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平衡温度、保护剂及时间对卵母细胞减数分裂能力的影响
1
作者 孙兴参 伊亚玲 岳奎忠 《黑龙江动物繁殖》 2002年第1期3-5,14,共4页
以小鼠为动物模型 ,研究延长小鼠卵母细胞在含有冷冻保护剂的液体中的平衡时间 ,并且降低或提高平衡时的温度是否能影响卵母细胞完成减数分裂的能力。结果表明 :1)无论是否有DMSO ,0℃平衡 15min或 6 0min后卵母细胞的激活率没有明显差... 以小鼠为动物模型 ,研究延长小鼠卵母细胞在含有冷冻保护剂的液体中的平衡时间 ,并且降低或提高平衡时的温度是否能影响卵母细胞完成减数分裂的能力。结果表明 :1)无论是否有DMSO ,0℃平衡 15min或 6 0min后卵母细胞的激活率没有明显差异 ;2 ) 1 5mol/LDMSO液中 ,0℃平衡 15min和 6 0min后卵母细胞激活率低于对照组 ;3) 0℃平衡 15min和 6 0min后卵母细胞的激活率与对照组没有差异 ;4 ) 1 5mol/L的DMSO液体中 2 4℃平衡 15min和 6 0min后卵母细胞的激活率显著低于对照组 ;5 )无论是否添加DMSO ,无论是 2 4℃平衡还是 0℃平衡均没有影响激活卵母细胞的第二极体排出。说明卵母细胞低温平衡时添加DMSO对卵母细胞的激活有一定的影响。 展开更多
关键词 平衡温度 保护剂 平衡时间 卵母细胞减数分裂能力 激活 小鼠
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核膜孔亚复合物Nup98/Rae1对小鼠卵母细胞体外减数分裂成熟的影响
2
作者 罗安凤 华再东 +1 位作者 杨彩侠 陈矾 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1998-2006,共9页
【目的】探究核膜孔蛋白98(Nup98)和核糖核酸输出因子1(Rae1)对小鼠卵母细胞体外减数分裂成熟的影响。【方法】选择4周龄SPF级雌性昆明小鼠,分离小鼠卵母细胞并进行体外成熟培养,利用实时荧光定量PCR检测小鼠卵母细胞中Nup 98和Rae 1基... 【目的】探究核膜孔蛋白98(Nup98)和核糖核酸输出因子1(Rae1)对小鼠卵母细胞体外减数分裂成熟的影响。【方法】选择4周龄SPF级雌性昆明小鼠,分离小鼠卵母细胞并进行体外成熟培养,利用实时荧光定量PCR检测小鼠卵母细胞中Nup 98和Rae 1基因表达量;利用免疫荧光法检测Nup98和Rae1共定位情况;利用电转siRNA干扰技术敲低小鼠卵母细胞中Nup 98和Rae 1基因,通过实时荧光定量PCR检测干扰效率,并观察小鼠卵母细胞生发泡破裂(germinal vesicle breakdown,GVBD)和第一极体排出(first polar body extruction,PBE)情况;利用免疫荧光法检测敲低Nup 98和Rae 1基因后小鼠卵母细胞纺锤体组装和染色体排列情况;利用染色体爬片技术检测染色体非整倍体率。【结果】Nup 98和Rae 1基因在小鼠卵母细胞中均有表达。在小鼠卵母细胞生发泡(germinal vesicle,GV)时期,Nup98和Rae1共定位于核膜边缘;在减数分裂过程中,Nup98和Rae1聚集于染色体动粒上。siRNA干扰试验结果显示,与对照组相比,单独敲低Nup 98和Rae 1基因后,对另一基因表达无显著影响(P<0.05);双敲Nup 98和Rae 1基因后,对卵母细胞减数分裂恢复率无显著影响(P>0.05),小鼠卵母细胞发育9.5 h时的PBE率极显著升高(P<0.01),染色体分离比率和非整倍体率极显著或显著增加(P<0.01;P<0.05)。【结论】Nup 98和Rae 1基因在小鼠卵母细胞减数分裂中参与染色体分离,影响非整倍体的发生,从而影响受精胚胎的发育潜力。 展开更多
关键词 小鼠卵母细胞 Nup98 Rae1 体外成熟 减数分裂
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SGK3在小鼠卵母细胞第一次减数分裂恢复中的作用及其机制
3
作者 郭文秀 庄妍 +2 位作者 张慧灵 何文宁 孟峻 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期891-899,共9页
