不同等级牛卵丘-卵母细胞复合体体外成熟后卵母细胞发育能力差异的机制分析

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作者 王蕊 衡诺 +10 位作者 胡樱凡 王欢 朱妮 何维 轩秀丽 胡智辉 熊铿 巩建飞 郝海生 朱化彬 赵善江 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第9期4432-4451,共20页

旨在探究不同等级牛卵丘-卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complexes,COCs)体外成熟后卵母细胞发育能力差异的分子机制。本试验以屠宰场卵巢来源的牛COCs为研究对象,参照国际胚胎技术学会手册根据卵丘细胞层数、卵丘细胞紧密程度和卵母... 旨在探究不同等级牛卵丘-卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complexes,COCs)体外成熟后卵母细胞发育能力差异的分子机制。本试验以屠宰场卵巢来源的牛COCs为研究对象,参照国际胚胎技术学会手册根据卵丘细胞层数、卵丘细胞紧密程度和卵母细胞细胞质外观将牛COCs分为一二级(较好)和三四级(较差)两组,每组3次重复,每个重复组含100枚以上COCs,进行体外成熟培养。本研究通过Smart-seq2技术对成熟前后的一二级和三四级COCs的卵母细胞进行了转录组测序并对差异基因进行了分析验证,利用非靶向代谢组学技术对不同级别COCs的培养液进行了差异代谢物分析。结果显示:1)三四级COCs的卵母细胞体外成熟、受精后的卵裂率和囊胚率(60.59%±6.54%,22.11%±2.79%)显著低于一二级(78.09%±3.01%,32.56%±4.33%,P<0.05);2)Smart-seq测序结果显示,体外成熟前一二级和三四级COCs的卵母细胞中共筛选出541个显著差异表达基因(DEGs),体外成熟22~24 h(体外成熟后)一二级和三四级卵母细胞中共筛选出860个显著DEGs,GO和KEGG富集分析结果显示,这些DEGs主要与糖代谢、氧化磷酸化信号通路相关;3)数字PCR结果显示,体外成熟前后三四级COCs的卵母细胞中糖酵解相关基因PKM和电子传递链复合物I相关抑制基因NDUFA4L2的拷贝数水平均显著低于一二级(P<0.01),体外成熟后三四级卵母细胞中电子供体生成相关基因IDH3α的拷贝数水平显著低于一二级(P<0.05);同样体外成熟前后三四级COCs的卵丘细胞中NDUFA4L2 mRNA表达水平显著低于一二级(P<0.05),但是PKM和IDH3αmRNA表达水平却显著高于一二级(P<0.05,P<0.01);4)代谢物分析结果显示,不同级别COCs的培养液中共鉴定出69种显著上调差异代谢物,71种显著下调差异代谢物,功能富集分析发现差异代谢物主要富集在三羧酸循环(TCA)、糖酵解/糖异生等代谢通路上,进一步对差异代谢物(α-D-葡萄糖、丙酮酸、乳酸)进行相对丰度分析发现三四级COCs成熟液中α-D-葡萄糖含量显著高于一二级(P<0.01)。5)在三四级COCs体外成熟液中添加糖酵解产物丙酮酸钠能够显著提高三四级COCs体外成熟、受精后的卵裂率(72.54%±4.79%vs.61.71%±4.75%)和囊胚率(30.63%±4.15%vs.22.72%±2.39%,P<0.05)。综上,本研究表明三四级COCs的卵母细胞体外成熟后发育能力差可能是由于其本身糖酵解活性较弱,加之其外围卵丘细胞能量底物供给不足,导致卵母细胞成熟时能量不足,发育能力受限;通过添加丙酮酸钠能够明显改善三四级COCs的卵母细胞体外成熟后发育能力,研究结果为提高COCs利用率和胚胎生产效率提供了理论依据。 展开更多

关键词 牛 卵丘卵母细胞复合体 体外成熟 糖代谢 丙酮酸钠

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生长分化因子9在牛卵丘卵母细胞复合体体外成熟过程中的表达 被引量：6

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作者 欧阳效晴 杨淑青 +3 位作者 张春强 栗瑞兰 张通 张家新 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1569-1575,共7页

