CCl4诱导的肝纤维化大鼠模型肝小叶内卵圆细胞总体积与轮廓数密度变化的体视学分析 被引量：2

1

作者 王川林 刘全明 +3 位作者 杨霞 杨正伟 梅小平 彭彬 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2024年第1期70-75,共6页

目的 定量研究CCl4诱导的肝纤维化大鼠肝小叶内卵圆细胞(HOC)总体积和轮廓数密度的变化。方法 将11只雄性健康SD大鼠随机分为对照组(n=5)、肝纤维化组(n=6),每周2次皮下注射CCl4与橄榄油混悬液,每次3 mL/kg。在肝纤维化造模5周后取材,... 目的 定量研究CCl4诱导的肝纤维化大鼠肝小叶内卵圆细胞(HOC)总体积和轮廓数密度的变化。方法 将11只雄性健康SD大鼠随机分为对照组(n=5)、肝纤维化组(n=6),每周2次皮下注射CCl4与橄榄油混悬液,每次3 mL/kg。在肝纤维化造模5周后取材,从每只大鼠肝脏随机抽选5个大小约1 mm3的肝组织块分别制作1张Epon812环氧树脂包埋超薄切片,运用体视学方法结合透射电子显微镜技术,对大鼠肝小叶内的HOC总体积和轮廓数密度进行定量研究,另从每只大鼠剩余肝脏等距随机抽选4个2 mm厚的肝组织块并分别制作2张石蜡包埋的Masson染色切片,按照肝纤维化Metavir分期标准定性评估每只大鼠的肝纤维化程度。计量资料两组间比较采用成组t检验。结果 体视学定量研究显示,对照组肝小叶内HOC总体积为(15.40±7.63) mm3,肝纤维化组肝小叶内HOC总体积为(146.80±114.00) mm3,与对照组比较,肝纤维化组大鼠肝小叶内HOC总体积显著增加了8.53倍(t=-2.551,P=0.031);对照组肝小叶内HOC轮廓数密度为(56.20±40.40),肝纤维化组肝小叶内HOC轮廓数密度为(566.50±317.00),与对照组比较,肝纤维化组大鼠肝小叶内轮廓数密度显著增加了9.08倍(t=-3.539,P=0.006);定性观察研究结果显示,肝纤维化大鼠肝纤维化分期按照Metavir评分标准达到Ⅱ~Ⅲ期,大鼠窦周隙内肝星状细胞增生部位周围伴随着HOC的大量增生。结论 CCl4诱导肝纤维化大鼠肝小叶内HOC显著增生。 展开更多

关键词 肝纤维化 大鼠 Sprague-Dawley 肝卵圆细胞 肝星状细胞

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华支睾吸虫溶血磷脂酶对大鼠肝星状细胞和卵圆细胞的作用 被引量：9

2

作者 马长玲 胡旭初 +3 位作者 胡凤玉 周红娟 薛玲 余新炳 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期692-695,共4页

目的:观察华支睾吸虫溶血磷脂酶(CslysoPLA)重组蛋白体外对大鼠肝星状细胞和卵圆细胞的作用。方法:应用免疫荧光方法,观察CslysoPLA重组蛋白是否可与大鼠肝星状细胞和卵圆细胞膜结合;应用MTT方法,测定CslysoPLA重组蛋白对大鼠肝星状细... 目的:观察华支睾吸虫溶血磷脂酶(CslysoPLA)重组蛋白体外对大鼠肝星状细胞和卵圆细胞的作用。方法:应用免疫荧光方法,观察CslysoPLA重组蛋白是否可与大鼠肝星状细胞和卵圆细胞膜结合;应用MTT方法,测定CslysoPLA重组蛋白对大鼠肝星状细胞和卵圆细胞的促增殖作用;应用流式细胞术(FCM)检测CslysoPLA重组蛋白对大鼠卵圆细胞细胞周期的影响。结果:CslysoPLA重组蛋白可与大鼠肝星状细胞和卵圆细胞膜结合,MTT方法测定结果表明低浓度重组蛋白对大鼠肝星状细胞和卵圆细胞有一定促增殖作用(P<0.05),20mg/L重组蛋白可促进大鼠卵圆细胞进入G2期,但高浓度重组蛋白可导致大鼠肝星状细胞和卵圆细胞死亡。结论:低浓度的CslysoPLA重组蛋白在体外可刺激大鼠肝星状细胞和卵圆细胞增殖,表明CslysoPLA可能是华支睾吸虫导致胆管上皮增生、腺瘤样病变和肝纤维化的效应分子之一。而高浓度的CslysoPLA重组蛋白可引起肝星状细胞和卵圆细胞死亡,表明CslysoPLA亦可能是华支睾吸虫引起的化学损伤的毒力因子之一。 展开更多