目的:探讨血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶3(SGK3)在小鼠卵母细胞第一次减数分裂恢复中的作用,初步阐明SGK3在哺乳动物卵母细胞早期发育中的调控机制。方法:利用超排卵技术获取生发泡(GV)期小鼠卵母细胞,利用显微注射技术将表达质粒体... 目的:探讨血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶3(SGK3)在小鼠卵母细胞第一次减数分裂恢复中的作用,初步阐明SGK3在哺乳动物卵母细胞早期发育中的调控机制。方法:利用超排卵技术获取生发泡(GV)期小鼠卵母细胞,利用显微注射技术将表达质粒体外转录获得的SGK3 mRNA注射至GV期卵母细胞,分为对照组、Tris-EDTA缓冲液(TE)组和SGK3 mRNA组,采用Western blotting法检测各组小鼠卵母细胞中SGK3蛋白表达水平,显微注射SGK3 mRNA后1、2、3和4 h观察并计算各组卵母细胞生发泡破裂(GVBD)率,采用SGK3抗体稀释抑制实验观察各组卵母细胞形态表现,采用Western blotting法检测体外培养不同时间点卵母细胞中磷酸化SGK3(pSer48)(SGK3-pSer48)和磷酸化细胞分裂周期蛋白2(CDC2)(pTyr15)(CDC2-pTyr15)蛋白表达水平。结果:与对照组和TE组比较,SGK3 mRNA组小鼠卵母细胞中SGK3蛋白表达水平升高(P<0.01),显微注射后1和2 h时GVBD率升高(P<0.01)。SGK3抗体稀释抑制实验,随着SGK3抗体浓度增加,各组小鼠卵母细胞GVBD率呈浓度依赖性降低。过表达SGK3后,与对照组比较,SGK3 mRNA组小鼠卵母细胞中检测不到CDC2-pTyr15蛋白表达的时间至少提前1 h。不同稀释浓度SGK3抗体作用后,与对照组比较,随着SGK3抗体浓度升高和时间的延长,小鼠卵母细胞中CDC2-pTyr15蛋白表达水平逐渐降低(P<0.01),SGK3-pSer486蛋白表达水平逐渐升高(P<0.01)。结论:过表达SGK3可以增加小鼠卵母细胞GVBD率,加快CDC2-pTyr15的脱磷酸化,而CDC2-pTyr15的脱磷酸化晚于SGK3-Ser486的磷酸化。SGK3可能作为CDC2上游调节因子参与调控小鼠卵母细胞第一次减数分裂的恢复。 展开更多
关键词 血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶3 小鼠卵母细胞 减数分裂 细胞分裂周期蛋白2 生发泡 生发泡破裂
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C型利钠肽在卵母细胞成熟中的作用及机制研究进展
4
作者 张天宇 吴亚玲 +2 位作者 胡殿兴(综述) 王世宣 张金金(审校) 《实用妇产科杂志》 北大核心 2025年第5期378-381,共4页
卵母细胞成熟是卵巢生殖功能的基石,该过程中存在一个由复杂分子机制调控的减数分裂阻滞时期。C型利钠肽(CNP)与其主要的利钠肽B型受体(NPR-B)在人类和啮齿类动物的卵巢中特异性高表达。研究发现,CNP/NPR-B通路在卵母细胞发育成熟中对... 卵母细胞成熟是卵巢生殖功能的基石,该过程中存在一个由复杂分子机制调控的减数分裂阻滞时期。C型利钠肽(CNP)与其主要的利钠肽B型受体(NPR-B)在人类和啮齿类动物的卵巢中特异性高表达。研究发现,CNP/NPR-B通路在卵母细胞发育成熟中对减数分裂阻滞有关键的调控作用。CNP/NPR-B通路可能参与多囊卵巢综合征的卵母细胞成熟障碍。临床辅助生殖中,CNP可用于优化卵母细胞体外成熟技术,拓宽辅助生殖技术的适用人群。本文综述了CNP/NPR-B通路在卵母细胞成熟中的作用、机制及临床应用进展,为CNP在卵巢功能的基础和临床研究提供理论基础。 展开更多
关键词 C型利钠肽 卵母细胞成熟 减数分裂阻滞 多囊卵巢综合征 辅助生殖
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香烟烟雾水溶物对小鼠卵母细胞体外减数分裂的影响 被引量：9
5
作者 李朝军 吴海涛 +1 位作者 蔡霞华 张锡然 《中国环境科学》 EI CAS CSSCI CSCD 北大核心 1997年第4期312-315,共4页