旨在探讨牛卵丘卵母细胞复合体(Cumulus-oocyte complex,COCs)体外成熟过程中生长分化因子9(Growth differentiation factor 9,GDF-9)基因表达和卵丘细胞扩展的关系。运用实时荧光定量PCR技术检测GDF-9基因在牛卵丘卵母细胞复合体体外... 旨在探讨牛卵丘卵母细胞复合体(Cumulus-oocyte complex,COCs)体外成熟过程中生长分化因子9(Growth differentiation factor 9,GDF-9)基因表达和卵丘细胞扩展的关系。运用实时荧光定量PCR技术检测GDF-9基因在牛卵丘卵母细胞复合体体外成熟过程中(0、6、12、18、24和28h)的相对表达变化,同时观察了卵丘细胞扩展情况。结果表明,GDF-9mRNA的表达量在牛卵丘卵母细胞复合体体外成熟过程中呈现一定的规律性变化,随着成熟培养的进行,其表达量逐渐增加,在成熟培养12h时表达量最高,但随后又逐渐降低,在成熟培养24h表达量最低;卵丘细胞在IVM 12h开始出现明显的扩散,而且随着成熟时间的延长,卵丘细胞的扩散程度在不断增加。研究结果表明:高水平的GDF-9mRNA表达与卵丘细胞开始扩散的时间一致,揭示GDF-9基因可能在牛卵丘细胞扩散和卵母细胞体外成熟过程中起着重要的作用。 展开更多

关键词 牛 卵丘卵母细胞复合体 GDF-9 体外成熟

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山羊GDF9基因在卵丘卵母细胞复合体体外成熟过程中的表达 被引量：7

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作者 郑爱燕 吴曼 +1 位作者 尚利青 丁家桐 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期671-677,共7页

本研究采用实时荧光定量PCR技术,从mRNA水平探讨了山羊卵丘卵母细胞复合体体外成熟(IVM)过程中(0、6、12、18、24和27h)GDF9基因的相对表达变化,分析其与卵丘细胞扩散之间的关系。结果表明,GDF9 mRNA在山羊卵丘卵母细胞复合体体外成熟... 本研究采用实时荧光定量PCR技术,从mRNA水平探讨了山羊卵丘卵母细胞复合体体外成熟(IVM)过程中(0、6、12、18、24和27h)GDF9基因的相对表达变化,分析其与卵丘细胞扩散之间的关系。结果表明,GDF9 mRNA在山羊卵丘卵母细胞复合体体外成熟过程中均有表达,且在成熟培养初期表达量较低,其表达峰值出现在IVM12h,与卵丘细胞开始扩散的时间一致,之后又有所下降。由此推测,GDF9基因在山羊卵丘扩散和卵母细胞体外成熟过程中起着重要的作用。 展开更多

关键词 山羊 GDF9 卵丘卵母细胞复合体 体外成熟 实时荧光定量PCR

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卵丘细胞对辽宁绒山羊卵母细胞体外成熟与孤雌发育的影响 被引量：12

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作者 田长永 杨景晁 +1 位作者 马泽芳 宋连喜 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期543-548,共6页

为了进一步探索辽宁绒山羊卵母细胞体外成熟的方法,本试验以屠宰场绒山羊卵巢为材料,采用抽吸法收集直径大于2 mm卵泡的卵母细胞,研究卵丘细胞对卵母细胞体外成熟和孤雌发育的影响。试验1,将一部分COCs经机械吹打脱除卵丘细胞成为机械裸... 为了进一步探索辽宁绒山羊卵母细胞体外成熟的方法,本试验以屠宰场绒山羊卵巢为材料,采用抽吸法收集直径大于2 mm卵泡的卵母细胞,研究卵丘细胞对卵母细胞体外成熟和孤雌发育的影响。试验1,将一部分COCs经机械吹打脱除卵丘细胞成为机械裸卵(DOs),然后以4种方式培养,即COCs单独培养、DOs与COCs共培养(DOs(COCs))、DOs与卵丘颗粒细胞共培养(DOs(CCs)),以及DOs单独培养。试验2,根据包裹卵母细胞的卵丘细胞的完整性分为3组,有3层卵丘细胞紧密包围的卵母细胞复合体COCs3,有1-3层卵丘细胞包围的卵母细胞COCs1-3,无卵丘细胞包围的裸露卵母细胞NOs,3组各自单独培养。结果表明:COCs组的成熟率、孤雌卵裂率和囊胚率最高,分别为83.25%、41.75%和29.25%,卵丘细胞的存在有利于卵母细胞体外成熟和随后的发育,COCs3组成熟率、孤雌卵裂率和囊胚率分别为83.25%、42.50%和29.75%,显著高于COCs1-3和NOs组,卵丘细胞的完整性也影响着卵母细胞的体外发育,自然裸卵已失去体外发育能力。 展开更多

