目的:成功分离与鉴定人原代卵巢癌干细胞(OCSC),探究单羧酸转运蛋白2(MCT2)在OCSC中的表达及其对OCSC干性及侵袭性的影响。方法:获取原代卵巢癌细胞,筛选培养建立OCSC模型。将筛选后的OCSC设为OCSC组,将贴壁培养的原代细胞作为对照1组;...目的:成功分离与鉴定人原代卵巢癌干细胞(OCSC),探究单羧酸转运蛋白2(MCT2)在OCSC中的表达及其对OCSC干性及侵袭性的影响。方法:获取原代卵巢癌细胞,筛选培养建立OCSC模型。将筛选后的OCSC设为OCSC组,将贴壁培养的原代细胞作为对照1组;用两种MCT2抑制常数Ki特异性的抑制剂[α-氰基-4-羟基肉桂酸(CHC)、ARC155858]进行干预,设置为CHC抑制剂组和ARC155858抑制剂组,仅添加溶剂二甲基亚砜(DMSO)分别设为CHC对照2组和ARC155858对照2组。采用流式细胞术、逆转录实时荧光定量聚合酶链式反应(q RT-PCR)鉴定OCSC标志物;qRT-PCR法、免疫荧光染色法检测MCT2的表达水平和细胞定位;干细胞成球性实验、基质胶迁移小室实验验证MCT2抑制剂对OCSC干性、侵袭性的影响。结果:成功建立23例患者来源的OCSC模型。qRT-PCR结果显示,OCSC组两种样本中MCT2的表达水平(5.78±3.55和122.89±19.90)显著高于对照1组(1.01±0.10和1.55±1.45),差异有统计学意义(P<0.05)。荧光定量分析确认OCSC组中MCT2的表达高于对照1组(6.79±0.67 AU vs.2.49±1.78 AU,P=0.030)。成球实验显示,CHC抑制剂组OCSC的干细胞球数量显著低于CHC对照2组(6.00±2.17个/1000细胞vs.14.62±3.07个/1000细胞,P<0.01),ARC155858抑制剂组OCSC的干细胞球数量显著低于ARC155858对照2组(11.00±4.42个/1000细胞vs.23.90±4.72个/1000细胞,P<0.01)。侵袭性实验显示,ARC155858抑制剂组与ARC155858对照2组侵袭细胞数比较,差异有统计学意义(10.20±5.98个vs.67.20±28.96个,P=0.010)。结论:MCT2在OCSC中高表达,抑制MCT2显著降低OCSC的干性及侵袭性,为卵巢癌的靶向治疗提供了潜在的研究方向。展开更多
文摘目的:成功分离与鉴定人原代卵巢癌干细胞(OCSC),探究单羧酸转运蛋白2(MCT2)在OCSC中的表达及其对OCSC干性及侵袭性的影响。方法:获取原代卵巢癌细胞,筛选培养建立OCSC模型。将筛选后的OCSC设为OCSC组,将贴壁培养的原代细胞作为对照1组;用两种MCT2抑制常数Ki特异性的抑制剂[α-氰基-4-羟基肉桂酸(CHC)、ARC155858]进行干预,设置为CHC抑制剂组和ARC155858抑制剂组,仅添加溶剂二甲基亚砜(DMSO)分别设为CHC对照2组和ARC155858对照2组。采用流式细胞术、逆转录实时荧光定量聚合酶链式反应(q RT-PCR)鉴定OCSC标志物;qRT-PCR法、免疫荧光染色法检测MCT2的表达水平和细胞定位;干细胞成球性实验、基质胶迁移小室实验验证MCT2抑制剂对OCSC干性、侵袭性的影响。结果:成功建立23例患者来源的OCSC模型。qRT-PCR结果显示,OCSC组两种样本中MCT2的表达水平(5.78±3.55和122.89±19.90)显著高于对照1组(1.01±0.10和1.55±1.45),差异有统计学意义(P<0.05)。荧光定量分析确认OCSC组中MCT2的表达高于对照1组(6.79±0.67 AU vs.2.49±1.78 AU,P=0.030)。成球实验显示,CHC抑制剂组OCSC的干细胞球数量显著低于CHC对照2组(6.00±2.17个/1000细胞vs.14.62±3.07个/1000细胞,P<0.01),ARC155858抑制剂组OCSC的干细胞球数量显著低于ARC155858对照2组(11.00±4.42个/1000细胞vs.23.90±4.72个/1000细胞,P<0.01)。侵袭性实验显示,ARC155858抑制剂组与ARC155858对照2组侵袭细胞数比较,差异有统计学意义(10.20±5.98个vs.67.20±28.96个,P=0.010)。结论:MCT2在OCSC中高表达,抑制MCT2显著降低OCSC的干性及侵袭性,为卵巢癌的靶向治疗提供了潜在的研究方向。