采用小鼠卵母细胞体外培养的方法研究了香烟烟雾水溶物对小鼠卵母细胞减数分裂的影响，以检查吸烟对生殖过程的影响。香烟烟雾水溶物可抑制卵母细胞排出第一极体，而不影响生发泡破裂。香烟烟雾水溶物抑制极体排出是由于破坏了细胞内的... 采用小鼠卵母细胞体外培养的方法研究了香烟烟雾水溶物对小鼠卵母细胞减数分裂的影响，以检查吸烟对生殖过程的影响。香烟烟雾水溶物可抑制卵母细胞排出第一极体，而不影响生发泡破裂。香烟烟雾水溶物抑制极体排出是由于破坏了细胞内的微丝或微管，使有丝分裂器不能向细胞边缘移动，并抑制了胞质分裂，形成两倍体的卵子。结果表明，吸烟对卵母细胞的减数分裂成熟有破坏作用。 展开更多
关键词 香烟烟雾水溶物 卵母细胞 毒理 减数分裂 生殖
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149位丝氨酸在CDC25B诱导小鼠卵母细胞减数分裂中的功能 被引量：3
6
作者 赵鸿梅 张阳 +1 位作者 徐晓燕 于秉治 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期298-299,302,共3页
目的:研究小鼠卵母细胞减数分裂过程中,149位丝氨酸对CDC25B磷酸酶功能的影响。方法:将野生型CDC25B-WT和突变型CDC25B-S149A体外转录成mRNA,显微注射到小鼠GV期卵母细胞中,观察减数分裂恢复情况,同时检测了各组卵母细胞CDC2-Tyr15的磷... 目的:研究小鼠卵母细胞减数分裂过程中,149位丝氨酸对CDC25B磷酸酶功能的影响。方法:将野生型CDC25B-WT和突变型CDC25B-S149A体外转录成mRNA,显微注射到小鼠GV期卵母细胞中,观察减数分裂恢复情况,同时检测了各组卵母细胞CDC2-Tyr15的磷酸化状态。结果:在小鼠卵母细胞减数分裂过程中,野生型CDC25B能促进减数分裂的重启动,活化有丝分裂促进因子,其突变体CDC25B-S149A对减数分裂的诱导作用丧失,不能活化有丝分裂促进因子。结论:149位丝氨酸的完整是CDC25B磷酸酶发挥调节功能所必需的。 展开更多
关键词 卵母细胞 减数分裂 GVBD CDC25B
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钙调蛋白依赖的蛋白激酶Ⅱ在卵母细胞减数分裂和受精中的作用(英文) 被引量：4
7
作者 范衡宇 霍立军 孙青原 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第2期171-174,共4页
钙调蛋白依赖的蛋白激酶 (CaMK)是一类分布广泛的丝 /苏氨酸蛋白激酶家族 ,在钙离子和钙调蛋白存在的条件下发生自磷酸化而被激活 ,在细胞内对于钙信号的传递具有重要的介导作用 .近年来的研究表明CaMKⅡ是参与调节卵母细胞减数分裂的... 钙调蛋白依赖的蛋白激酶 (CaMK)是一类分布广泛的丝 /苏氨酸蛋白激酶家族 ,在钙离子和钙调蛋白存在的条件下发生自磷酸化而被激活 ,在细胞内对于钙信号的传递具有重要的介导作用 .近年来的研究表明CaMKⅡ是参与调节卵母细胞减数分裂的重要分子 ,在卵母细胞成熟、极体排放、受精和活化等过程中发挥作用 .CaMKⅡ作为Ca2 + 的下游信号分子 ,在受精后促进成熟促进因子 (MPF)和细胞静止因子 (CSF)的失活 ,并调节纺锤体微管的组装和中心体的复制过程 .虽然CaMKⅡ在减数分裂中的作用广泛而关键 ,但目前的研究主要集中于低等动物和小鼠 。 展开更多
关键词 钙调蛋白依赖的蛋白激酶Ⅱ 卵母细胞 减数分裂 受精 CAMK 细胞周期
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核糖体S6蛋白激酶p90^(rsk)与卵母细胞减数分裂 被引量：4
8
作者 范衡宇 佟超 孙青原 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第4期506-509,共4页
丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK)信号途径对减数分裂有重要调节作用 ,p90 rsk是迄今研究最清楚的MAPK下游靶分子 ,介导MAPK途径在卵母细胞减数分裂中的多种功能 ,包括卵母细胞减数分裂的启动、MⅠ /MⅡ期转化和MⅡ期阻滞的维持等 .p90 rsk的... 丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK)信号途径对减数分裂有重要调节作用 ,p90 rsk是迄今研究最清楚的MAPK下游靶分子 ,介导MAPK途径在卵母细胞减数分裂中的多种功能 ,包括卵母细胞减数分裂的启动、MⅠ /MⅡ期转化和MⅡ期阻滞的维持等 .p90 rsk的磷酸化是MAPK激活的结果 ,而细胞退出减数分裂时 ,p90 rsk的去磷酸化也发生在MAPK失活以后 .介绍了在卵母细胞中 p90 rsk的研究进展 . 展开更多
关键词 核糖体S6蛋白激酶p90^rsk 卵母细胞 减数分裂 MAPK
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卵泡颗粒细胞维持山羊卵母细胞减数分裂抑制状态的研究 被引量：2
9
作者 刘利杰 权富生 +3 位作者 刘军 张东 刘根胜 张涌 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2008年第4期119-123,共5页
通过在卵母细胞体外成熟过程中添加不同浓度的卵丘细胞或其外围壁层颗粒细胞进行共培养,对山羊卵母细胞成熟过程中卵泡颗粒细胞对卵母细胞减数分裂抑制作用及作用机制进行了探索。结果表明,成熟液中添加105和106个/mL卵丘细胞或外围壁... 通过在卵母细胞体外成熟过程中添加不同浓度的卵丘细胞或其外围壁层颗粒细胞进行共培养,对山羊卵母细胞成熟过程中卵泡颗粒细胞对卵母细胞减数分裂抑制作用及作用机制进行了探索。结果表明,成熟液中添加105和106个/mL卵丘细胞或外围壁层颗粒细胞的卵母细胞体外成熟率与对照组相比差异不显著(p>0.05),但添加5×106个/mL(41.2%)和107个/mL(24.6%)卵丘细胞或外围壁层颗粒细胞组的成熟率显著降低(p<0.05);添加5×106和107个/mL卵丘细胞组和颗粒细胞组卵丘不能正常扩展,卵母细胞核状态观察,停留在GV期;Rp-cAMP(Rp-cyclicadenosine monophosphothioate)膜渗透性cAMP对抗剂,诱导了107个/mL的卵丘细胞组(71.6%)和外围壁层颗粒细胞组(71.3%)的卵母细胞体外成熟率与对照组(72.0%)差异不显著(p>0.05)。在山羊卵母细胞体外成熟过程中,添加一定浓度的卵丘细胞及其外层的颗粒细胞可以提高卵母细胞胞质内的cAMP的水平,抑制卵母细胞减数分裂的启动,使卵母细胞停留在GV期。 展开更多
关键词 山羊 卵泡颗粒细胞 卵母细胞 减数分裂 抑制
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小鼠卵母细胞减数分裂染色体的制备 被引量：1
10
作者 李朝军 袁来平 +1 位作者 张锡然 陈宜峰 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 1996年第6期27-28,共2页
关键词 哺乳动物纲 小鼠 卵母细胞 减数分裂 染色体
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牦牛HDAC1基因克隆及其在组织和卵母细胞减数分裂过程中的表达研究 被引量：1
11
作者 王斌 殷实 +3 位作者 熊显荣 秦文昌 黄向月 李键 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1997-2004,共8页
旨在克隆牦牛组蛋白去乙酰化酶1(histone deacetylases 1,HDAC 1)基因,并检测其在牦牛不同组织及卵母细胞减数分裂过程中的表达水平,从而为研究HDAC1在牦牛生殖发育中的作用机制提供理论依据。本试验采用牦牛为研究对象,通过RT-PCR技术... 旨在克隆牦牛组蛋白去乙酰化酶1(histone deacetylases 1,HDAC 1)基因,并检测其在牦牛不同组织及卵母细胞减数分裂过程中的表达水平,从而为研究HDAC1在牦牛生殖发育中的作用机制提供理论依据。本试验采用牦牛为研究对象,通过RT-PCR技术获得牦牛HDAC1基因CDS序列,使用相关生物信息学软件分析其结构和功能,通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测HDAC1基因在牦牛脑、心、肌肉、卵巢、肾、脾、小肠、肝、肺和子宫组织中的表达谱及在卵母细胞减数分裂过程中mRNA的表达水平。