关键词 卵丘细胞 卵母细胞 体外成熟 孤雌发育 辽宁绒山羊

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卵丘细胞对牛卵母细胞体外成熟的影响 被引量：6

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作者 黄承俊 郭林林 +2 位作者 孙守强 林峰 刘海军 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2014年第4期111-115,共5页

为了提高牛卵母细胞体外成熟率,以机械裸卵(DOs)、卵丘-卵母细胞复合体(COCs)和添加的离散卵丘细胞的不同组合,对卵丘细胞在卵母细胞体外成熟过程中的影响进行了探索,并对不同卵丘细胞的作用途径和强度进行了分析。试验结果表明:添加离... 为了提高牛卵母细胞体外成熟率,以机械裸卵(DOs)、卵丘-卵母细胞复合体(COCs)和添加的离散卵丘细胞的不同组合,对卵丘细胞在卵母细胞体外成熟过程中的影响进行了探索,并对不同卵丘细胞的作用途径和强度进行了分析。试验结果表明:添加离散卵丘细胞能够显著促进DOs的体外成熟(57.98±14.27 vs 35.53±14.00,P<0.05),对COCs具有促进趋势但差异不显著(76.66±5.77 vs 66.76±9.46,P>0.05);卵母细胞胞外卵丘细胞对与之共培养的DOs的体外成熟促进作用效果不明显(35.83±18.32 vs 35.53±14.00,P>0.05)。分析结果显示:卵母细胞胞外卵丘细胞主要通过间隙连接促进卵母细胞的体外成熟,添加的离散卵丘细胞主要以旁分泌途径促进卵母细胞的体外成熟;3层及其以上胞外卵丘细胞能够提高其包裹的卵母细胞平均体外成熟能力的85.34%,添加的离散卵丘细胞能够提高COC平均体外成熟能力的16.18%,能够提高DO平均体外成熟能力的60.61%。 展开更多

关键词 卵丘细胞 卵母细胞 体外成熟 牛

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水牛卵丘颗粒细胞凋亡与卵母细胞体外发育潜能的研究 被引量：4

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作者 王晓丽 杨娟 +5 位作者 陈玉 成俊萍 潘红平 韦精卫 陆凤花 石德顺 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1400-1404,共5页

为了探讨水牛卵母细胞体外发育潜能与卵丘颗粒细胞凋亡之间的关系,本研究将水牛卵母细胞体外培养22-24 h后,取其卵丘颗粒细胞,采用Annexin V-FITC法进行颗粒细胞凋亡染色,进行凋亡率的分析,并与卵母细胞的成熟情况和卵母细胞的评分及形... 为了探讨水牛卵母细胞体外发育潜能与卵丘颗粒细胞凋亡之间的关系,本研究将水牛卵母细胞体外培养22-24 h后,取其卵丘颗粒细胞,采用Annexin V-FITC法进行颗粒细胞凋亡染色,进行凋亡率的分析,并与卵母细胞的成熟情况和卵母细胞的评分及形成卵裂、囊胚的结果进行对照。结果发现,随着卵母细胞成熟时间的增加,卵丘颗粒细胞凋亡率升高;随着卵母细胞评分和发育潜能的降低,卵丘颗粒细胞凋亡率逐渐升高。由此表明,卵母细胞发育潜能与卵丘颗粒细胞凋亡密切相关,通过测定卵丘颗粒细胞的凋亡率可预测未成熟卵母细胞的发育潜能。 展开更多

关键词 卵丘颗粒细胞 凋亡 卵母细胞 体外成熟

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不同年龄IVF-ET患者卵丘颗粒细胞端粒长度与卵母细胞成熟度及妊娠结局的关系 被引量：7

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作者 王兴玲 蔡鹏飞 +1 位作者 张文娟 肖雅琳 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2016年第2期233-236,共4页

