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不同等级牛卵丘-卵母细胞复合体体外成熟后卵母细胞发育能力差异的机制分析
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作者 王蕊 衡诺 +10 位作者 胡樱凡 王欢 朱妮 何维 轩秀丽 胡智辉 熊铿 巩建飞 郝海生 朱化彬 赵善江 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第9期4432-4451,共20页
旨在探究不同等级牛卵丘-卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complexes,COCs)体外成熟后卵母细胞发育能力差异的分子机制。本试验以屠宰场卵巢来源的牛COCs为研究对象,参照国际胚胎技术学会手册根据卵丘细胞层数、卵丘细胞紧密程度和卵母... 旨在探究不同等级牛卵丘-卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complexes,COCs)体外成熟后卵母细胞发育能力差异的分子机制。本试验以屠宰场卵巢来源的牛COCs为研究对象,参照国际胚胎技术学会手册根据卵丘细胞层数、卵丘细胞紧密程度和卵母细胞细胞质外观将牛COCs分为一二级(较好)和三四级(较差)两组,每组3次重复,每个重复组含100枚以上COCs,进行体外成熟培养。本研究通过Smart-seq2技术对成熟前后的一二级和三四级COCs的卵母细胞进行了转录组测序并对差异基因进行了分析验证,利用非靶向代谢组学技术对不同级别COCs的培养液进行了差异代谢物分析。结果显示:1)三四级COCs的卵母细胞体外成熟、受精后的卵裂率和囊胚率(60.59%±6.54%,22.11%±2.79%)显著低于一二级(78.09%±3.01%,32.56%±4.33%,P<0.05);2)Smart-seq测序结果显示,体外成熟前一二级和三四级COCs的卵母细胞中共筛选出541个显著差异表达基因(DEGs),体外成熟22~24 h(体外成熟后)一二级和三四级卵母细胞中共筛选出860个显著DEGs,GO和KEGG富集分析结果显示,这些DEGs主要与糖代谢、氧化磷酸化信号通路相关;3)数字PCR结果显示,体外成熟前后三四级COCs的卵母细胞中糖酵解相关基因PKM和电子传递链复合物I相关抑制基因NDUFA4L2的拷贝数水平均显著低于一二级(P<0.01),体外成熟后三四级卵母细胞中电子供体生成相关基因IDH3α的拷贝数水平显著低于一二级(P<0.05);同样体外成熟前后三四级COCs的卵丘细胞中NDUFA4L2 mRNA表达水平显著低于一二级(P<0.05),但是PKM和IDH3αmRNA表达水平却显著高于一二级(P<0.05,P<0.01);4)代谢物分析结果显示,不同级别COCs的培养液中共鉴定出69种显著上调差异代谢物,71种显著下调差异代谢物,功能富集分析发现差异代谢物主要富集在三羧酸循环(TCA)、糖酵解/糖异生等代谢通路上,进一步对差异代谢物(α-D-葡萄糖、丙酮酸、乳酸)进行相对丰度分析发现三四级COCs成熟液中α-D-葡萄糖含量显著高于一二级(P<0.01)。5)在三四级COCs体外成熟液中添加糖酵解产物丙酮酸钠能够显著提高三四级COCs体外成熟、受精后的卵裂率(72.54%±4.79%vs.61.71%±4.75%)和囊胚率(30.63%±4.15%vs.22.72%±2.39%,P<0.05)。综上,本研究表明三四级COCs的卵母细胞体外成熟后发育能力差可能是由于其本身糖酵解活性较弱,加之其外围卵丘细胞能量底物供给不足,导致卵母细胞成熟时能量不足,发育能力受限;通过添加丙酮酸钠能够明显改善三四级COCs的卵母细胞体外成熟后发育能力,研究结果为提高COCs利用率和胚胎生产效率提供了理论依据。 展开更多
关键词 卵母细胞复合 外成熟 糖代谢 丙酮酸钠
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生长分化因子9在牛卵丘卵母细胞复合体体外成熟过程中的表达 被引量:6
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作者 欧阳效晴 杨淑青 +3 位作者 张春强 栗瑞兰 张通 张家新 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1569-1575,共7页