关键词 华支睾吸虫 溶血磷脂酶 肝星状细胞 卵圆细胞

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肝细胞肝癌中卵圆细胞的组织学与超微结构研究 被引量：12

3

作者 肖家诚 朱延波 +4 位作者 朱上林 李勤裕 RuckP AdamA KaiserlingE 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 2000年第3期177-179,共3页

目的 :探讨人肝癌肝组织存在卵圆细胞的可能性。方法 :对 2 0例人肝细胞肝癌的手术标本行常规组织学和超微结构观察 ,并用胆管上皮分化标记CK7和肝细胞分化标记白蛋白对以上组织作免疫组化染色 ,同时对其中 5例作免疫电镜标记。结果 :... 目的 :探讨人肝癌肝组织存在卵圆细胞的可能性。方法 :对 2 0例人肝细胞肝癌的手术标本行常规组织学和超微结构观察 ,并用胆管上皮分化标记CK7和肝细胞分化标记白蛋白对以上组织作免疫组化染色 ,同时对其中 5例作免疫电镜标记。结果 :光镜下 ,14/ 2 0例癌肿边缘常可见到增生的小胆管样结构。电镜下 ,14/ 2 0例可找到三型卵圆细胞。其中Ⅰ型细胞体积较小、核大、胞质少 ,此为较为原始的卵圆细胞。Ⅱ型细胞体积稍大 ,胞质稍多 ,此为向胆管上皮分化的小上皮细胞。Ⅲ型细胞体积稍大 ,内含稍多粗面内质网 ,此为向肝细胞分化的卵圆细胞。此三型卵圆细胞均有细胞内张力微丝和细胞间连接结构。免疫电镜显示 ,三型卵圆细胞均表达CK7和白蛋白 ,但Ⅰ型和Ⅱ型表达CK7多些 ,Ⅲ型表达白蛋白多些。结论 :与动物致癌模型肝中存在卵圆细胞一样 ,人肝细胞肝癌肝中也存在同样形态和免疫表型特点的卵圆细胞。结果支持卵圆细胞可能为肝前体细胞的假设。 展开更多

关键词 卵圆细胞 白蛋白 肝细胞肿瘤 cytokcratin7

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不同品系大鼠肝脏卵圆细胞增殖模型的比较研究 被引量：5

4

作者 赵丽娟 余娇 +4 位作者 李影 陈奕 夏芳珍 王宁荐 陆颖理 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期381-385,共5页

目的对不同品系大鼠肝卵圆细胞增殖模型进行比较,筛选建模效率较高的大鼠品系。方法选择F344、Wistar和SD大鼠各10只,经2-乙酰氨基芴灌胃和四氯化碳腹腔注射建立肝脏卵圆细胞增殖模型,组织学和免疫组织化学检测鉴定。荧光激活细胞筛选... 目的对不同品系大鼠肝卵圆细胞增殖模型进行比较,筛选建模效率较高的大鼠品系。方法选择F344、Wistar和SD大鼠各10只,经2-乙酰氨基芴灌胃和四氯化碳腹腔注射建立肝脏卵圆细胞增殖模型,组织学和免疫组织化学检测鉴定。荧光激活细胞筛选法分选并纯化各品系大鼠肝脏卵圆细胞,分析Thy-1.1^+细胞百分率,观察Thy-1.1^+细胞培养结果。结果成功建立三种品系大鼠肝脏卵圆细胞增殖模型。流式细胞仪分选结果显示,F344、Wistar和SD大鼠Thy-1.1^+细胞百分率分别为(9.46±0.99)%、(2.46±0.37)%和(1.46±0.12)%;各品系大鼠间Thy-1.1^+细胞百分率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。细胞培养观察发现,与Wistar和SD大鼠比较,F344大鼠分选得到的肝脏卵圆细胞生长状态好且纯度较高。结论在用于建立肝脏卵圆细胞增殖模型最为常见的三种品系大鼠中,F344大鼠所建模型的肝脏卵圆细胞活化效率最高。 展开更多

关键词 大鼠品系 肝脏卵圆细胞 细胞增殖模型 细胞分选 细胞培养

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大鼠肝卵圆细胞免疫组化定位及超微结构观察 被引量：4

5

作者 何忠杰 方驰华 +4 位作者 马俊勋 张伟 朱新勇 杨丽萍 路艳盟 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期322-324,共3页