结果表明,HDAC 1基因开放阅读框为1 302 bp,编码433个氨基酸,与黄牛、山羊和绵羊的同源性较高;HDAC1基因在牦牛的各个组织中均有表达,其中在脾、肾和小肠中的表达量极显著高于其他组织(P<0.01)。在牦牛减数第一次分裂中期(MⅠ)和减数第二次分裂中期(MⅡ)卵母细胞中,HDAC 1基因的表达水平极显著高于生发泡(germinal vesicle,GV)期(P<0.01)。提示,HDAC 1基因参与牦牛卵母细胞减数分裂过程。本试验为进一步研究HDAC 1基因在高寒、低氧环境下的牦牛生殖繁育中的作用提供了理论依据。 展开更多
关键词 组蛋白去乙酰化 HDAC1 牦牛 卵母细胞 减数分裂
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A型激酶锚定蛋白在小鼠卵母细胞减数分裂阻滞中的作用
12
作者 王述森 张震 +1 位作者 罗阳 张阳 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期588-590,共3页
目的探讨A型激酶锚定蛋白(AKAPs)在小鼠卵母细胞减数分裂阻滞中的作用。方法收集生发泡期小鼠卵母细胞,显微注射Ht31或Ht31-P,观察卵母细胞减数分裂恢复情况。结果在蛋白激酶A(PKA)持续激活的情况下,Ht31注射组能促进小鼠卵母细胞减数... 目的探讨A型激酶锚定蛋白(AKAPs)在小鼠卵母细胞减数分裂阻滞中的作用。方法收集生发泡期小鼠卵母细胞,显微注射Ht31或Ht31-P,观察卵母细胞减数分裂恢复情况。结果在蛋白激酶A(PKA)持续激活的情况下,Ht31注射组能促进小鼠卵母细胞减数分裂重新启动,解除PKA引起的生发泡期阻滞,而Ht31-P对照组不能。结论 AKAPs介导的PKA正确锚定对小鼠卵母细胞第一次减数分裂阻滞至关重要。 展开更多
关键词 卵母细胞 减数分裂阻滞 A型激酶锚定蛋白
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KDM2B基因克隆及其在牦牛组织和卵母细胞减数分裂过程中的表达研究 被引量：5
13
作者 蔡雯祎 熊显荣 +4 位作者 陈通 杨显英 韩杰 阿果约达 李键 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期534-541,共8页
本研究旨在克隆牦牛组蛋白去甲基化酶2B(Lysine-specific histone demethylase 2B,KDM2B)基因,检测其在牦牛不同组织及其在卵母细胞减数分裂过程中的表达水平,从而为研究KDM2B基因在牦牛减数分裂中的作用机制提供试验依据。牦牛屠宰后,... 本研究旨在克隆牦牛组蛋白去甲基化酶2B(Lysine-specific histone demethylase 2B,KDM2B)基因,检测其在牦牛不同组织及其在卵母细胞减数分裂过程中的表达水平,从而为研究KDM2B基因在牦牛减数分裂中的作用机制提供试验依据。牦牛屠宰后,采集心、肝、脾、肺、肾、脑、小肠、胃、肌肉、卵巢、睾丸和子宫组织样品,分别提取各个样本的总RNA。另选择3~5周岁的健康牦牛,采集卵巢后,抽取卵丘-卵母细胞复合体(Cumulus-oocyte complex,COCs),透明质酸酶作用后,获得卵母细胞和颗粒细胞,利用RT-PCR扩增得到KDM2B基因CDS区序列,实时荧光定量PCR(Quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测KDM2B基因在不同组织中的表达水平。体外培养获得GV、MI、MII 3个时期COCs,用qRT-PCR法检测KDM2B基因在卵母细胞减数分裂过程中的表达规律。结果表明,KDM2B基因CDS区长为3 930bp,编码1 309个氨基酸,与牦牛已有预测序列相比,属于长型转录本。与牛、绵羊、山羊的同源性较高,与斑马鱼和鸡的同源性较低。KDM2B基因在牦牛的各个组织中均有表达,其中脾、子宫、睾丸和卵巢的表达量较高。在MI期卵母细胞中,KDM2B基因的表达水平显著高于GV期和MII期(P<0.01)。在卵丘颗粒细胞中,KDM2B基因的表达水平随减数分裂的进行而显著增加(P<0.01)。本研究为进一步研究牦牛卵母细胞减数分裂机制及改善牦牛繁殖效率提供基础资料。 展开更多
关键词 牦牛 KDM2B基因 组织表达 卵母细胞 减数分裂