旨在探讨牛卵丘卵母细胞复合体(Cumulus-oocyte complex,COCs)体外成熟过程中生长分化因子9(Growth differentiation factor 9,GDF-9)基因表达和卵丘细胞扩展的关系。运用实时荧光定量PCR技术检测GDF-9基因在牛卵丘卵母细胞复合体体外... 旨在探讨牛卵丘卵母细胞复合体(Cumulus-oocyte complex,COCs)体外成熟过程中生长分化因子9(Growth differentiation factor 9,GDF-9)基因表达和卵丘细胞扩展的关系。运用实时荧光定量PCR技术检测GDF-9基因在牛卵丘卵母细胞复合体体外成熟过程中(0、6、12、18、24和28h)的相对表达变化,同时观察了卵丘细胞扩展情况。结果表明,GDF-9mRNA的表达量在牛卵丘卵母细胞复合体体外成熟过程中呈现一定的规律性变化,随着成熟培养的进行,其表达量逐渐增加,在成熟培养12h时表达量最高,但随后又逐渐降低,在成熟培养24h表达量最低;卵丘细胞在IVM 12h开始出现明显的扩散,而且随着成熟时间的延长,卵丘细胞的扩散程度在不断增加。研究结果表明:高水平的GDF-9mRNA表达与卵丘细胞开始扩散的时间一致,揭示GDF-9基因可能在牛卵丘细胞扩散和卵母细胞体外成熟过程中起着重要的作用。 展开更多
关键词 卵母细胞复合 GDF-9 外成熟
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山羊GDF9基因在卵丘卵母细胞复合体体外成熟过程中的表达 被引量:7
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作者 郑爱燕 吴曼 +1 位作者 尚利青 丁家桐 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期671-677,共7页
本研究采用实时荧光定量PCR技术,从mRNA水平探讨了山羊卵丘卵母细胞复合体体外成熟(IVM)过程中(0、6、12、18、24和27h)GDF9基因的相对表达变化,分析其与卵丘细胞扩散之间的关系。结果表明,GDF9 mRNA在山羊卵丘卵母细胞复合体体外成熟... 本研究采用实时荧光定量PCR技术,从mRNA水平探讨了山羊卵丘卵母细胞复合体体外成熟(IVM)过程中(0、6、12、18、24和27h)GDF9基因的相对表达变化,分析其与卵丘细胞扩散之间的关系。结果表明,GDF9 mRNA在山羊卵丘卵母细胞复合体体外成熟过程中均有表达,且在成熟培养初期表达量较低,其表达峰值出现在IVM12h,与卵丘细胞开始扩散的时间一致,之后又有所下降。由此推测,GDF9基因在山羊卵丘扩散和卵母细胞体外成熟过程中起着重要的作用。 展开更多
关键词 山羊 GDF9 卵母细胞复合 外成熟 实时荧光定量PCR
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牛卵丘-卵母细胞复合体体外成熟前后超微结构 被引量:15
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作者 孙青原 秦鹏春 +1 位作者 刘国艺 杨庆章 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 1996年第2期158-164,共7页
实验用透射电镜技术研究了牛卵立-卵母细胞复合体(COC)体外成熟前后卵母细胞、卵丘细胞及它们之间联系的结构特征.体外培养前,卵母细胞微绒毛数量较少,有的伸入秀明带中;各种细胞器集中分布于皮质区,形成“细胞器带”;核膜... 实验用透射电镜技术研究了牛卵立-卵母细胞复合体(COC)体外成熟前后卵母细胞、卵丘细胞及它们之间联系的结构特征.体外培养前,卵母细胞微绒毛数量较少,有的伸入秀明带中;各种细胞器集中分布于皮质区,形成“细胞器带”;核膜可打褶,核仁致密化.卵母细胞与卵丘细胞间及卵丘细胞之间形成间隙连接;卵丘细胞中线粒体致密、形态多样.成熟培养后.微绒毛增多.卵周隙形成;高尔基复合体消失,脂滴伴随着线粒体内迁.少数线粒体转变为幼稚型,皮质区形成“细胞器游离带’;皮质颗粒开始沿质膜下呈线状排列,但有的仍成团分布;排出第一极体处无微绒毛.中期赤道板附近无细胞器;卵丘细胞间及卵丘细胞与卵母细胞间联系中止;卵丘细胞中线粒体转变为幼稚型. 展开更多
关键词 卵母细胞复合 外成熟 超微结构
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Gdf9、Zar1、Mater、Dnmt1 mRNA在绵羊卵母细胞复合体、裸卵及卵丘细胞中的表达 被引量:1
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作者 林嘉鹏 侯敏 +3 位作者 白杰 赵云程 汪立芹 黄俊成 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2012年第10期25-29,共5页