目的研究大鼠肝组织卵圆细胞的定位及其超微结构。方法建立SD大鼠卵圆细胞增生模型,用胆管上皮分化标志CK18、19和干细胞标志CD34作组织免疫组化染色,采用透射电镜观察超微结构。结果组织免疫组化发现大鼠卵圆细胞主要分布于汇管区,部... 目的研究大鼠肝组织卵圆细胞的定位及其超微结构。方法建立SD大鼠卵圆细胞增生模型,用胆管上皮分化标志CK18、19和干细胞标志CD34作组织免疫组化染色,采用透射电镜观察超微结构。结果组织免疫组化发现大鼠卵圆细胞主要分布于汇管区,部分分散于肝小叶内,根据组织和细胞透射电镜超微结构特点,发现卵圆细胞有三型,Ⅰ型细胞体积较小、7μm左右,核大、胞质少,细胞器少,此为较为原始的卵圆细胞。Ⅱ型细胞体积稍大,8μm左右,胞质稍多,有部分细胞器。Ⅲ型细胞体积更大,9μm左右,细胞器较多。结论大鼠肝卵圆细胞位于汇管区,超微结构观察发现肝卵圆细胞可能是肝脏干细胞。 展开更多

关键词 大鼠 卵圆细胞 免疫组化 超微结构

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大鼠成体肝卵圆细胞分离培养及诱导分化的初步研究 被引量：5

6

作者 金世龙 刘宝华 +4 位作者 刘宏鸣 杨俊涛 顾红光 申海军 肖静 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第22期2259-2262,共4页

目的 通过成体大鼠肝卵圆细胞分离培养获取纯净的干细胞并观察诱导分化前后从肝卵圆细胞到肝细胞的形态变化。方法 采用AAF／PH肝干细胞刺激模型，胶原酶Ⅳ消化分离和Percoll梯度离心纯化肝卵圆细胞的方法，用地塞米松、DMSO和EGF、HGF... 目的 通过成体大鼠肝卵圆细胞分离培养获取纯净的干细胞并观察诱导分化前后从肝卵圆细胞到肝细胞的形态变化。方法 采用AAF／PH肝干细胞刺激模型，胶原酶Ⅳ消化分离和Percoll梯度离心纯化肝卵圆细胞的方法，用地塞米松、DMSO和EGF、HGF、SCF、LIF等生长因子联合应用诱导肝卵圆细胞增殖和分化为肝实质细胞。观察肝卵圆细胞到肝细胞形态变化过程，用免疫荧光技术，Western blotting分析检测了干细胞标志c-kit和RT-PCR分析法检测肝干细胞白蛋白和CK19 mRNA表达鉴定卵圆细胞。结果 分离得到的肝卵圆细胞活度达到90％，细胞肜态包括大小和颜色呈不均质，卵圆细胞直径是肝细胞直径的1／4～1／6。诱导后出现大而圆的肝细胞，可见卵圆细胞到肝细胞的中间变化过程，新分离的肝卵圆细胞存生长因子诱导下有向肝细胞分化的特性。经c-kit免疫荧比染色照黄绿色荧光，Western blotting检测肝卵圆细胞有c-kit蛋白条带，而大鼠肝细胞及胆管细胞则未出现条带。PCR分析显示卵圆细胞有CK19和白蛋白mRNA表达。结论 新分离的肝卵圆细胞同时表达c-kit，CK19和白蛋白3种抗原，诱导分化出现一系列从卵圆细胞到肝细胞的形态学变化，这种现象证明分离的肝卵圆细胞就是肝干细胞，经诱导分化可以产生成熟的肝细胞，成为进一步研究肝干细胞生物学特性的基础。 展开更多

关键词 肝卵圆细胞 细胞培养 诱导分化

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小鼠单纯肝切除后再生肝组织内大小核分裂相和卵圆细胞的观察 被引量：3

7

作者 余宏宇 李文林 +10 位作者 谢东甫 张朵 肖承志 孙志勇 何金 孙静 苏娟 李建秀 朱明华 Joseph T Lau 胡以平 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期251-256,共6页