目的:探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)卵丘颗粒细胞的端粒长度与卵母细胞成熟度及妊娠结局的关系。方法:收集81例行体外受精-胚胎移植患者的卵丘颗粒细胞,根据患者的年龄,分为低龄(<35岁)组42例和高龄(≥35岁)组39例。应用qRT-PCR测... 目的:探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)卵丘颗粒细胞的端粒长度与卵母细胞成熟度及妊娠结局的关系。方法:收集81例行体外受精-胚胎移植患者的卵丘颗粒细胞,根据患者的年龄,分为低龄(<35岁)组42例和高龄(≥35岁)组39例。应用qRT-PCR测量卵丘颗粒细胞端粒长度。结果:卵丘颗粒细胞端粒长度与年龄呈负相关(r=-0.267,P=0.021),低、高龄组内成熟卵母细胞的卵丘颗粒细胞端粒长度明显比未成熟卵母细胞的长(P<0.05)。高龄组妊娠者端粒长度较未妊娠者长(P<0.05)。结论:在IVF-ET中,卵丘颗粒细胞的相对端粒长度随年龄增长逐渐缩短,可反映卵母细胞的成熟度;端粒长度缩短可能会影响妊娠结局。 展开更多

关键词 体外受精-胚胎移植 卵丘颗粒细胞 端粒长度 卵母细胞成熟度

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卵丘细胞在卵母细胞体外成熟培养过程中的作用 被引量：9

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作者 张晓华 朱增娟 +2 位作者 袁水桥 李东全 罗光彬 《黄牛杂志》 2005年第3期43-45,共3页

介绍了卵丘细胞在卵母细胞体外成熟培养过程中的作用,主要从卵丘细胞与卵母细胞的结构与功能联系,卵丘扩展对卵母细胞体外成熟的影响及卵丘细胞层数对卵母细胞体外成熟的影响三个方面加以阐述。

关键词 卵母细胞 体外成熟 卵丘细胞 培养过程 结构与功能 卵丘扩展

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无卵丘的水牛卵母细胞体外成熟方法的初步探讨

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作者 冯贵雪 王晓丽 +3 位作者 卞桂华 石德顺 杨素芳 舒益民 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期614-619,共6页

主要探讨无卵丘水牛卵母细胞体外成熟的可行性,以便为研究卵母细胞成熟机理提供模型。无卵丘的水牛卵母细胞随机分为5组,然后分别进行直接成熟培养(M1),与卵丘细胞单层共培养(M2),用未扩展的卵丘细胞块包围培养(M3),与扩展的卵丘细胞团... 主要探讨无卵丘水牛卵母细胞体外成熟的可行性,以便为研究卵母细胞成熟机理提供模型。无卵丘的水牛卵母细胞随机分为5组,然后分别进行直接成熟培养(M1),与卵丘细胞单层共培养(M2),用未扩展的卵丘细胞块包围培养(M3),与扩展的卵丘细胞团共培养(M4)和用卵巢组织包围培养(M5)。无卵丘的水牛卵母细胞体外成熟培养24 h后检查第一极体(PB1)排出率,随后对这些卵母细胞进行孤雌激活,评定其成熟质量。结果发现,M4组的第一极体排出率明显高于M1组和M5组,其它各组间没有显著差异(P>0.05);M5组的孤雌激活卵裂率显著低于M1组和M4组(P<0.05),而与M2组和M3组没有显著差异(P>0.05),但M3和M4两组的囊胚发育率显著高于M1组和M5组(P<0.05)。这些研究结果表明:(1)未扩展卵丘细胞包围法和扩展卵丘细胞团支撑法可促进无卵丘水牛卵母细胞的体外成熟,但与卵丘细胞单层共培养没有作用;(2)卵巢组织包围培养不利于水牛卵母细胞的体外成熟。 展开更多

关键词 水牛 无卵丘的卵母细胞 体外成熟

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牛卵丘卵母细胞体外成熟的研究进展 被引量：1

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作者 丁丽艳 《现代畜牧科技》 2015年第1期44-45,共2页

