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猪瘟病毒E^(rns)结构蛋白鼠源单个B细胞抗体的制备和鉴定
1
作者
黄禹丰
吴睿智
+9 位作者
徐璐
邹兴启
车斯琪
李芳韬
夏应菊
赵俊杰
赵启祖
刘业兵
贾伟新
朱元源
《中国兽医杂志》
北大核心
2025年第9期18-27,共10页
研制猪瘟病毒(CSFV)E^(rns)结构蛋白单克隆抗体(简称“单抗”),对研究E^(rns)抗原结构和建立CSFV诊断方法具有重要意义。本试验利用单个B细胞抗体技术制备系列单抗,用CSFV E^(rns)蛋白免疫BALB/c小鼠,通过流式分选技术分选特异性结合E^(...
研制猪瘟病毒(CSFV)E^(rns)结构蛋白单克隆抗体(简称“单抗”),对研究E^(rns)抗原结构和建立CSFV诊断方法具有重要意义。本试验利用单个B细胞抗体技术制备系列单抗,用CSFV E^(rns)蛋白免疫BALB/c小鼠,通过流式分选技术分选特异性结合E^(rns)蛋白的单个B细胞,利用巢式聚合酶链式反应(PCR)扩增IgG抗体重链和轻链可变区基因,分别构建IgG抗体重链和轻链完整基因重组质粒,然后将重链和轻链重组质粒共转染至人胚胎肾细胞(HEK-293T)中进行单抗表达、纯化,并对单抗进行蛋白免疫印记(WB)、间接酶联免疫吸附试验(ELISA)和间接免疫荧光(IFA)鉴定。流式分选结果显示,本试验分选得到48个特异性结合E^(rns)蛋白的单个B细胞。PCR扩增结果显示,从48个B细胞中扩增得到16对配对的IgG抗体重链和轻链可变区基因。WB、间接ELISA和IFA结果显示,本试验成功制备得到13株能与CSFV发生反应的E^(rns)单抗,其中1株(E0M11)仅与CSFV疫苗毒株(HCLV株、Thiverval株)反应,不与CSFV流行毒株(IVDC-HeB-01、IVDC-HuB-06)和牛流行性腹泻病毒(BVDV)反应。结果表明,本试验建立了快速筛选CSFV单抗的技术平台,制备的单抗有望用于CSFV鉴别诊断方法的建立,具有一定的临床应用价值。
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关键词
猪瘟病毒(CSFV)
单克隆
抗体
单个b细胞抗体技术
E^(rns)蛋白
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职称材料
单克隆抗体制备技术的最新进展
被引量:
5
2
作者
林金香
王心睿
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第20期2544-2548,共5页
随着各类新兴技术和学科的发展,单克隆抗体制备技术也得到不断更新和完善,但如何利用并有效制备抗体,用于检测、预防、治疗等迫在眉睫。本文综述了单克隆抗体制备技术的最新研究进展,包括抗体库技术、转基因和新型动物模型技术、单个B...
随着各类新兴技术和学科的发展,单克隆抗体制备技术也得到不断更新和完善,但如何利用并有效制备抗体,用于检测、预防、治疗等迫在眉睫。本文综述了单克隆抗体制备技术的最新研究进展,包括抗体库技术、转基因和新型动物模型技术、单个B细胞抗体技术、多学科和计算机辅助抗体制备技术,并简要讨论其应用前景和存在的问题。
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关键词
单克隆
抗体
抗体
库
转基因动物
单个b细胞抗体技术
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职称材料
题名
猪瘟病毒E^(rns)结构蛋白鼠源单个B细胞抗体的制备和鉴定
1
作者
黄禹丰
吴睿智
徐璐
邹兴启
车斯琪
李芳韬
夏应菊
赵俊杰
赵启祖
刘业兵
贾伟新
朱元源
机构
华南农业大学兽医学院
中国兽医药品监察所国家/WOAH猪瘟参考实验室
出处
《中国兽医杂志》
北大核心
2025年第9期18-27,共10页
基金
国家重点研发计划项目(2023YFD1800504)。
文摘
研制猪瘟病毒(CSFV)E^(rns)结构蛋白单克隆抗体(简称“单抗”),对研究E^(rns)抗原结构和建立CSFV诊断方法具有重要意义。本试验利用单个B细胞抗体技术制备系列单抗,用CSFV E^(rns)蛋白免疫BALB/c小鼠,通过流式分选技术分选特异性结合E^(rns)蛋白的单个B细胞,利用巢式聚合酶链式反应(PCR)扩增IgG抗体重链和轻链可变区基因,分别构建IgG抗体重链和轻链完整基因重组质粒,然后将重链和轻链重组质粒共转染至人胚胎肾细胞(HEK-293T)中进行单抗表达、纯化,并对单抗进行蛋白免疫印记(WB)、间接酶联免疫吸附试验(ELISA)和间接免疫荧光(IFA)鉴定。流式分选结果显示,本试验分选得到48个特异性结合E^(rns)蛋白的单个B细胞。PCR扩增结果显示,从48个B细胞中扩增得到16对配对的IgG抗体重链和轻链可变区基因。WB、间接ELISA和IFA结果显示,本试验成功制备得到13株能与CSFV发生反应的E^(rns)单抗,其中1株(E0M11)仅与CSFV疫苗毒株(HCLV株、Thiverval株)反应,不与CSFV流行毒株(IVDC-HeB-01、IVDC-HuB-06)和牛流行性腹泻病毒(BVDV)反应。结果表明,本试验建立了快速筛选CSFV单抗的技术平台,制备的单抗有望用于CSFV鉴别诊断方法的建立,具有一定的临床应用价值。
关键词
猪瘟病毒(CSFV)
单克隆
抗体
单个b细胞抗体技术
E^(rns)蛋白
Keywords
classical swine fever virus(CSFV)
monoclonal anti
b
ody
single
b
cell anti
b
ody technology
E^(rns)protein
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
单克隆抗体制备技术的最新进展
被引量:
5
2
作者
林金香
王心睿
机构
福建省儿童医院
福建医科大学附属福建省妇幼保健院医学研究中心
国家卫健委非人灵长类生育调节技术评价重点实验室
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第20期2544-2548,共5页
基金
福建省妇幼保健院科研基金项目(YCXB18-05,YCXM19-03)。
文摘
随着各类新兴技术和学科的发展,单克隆抗体制备技术也得到不断更新和完善,但如何利用并有效制备抗体,用于检测、预防、治疗等迫在眉睫。本文综述了单克隆抗体制备技术的最新研究进展,包括抗体库技术、转基因和新型动物模型技术、单个B细胞抗体技术、多学科和计算机辅助抗体制备技术,并简要讨论其应用前景和存在的问题。
关键词
单克隆
抗体
抗体
库
转基因动物
单个b细胞抗体技术
Keywords
Monoclonal anti
b
ody
Anti
b
ody li
b
rary
Transgenic animal
Single
b
cell anti
b
ody technology
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪瘟病毒E^(rns)结构蛋白鼠源单个B细胞抗体的制备和鉴定
黄禹丰
吴睿智
徐璐
邹兴启
车斯琪
李芳韬
夏应菊
赵俊杰
赵启祖
刘业兵
贾伟新
朱元源
《中国兽医杂志》
北大核心
2025
0
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职称材料
2
单克隆抗体制备技术的最新进展
林金香
王心睿
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021
5
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已选择
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