目的:探究C57小鼠单纯2/3肝切除后肝组织内与再生和肝干细胞有关的病理形态学变化及其意义。方法:在4个对照组(正常组、假手术组、倒千里光碱组和倒千里光碱2/3肝切除组)的参照下,观察实验组C57小鼠单纯2/3肝切除后不同时间肝脏病理形... 目的:探究C57小鼠单纯2/3肝切除后肝组织内与再生和肝干细胞有关的病理形态学变化及其意义。方法:在4个对照组(正常组、假手术组、倒千里光碱组和倒千里光碱2/3肝切除组)的参照下,观察实验组C57小鼠单纯2/3肝切除后不同时间肝脏病理形态变化(核分裂相和卵圆细胞等)和CK19、AFP免疫组化检测情况。结果:单纯2/3肝切除后小鼠均出现不同程度的成熟肝细胞通过大核分裂相分裂增生、轻重不等的小胆管/终末胆管增生反应和个别例中有类似于倒千里光碱肝切除模型组的卵圆细胞增生;尤其还有大小核分裂相分布等一些文献未提及的形态学改变。结论:本研究提出肝流域假说的初步设想:肝内成体干细胞存在于小胆管/终末胆管附近,是肝主质细胞的重要源头;在其向中央静脉方向的流向上产生各级分化程度不同的子代(自卵圆细胞到小肝细胞、成熟肝细胞),沿肝板形成该流域干流;而经由血流到达肝脏的过客性干细胞可不同程度地在不同区段作为该流域的支流汇入干流并转分化为肝系细胞。 展开更多

关键词 肝切除术 肝再生 干细胞 肝 大小核分裂相 卵圆细胞

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肝卵圆细胞对肝纤维化大鼠肝组织TGF-β/Smad信号通路的影响 被引量：5

8

作者 赵辉平 田卫斌 +1 位作者 刘明义 王胜春 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期1335-1340,共6页

目的:探讨肝卵圆细胞(HOCs)对肝纤维化(HF)大鼠肝组织TGF-β/Smad信号通路蛋白表达的影响。方法:采用CCl4和复方因素制备HF大鼠模型,取模型组大鼠分离纯化HOCs,从门静脉植入HF大鼠肝组织内,连续观察30d,同时以五灵胶囊为阳性对照。在植... 目的:探讨肝卵圆细胞(HOCs)对肝纤维化(HF)大鼠肝组织TGF-β/Smad信号通路蛋白表达的影响。方法:采用CCl4和复方因素制备HF大鼠模型,取模型组大鼠分离纯化HOCs,从门静脉植入HF大鼠肝组织内,连续观察30d,同时以五灵胶囊为阳性对照。在植入后8d、15d、23d、30d各组大鼠尾静脉采血,酶法测定血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT),实验结束取肝组织Masson染色观察肝组织形态学变化,Western blotting检测肝组织Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(ERK)、磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p-ERK)、转化生长因子β受体Ⅰ(TβRI)、转化生长因子β受体Ⅱ(TβRⅡ)、果蝇MAD类似基因2/3(Smad2/3)、果蝇MAD类似基因7(Smad7)蛋白的表达。结果:HOCs植入组与五灵胶囊组在植入后15d、23d、30dAST、ALT水平显著降低;肝组织胶原纤维增生程度明显减轻;肝组织表达ERK、p-ERK、TβRI、TβRⅡ蛋白作用显著降低,表达Smad7的作用显著增加。结论:植入HOCs可阻止大鼠HF的进展,其作用机制可能与其抑制肝组织内TGF-β/Smad信号通路p-ERK、TβRⅠ、TβRⅡ蛋白的表达有关。 展开更多

关键词 肝卵圆细胞 肝硬化 TGF-Β/SMAD信号通路

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TNF-α和IL-6在卵圆细胞介导的肝再生中的作用 被引量：3

9

作者 朱言亮 陈孝平 +1 位作者 张万广 裘法祖 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期124-126,共3页

目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)在卵圆细胞介导的肝再生中的作用。方法采用2-乙酰氨基芴(2-acetylaminofluroene,2-AAF)加2/3肝切除建立大鼠肝卵圆细胞介导的肝再生模型,以行2/3肝切除诱导的肝细胞介导的肝再生... 目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)在卵圆细胞介导的肝再生中的作用。方法采用2-乙酰氨基芴(2-acetylaminofluroene,2-AAF)加2/3肝切除建立大鼠肝卵圆细胞介导的肝再生模型,以行2/3肝切除诱导的肝细胞介导的肝再生模型作为对照,采用RT-PCR方法检测TNF-αI、L-6在模型组及对照组肝组织中的表达。结果同正常组相比,术后模型组及对照组TNF-αmRNA表达明显上调,模型组持续至术后第3天(P<0.05),对照组持续至术后第6天(P<0.05)。对照组IL-6 mRNA术后8 h显著升高(P<0.05),而模型组IL-6 mRNA术后无明显变化。结论TNF-α的高表达可能与肝卵圆细胞介导的肝再生过程密切相关。 展开更多

关键词 肝卵圆细胞 肿瘤坏死因子-Α 白细胞介素-6 肝再生

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大鼠肝脏卵圆细胞干细胞特性的研究 被引量：2

10

作者 李影 赵丽娟 +2 位作者 李艳香 施超 陆颖理 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期561-566,共6页