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组蛋白H3Ser10磷酸化对猪卵母细胞减数分裂的影响 被引量：1
14
作者 田明明 孙大康 +5 位作者 孟玮 王楠 倪娜 李清春 王雁林 孙洪亮 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2020年第5期466-470,共5页
目的组蛋白磷酸化修饰在卵母细胞减数分裂过程中作用机制的研究较少。文中旨在探讨猪卵母细胞中组蛋白H3的磷酸化模式及对卵母细胞减数分裂过程的调控。方法首先采用免疫组化法鉴定组蛋白H3Ser10(H 3S10)磷酸化在猪卵母细胞减数分裂过... 目的组蛋白磷酸化修饰在卵母细胞减数分裂过程中作用机制的研究较少。文中旨在探讨猪卵母细胞中组蛋白H3的磷酸化模式及对卵母细胞减数分裂过程的调控。方法首先采用免疫组化法鉴定组蛋白H3Ser10(H 3S10)磷酸化在猪卵母细胞减数分裂过程的表达情况,随后体外成熟猪卵母细胞,将卵丘卵母细胞复合体(COCs)分为4个组,一组正常培养作为对照组,另外3组分别添加5、10、30μmol/L ZM447439的成熟液,体外培养27 h,分别为5、10、30μmol/L ZM447439处理组。统计卵母细胞在减数分裂各个时期所占的比例,并进一步检测猪卵母细胞组蛋白H3S10磷酸化的表达模式及蛋白激酶Aurora B基因表达的情况。结果与GVBD期组蛋白H3S10磷酸化水平比较,MI期和AI期明显升高(P<0.05),AI期较MⅡ期明显升高(P<0.05)。与对照组相比,10、30μmol/L ZM447439处理组GVBD期卵母细胞比例[(32.14±0.51)%、(95.34±0.59)%]较对照组[(2.56±0.03)%]增加(P<0.05),MI[(66.88±0.13)%、(4.66±0.04)%]较对照组[(87.42±0.14)%]明显下降(P<0.05)、AI期[(1.01±0.03)%、(0.00±0.00)%]较对照组[(10.02±0.21)%]明显下降(P<0.05)。与对照组卵母细胞发生H3S10去磷酸化修饰比例(0)比较,10μmol/L、30μmol/L ZM447439处理组[(35.2±0.39)%、(95.4±0.65)%]明显升高(P<0.05)。与对照组相比,10、30μmol/L ZM447439处理组Aurora B基因的相对表达量显著降低(P<0.05)。结论组蛋白H3S10磷酸化修饰在哺乳动物卵母细胞成熟过程起着一定作用。Aurora B激酶抑制剂ZM447439处理引起组蛋白H3S10磷酸化水平及Aurora-B激酶的表达降低导致卵母细胞成熟障碍。 展开更多
关键词 猪卵母细胞 成熟 组蛋白 H3S10磷酸化 减数分裂
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性成熟前山羊卵母细胞减数分裂进程的研究
15
作者 武建朝 王锋 +4 位作者 洪俊君 武杰 李中原 万永杰 王瑞芳 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2008年第1期169-172,共4页
以卵丘卵母细胞复合体(COCs)为研究对象,研究比较了性成熟前山羊和成年山羊卵母细胞体外核成熟进程及其卵母细胞孤雌发育的能力。结果表明,成年山羊和性成熟前山羊卵母细胞体外成熟过程中减数分裂各时相出现的时间不同。在整个体外成熟... 以卵丘卵母细胞复合体(COCs)为研究对象,研究比较了性成熟前山羊和成年山羊卵母细胞体外核成熟进程及其卵母细胞孤雌发育的能力。结果表明,成年山羊和性成熟前山羊卵母细胞体外成熟过程中减数分裂各时相出现的时间不同。在整个体外成熟培养过程中,性成熟前山羊卵母细胞GV期存在时间较长(7.21 h),大约占成熟时间的1/4,在成熟培养23.96 h后才能进入MⅡ期。对成年羊而言,其卵母细胞GV期存在时间相对较短(2.94 h),占成熟培养时间的1/9,大约在成熟培养20.64 h后进入MⅡ期。成熟培养24 h和27 h,成年羊卵母细胞成熟率差异不显著,但是性成熟前山羊卵母细胞成熟率差异显著(P<0.05)。与成年山羊相比,羔山羊卵母细胞孤雌发育能力较差,可能与其卵母细胞本身成熟缺陷有关。 展开更多
关键词 卵母细胞 减数分裂 孤雌发育 性成熟 山羊