牛体外受精技术是胚胎生物工程技术研究的基础,其中牛卵丘卵母细胞体外成熟培养是体外受精技术的关键,也是重要环节。自上世纪三十年代以来,国内外研究者们都付出了大量的研究工作,并取得了较大研究进展。目前,牛卵丘卵母细胞体外成熟... 牛体外受精技术是胚胎生物工程技术研究的基础,其中牛卵丘卵母细胞体外成熟培养是体外受精技术的关键,也是重要环节。自上世纪三十年代以来,国内外研究者们都付出了大量的研究工作,并取得了较大研究进展。目前,牛卵丘卵母细胞体外成熟培养体系已经确立,但其中的卵母细胞体外成熟和早期胚胎发育阻滞,卵母细胞的成熟调控机理等问题,还有待研究者们进一步深入探讨。本文主要从牛卵丘卵母细胞的获得方法、体外培养条件、体外培养液及添加物、存在问题等几方面来综述其研究进展。 展开更多

关键词 牛 卵丘卵母细胞 体外培养

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孕晚期人未成熟卵母细胞的体外成熟:一种新的卵母细胞来源

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作者 石宇 龙晓林 +6 位作者 杜红姿 黄玉玲 黄青 杨建华 张伟良 刘见桥 许海燕 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期1367-1371,共5页

目的探讨来源于孕晚期、自然周期及Gn刺激周期(包括超促排周期及IVM周期)的人未成熟卵母细胞体外成熟的差异及颗粒细胞对孕晚期卵母细胞体外成熟的影响。方法共获得未成熟卵母细胞1076枚,包括OCC633枚和DO453枚。其中OCC分为孕晚期组、... 目的探讨来源于孕晚期、自然周期及Gn刺激周期(包括超促排周期及IVM周期)的人未成熟卵母细胞体外成熟的差异及颗粒细胞对孕晚期卵母细胞体外成熟的影响。方法共获得未成熟卵母细胞1076枚,包括OCC633枚和DO453枚。其中OCC分为孕晚期组、自然周期组和IVM周期组;DO分为孕晚期组、自然周期组和超促排卵周期组;孕晚期来源的未成熟卵母细胞分为OCC组和DO组。所有未成熟卵母细胞体外成熟后,ICSI受精序贯培养,除IVM周期组行胚胎移植外,其余均培养至囊胚阶段。分别比较OCC和DO各组未成熟卵母细胞的成熟率、受精率、卵裂率和孕晚期组、自然周期组和超促排卵周期组的囊胚形成率,统计IVM周期组的移植周期妊娠率;比较孕晚期OCC组与DO组的成熟率、受精率、卵裂率和囊胚形成率。结果OCC:孕晚期组、自然周期组及IVM周期组的体外成熟率分别为74.3%、76.9%和82.2%,孕晚期组与IVM周期组相比具有统计学差异;三组受精率、卵裂率相比,孕晚期组和自然周期组囊胚形成率相比均未见统计学差异,IVM周期组移植周期妊娠率为20%。DO:超促排卵周期组体外成熟率最高(86.0%),明显高于自然周期组(72.5%)和孕晚期组(72.7%),P<0.01;孕晚期组受精率、卵裂率、囊胚形成率分别为65.0%、83.3%和38.5%,与其他两组相比均亦未见统计学差异。孕晚期OCC组与DO组的成熟率、受精率、卵裂率和囊胚形成率无差别。结论孕晚期来源的未成熟卵母细胞在体外具有同样的发育潜能,孕晚期捐献的卵母细胞可作为一种供卵来源;有无颗粒细胞并不影响孕晚期卵母细胞的发育能力。 展开更多

关键词 孕晚期 卵母细胞 体外成熟 精子注射 卵母细胞-卵丘复合体

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猪分级卵母细胞体外成熟时间规律的研究 被引量：2

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作者 华再东 郑新民 +6 位作者 魏庆信 许厚强 乔宪凤 刘西梅 李莉 肖红卫 王亚刚 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第3期155-159,共5页

