谢、信号通路、毒性和抗毒性因子、细胞壁和细胞膜组分等多个方面,并且与结核分枝杆菌的致病性相关,被认为是新的结核病治疗药物靶点.本文就原核Pup-蛋白酶体系统的作用机理及其功能的研究进展作一综述.
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关键词
原核
类
泛素
蛋白
(
pup
)
蛋白
酶体
蛋白
质降解
结核分枝杆菌
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职称材料
原核生物的蛋白质翻译后修饰
被引量：
10
2
作者
谭永聪
王启军
+1 位作者
赵国屏
姚玉峰
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2011年第3期197-203,共7页
蛋白质翻译后修饰是调节蛋白质生物学功能的关键步骤之一,是蛋白质动态反应和相互作用的一个重要分子基础,同时,它也是细胞信号网络调控的重要靶点.目前,蛋白质翻译后修饰已经成为国际上蛋白质研究的一个极其重要的热点.在原核生物生命...
蛋白质翻译后修饰是调节蛋白质生物学功能的关键步骤之一,是蛋白质动态反应和相互作用的一个重要分子基础,同时,它也是细胞信号网络调控的重要靶点.目前,蛋白质翻译后修饰已经成为国际上蛋白质研究的一个极其重要的热点.在原核生物生命活动中,蛋白质的翻译后修饰具有十分重要的作用,如参与细胞信号传导、物质的代谢、蛋白质的降解、致病微生物的致病过程等.综述了经典原核生物蛋白质翻译后修饰的种类、机制和功能,同时介绍了最近发现的原核生物的全局性乙酰化修饰以及结核分枝杆菌中类泛素化修饰.
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关键词
原核
生物
蛋白
质翻译后修饰
糖基化
磷酸化
脂质化
乙酰化
类
泛素
化
甲基化
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职称材料
人泛素偶联酶UBE2C/UbcH10在大肠埃希菌中的诱导表达与鉴定
被引量：
1
3
作者
杜红延
杨学习
+3 位作者
马奎
黄湘
王穗海
李明
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第2期166-168,共3页
目的构建稳定表达人类泛素偶联酶E2C(UBE2C/UbcH10)蛋白的原核表达载体并在大肠埃希菌中诱导其表达,纯化并鉴定该重组蛋白。方法通过PCR扩增获得UbcH10基因,将其克隆至原核表达载体pET32a(+)中,构建重组表达载体,经EcoRI/XhoI双酶切及...
目的构建稳定表达人类泛素偶联酶E2C(UBE2C/UbcH10)蛋白的原核表达载体并在大肠埃希菌中诱导其表达,纯化并鉴定该重组蛋白。方法通过PCR扩增获得UbcH10基因,将其克隆至原核表达载体pET32a(+)中,构建重组表达载体,经EcoRI/XhoI双酶切及测序验证正确后,转化至大肠埃希菌BL21,经IPTG(终浓度1mmol/L)诱导表达4h。采用SDS-PAGE、Western blotting等方法鉴定表达产物,用Ni-Sepharose亲和层析和Sephadex G-50分子筛纯化UbcH10蛋白。结果成功构建UbcH10基因的原核表达载体,经IPTG诱导后在大肠埃希菌BL21中获得大量重组蛋白。该重组蛋白以可溶形式表达,表观分子量约为29kD,表达量约占菌体蛋白总量的40%。Western blotting检测在29kD附近出现预期条带,与目的蛋白的理论计算值相吻合。纯化后的UbcH10蛋白终浓度为8.82mg/ml,纯度达90%以上。结论成功表达并纯化了UbcH10重组蛋白,为进一步研究其结构、功能以及该蛋白在肿瘤发生发展过程中的作用奠定了基础。
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关键词
泛素
蛋白
连接酶
类
原核
表达
克隆
分子
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职称材料
题名
原核生物类泛素蛋白Pup-蛋白酶体系统的研究进展
被引量：
13
1
作者
汪春军
林进
张俊杰
机构
北京林业大学理学院
北京师范大学生命科学学院
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2011年第12期1091-1098,共8页
基金
国家自然科学基金资助项目(30770030,31070714)
北京市科技新星计划资助项目(2005B47)~~
文摘
真核泛素-蛋白酶体系统是细胞内蛋白质降解的重要机制,参与细胞生理功能调控,因此泛素-蛋白酶体通路的机制和功能研究备受关注.20世纪80年代,人们就发现放线菌中存在原核蛋白酶体,但是对于原核蛋白酶体的功能和作用机理长期以来了解甚少.2008年,Pearce等在结核分枝杆菌中发现了原核类泛素蛋白(prokaryotic ubiquitin-like protein,Pup).在Dop、PafA、Mpa等辅助因子的作用下,Pup可以共价标记多种功能蛋白,并介导被标记蛋白质通过蛋白酶体降解,Pup-蛋白酶体系统的发现揭示了原核生物中一个崭新的蛋白质降解机制.Pup-蛋白酶体系统的靶蛋白涉及物质中间代谢、信号通路、毒性和抗毒性因子、细胞壁和细胞膜组分等多个方面,并且与结核分枝杆菌的致病性相关,被认为是新的结核病治疗药物靶点.本文就原核Pup-蛋白酶体系统的作用机理及其功能的研究进展作一综述.