目的探讨大鼠肝脏卵圆细胞体外培养扩增及其干细胞特征。方法采用2-乙酰氨基芴/四氯化碳方法建模,胶原酶灌流和流式细胞术分选纯化卵圆细胞,进行培养和扩增。透射电子显微镜观察肝脏卵圆细胞的超微结构,免疫细胞化学法检测干细胞标志物O... 目的探讨大鼠肝脏卵圆细胞体外培养扩增及其干细胞特征。方法采用2-乙酰氨基芴/四氯化碳方法建模,胶原酶灌流和流式细胞术分选纯化卵圆细胞,进行培养和扩增。透射电子显微镜观察肝脏卵圆细胞的超微结构,免疫细胞化学法检测干细胞标志物OV-6、c-kit和Thy-1.1的表达;RT-PCR法检测卵圆细胞内c-kit、肝细胞标志物(HNF-4α、AFP)和胆管细胞标志物(CK-7、CK-19)的基因表达;Western blotting法检测OV-6和AFP蛋白的表达。结果大鼠肝脏组织可见明显的卵圆细胞增生,成簇分布,逐渐向肝实质内延伸。细胞体外培养可达40 d以上,细胞体积较小,多呈圆形和卵圆形。透射电子显微镜下可见细胞直径5～10μm,细胞核大,胞质少,核/质比例大,细胞器少,仅见少量线粒体和内质网。免疫细胞化学检测显示,细胞表面OV-6、c-kit和Thy-1.1染色阳性;RT-PCR检测显示,卵圆细胞内有c-kit、HNF-4α、AFP、CK-7和CK-19基因表达;Western blotting检测显示,OV-6蛋白持续表达,AFP蛋白表达逐渐增强。结论大鼠肝脏卵圆细胞体外可大量扩增并且保留其干细胞和双向分化潜能特性。 展开更多

关键词 卵圆细胞 增殖 体外 干细胞

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大鼠肝卵圆细胞体外分离培养和诱导分化为肝细胞的初步研究 被引量：2

11

作者 周高速 张振书 +5 位作者 刘思德 苏磊 王亚东 何敬东 张明军 李旭 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期467-469,共3页

目的探索体外诱导成年Wistar大鼠肝卵圆细胞(HOCs)分化为肝细胞的可行性。方法雄性Wistar大鼠36只,建立肝卵圆细胞增殖模型,采用两步法灌注和Percoll密度梯度离心法分离纯化HOCs,行体外培养并添加HGF、OSM和FGF4诱导其分化。结果每只模... 目的探索体外诱导成年Wistar大鼠肝卵圆细胞(HOCs)分化为肝细胞的可行性。方法雄性Wistar大鼠36只,建立肝卵圆细胞增殖模型,采用两步法灌注和Percoll密度梯度离心法分离纯化HOCs,行体外培养并添加HGF、OSM和FGF4诱导其分化。结果每只模型大鼠肝脏体外分离可获得约1.34×105/mlHOCs,细胞为圆形、椭圆形或多角形,大小为正常肝细胞1/6～1/3,核质比例大,2周后可呈克隆样增殖生长。所获HOCs胞浆和胞膜表达干细胞标志Thy-1及C-kit,其原始细胞标志AFP呈阳性表达;能稳定传代,在HGF、OSM和FGF4刺激下形态逐渐发生改变,细胞伸展且体积渐增大,贴壁能力减弱,诱导14天后分化细胞Alb表达明显阳性,且随着诱导时间延长阳性率逐渐升高;诱导分化的细胞胞浆G-6-P及PAS染色均呈阳性。结论HOCs在体外一定条件刺激下可诱导分化为肝细胞。 展开更多