试验根据猪卵丘-卵母细胞复合体（COCs）的颗粒细胞层数,把COCs分成A、B、C和D级,A、B级用于体外分别培养24、32、38、44、48和54 h,C级用于体外分别培养24、32、38、44、48、54和60 h,观察它们不同时间排出极体数,然后将排出极体的卵... 试验根据猪卵丘-卵母细胞复合体（COCs）的颗粒细胞层数,把COCs分成A、B、C和D级,A、B级用于体外分别培养24、32、38、44、48和54 h,C级用于体外分别培养24、32、38、44、48、54和60 h,观察它们不同时间排出极体数,然后将排出极体的卵母细胞孤雌激活。结果发现,A和B级COCs培养48 h时成熟率最高（83.2%和78.0%）,明显高于同级水平培养24、32和38 h的成熟率;不同级别COCs体外培养相同时间,A与B级成熟率差异不显著（P〉0.05）,但二者与C级的成熟率差异显著（P〈0.05）;体外培养48 h COCs卵裂率最高（81.7%）,与培养38 h前的卵裂率差异显著（P〈0.05）。结果表明,A、B级卵母细胞更适于体外培养,能获得高的成熟率和卵裂率,COCs周围颗粒细胞对卵母细胞的成熟有显著影响;COCs培养38 h之前,部分虽能看到极体,但激活后卵裂率极低,说明卵母细胞并未真正成熟,通常通过排出极体判断卵母细胞成熟是不够准确的,COCs体外培养44~48 h是成熟的最佳时期,能为体细胞核移植提供大量优质的MⅡ期卵母细胞。 展开更多

关键词 卵丘-卵母细胞复合体 体外成熟 极体 孤雌激活

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猪卵母细胞体外成熟的影响因素 被引量：2

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作者 华再东 郑新民 +3 位作者 魏庆信 许厚强 刘西梅 李莉 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期280-284,共5页

通过采集屠宰场废弃猪卵巢，体外分离和培养猪卵母细胞，探讨基础培养基、激素、卵泡直径大小及卵丘细胞层数对猪卵母细胞体外成熟的影响。结果表明：改良TCM199（mTCM199）较NCSU-23培养猪卵母细胞成熟率显著提高（P〈0．05）；基础培... 通过采集屠宰场废弃猪卵巢，体外分离和培养猪卵母细胞，探讨基础培养基、激素、卵泡直径大小及卵丘细胞层数对猪卵母细胞体外成熟的影响。结果表明：改良TCM199（mTCM199）较NCSU-23培养猪卵母细胞成熟率显著提高（P〈0．05）；基础培养基中添加PMSG、hcG和pFF，卵母细胞体外成熟率（80．63％）显著高于仅添加其中一种；从卵泡直径3～6mm和大于6mm卵泡获得的卵丘卵母细胞复合体（COCs），其体外培养成熟率（83．33％和76．43％）极显著高于卵泡直径在3mm以下获得的COCs成熟率（30．94％）；根据卵丘细胞层数把COCs分为A、B、C3级，其中A级和B级卵母细胞成熟率差异不显著，但都极显著高于C级卵母细胞的成熟率。 展开更多

关键词 猪 卵母细胞 体外成熟 卵丘卵母细胞复合体

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猪不同直径卵泡内卵母细胞胞质成熟及体外发育潜力差异原因的初探 被引量：3

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作者 焦明霞 刘仲凤 +7 位作者 王峰 刘世超 格日乐其木格 周洋 孔庆然 尹智 郭诗萌 刘忠华 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第10期165-171,共7页

试验根据直径将猪卵泡分为2组：G1组（4~7mm）和G2组（2~4mm）,对2组卵泡内获取的卵母细胞体外成熟率和发育潜能进行了比较,利用相对定量PCR检测了卵丘细胞中卵丘扩展相关基因Has2、Ptgs2、Ptx31及Pgr的表达水平,应用绝对定量PCR检测了... 试验根据直径将猪卵泡分为2组：G1组（4~7mm）和G2组（2~4mm）,对2组卵泡内获取的卵母细胞体外成熟率和发育潜能进行了比较,利用相对定量PCR检测了卵丘细胞中卵丘扩展相关基因Has2、Ptgs2、Ptx31及Pgr的表达水平,应用绝对定量PCR检测了成熟培养前后卵母细胞线粒体拷贝数,并利用5,5′-二巯基-2-硝基苯酸（DTNB）酶循环法检测了体外成熟培养过程中卵母细胞谷胱甘肽（GSH）的含量。结果显示,G1组和G2组卵母细胞体外成熟率分别为95.06%和68.19%,G1和G2组排出第一极体的成熟卵母细胞孤雌激活后的囊胚率分别为51.47%和29.44%,2组卵母细胞在体外成熟率和孤雌发育率上均差异显著（P〈0.05）。G1组卵丘细胞在体外成熟培养过程中的扩展程度明显高于G2组,G1组卵母细胞对应的卵丘细胞扩展相关基因Has2、Ptgs2、Ptx31、Pgr的表达水平高于G2组（Has2基因在卵母细胞成熟培养0、24h除外）;G1组卵母细胞线粒体数、谷胱甘肽含量均高于G2组。以上结果表明,大卵泡来源的卵母细胞体外成熟能力和发育潜力优于小卵泡来源的卵母细胞,这可能与卵母细胞成熟过程中卵丘扩展程度、卵丘扩展相关基因表达激活情况、卵胞质内谷胱甘肽含量和线粒体拷贝数有关。 展开更多