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正常培养条件下绵羊卵母细胞减数分裂从中期Ⅰ至中期Ⅲ的动态变化过程
16
作者 李欣欣 白春玲 +1 位作者 魏著英 李光鹏 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期226-233,共8页
以绵羊卵母细胞为研究对象,通过免疫组织化学的方法研究其染色体和纺锤体微管及微丝在体外成熟、孤雌激活过程中的动态变化。结果表明:(1)纺锤体的形态由中期的桶形,变成早后期的圆柱形及后期和末期细长而扁平的三角锥形,与椎体底面连... 以绵羊卵母细胞为研究对象,通过免疫组织化学的方法研究其染色体和纺锤体微管及微丝在体外成熟、孤雌激活过程中的动态变化。结果表明:(1)纺锤体的形态由中期的桶形,变成早后期的圆柱形及后期和末期细长而扁平的三角锥形,与椎体底面连接的染色质将来进入极体并最终被排出。(2)染色体形态从中期单个的清晰可见的状态,变为后期和末期凝缩的染色质状态,随后在下一个中期再次呈现出清晰可见的形态。(3)第一次减数分裂中期(MI)纺锤体比第二次减数分裂中期(MII)和第三次减数分裂中期(MIII)大,但MII期纺锤体形态比MI期更接近桶形。(4)几乎所有组成纺锤体的微管和微丝都被分配到极体中。 展开更多
关键词 减数分裂 微管 微丝 纺锤体 卵母细胞 绵羊
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绵羊卵泡液和次黄嘌呤对卵母细胞体外减数分裂的影响
17
作者 布赫 王建国 旭日干 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2002年第4期219-222,共4页
目的　利用在培养液中添加绵羊卵泡液和次黄嘌呤 ,抑制卵母细胞GVBD发生 ,延长转录活性 ,从而使卵母细胞真正成熟 ,提高胚胎质量及生产效率。方法　利用体外成熟技术对有屠宰采集的绵羊卵母细胞进行培养 ,培养液中添加卵泡液及次黄嘌呤 ... 目的　利用在培养液中添加绵羊卵泡液和次黄嘌呤 ,抑制卵母细胞GVBD发生 ,延长转录活性 ,从而使卵母细胞真正成熟 ,提高胚胎质量及生产效率。方法　利用体外成熟技术对有屠宰采集的绵羊卵母细胞进行培养 ,培养液中添加卵泡液及次黄嘌呤 ,检查成熟效果。结果　将卵母细胞培养在 5 0 %和 10 0 %的卵泡液中 ,2 4h后处于GV期的卵母细胞分别为 19% (8 4 2 )和 33 3% (13 39)。在含有 4mmol L次黄嘌呤的培养液中 ,2 4h后有2 1 6 % (16 74 )的卵母细胞处GV期 ,而对照组中只有 6 % (3 5 0 ) ,经过次黄嘌呤处理的卵母细胞多数都停滞于PⅠ期(44 6 % ,33 74 )。在 4mmol L次黄嘌呤培养液中添加FSH并未使受到抑制的卵母细胞诱导成熟。结论　卵泡液和次黄嘌呤只能在有限的程度上抑制减数分裂的重新启动 ,并对减数分裂的全过程都有影响 ,这种影响程度与抑制因子的浓度相关 ,存在明显的剂量效应。 展开更多
关键词 绵羊卵泡液 次黄嘌呤 卵母细胞 体外减数分裂
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人类卵母细胞减数分裂的生理和病理机制 被引量：2
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作者 周舟 桑庆 王磊 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期1087-1099,共13页
正常的卵子发生是人类成功繁育后代的关键步骤。女性胚胎发育时期,原始生殖细胞从有丝分裂转变为减数分裂,经过同源染色体配对和重组后,减数分裂被阻滞在减数第一次分裂前期的双线期。卵泡内卵母细胞的减数分裂阻滞的维持主要归因于胞... 正常的卵子发生是人类成功繁育后代的关键步骤。女性胚胎发育时期,原始生殖细胞从有丝分裂转变为减数分裂,经过同源染色体配对和重组后,减数分裂被阻滞在减数第一次分裂前期的双线期。卵泡内卵母细胞的减数分裂阻滞的维持主要归因于胞质中高浓度的环磷酸腺苷。在月经周期中,卵泡刺激素和黄体生成素促进某些卵母细胞恢复减数分裂,完成排卵过程。卵母细胞减数分裂过程中发生任何缺陷都可能影响卵子发生,进而影响受精和胚胎发育过程。辅助生殖、高通量测序和分子生物学技术的快速发展,为人类认识减数分裂背后的精确分子机制以及卵母细胞成熟缺陷疾病的发病机制与诊疗提供新的思路和手段。本文主要介绍了近年来发现的调控卵子发生的生理和病理机制,涉及同源重组、减数分裂阻滞与恢复、母源mRNA降解、翻译后调节、透明带组装等过程,旨在增进相关领域研究人员对卵母细胞减数分裂的了解,并为进一步机制研究和疾病治疗提供理论基础。 展开更多