为了探讨卵丘细胞的完整性在支持和促进绵羊卵母细胞成熟过程中发挥的重要作用以及卵丘与卵母细胞互作的分子机理。本研究对具有完整致密卵丘细胞包裹的和无卵丘细胞包裹的绵羊卵母细胞进行了体外成熟培养试验,以不同方式处理卵丘细胞,... 为了探讨卵丘细胞的完整性在支持和促进绵羊卵母细胞成熟过程中发挥的重要作用以及卵丘与卵母细胞互作的分子机理。本研究对具有完整致密卵丘细胞包裹的和无卵丘细胞包裹的绵羊卵母细胞进行了体外成熟培养试验,以不同方式处理卵丘细胞,应用Rael-time PCR技术,检测母源基因Gdf9(生长分化因子9),Zar1(合子阻滞因子1),Mater(胚胎必要的母体抗原),Dnmt1(DNA甲基化酶1)在不同卵母细胞和卵丘细胞中mRNA的含量。结果表明,4个基因的mRNA在GV期的表达量均高于24 h成熟培养的卵母细胞(P<0.05),除Dnmt1外其他3个基因在致密卵丘细胞包裹的卵母细胞的表达量均高于自然裸卵(DOs)(P<0.05),Zar1和Mater在24 h卵丘-卵母细胞复合体的表达量低于24 h裸卵(P<0.05),除Dnmt1外其他3个基因在24 h共成熟卵丘细胞中表达量均高于未培养的卵丘细胞(P<0.05)。结果提示,这4个母源基因对卵母细胞成熟有重要影响,且可能参与了卵丘细胞与卵母细胞间的相互作用,本研究结果为提高卵母细胞的体外成熟效率提供了依据及理论基础。 展开更多
关键词 卵母细胞 细胞 基因表达
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猪卵丘-卵母细胞复合体(COCs)体外培养卵丘细胞凋亡检测 被引量:1
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作者 王星 白秀娟 +1 位作者 罗光彬 石娇 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2010年第5期315-317,共3页
为了验证猪COCs在体外成熟过程中是否存在细胞凋亡的现象及其生物学特征,筛选快速、准确的检测卵丘细胞凋亡的方法,本试验将体外培养的猪COCs采用电子显微镜(EM)技术、苏木素-伊红(HE)染色技术、Hoechst33342-P荧I光染色技术、原位末端... 为了验证猪COCs在体外成熟过程中是否存在细胞凋亡的现象及其生物学特征,筛选快速、准确的检测卵丘细胞凋亡的方法,本试验将体外培养的猪COCs采用电子显微镜(EM)技术、苏木素-伊红(HE)染色技术、Hoechst33342-P荧I光染色技术、原位末端标记(TUNEL)法检测猪卵丘细胞凋亡,并对3种定量检测方法进行了比较与分析。试验结果表明:猪COCs在体外成熟过程中存在细胞凋亡的现象,TUNEL法检测卵丘细胞凋亡灵敏度最高,与Hoechst33342-PI荧光染色法、HE染色检测法相关系数分别为0.93、0.85。在本试验中Hoechst33342-PI荧光染色法可代替TUNEL法检测卵丘细胞凋亡。 展开更多
关键词 COCs 外培养 细胞凋亡 检测
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不同采卵方法对湖羊卵母细胞回收效果的影响
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作者 石笑笑 藤能斯·阿合麦提拜 +5 位作者 艾拜地·买合苏木 吴向利 陈莹 艾比拜木·哈帕尔 林嘉鹏 汪立芹 《黑龙江动物繁殖》 2025年第4期40-45,共6页
试验旨在比较传统手术采卵与腹腔镜活体采卵(LOPU)的效率,分析操作人员技术水平及不同促卵泡激素(FSH)诱导方案对湖羊卵母细胞回收效果的影响,为优化卵母细胞采集技术体系提供依据。选用180只成年湖羊,分3个部分开展试验:(1)比较手术采... 试验旨在比较传统手术采卵与腹腔镜活体采卵(LOPU)的效率,分析操作人员技术水平及不同促卵泡激素(FSH)诱导方案对湖羊卵母细胞回收效果的影响,为优化卵母细胞采集技术体系提供依据。选用180只成年湖羊,分3个部分开展试验:(1)比较手术采卵和腹腔镜采卵两种方法的回收效果;(2)分析操作人员对腹腔镜采卵效果的影响;(3)探究等量FSH、递减FSH和长效FSH等不同FSH方案的作用效果。结果表明:手术组与腹腔镜组卵母细胞回收率差异不显著(P>0.05),但手术组可用卵母细胞数显著提高(P<0.05);2号操作人员的卵母细胞回收率、平均卵母细胞数及可用卵母细胞数均显著高于其他人员(P<0.05);递减FSH组的平均卵母细胞数和可用卵母细胞数显著高于等量FSH组和长效FSH组(P<0.05)。综上所述,腹腔镜活体采卵具有微创优势,但需通过提升操作人员技术水平及优化FSH方案等提高卵母细胞回收效果;传统手术采卵单次可用卵母细胞更多,但对供体损伤较大。 展开更多