关键词 猪卵母细胞 体外成熟 发育潜力 卵泡直径 卵丘细胞扩展相关基因 谷胱甘肽 线粒体

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猪卵母细胞极体排出的规律 被引量：1

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作者 刘西梅 华再东 +3 位作者 魏庆信 乔宪凤 李莉 肖红卫 《湖北农业科学》 北大核心 2011年第24期5172-5174,5190,共4页

试验把猪卵丘-卵母细胞复合体(Cumulus-oocyte complexes,COCs)于体外分别培养24、32、38、44、48和54 h,观察它们在不同时间排出的极体数,以研究体外卵母细胞排出极体的规律。结果表明,A级和B级的COCs培养48 h的极体排出率最高(83.2%和... 试验把猪卵丘-卵母细胞复合体(Cumulus-oocyte complexes,COCs)于体外分别培养24、32、38、44、48和54 h,观察它们在不同时间排出的极体数,以研究体外卵母细胞排出极体的规律。结果表明,A级和B级的COCs培养48 h的极体排出率最高(83.2%和65.7%),明显高于同级水平培养24、32和38 h的;不同级别COCs体外培养相同时间后,A级与B级的极体排出率差异不显著(P﹥0.05),但两者与C级的差异显著(P﹤0.05)。由此可见,A级、B级COCs能获得高的极体排出率,培养48 h的极体排出达到高峰,排出过程呈现前期上升快、后期下降慢的变化趋势。 展开更多

关键词 猪 卵丘-卵母细胞复合体 体外成熟 极体

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牛体外发育卵母细胞成熟的评估方法研究 被引量：2

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作者 李晓霞 曹平华 禹学礼 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2013年第7期130-133,共4页

为探讨不同评估方法对牛卵母细胞体外成熟的判定效果,以牛卵丘卵母细胞复合体(COCs)为试验材料,采用比较卵丘扩展、形态学观察第一极体排出和固定染色观察第一极体3种方法评估牛卵母细胞成熟率的差异。结果表明,牛卵母细胞经体外24h成... 为探讨不同评估方法对牛卵母细胞体外成熟的判定效果,以牛卵丘卵母细胞复合体(COCs)为试验材料,采用比较卵丘扩展、形态学观察第一极体排出和固定染色观察第一极体3种方法评估牛卵母细胞成熟率的差异。结果表明,牛卵母细胞经体外24h成熟培养后,卵丘扩展分级的成熟率为76.8%,形态学观察第一极体排出率为71.2%,固定染色观察第一极体核成熟率为77.1%,3种判定方法评估成熟率无显著差异(P>0.05)。因此,3种方法均可用于卵母细胞的体外成熟判定。 展开更多

关键词 牛 卵母细胞 体外成熟 卵丘扩展 第一极体

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不同收集方法对猪卵母细胞体外成熟培养的影响 被引量：19

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作者 陈晓宇 刘东 +1 位作者 李青旺 张德福 《上海畜牧兽医通讯》 2003年第1期24-25,共2页

本实验就猪卵母细胞的三种采集方法 :抽吸法、剖解法和机械破碎法进行了对比研究。结果表明 :(1)机械破碎法所采集细胞数目显著高于剖解法 (P <0 .0 5 ) ,剖解法显著高于抽吸法 (P <0 .0 5 ) ;而所用时间则与此相反 (P<0 .0 5 ... 本实验就猪卵母细胞的三种采集方法 :抽吸法、剖解法和机械破碎法进行了对比研究。结果表明 :(1)机械破碎法所采集细胞数目显著高于剖解法 (P <0 .0 5 ) ,剖解法显著高于抽吸法 (P <0 .0 5 ) ;而所用时间则与此相反 (P<0 .0 5 )。 (2 )A级卵母细胞的比例在剖解法中显著高于抽吸法 (P <0 .0 5 ) ,同时抽吸法也显著高于机械破碎法 (P <0 .0 5 )。机械破碎法采集的B级细胞比例显著高于其余两法 (P <0 .0 5 ) ;抽吸法所采集的C级细胞也显著高于其余两法 (P <0 .0 5 )。 (3)剖解法中卵丘扩散率要显著高于其它两法 (P <0 .0 5 ) ;而机械破碎法中第一极体排出率要显著低于另两法 (P <0 .0 5 )。 展开更多