关键词 肝卵圆细胞 细胞分离 细胞培养 细胞分化

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卵圆细胞在实验性肝癌发生中的作用 被引量：9

12

作者 薛玲 赵国强 +1 位作者 吴惠茜 董郡 《中山医科大学学报》 CSCD 1999年第1期36-38,共3页

目的：观察诱癌过程中ｃＨａｒａｓ、ｐ２１蛋白、ＡＦＰ及ＰＣＮＡ在肝细胞及肝卵圆细胞中的表达变化。方法：用化学致癌剂３′甲基４二甲基氨偶氮苯（３′ｍｅｔｈｙ１４ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏａｚｏｂｅｎｚｅ... 目的：观察诱癌过程中ｃＨａｒａｓ、ｐ２１蛋白、ＡＦＰ及ＰＣＮＡ在肝细胞及肝卵圆细胞中的表达变化。方法：用化学致癌剂３′甲基４二甲基氨偶氮苯（３′ｍｅｔｈｙ１４ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏａｚｏｂｅｎｚｅｎｅ，３′ＭｅＤＡＢ）诱发ＳＤ大鼠肝癌，通过免疫组化、原位杂交等方法检测各相关因子在肝细胞及肝卵圆细胞内的表达。结果：诱癌４周，大鼠肝内出现大量的卵圆细胞，呈ＰＣＮＡ强阳性。６～８周，部分增生的卵圆细胞ｐ２１ｒａｓ及ＡＦＰ阳性反应。原位杂交显示，诱癌的第４～８周，ｃＨａｒａｓ的阳性表达细胞呈逐渐增多趋势；１４周时，ｃＨａｒａｓｍＲＮＡ阳性表达细胞减少；至１７周，所有癌组织内显示ｃＨａｒａｓ基因表达阴性，而癌旁组织内则可见ｒａｓ基因的大量表达。结论：卵圆细胞是宿主受化学致癌剂作用后发生肝癌的始动细胞，与肝癌的发生有着密切的联系。 展开更多

关键词 肝肿瘤 癌基因 卵圆细胞 实验研究

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过氧化氢对大鼠肝卵圆细胞内游离钙含量的影响 被引量：2

13

作者 施广璞 杜洪震 +2 位作者 刘子文 刘旭 吴元德 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期281-284,共4页

目的研究小剂量(800nmol/L)过氧化氢H2O2诱导培养的大鼠肝卵圆细胞(WB细胞)胞质内游离钙犤Ca2+犦i含量的变化及其机制。方法以800nmol/LH2O2刺激WB细胞,采用Fluo-3/AM作为荧光指示剂,以激光共聚焦扫描显微镜测定不同条件下犤Ca2+犦i荧... 目的研究小剂量(800nmol/L)过氧化氢H2O2诱导培养的大鼠肝卵圆细胞(WB细胞)胞质内游离钙犤Ca2+犦i含量的变化及其机制。方法以800nmol/LH2O2刺激WB细胞,采用Fluo-3/AM作为荧光指示剂,以激光共聚焦扫描显微镜测定不同条件下犤Ca2+犦i荧光值的改变以反映犤Ca2+犦i含量的变化。结果(1)小剂量H2O2可引起犤Ca2+犦i升高,约300s后达到高峰,800s后恢复正常,过氧化氢酶(CAT)可抑制此变化;(2)细胞在无钙外环境下,相同浓度的H2O2不引起犤Ca2+犦i变化;(3)钙拮抗剂心痛定(nifedipine)不能抑制犤Ca2+犦i荧光值的升高,而蒽-9-羧酸(A9C)则可抑制此变化。结论小剂量H2O2刺激WB细胞可诱使犤Ca2+犦i含量升高,其机制可能是H2O2引起细胞膜上非选择性阳离子通道开放使胞外Ca2+进入胞内,造成胞浆内犤Ca2+犦i含量增高。 展开更多

关键词 过氧化氢 肝卵圆细胞 钙 激光共聚焦扫描显微镜 肝癌 发病机制

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卵圆细胞转化过程中生物学标志物的表达变化及其意义 被引量：2

14

作者 刘君 薛玲 +3 位作者 张萌 车丽洪 吴惠茜 胡瑞德 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期245-247,共3页

关键词 卵圆细胞 转化 肝脏肿瘤 蛋白芯片

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HBx基因诱导肝卵圆细胞恶性转化并促进其发生侵袭转移 被引量：3

15

作者 刘顺芳 董可帅 +1 位作者 张尊义 董汉华 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期410-413,共4页

目的研究HBx对肝卵圆细胞发生恶性转化并上皮-间质转化(EMT)的影响。方法以稳定表达HBx的转基因卵圆细胞株pEGFP-HBx-LE/6为实验组,pEGFP-LE/6卵圆细胞为对照组。使用Western blotting、Transwell细胞侵袭实验、划痕实验、CCK-8等检测pE... 目的研究HBx对肝卵圆细胞发生恶性转化并上皮-间质转化(EMT)的影响。方法以稳定表达HBx的转基因卵圆细胞株pEGFP-HBx-LE/6为实验组,pEGFP-LE/6卵圆细胞为对照组。使用Western blotting、Transwell细胞侵袭实验、划痕实验、CCK-8等检测pEGFP-HBx-LE/6在细胞周期、分化标志物以及增殖转移能力方面的变化。结果(1)实验组细胞体积增大、具有明显异形性,CK-19、CK-7表达明显下降,AFP、HNF-4α表达升高;(2)实验组细胞的增殖能力明显升高,克隆形成能力、侵袭能力、划痕恢复能力明显增强;(3)与对照组比较,实验组E-cadherin表达水平明显下降,而N-cadherin、α-SMA、Vimentin表达水平明显上升。结论 HBx基因可诱导肝卵圆细胞向恶性转化,并促进其转移。 展开更多

