重组人半乳糖苷结合凝集素-9质粒的构建及表达

1

作者 郭凯文 邱文洪 +3 位作者 艾永循 钟伟 易路阳 宰文欣 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期177-180,共4页

目的构建人半乳糖苷结合凝集素-9(Galectin-9)的真核表达质粒pGalectin-9,并检测其表达。方法通过DNA重组技术和PCR方法从人外周血单个核细胞克隆Galectin-9基因,插入真核表达质粒pcDNA3.1(+)中,通过PCR、酶切及测序鉴定重组载体的正确... 目的构建人半乳糖苷结合凝集素-9(Galectin-9)的真核表达质粒pGalectin-9,并检测其表达。方法通过DNA重组技术和PCR方法从人外周血单个核细胞克隆Galectin-9基因,插入真核表达质粒pcDNA3.1(+)中,通过PCR、酶切及测序鉴定重组载体的正确性;采用脂质体转染技术将重组质粒pGalectin-9瞬时转染中国仓鼠卵巢(Chinesehamster ovary,CHO)细胞,通过Western blot、RT-PCR和间接免疫荧光方法检测Galectin-9的表达。结果 DNA测序和酶切鉴定证明Galectin-9基因正确克隆至pcDNA3.1(+)的多克隆位点;以重组质粒pGalectin-9瞬时转染CHO细胞,通过Western blot、RT-PCR和间接免疫荧光方法,在分子和细胞水平证实Galectin-9的表达。结论成功构建pGa-lectin-9的重组质粒,并证实其在CHO细胞中可以成功表达。 展开更多

关键词 半乳糖苷结合凝集素-9 构建 表达 重组质粒

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半乳糖凝集素-9(Gal-9)介导的免疫调节作用在肝脏疾病中的研究进展 被引量：1

2

作者 凌珺 朱冰 +3 位作者 陈威巍 王卓然 余丽梅 游绍莉 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2024年第1期193-198,共6页

半乳糖凝集素-9(Gal-9)是能够特异性识别、结合半乳糖苷的半乳糖凝集素家族成员之一。近年研究发现,Gal-9在肝脏中高水平表达,有助于维持肝内免疫稳态并在多种肝脏疾病中发挥生物学功能。本文综述了Gal-9的免疫调节功能及其在不同肝脏... 半乳糖凝集素-9(Gal-9)是能够特异性识别、结合半乳糖苷的半乳糖凝集素家族成员之一。近年研究发现,Gal-9在肝脏中高水平表达,有助于维持肝内免疫稳态并在多种肝脏疾病中发挥生物学功能。本文综述了Gal-9的免疫调节功能及其在不同肝脏疾病中的作用。Gal-9在不同肝脏疾病中通过多种途径发挥重要的生物学功能,基于对Gal-9具体免疫调节机制和功能的研究,有助于发现Gal-9在肝脏疾病中的治疗作用。 展开更多

关键词 半乳糖凝集素-9 免疫调节 肝脏疾病

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半乳糖凝集素-9在食管鳞状细胞癌中的表达及其与临床病理特征的关系 被引量：8

3

作者 许鹏 方玉松 +3 位作者 朱良明 孙志钢 王丹云 王宗明 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期824-829,共6页

目的:探讨半乳糖凝集素-9(galectin-9)在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell cancer,ESCC)组织及癌旁组织中的表达及对ESCC细胞迁移和侵袭能力的影响。方法 :收集山东大学附属济南市中心医院胸外科于2012年1月至2013年1月期间手... 目的:探讨半乳糖凝集素-9(galectin-9)在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell cancer,ESCC)组织及癌旁组织中的表达及对ESCC细胞迁移和侵袭能力的影响。方法 :收集山东大学附属济南市中心医院胸外科于2012年1月至2013年1月期间手术切除的ESCC患者组织标本89例及距癌组织边缘5 cm以上的癌旁组织标本20例,采用免疫组化法检测ESCC及癌旁组织中galectin-9蛋白的表达,并分析其与患者性别、年龄、浸润深度、肿瘤大小、分化程度、病理分期(p TNM)及淋巴结转移等临床病理特征之间的关系。采用脂质体介导法将pc DNA3.1-galectin-9转染食管癌EC9706细胞系,运用细胞划痕愈合实验和Transwell侵袭实验,检测galectin-9表达上调对食管癌EC9706细胞迁移、侵袭能力的影响。结果:ESCC组织中galectin-9蛋白的阳性表达率明显低于癌旁组织[25.8%(23/89)vs 50%(10/20),P<0.05],galectin-9蛋白的表达与ESCC患者肿瘤分化程度及淋巴结转移相关(均P<0.05),而与患者性别、年龄、肿瘤大小、浸润深度及病理分期无关(均P>0.05)。在食管癌EC9706细胞中过表达galectin-9后,与阴性对照组相比,肿瘤细胞的侵袭[(45.0±8.0)vs(160.0±12.0),P<0.01]和迁移能力[(20.6±2.1)vs(87.6±4.9),P<0.05]明显下降。结论:galectin-9的表达缺失参与了食管癌的发生、发展,galectin-9可以抑制ESCC细胞的侵袭及迁移。 展开更多