关键词 卵子发生 卵母细胞 减数分裂 突变
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Aurora激酶A调控卵母细胞减数分裂的分子机制 被引量：3
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作者 刘凤 姚波 +2 位作者 莫晓龙 柳琼友 任艳萍 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期142-148,共7页
Aurora激酶A(AURKA)是Aurora激酶家族成员,其参与有丝分裂进入、中心体成熟和分离、双极纺锤体组装和稳定以及染色体的凝集和分离。AURKA在减数分裂过程中发挥的作用与有丝分裂类似,但其具体作用机制以及其与有丝分裂的异同尚不清楚。... Aurora激酶A(AURKA)是Aurora激酶家族成员,其参与有丝分裂进入、中心体成熟和分离、双极纺锤体组装和稳定以及染色体的凝集和分离。AURKA在减数分裂过程中发挥的作用与有丝分裂类似,但其具体作用机制以及其与有丝分裂的异同尚不清楚。因此本文从AURKA在卵母细胞减数分裂中的定位与活化,及其在调控纺锤体形成、纺锤体组装检查点活化以及动粒-微管附着纠错等方面进行综述,对比AURKA在有丝分裂和卵母细胞减数分裂中的异同,为今后进一步揭示细胞分裂调控机制以及癌症和生殖等相关临床研究奠定理论基础。 展开更多
关键词 减数分裂 Aurora激酶A 微管组织中心 纺锤体组装 动粒-微管附着 卵母细胞
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PLCγ1在小鼠卵母细胞减数分裂恢复中的作用 被引量：4
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作者 郝肖琼 贾方毅 付旭阳 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第12期16-22,51,共8页
目的探究磷脂酶(PLC)Cγ1在卵母细胞减数分裂恢复中的作用及机制,进一步阐明卵母细胞成熟的分子机理,为与相关的人体临床应用提供理论基础。方法利用Real-time PCR检测PLC不同亚型在颗粒细胞与卵丘细胞中的表达情况,构建体外卵泡培养模... 目的探究磷脂酶(PLC)Cγ1在卵母细胞减数分裂恢复中的作用及机制,进一步阐明卵母细胞成熟的分子机理,为与相关的人体临床应用提供理论基础。方法利用Real-time PCR检测PLC不同亚型在颗粒细胞与卵丘细胞中的表达情况,构建体外卵泡培养模型及COC培养模型研究PLCγ1特异抑制剂U73122对LH及EGF诱导的减数分裂恢复的影响,利用钙离子荧光探针Fluo 3-AM检测胞内钙离子水平变化,酶联免疫法检测胞内cGMP水平变化,利用Real-time PCR、Western blot以及免疫组化检测不同亚型1,4,5-三磷酸肌醇受体(IP 3R)的表达变化情况。结果研究表明,颗粒细胞与卵丘细胞中Plcγ1 mRNA的表达均显著高于其它亚型(P<0.05),U73122能够有效抑制LH和EGF诱导的卵母细胞减数分裂恢复(P<0.05)以及EGF诱导的卵丘细胞内钙离子水平升高(P<0.05),U73122还显著逆转了EGF介导的胞内cGMP水平下降(P<0.05),此外,研究还发现在颗粒细胞,卵丘细胞与卵母细胞中Itpr1 mRNA的表达量显著高于其它亚型(P<0.05),Western blot与免疫组化的结果也表明IP 3R1在三种细胞中均有表达。结论LH-EGFR信号通过PLCγ1-IP 3R1升高胞内钙离子水平诱导卵母细胞减数分裂恢复。 展开更多
关键词 卵母细胞减数分裂 磷脂酶Cγ1 1 4 5-三磷酸肌醇受体 钙离子
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