关键词 卵圆细胞 HBX 上皮-间质转化

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胚胎干细胞向肝实质细胞体外定向诱导分化过程中的肝卵圆细胞 被引量：1

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作者 银东智 蔡继业 +5 位作者 郑启昌 肇静娴 刘美莉 戴云 谢秋玲 洪岸 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第10期959-968,共10页

如果肝脏严重受损致使肝细胞大部分坏死,或由于某些原因(肝毒性物质、致癌物质的作用)抑制残存肝细胞增殖时,肝内前体/干细胞——肝卵圆细胞便被激活并分化生成肝细胞和胆管细胞等以参与肝修复.基于此理论,人们建立了啮齿类动物肝卵圆... 如果肝脏严重受损致使肝细胞大部分坏死,或由于某些原因(肝毒性物质、致癌物质的作用)抑制残存肝细胞增殖时,肝内前体/干细胞——肝卵圆细胞便被激活并分化生成肝细胞和胆管细胞等以参与肝修复.基于此理论,人们建立了啮齿类动物肝卵圆细胞诱导实验模型.但显然上述模型不适用于人类,所以有必要开发一种适用于人类的、高效的肝卵圆细胞的新诱导模型.选用小鼠胚胎干细胞,转成拟胚体分化3天后分组,诱导组添加肝细胞生长因子(HGF)、表皮生长因子(EGF)作定向诱导分化.其间用免疫细胞化学(ICC)检测肝卵圆细胞标志物A6等的表达,用流式细胞仪筛选肝卵圆细胞并行RT-PCR、透射电镜检测.所筛选的肝卵圆细胞进一步体外培养并进行ICC和RT-PCR,检测其分化生成成熟的肝细胞和胆管细胞的能力.研究证实胚胎干细胞体外定向诱导生成肝实质细胞的过程中,存在着有双向分化能力的肝卵圆细胞这个中间分化阶段.诱导组肝卵圆细胞分化率均显著地高于对照组,最高时可达6.11%左右.HGF和EGF能显著性诱导胚胎干细胞源性卵圆细胞的生成.流式细胞仪筛选Sca-1+/CD34+细胞占总细胞数的4.59%,其中A6阳性肝卵圆细胞占90.81%左右.使用流式细胞仪可获得高富集的A6+/Sca-1+/CD34+肝卵圆细胞.提供了一种可适用于人类的肝卵圆细胞的新诱导模型. 展开更多

关键词 A6 肝卵圆细胞 胚胎干细胞 细胞分化

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肝干细胞-卵圆细胞的研究进展 被引量：1

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作者 吕国悦 张平 +1 位作者 李红 王广义 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期1134-1137,共4页

卵圆细胞是肝脏干细胞的代表细胞,主要存在于幼肝及成人受损的肝脏中,是一种双潜能的肝脏干细胞,多种因素调节其分化,在此过程中动态表达一系列表面标志物。卵圆细胞的分化异常与肝癌的发生关系密切。在体外大量扩增卵圆细胞并使之分化... 卵圆细胞是肝脏干细胞的代表细胞,主要存在于幼肝及成人受损的肝脏中,是一种双潜能的肝脏干细胞,多种因素调节其分化,在此过程中动态表达一系列表面标志物。卵圆细胞的分化异常与肝癌的发生关系密切。在体外大量扩增卵圆细胞并使之分化为成熟的有功能的肝细胞,为终末期肝病、肝脏的组织工程研究及基因治疗开辟了新的途径。 展开更多

关键词 卵圆细胞 干细胞 肝肿瘤 培养 分化

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肝硬化组织中卵圆细胞的光镜、电镜与免疫电镜观察 被引量：3

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作者 肖家诚 王天翔 +2 位作者 Ruck P Adam A Kaiserling E 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 2002年第1期57-60,共4页

