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南极深海沉积物宏基因组DNA中低温脂肪酶基因的克隆、表达及性质分析 被引量:14
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作者 张金伟 曾润颖 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1207-1214,共8页
从南极普利兹湾深海900米深的沉积物中提取获得宏基因组DNA,并通过设计引物,从中克隆到全长为948bp的低温脂肪酶(lip3)开放阅读框完整序列,该基因编码一个由315个氨基酸残基组成、预计分子质量为34.557ku酶蛋白(Lip3);氨基酸序列上的GFG... 从南极普利兹湾深海900米深的沉积物中提取获得宏基因组DNA,并通过设计引物,从中克隆到全长为948bp的低温脂肪酶(lip3)开放阅读框完整序列,该基因编码一个由315个氨基酸残基组成、预计分子质量为34.557ku酶蛋白(Lip3);氨基酸序列上的GFGNS(GXGXS)和G-N-S-M-G(GXSXG)在许多脂肪酶中有很高的保守性,它们是水解机制所必需的序列,也是丝氨酸水解酶中最保守的序列.构建了lip3基因重组表达载体,并在大肠杆菌中获得表达,采用镍离子亲和层析柱对表达的酶蛋白Lip3进行纯化,得到约35ku蛋白条带,酶学性质的分析表明,该酶的最适作用温度为25℃,在0℃时表现为最高活力的22%,最适pH值为8.0,对热敏感,35℃热处理60min剩余酶活为10%,以硝基苯棕榈酸酯为底物,Lip3的酶促反应常数Km值随着反应温度的升高而升高,是典型的低温酶. 展开更多
关键词 南极深海沉积物 宏基因组 低温脂肪酶 克隆与表达
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极地沉积物中甲基汞的测定 被引量:2
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作者 刘海玲 陈皓 +1 位作者 肖乾芬 李明利 《实验室研究与探索》 CAS 北大核心 2017年第11期4-6,共3页
建立了一种能对南极和北极沉积物样品中痕量甲基汞准确测定的技术和方法。该方法采用高浓度硝酸溶液提取,二氯甲烷萃取,水相反萃取,乙基化后用气相色谱-冷原子荧光光谱法(GC-CVAFS)进行测定,方法回收率在75%~110%,相对标准偏差≤11.5%,... 建立了一种能对南极和北极沉积物样品中痕量甲基汞准确测定的技术和方法。该方法采用高浓度硝酸溶液提取,二氯甲烷萃取,水相反萃取,乙基化后用气相色谱-冷原子荧光光谱法(GC-CVAFS)进行测定,方法回收率在75%~110%,相对标准偏差≤11.5%,检出限为250 ng/g,重现性好,选择性和灵敏度高,结果稳定,操作容易控制。 展开更多
关键词 南极沉积物 北极沉积物 甲基汞 萃取 气相色谱 冷原子荧光光谱
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抗铜绿假单胞菌南极微生物的筛选、鉴定及其抑菌谱研究 被引量:4
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作者 宋红丽 杨佳夷 +4 位作者 郑立 黄杨竹 石悦炜 徐麓凯 金黎明 《中国酿造》 CAS 北大核心 2022年第11期108-112,共5页
该研究采用稀释涂布平板法从南极团结湖沉积物中分离、纯化南极微生物,采用双层平板法和琼脂扩散法从中筛选铜绿假单胞菌的拮抗菌,通过形态观察、生理生化试验及16S r DNA序列分析对筛选菌株进行菌种鉴定,并测定其抑菌谱。结果表明,共... 该研究采用稀释涂布平板法从南极团结湖沉积物中分离、纯化南极微生物,采用双层平板法和琼脂扩散法从中筛选铜绿假单胞菌的拮抗菌,通过形态观察、生理生化试验及16S r DNA序列分析对筛选菌株进行菌种鉴定,并测定其抑菌谱。结果表明,共分离纯化出64株南极微生物,8株对铜绿假单胞菌具有抑制作用,其中菌株NO.TJ31的抑制效果最好,抑菌圈直径达(22.3±0.7)mm,经鉴定,其为弗氏甲基杆菌(Methylobacterium frigidaeris),菌株NO.TJ31对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、副溶血弧菌、鼠伤寒沙门氏菌、鲍曼不动杆菌、屎肠球菌、肺炎克雷伯氏菌都具有一定的抑制作用,具有较广的抑菌谱。 展开更多
关键词 南极团结湖沉积物 铜绿假单胞菌 拮抗菌株 分离 筛选 鉴定 抑菌谱
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