关键词 食管鳞状细胞癌 半乳糖凝集素-9 迁移 侵袭

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半乳糖苷凝集素-7免疫增强功能的体外研究 被引量：2

4

作者 高英 张维娜 +4 位作者 何文涛 汪理 周鸿敏 林星光 陈忠华 《医药导报》 CAS 2010年第10期1261-1265,共5页

目的了解半乳糖苷凝集素-7(galectin-7)对不同T细胞亚群增殖的影响,并进一步探讨其免疫治疗方面的应用前景。方法利用不同浓度的重组Galectin-7蛋白在有或无抗CD3和CD28抗体存在时与纯化的T细胞共同培养5 d,流式细胞仪检测T细胞及各亚... 目的了解半乳糖苷凝集素-7(galectin-7)对不同T细胞亚群增殖的影响,并进一步探讨其免疫治疗方面的应用前景。方法利用不同浓度的重组Galectin-7蛋白在有或无抗CD3和CD28抗体存在时与纯化的T细胞共同培养5 d,流式细胞仪检测T细胞及各亚群的增殖情况。结果 galectin-7能明显诱导T细胞的增殖,在与抗CD3和抗CD28抗体联用时能协同促进T细胞增殖反应,增殖的细胞主要为CD8+T细胞。结论 galectin-7能诱导并促进T细胞的增殖,在体外发挥免疫增强作用,深入探索其作用机制,有望研发新的靶点药物用于肿瘤的临床免疫治疗。 展开更多

关键词 半乳糖苷凝集素-7 增殖 T细胞亚群

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晚期缺血预适应(IPC)联合半乳糖凝集素-9通过上调调节性T细胞减轻小鼠肾脏缺血再灌注损伤 被引量：1

5

作者 张冰莹 方艺 +4 位作者 焦晓燕 刘春凤 储以微 邹建洲 丁小强 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期711-719,共9页

目的研究晚期缺血预适应（ischemic preconditioning,IPC）联合半乳糖凝集素-9（galectin-9,Gal-9）对小鼠肾脏缺血再灌注（ischemia reperfusion,IR）损伤的预防作用及可能的机制。方法 75只雄性C57BL/6N小鼠随机分为5组。（1）IR组：d... 目的研究晚期缺血预适应（ischemic preconditioning,IPC）联合半乳糖凝集素-9（galectin-9,Gal-9）对小鼠肾脏缺血再灌注（ischemia reperfusion,IR）损伤的预防作用及可能的机制。方法 75只雄性C57BL/6N小鼠随机分为5组。（1）IR组：d1仅分离两侧肾蒂,不进行预缺血,d5夹闭两侧肾蒂造成缺血35min。（2）IPC-IR组：d1夹闭两侧肾蒂造成18min预缺血,d2~d5每天PBS皮下注射,d5给药后立即夹闭两侧肾蒂造成缺血35min。（3）IPC-Gal9-IR组：d1夹闭两侧肾蒂造成18min预缺血,d2~d5每天给予Gal-9 5μg皮下注射,并于d5给药后夹闭两侧肾蒂造成缺血35min。（4）IPC-Gal9-PC61-IR组：d1夹闭两侧肾蒂造成18min预缺血,d2~d5每天给予Gal-9 5μg皮下注射,d3和d5分别给予调节性T细胞（regulatory T cells,Treg）特异性拮抗剂PC61腹腔注射200μg,并在d5给药后夹闭两侧肾蒂造成缺血35min。（5）sham-sham组：不进行预适应,不给药,不给予IR损伤。以上5组于IR或第2次sham术后24h、72h和7天取样评价肾功能,并采用流式细胞术比较外周血、脾脏和肾脏中Treg的表达量和肾脏固有免疫系统反应程度及炎性因子的分泌。结果缺血再灌注24h及72h小鼠血肌酐IPC-IR组显著低于IR组（P〈0.01）,同时IPC-Gal9-IR组显著低于IPC-IR组（P〈0.05）,而给予Treg特异性拮抗剂的IPC-Gal9-PC61-IR组与IR组差异无统计学意义（P〉0.05）。缺血再灌注24h肾小管间质损伤指数IPC-IR组显著低于IR组（P〈0.05）,同时IPC-Gal9-IR组显著低于IPC-IR组（P〈0.05）。IPC-Gal9-IR组肾脏局部中心粒细胞浸润减轻（P〈0.05）且CD4＋T细胞分泌的IFN-γ减少（P〈0.05）。IPCGal9-IR组外周血、脾脏和肾脏Treg占CD4＋T细胞的比例较IR组显著升高（P〈0.05）。结论晚期IPC联合Gal-9干预对小鼠缺血再灌注肾损伤的保护作用优于单纯缺血预适应,可能与系统上调Treg表达有关。 展开更多