关键词 绵羊 湖羊 卵母细胞 腹腔镜活 泡激素 手术采
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卵丘细胞对辽宁绒山羊卵母细胞体外成熟与孤雌发育的影响 被引量:12
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作者 田长永 杨景晁 +1 位作者 马泽芳 宋连喜 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期543-548,共6页
为了进一步探索辽宁绒山羊卵母细胞体外成熟的方法,本试验以屠宰场绒山羊卵巢为材料,采用抽吸法收集直径大于2 mm卵泡的卵母细胞,研究卵丘细胞对卵母细胞体外成熟和孤雌发育的影响。试验1,将一部分COCs经机械吹打脱除卵丘细胞成为机械裸... 为了进一步探索辽宁绒山羊卵母细胞体外成熟的方法,本试验以屠宰场绒山羊卵巢为材料,采用抽吸法收集直径大于2 mm卵泡的卵母细胞,研究卵丘细胞对卵母细胞体外成熟和孤雌发育的影响。试验1,将一部分COCs经机械吹打脱除卵丘细胞成为机械裸卵(DOs),然后以4种方式培养,即COCs单独培养、DOs与COCs共培养(DOs(COCs))、DOs与卵丘颗粒细胞共培养(DOs(CCs)),以及DOs单独培养。试验2,根据包裹卵母细胞的卵丘细胞的完整性分为3组,有3层卵丘细胞紧密包围的卵母细胞复合体COCs3,有1-3层卵丘细胞包围的卵母细胞COCs1-3,无卵丘细胞包围的裸露卵母细胞NOs,3组各自单独培养。结果表明:COCs组的成熟率、孤雌卵裂率和囊胚率最高,分别为83.25%、41.75%和29.25%,卵丘细胞的存在有利于卵母细胞体外成熟和随后的发育,COCs3组成熟率、孤雌卵裂率和囊胚率分别为83.25%、42.50%和29.75%,显著高于COCs1-3和NOs组,卵丘细胞的完整性也影响着卵母细胞的体外发育,自然裸卵已失去体外发育能力。 展开更多
关键词 细胞 卵母细胞 外成熟 孤雌发育 辽宁绒山羊
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卵丘细胞对牛卵母细胞体外成熟的影响 被引量:6
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作者 黄承俊 郭林林 +2 位作者 孙守强 林峰 刘海军 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2014年第4期111-115,共5页
为了提高牛卵母细胞体外成熟率,以机械裸卵(DOs)、卵丘-卵母细胞复合体(COCs)和添加的离散卵丘细胞的不同组合,对卵丘细胞在卵母细胞体外成熟过程中的影响进行了探索,并对不同卵丘细胞的作用途径和强度进行了分析。试验结果表明:添加离... 为了提高牛卵母细胞体外成熟率,以机械裸卵(DOs)、卵丘-卵母细胞复合体(COCs)和添加的离散卵丘细胞的不同组合,对卵丘细胞在卵母细胞体外成熟过程中的影响进行了探索,并对不同卵丘细胞的作用途径和强度进行了分析。试验结果表明:添加离散卵丘细胞能够显著促进DOs的体外成熟(57.98±14.27 vs 35.53±14.00,P<0.05),对COCs具有促进趋势但差异不显著(76.66±5.77 vs 66.76±9.46,P>0.05);卵母细胞胞外卵丘细胞对与之共培养的DOs的体外成熟促进作用效果不明显(35.83±18.32 vs 35.53±14.00,P>0.05)。分析结果显示:卵母细胞胞外卵丘细胞主要通过间隙连接促进卵母细胞的体外成熟,添加的离散卵丘细胞主要以旁分泌途径促进卵母细胞的体外成熟;3层及其以上胞外卵丘细胞能够提高其包裹的卵母细胞平均体外成熟能力的85.34%,添加的离散卵丘细胞能够提高COC平均体外成熟能力的16.18%,能够提高DO平均体外成熟能力的60.61%。 展开更多
关键词 细胞 卵母细胞 外成熟
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水牛卵丘颗粒细胞凋亡与卵母细胞体外发育潜能的研究 被引量:4
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作者 王晓丽 杨娟 +5 位作者 陈玉 成俊萍 潘红平 韦精卫 陆凤花 石德顺 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1400-1404,共5页