关键词 收集方法 猪 卵母细胞 体外成熟培养 卵丘细胞完整性

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影响猪卵母细胞体外成熟的因素 被引量：2

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作者 李俊 田永祥 曹斌云 《黑龙江动物繁殖》 2004年第4期13-16,共4页

就影响猪卵母细胞体外成熟的因素, 如卵巢获取、卵母细胞来源、卵丘细胞、培养时间、培养条件基础培养基、激素、血清和卵泡液等, 及其研究进展进行了综述。

关键词 猪 卵母细胞 体外成熟 卵丘细胞 基础培养基 激素 血清 卵泡液

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猪卵丘包裹层数与猪卵母细胞质量的相关性研究 被引量：1

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作者 周荣 石俊松 +5 位作者 周秀 罗绿花 麦然标 王青来 蔡更元 吴珍芳 《广东畜牧兽医科技》 2014年第5期27-29,共3页

为探讨如何从大量的未成熟卵母细胞中挑选出合适的卵母细胞用于体外成熟培养,本研究根据猪卵丘-卵母细胞复合体（COCs）的颗粒细胞层数和胞质情况,把挑选的COCs分成A、B、C3个等级;体外成熟培养42~44 h后,所获得的成熟卵母细胞做孤雌激... 为探讨如何从大量的未成熟卵母细胞中挑选出合适的卵母细胞用于体外成熟培养,本研究根据猪卵丘-卵母细胞复合体（COCs）的颗粒细胞层数和胞质情况,把挑选的COCs分成A、B、C3个等级;体外成熟培养42~44 h后,所获得的成熟卵母细胞做孤雌激活,比较孤雌胚的发育能力。结果表明：A、B、C3级卵母细胞的成熟率之间没有差异（P〉0.05）,但是A级卵母细胞与B级卵母细胞的孤雌胚胎的囊胚率显著高于C级卵母细胞（P〈0.05）。说明卵丘细胞包裹层数不会影响卵母细胞的成熟率,但会影响其潜在的发育能力。 展开更多

关键词 猪 卵丘-卵母细胞复合体(COCs) 卵母细胞 质量

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miRNA-205在猪卵母细胞成熟过程中表达规律及其调控作用的研究

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作者 陈超 李万宏 +4 位作者 孙丽娜 陈树雄 陈璐 李纯锦 周虚 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第4期18-22,共5页

本试验旨在探索miRNA-205在猪卵母细胞成熟过程中表达规律及其调控功能。应用生物学软件TargetScan和microRNA.org对miRNA-205靶基因进行预测,利用实时荧光定量PCR方法分别检测miRNA-205及其靶基因在猪卵丘卵母细胞复合体(cumulus-oocyt... 本试验旨在探索miRNA-205在猪卵母细胞成熟过程中表达规律及其调控功能。应用生物学软件TargetScan和microRNA.org对miRNA-205靶基因进行预测,利用实时荧光定量PCR方法分别检测miRNA-205及其靶基因在猪卵丘卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complexes,COCs)成熟过程中0、24和48h表达量。结果表明,miRNA-205在猪COCs成熟过程中表达呈上升趋势,0h表达量最低,48h表达量最高。添加FSH、LH和EGF的成熟液组与成熟基液组相比,miRNA-205表达量显著下调,长正五聚蛋白(PTX3)表达量极显著上调(P<0.01),PTX3与miRNA-205的表达量呈负相关,卵丘细胞扩散标记基因肿瘤致死因子(TNFAIP6)和透明质酸合成酶(HAS2)的表达量极显著上调(P<0.01)。由此推断,miRNA-205保守序列可能与PTX3基因3′-UTR区特异性结合参与卵丘细胞扩散的调控。 展开更多

关键词 MIRNA 205 卵丘卵母细胞复合体 实时荧光定量PCR 卵母细胞成熟

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