关键词 缺血预适应(IPC) 急性肾损伤(AKI) 调节性T细胞(Treg) 半乳糖凝集素-9(Gal-9)

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慢性心力衰竭患者血清半乳糖凝集素-3和心型脂肪酸结合蛋白表达水平及其诊断和预后价值 被引量：3

6

作者 袁雪 《中国医学前沿杂志（电子版）》 2017年第8期82-85,共4页

目的探讨血清半乳糖凝集素-3、心型脂肪酸结合蛋白(heart fatty acid binding protein,h-FABP)表达水平及其在慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)患者诊断和预后中的价值。方法将2015年10月至2016年10月本院心内科收治的96例CHF... 目的探讨血清半乳糖凝集素-3、心型脂肪酸结合蛋白(heart fatty acid binding protein,h-FABP)表达水平及其在慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)患者诊断和预后中的价值。方法将2015年10月至2016年10月本院心内科收治的96例CHF患者纳入CHF组。另将同期本院40例健康体检者纳入对照组,采用酶联免疫吸附测定检测两组研究对象血清半乳糖凝集素-3和h-FABP水平,应用彩色多普勒超声仪测定两组研究对象左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)、二尖瓣舒张早期充盈峰(E峰)、左室重量指数(left ventricular mass index,LVMI)、左室舒张末期内径(left ventricular end-diastolic diamete,LVEDd)。采用Pearson单因素分析探讨血清galectin-3和H-FABP水平与心功能的关系。应用接受者操作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC曲线)分析血清半乳糖凝集素-3和h-FABP在心力衰竭中的应用价值。结果 CHF组患者血清半乳糖凝集素-3和h-FABP表达水平、LVEF、E峰、LVMI及LVEDd均高于对照组(P<0.05),且随着心功能分级的增加,血清半乳糖凝集素-3和h-FABP水平均显著升高(P<0.05)。死亡组患者血清半乳糖凝集素-3和h-FABP表达水平均显著高于存活组(P<0.01)。Pearson单因素分析显示,血清半乳糖凝集素-3和h-FABP表达水平与LVEF均呈负相关(P<0.01),与E峰、LVMI、LVEDd均无明显相关性(P>0.05)。ROC曲线分析显示,血清半乳糖凝集素-3联合h-FABP检测对CHF死亡率诊断的灵敏度和特异度均显著高于单一指标(P<0.05)。结论血清半乳糖凝集素-3和h-FABP表达水平升高与CHF病情进展密切相关,可作为评价CHF预后的指标。 展开更多

关键词 半乳糖凝集素-3 心型脂肪酸结合蛋白 慢性心力衰竭 诊断 预后

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半乳糖凝集素-3和基质金属蛋白酶-9与支架内再狭窄的关系 被引量：7

7

作者 牛晓婷 徐阳 +8 位作者 郑阳 刘晓唤 巩红 范雅洁 张春艳 张岩 胡艳超 李永勤 王聪霞 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期483-487,503,共6页