为了探讨水牛卵母细胞体外发育潜能与卵丘颗粒细胞凋亡之间的关系,本研究将水牛卵母细胞体外培养22-24 h后,取其卵丘颗粒细胞,采用Annexin V-FITC法进行颗粒细胞凋亡染色,进行凋亡率的分析,并与卵母细胞的成熟情况和卵母细胞的评分及形... 为了探讨水牛卵母细胞体外发育潜能与卵丘颗粒细胞凋亡之间的关系,本研究将水牛卵母细胞体外培养22-24 h后,取其卵丘颗粒细胞,采用Annexin V-FITC法进行颗粒细胞凋亡染色,进行凋亡率的分析,并与卵母细胞的成熟情况和卵母细胞的评分及形成卵裂、囊胚的结果进行对照。结果发现,随着卵母细胞成熟时间的增加,卵丘颗粒细胞凋亡率升高;随着卵母细胞评分和发育潜能的降低,卵丘颗粒细胞凋亡率逐渐升高。由此表明,卵母细胞发育潜能与卵丘颗粒细胞凋亡密切相关,通过测定卵丘颗粒细胞的凋亡率可预测未成熟卵母细胞的发育潜能。 展开更多
关键词 颗粒细胞 凋亡 卵母细胞 外成熟
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卵丘细胞对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎体外发育的影响 被引量:4
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作者 岑文 华再东 +3 位作者 郑新民 肖红卫 张立苹 吴民耀 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第3期638-643,共6页
为探讨表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)的添加浓度及脱卵丘细胞时间对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎体外发育的影响。试验通过在体外成熟液中添加不同浓度(0、10、15、20、30、40ng/mL)的EGF来研究其对培养44h的卵母细胞成... 为探讨表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)的添加浓度及脱卵丘细胞时间对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎体外发育的影响。试验通过在体外成熟液中添加不同浓度(0、10、15、20、30、40ng/mL)的EGF来研究其对培养44h的卵母细胞成熟率以及孤雌胚胎发育的影响;在培养开始后的不同时间(18、24、38、44h)进行脱卵丘细胞处理来研究不同时间脱卵丘处理对培养44h的卵母细胞成熟率以及孤雌胚胎发育的影响。结果表明,成熟培养基中添加10ng/mL EGF能显著提高卵母细胞的卵裂率和囊胚率(P<0.05)。共培组和独培组卵母细胞培养18h后脱卵丘细胞成熟率均低于44h,但差异不显著(P>0.05);共培组卵母细胞培养18h后脱卵丘细胞的卵裂率和囊胚率显著高于培养44h(P<0.05);独培组卵母细胞培养18h后脱卵丘细胞的卵裂率与44h无显著差异(P>0.05),但囊胚率显著高于培养44h后脱卵丘细胞(P<0.05)。添加10ng/mL EGF对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎体外发育较好;卵母细胞培养18h后脱卵丘细胞可提高孤雌胚胎早期发育能力。 展开更多
关键词 EGF 细胞 外成熟 胚胎发育
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水牛卵丘细胞和颗粒细胞单层对卵母细胞体外受精及其胚胎发育的影响 被引量:5
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作者 黄芬香 杨春艳 +4 位作者 庞春英 郑海英 尚江华 张秀芳 梁贤威 《中国牛业科学》 2011年第6期8-12,共5页
[目的]探讨卵丘细胞对水牛卵母细胞体外成熟、体外受精及颗粒细胞单层对水牛体外胚胎发育的影响。[方法]①按卵母细胞有无卵丘细胞情况分为五个组:即自然裸卵组(Ⅰ组)、自然裸卵+卵丘细胞共成熟组(Ⅱ组)、人为裸卵+卵丘细胞共成熟组(Ⅲ... [目的]探讨卵丘细胞对水牛卵母细胞体外成熟、体外受精及颗粒细胞单层对水牛体外胚胎发育的影响。[方法]①按卵母细胞有无卵丘细胞情况分为五个组:即自然裸卵组(Ⅰ组)、自然裸卵+卵丘细胞共成熟组(Ⅱ组)、人为裸卵+卵丘细胞共成熟组(Ⅲ组)、AB级卵母细胞成熟后去除卵丘细胞受精组(Ⅳ组)、AB级卵母细胞对照组(Ⅴ组)分别进行体外成熟及体外受精培养。②不同牛品种的颗粒细胞单层与受精卵共培养效果比较。[结果]表明:在体外成熟方面,Ⅰ组与Ⅱ组无显著差异(P>0.05),但显著低于Ⅲ组(P<0.05),极显著低于Ⅳ组、Ⅴ组;受精卵分裂率方面,Ⅰ组与Ⅱ组、Ⅲ组无显著差异(P>0.05),极显著低于Ⅳ组、Ⅴ组(P<0.01);但在囊胚率方面,对照组Ⅴ组囊胚率极显著高于其他试验组30.50%(P<0.01)。用不同牛品种颗粒细胞单层进行受精卵培养的试验表明,水牛受精卵与水牛颗粒细胞单层共培养效果30.03%明显优于黄牛颗粒细胞单层的效果23.04%(P<0.05)。[结论]卵丘细胞对卵母细胞的体外成熟、体外受精及胚胎发育均有促进作用;水牛受精卵与同科属的水牛颗粒细胞单层共培养效果优于黄牛颗粒细胞单层的效果。 展开更多