目的 :探讨人肝硬化肝组织是否存在卵圆细胞。方法 :对 30例人肝细胞肝癌手术标本的癌旁肝硬化组织行常规组织学观察 ,并用胆管上皮分化标记CK7和肝细胞分化标记白蛋白对以上组织作免疫组化染色 ,同时对其中 10例作了超微结构观察 ,5例... 目的 :探讨人肝硬化肝组织是否存在卵圆细胞。方法 :对 30例人肝细胞肝癌手术标本的癌旁肝硬化组织行常规组织学观察 ,并用胆管上皮分化标记CK7和肝细胞分化标记白蛋白对以上组织作免疫组化染色 ,同时对其中 10例作了超微结构观察 ,5例作免疫电镜标记和观察。另外对 5例正常肝脏和 5例肝炎后肝硬化组织同时作了光镜、免疫组化和电镜观察 ,对 2例肝炎后肝硬化作了免疫电镜标记和观察。结果 :癌旁肝硬化组织的 30例光镜和 10例电镜观察以及 5例肝炎肝硬化光、电镜观察 ,均可在再生的肝细胞结节边缘见到散在的小细胞和增生的小胆管样结构。这些小细胞和增生的小胆管内少数小细胞 ,为卵圆形 ,体积较小 ,核大 ,胞质少 ,胞质内含较多的游离核糖体 ,仅含少量粗面内质网和线粒体 ,胞质内可见张力微丝结构 ,这类细胞与邻近细胞间均有细胞间连接。免疫电镜示 ,卵圆细胞均表达CK7和白蛋白 ,但有些细胞内表达CK7多些 ,有些细胞则表达白蛋白多些。在正常肝组织内未见到类似细胞。结论 :与动物实验性肝癌模型肝组织一样 ,人类肝硬化肝组织中也存在同样细胞形态和免疫表型特点的卵圆细胞。 展开更多

关键词 肝硬化 卵圆细胞 白蛋白类 cytokeratin7 显微镜 免疫电镜 光镜 电镜

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大鼠肝卵圆细胞系WB-F344恶性转化模型的构建及NOD/SCID小鼠成瘤实验 被引量：1

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作者 舒曼 张明辉 +5 位作者 何潇潇 丁力 林原 曹清华 杨峥 薛玲 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1354-1357,1364,共5页

目的通过N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)处理大鼠肝卵圆细胞系WB-F344,使其发生恶性转化,为研究肝癌的发生、发展提供有用的体外模型。方法以MNNG作用于WB-F344细胞系,使之发生恶性转化,并从形态学、遗传学、软琼脂克隆形成、NOD/SCI... 目的通过N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)处理大鼠肝卵圆细胞系WB-F344,使其发生恶性转化,为研究肝癌的发生、发展提供有用的体外模型。方法以MNNG作用于WB-F344细胞系,使之发生恶性转化,并从形态学、遗传学、软琼脂克隆形成、NOD/SCID小鼠成瘤等方面加以验证。结果经MNNG诱导数代的WB-F344细胞出现恶性特征,表现为细胞形态改变,异倍体核型增多,肿瘤标志物表达增高,非锚定克隆能力增强,接种于NOD/SCID小鼠皮下可成瘤。结论肝卵圆细胞系WB-F344在MNNG的作用下可成为肝癌发生的有效体外模型。 展开更多

关键词 肝卵圆细胞 恶性转化 成瘤实验 NOD/SCID小鼠

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D-gal致大鼠急性肝损伤过程中肝卵圆细胞增殖及迁延 被引量：2

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作者 杨丽萍 张广州 +3 位作者 袁菊芳 赵爽 白杰英 曾林 《中国比较医学杂志》 CAS 2010年第10期6-9,86,共5页

目的用D-gal建立大鼠急性肝损伤模型,观察肝损伤后再生过程中肝卵圆细胞的增殖和迁延。方法建立大鼠急性肝损伤模型,于第1、3、7和14天分别取肝组织,分别行病理、免疫组织化学,观察卵圆细胞的分布迁移情况,并取第7天肝组织进行组织电镜... 目的用D-gal建立大鼠急性肝损伤模型,观察肝损伤后再生过程中肝卵圆细胞的增殖和迁延。方法建立大鼠急性肝损伤模型,于第1、3、7和14天分别取肝组织,分别行病理、免疫组织化学,观察卵圆细胞的分布迁移情况,并取第7天肝组织进行组织电镜观察汇管区新增生细胞超微结构。结果病理切片显示肝细胞变性坏死程度以第7天和第14天为主,出现新增生的细胞。免疫组化示随时间阳性细胞明显增多,分布于汇管区,并向小叶中心迁移,形成大量的胆小管,并有部分向坏死区迁移。透射电镜有新生内源性细胞,小于成熟的肝细胞,细胞器较少,有细胞紧密连接,以数个细胞排列成小胆管,与免疫组化一致。结论在大鼠急性肝损伤时HOC被活化、增殖,并向肝小叶中心迁移,全程参与了肝再生过程。 展开更多

关键词 急性肝损伤 肝卵圆细胞 增殖 迁延

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