关键词
原核
类
泛素
蛋白
(
pup
)
蛋白
酶体
蛋白
质降解
结核分枝杆菌
Keywords
prokaryotic ubiquitin-like protein（
pup
）
proteasome
protein degradation
Mycobacterium tuberculosis
分类号
Q71 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
原核生物的蛋白质翻译后修饰
被引量：
10
2
作者
谭永聪
王启军
赵国屏
姚玉峰
机构
上海交通大学医学院基础医学院病原生物学教研室
中国科学院上海植物生理与生态研究所合成生物学实验室
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2011年第3期197-203,共7页
基金
国家自然科学基金(30870100)
国家重点基础研究发展计划(973)(2009CB522605)资助项目~~
文摘
蛋白质翻译后修饰是调节蛋白质生物学功能的关键步骤之一,是蛋白质动态反应和相互作用的一个重要分子基础,同时,它也是细胞信号网络调控的重要靶点.目前,蛋白质翻译后修饰已经成为国际上蛋白质研究的一个极其重要的热点.在原核生物生命活动中,蛋白质的翻译后修饰具有十分重要的作用,如参与细胞信号传导、物质的代谢、蛋白质的降解、致病微生物的致病过程等.综述了经典原核生物蛋白质翻译后修饰的种类、机制和功能,同时介绍了最近发现的原核生物的全局性乙酰化修饰以及结核分枝杆菌中类泛素化修饰.
关键词
原核
生物
蛋白
质翻译后修饰
糖基化
磷酸化
脂质化
乙酰化
类
泛素
化
甲基化
Keywords
prokaryote, post-translational modification, acetylation, ubiquitin-like modification, methylation glycosylation, phosphorylation, lipid modification,
分类号
Q93 [生物学—微生物学]
Q5 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
人泛素偶联酶UBE2C/UbcH10在大肠埃希菌中的诱导表达与鉴定
被引量：
1
3
作者
杜红延
杨学习
马奎
黄湘
王穗海
李明
机构
南方医科大学生物技术学院
出处
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第2期166-168,共3页
基金
国家高技术研究发展计划(863计划)资助项且(2006AA02A311)
文摘
目的构建稳定表达人类泛素偶联酶E2C(UBE2C/UbcH10)蛋白的原核表达载体并在大肠埃希菌中诱导其表达,纯化并鉴定该重组蛋白。方法通过PCR扩增获得UbcH10基因,将其克隆至原核表达载体pET32a(+)中,构建重组表达载体,经EcoRI/XhoI双酶切及测序验证正确后,转化至大肠埃希菌BL21,经IPTG(终浓度1mmol/L)诱导表达4h。采用SDS-PAGE、Western blotting等方法鉴定表达产物,用Ni-Sepharose亲和层析和Sephadex G-50分子筛纯化UbcH10蛋白。结果成功构建UbcH10基因的原核表达载体,经IPTG诱导后在大肠埃希菌BL21中获得大量重组蛋白。该重组蛋白以可溶形式表达,表观分子量约为29kD,表达量约占菌体蛋白总量的40%。Western blotting检测在29kD附近出现预期条带,与目的蛋白的理论计算值相吻合。纯化后的UbcH10蛋白终浓度为8.82mg/ml,纯度达90%以上。结论成功表达并纯化了UbcH10重组蛋白,为进一步研究其结构、功能以及该蛋白在肿瘤发生发展过程中的作用奠定了基础。
关键词
泛素
蛋白
连接酶
类
原核
表达
克隆
分子
Keywords
ubiquitin protein ligases
prokaryotic expression
cloning, molecular
分类号
R34-33 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
原核生物类泛素蛋白Pup-蛋白酶体系统的研究进展
汪春军
林进
张俊杰
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2011
13
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
原核生物的蛋白质翻译后修饰
谭永聪
王启军
赵国屏
姚玉峰
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2011
10
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
人泛素偶联酶UBE2C/UbcH10在大肠埃希菌中的诱导表达与鉴定
杜红延
杨学习
马奎
黄湘
王穗海
李明
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009
1
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