关键词 水牛 细胞 卵母细胞 颗粒细胞单层
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卵丘细胞在卵母细胞体外成熟培养过程中的作用 被引量:9
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作者 张晓华 朱增娟 +2 位作者 袁水桥 李东全 罗光彬 《黄牛杂志》 2005年第3期43-45,共3页
介绍了卵丘细胞在卵母细胞体外成熟培养过程中的作用,主要从卵丘细胞与卵母细胞的结构与功能联系,卵丘扩展对卵母细胞体外成熟的影响及卵丘细胞层数对卵母细胞体外成熟的影响三个方面加以阐述。
关键词 卵母细胞 外成熟 细胞 培养过程 结构与功能 扩展
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无卵丘的水牛卵母细胞体外成熟方法的初步探讨
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作者 冯贵雪 王晓丽 +3 位作者 卞桂华 石德顺 杨素芳 舒益民 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期614-619,共6页
主要探讨无卵丘水牛卵母细胞体外成熟的可行性,以便为研究卵母细胞成熟机理提供模型。无卵丘的水牛卵母细胞随机分为5组,然后分别进行直接成熟培养(M1),与卵丘细胞单层共培养(M2),用未扩展的卵丘细胞块包围培养(M3),与扩展的卵丘细胞团... 主要探讨无卵丘水牛卵母细胞体外成熟的可行性,以便为研究卵母细胞成熟机理提供模型。无卵丘的水牛卵母细胞随机分为5组,然后分别进行直接成熟培养(M1),与卵丘细胞单层共培养(M2),用未扩展的卵丘细胞块包围培养(M3),与扩展的卵丘细胞团共培养(M4)和用卵巢组织包围培养(M5)。无卵丘的水牛卵母细胞体外成熟培养24 h后检查第一极体(PB1)排出率,随后对这些卵母细胞进行孤雌激活,评定其成熟质量。结果发现,M4组的第一极体排出率明显高于M1组和M5组,其它各组间没有显著差异(P>0.05);M5组的孤雌激活卵裂率显著低于M1组和M4组(P<0.05),而与M2组和M3组没有显著差异(P>0.05),但M3和M4两组的囊胚发育率显著高于M1组和M5组(P<0.05)。这些研究结果表明:(1)未扩展卵丘细胞包围法和扩展卵丘细胞团支撑法可促进无卵丘水牛卵母细胞的体外成熟,但与卵丘细胞单层共培养没有作用;(2)卵巢组织包围培养不利于水牛卵母细胞的体外成熟。 展开更多
关键词 水牛 卵母细胞 外成熟
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中国人卵母细胞中联会复合体的电镜分析
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作者 刘静宇 曾庆华 +2 位作者 白玲 李锁平 郝水 《东北师大学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期105-110,共6页
运用表面铺展SDS处理、硝酸银染色的电镜观察技术 ,分析了 5例中国胎儿卵母细胞中联会复合体的发育情况 .结果表明 :引起神经管损伤的因子对卵母细胞中同源染色体配对行为无影响 ;中国人卵母细胞中同源染色体开始配对可能发生在胎龄 1 ... 运用表面铺展SDS处理、硝酸银染色的电镜观察技术 ,分析了 5例中国胎儿卵母细胞中联会复合体的发育情况 .结果表明 :引起神经管损伤的因子对卵母细胞中同源染色体配对行为无影响 ;中国人卵母细胞中同源染色体开始配对可能发生在胎龄 1 4周之前 . 展开更多
关键词 卵母细胞 同源染色配对 联会复合 中国人 电镜分析
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牛卵丘卵母细胞体外成熟的研究进展 被引量:1
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作者 丁丽艳 《现代畜牧科技》 2015年第1期44-45,共2页
牛体外受精技术是胚胎生物工程技术研究的基础,其中牛卵丘卵母细胞体外成熟培养是体外受精技术的关键,也是重要环节。自上世纪三十年代以来,国内外研究者们都付出了大量的研究工作,并取得了较大研究进展。目前,牛卵丘卵母细胞体外成熟... 牛体外受精技术是胚胎生物工程技术研究的基础,其中牛卵丘卵母细胞体外成熟培养是体外受精技术的关键,也是重要环节。自上世纪三十年代以来,国内外研究者们都付出了大量的研究工作,并取得了较大研究进展。目前,牛卵丘卵母细胞体外成熟培养体系已经确立,但其中的卵母细胞体外成熟和早期胚胎发育阻滞,卵母细胞的成熟调控机理等问题,还有待研究者们进一步深入探讨。本文主要从牛卵丘卵母细胞的获得方法、体外培养条件、体外培养液及添加物、存在问题等几方面来综述其研究进展。 展开更多
关键词 卵母细胞 外培养
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db-cAMP和卵丘细胞单层对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎发育潜力研究 被引量:1
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作者 徐国旗 华再东 +4 位作者 张立苹 肖红卫 刘西梅 许生成 郑新民 《湖北农业科学》 2015年第24期6303-6306,共4页
为提高卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎发育的能力,探讨了双丁酰基腺苷酸环化酶(db-c AMP)和卵丘细胞单层共培养对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎体外发育潜力。结果表明,成熟培养液中分别添加0、0.5、1.0、1.5和2.0 mmol/L的db-c AMP时,卵... 为提高卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎发育的能力,探讨了双丁酰基腺苷酸环化酶(db-c AMP)和卵丘细胞单层共培养对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎体外发育潜力。结果表明,成熟培养液中分别添加0、0.5、1.0、1.5和2.0 mmol/L的db-c AMP时,卵母细胞的体外成熟率依次降低,但浓度为1 mmol/L时的孤雌胚囊胚率(27.03%)显著高于其他各组(P<0.05);卵丘细胞单层共培养卵母细胞时,其成熟率、卵裂率及囊胚率(86.00%、89.04%、28.36%)也得到了显著提高;0.4 mmol/L的db-c AMP和卵丘细胞单层共培养时,其成熟率和卵裂率(85.78%和88.95%)与对照组差异不显著,但囊胚率(35.14%)显著提高。0.4 mmol/L的db-c AMP和卵丘细胞单层共培养能够显著提高猪卵母细胞的体外成熟及孤雌胚胎的发育潜力。 展开更多
关键词 细胞单层 外发育
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卵丘细胞和细胞骨架稳定剂对绵羊成熟卵母细胞玻璃化冷冻的影响 被引量:9
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作者 张家新 张家新 +5 位作者 陈少轻 孟昭霞 郭丽丽 安晶 吴亦芳 李金泉 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第5期1879-1881,共3页
[目的]为了提高绵羊成熟卵母细胞玻璃化冷冻的效果。[方法]以未冷冻的卵母细胞为对照,研究卵丘细胞存在与否以及不同浓度的细胞骨架稳定剂对绵羊成熟卵母细胞冷冻保存的影响。[结果]卵丘细胞存在与否对绵羊成熟卵母细胞玻璃化冷冻没有... [目的]为了提高绵羊成熟卵母细胞玻璃化冷冻的效果。[方法]以未冷冻的卵母细胞为对照,研究卵丘细胞存在与否以及不同浓度的细胞骨架稳定剂对绵羊成熟卵母细胞冷冻保存的影响。[结果]卵丘细胞存在与否对绵羊成熟卵母细胞玻璃化冷冻没有影响。在所有细胞松弛素B处理组中,用7.5、10.0μg/ml细胞松弛素B处理的绵羊成熟卵母细胞玻璃化冷冻后获得较高的囊胚率(P<0.05),分别为8.1%、7.8%;在所有紫杉醇处理组中,用0.5μmol/L紫杉醇处理的绵羊成熟卵母细胞玻璃化冷冻后获得的囊胚率最高为10.1%(P<0.05)。[结论]细胞骨架稳定剂细胞松弛素B或紫杉醇可以提高绵羊成熟卵母细胞的玻璃化冷冻效果。 展开更多
关键词 细胞 细胞骨架稳定剂 绵羊成熟卵母细胞 玻璃化冷冻
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组织蛋白酶对成年绵羊卵母细胞体外发育能力的影响 被引量:7
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作者 刘志涛 田树军 +4 位作者 孙树春 陈晓勇 张艳普 胡媛媛 郭军艾 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1704-1711,共8页
本研究旨在观察绵羊卵丘细胞中组织蛋白酶(CTSS、CTSB)的mRNA在体外成熟过程中的表达规律,探明卵丘细胞中组织蛋白酶(CTSS、CTSB)mRNA的表达与卵母细胞体外发育能力之间的相关性。采用Rea-ltimePCR方法检测绵羊在体外成熟0、8、16和24h... 本研究旨在观察绵羊卵丘细胞中组织蛋白酶(CTSS、CTSB)的mRNA在体外成熟过程中的表达规律,探明卵丘细胞中组织蛋白酶(CTSS、CTSB)mRNA的表达与卵母细胞体外发育能力之间的相关性。采用Rea-ltimePCR方法检测绵羊在体外成熟0、8、16和24h的卵丘细胞中组织蛋白酶(CTSB、CTSS)的mRNA表达水平,以及在成熟液中添加组织蛋白酶抑制剂(E-64)后卵丘细胞中CTSB和CTSS的mRNA表达量在体外成熟前及体外成熟后的表达水平,并测定在成熟液中添加1、5、10μmol.L-1 E-64对卵母细胞成熟率、受精率及囊胚发育率的影响。结果,卵丘细胞中的CTSS和CTSB mRNA表达均随着体外成熟时间的增加(IVM 0h、IVM 8h和IVM 16h)呈下降的趋势(P<0.01)。添加5和10μmol.L-1 E-64组的卵丘细胞中CTSS和CTSB mRNA表达水平较对照组和1μmol.L-1组均显著性降低(P<0.01),而5和10μmol.L-1组间的CTSS和CTSB mRNA表达水平无显著差异(P>0.05)。成熟液中添加5和10μmol.L-1的E-64组的囊胚发育率(26.82%和30.95%)显著高于1μmol.L-1组和对照组(18.23%和15.63%,P<0.05),但5和10μmol.L-1组对卵母细胞的成熟率及卵裂率与1μmol.L-1组和对照组间无显著性差异(P>0.05)。结果表明,绵羊卵丘细胞中CTSS和CTSB的mRNA表达水平在体外成熟过程中呈下降趋势,其mRNA表达水平与胚胎的发育能力呈负相关;组织蛋白酶特异性抑制剂E-64可下调绵羊卵丘细胞中CTSS和CTSB的mRNA表达水平,并提高卵母细胞随后的体外发育能力。 展开更多
关键词 E-64 细胞 组织蛋白酶 外发育 REAL-TIMEPCR
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卵母细胞第一极体形态与卵胞浆内单精子显微注射受精率和胚胎质量的关系 被引量:10
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作者 郝大勇 张展 +3 位作者 管一春 王兴玲 孙丽君 娄华 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2012年第2期232-234,共3页
目的:了解人卵母细胞第一极体形态与卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)后正常受精率、卵裂率和优质胚胎率的关系。方法:选择行ICSI治疗的110个周期中1017枚人卵母细胞。将卵母细胞第一极体分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ四种类型,采用3种来源的精子[手... 目的:了解人卵母细胞第一极体形态与卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)后正常受精率、卵裂率和优质胚胎率的关系。方法:选择行ICSI治疗的110个周期中1017枚人卵母细胞。将卵母细胞第一极体分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ四种类型,采用3种来源的精子[手淫取精精子、附睾穿刺/睾丸活检(PESA/TESA)取精精子、冷冻精液精子]授精。ICSI操作后,了解各型第一极体卵母细胞受精率、卵裂率和优质胚胎率。结果:手淫取精患者:各型第一极体卵母细胞正常受精率和卵裂率比较,差异有统计学意义(P<0.05),其中Ⅲ、Ⅳ型正常受精率低于Ⅰ和Ⅱ型,Ⅱ型卵裂率低于Ⅰ和Ⅲ型。PESA/TESA取精患者:各型第一极体卵母细胞正常受精率和取卵后第3天优质胚胎率比较,差异有统计学意义(χ2=8.488和6.789,P=0.044和0.034),Ⅰ型正常受精率低于Ⅱ和Ⅲ型,Ⅰ和Ⅲ型第3天优质胚胎率高于Ⅱ型。冷冻精液取精患者各指标比较,差异无统计学意义。结论:排除精子来源对受精的影响,正常受精可能和卵母细胞第一极体形态有关。 展开更多
关键词 卵母细胞 胞浆内单精子显微注射 第一极 胚胎
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