目的探讨半乳糖凝集素-3(Gal-3)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)与支架内再狭窄(ISR)的关系。方法连续招募434例植入药物涂层支架的冠心病患者,根据随访期复查冠脉造影结果,分为再狭窄组(ISR,41例)和非再狭窄组(NO-ISR,393例)。分析ISR的独... 目的探讨半乳糖凝集素-3(Gal-3)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)与支架内再狭窄(ISR)的关系。方法连续招募434例植入药物涂层支架的冠心病患者,根据随访期复查冠脉造影结果,分为再狭窄组(ISR,41例)和非再狭窄组(NO-ISR,393例)。分析ISR的独立危险因素,按照除Gal-3和MMP-9外的其他危险因素对两组患者进行配对后,比较两组的血清Gal-3和MMP-9水平,并分析其与ISR严重程度的关系。分别根据Gal-3和MMP-9水平不同进行分组,比较各组间主要不良心血管事件(MACEs)的发生率。结果消除其他因素影响后进行统计学分析,ISR组的血清Gal-3和MMP-9水平均显著高于NO-ISR组(P<0.001)。血清Gal-3及MMP-9水平在Ⅲ型和Ⅳ型再狭窄患者中均显著高于Ⅰ型再狭窄患者(P<0.05)。Gal-3及MMP-9较高浓度组MACEs发生率高于低浓度组(P<0.01);ISR组MACEs发生率高于NO-ISR组(P<0.05)。结论 MMP-9和Gal-3与ISR发生及其严重程度密切相关,是ISR的独立预测因子。并随着二者的血清浓度的升高,支架术后长期随访的MACEs发生率升高。 展开更多

关键词 冠状动脉粥样硬化性心脏病 半乳糖凝集素-3(Gal-3) 基质金属蛋白酶-9(MMP-9) 支架内再狭窄 主要不良心血管事件(MACEs)

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荧光光谱法研究杨树菇半乳糖凝集素与半乳糖和β-半乳糖苷的相互作用 被引量：1

8

作者 郭骊骊 王昆 +3 位作者 王迷 陈希 梁一 孙慧 《分析科学学报》 CAS CSCD 2006年第6期621-626,共6页

半乳糖凝集素是一类具有重要生理功能的蛋白质,杨树菇(Agrocybe aegerita)半乳糖凝集素(AAL)是被报道的第四种真菌半乳糖凝集素。本文用荧光光谱法研究了半乳糖、乳糖和X-gal两种含β-半乳糖残基的分子与AAL的相互作用。研究结果表明:... 半乳糖凝集素是一类具有重要生理功能的蛋白质,杨树菇(Agrocybe aegerita)半乳糖凝集素(AAL)是被报道的第四种真菌半乳糖凝集素。本文用荧光光谱法研究了半乳糖、乳糖和X-gal两种含β-半乳糖残基的分子与AAL的相互作用。研究结果表明:半乳糖对AAL的荧光光谱无明显影响;乳糖的结合使AAL折叠为更紧密的结构而使其光谱蓝移;X-gal与AAL的结合强烈猝灭AAL的荧光,且X-gal的紫外吸收光谱与AAL的荧光发射光谱有一定程度的重叠,由此得出了其反应的结合常数(Kb=7.33×103L.mol-1),结合位点数(n=8.3)及作用距离(r=2.79 nm)。用同步荧光光谱法比较了乳糖和X-gal对AAL构象的影响,结果表明,乳糖和X-gal对AAL的结合方式有可能不同。此结果为深入研究AAL的生理功能提供了线索。 展开更多

关键词 杨树菇半乳糖凝集素 β-半乳糖苷 荧光光谱

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半乳糖苷凝集素-3与肥胖及2型糖尿病 被引量：1

9

作者 杨永青 赵梅 段江燕 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1203-1208,共6页

肥胖及2型糖尿病是代谢紊乱相关的慢性低度系统炎症状态。半乳糖苷凝集素-3(galectin-3)是一种β-半乳糖苷结合蛋白,在炎症、信号转导、细胞增殖与分化等过程中发挥重要作用。新近的研究表明,半乳糖苷凝集素-3在患肥胖和2型糖尿病的人... 肥胖及2型糖尿病是代谢紊乱相关的慢性低度系统炎症状态。半乳糖苷凝集素-3(galectin-3)是一种β-半乳糖苷结合蛋白,在炎症、信号转导、细胞增殖与分化等过程中发挥重要作用。新近的研究表明,半乳糖苷凝集素-3在患肥胖和2型糖尿病的人及鼠类体内高表达,对鼠类体脂的沉积、脂肪细胞分化、血糖浓度、胰岛素敏感性、葡萄糖耐受性和系统炎症等具有重要影响。本文综述了半乳糖苷凝集素-3的结构、分布及其对肥胖和2型糖尿病的调控作用与分子机制,以期为研发针对半乳糖苷凝集素-3靶点的新药提供重要思路和参考。 展开更多

关键词 半乳糖苷凝集素-3 肥胖 2型糖尿病 胰岛素抵抗 系统炎症

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原发性高血压患者血清自噬相关蛋白9a、半乳糖凝集素-3与左心室肥厚的相关性 被引量：10

10

作者 李洋 杨思进 +4 位作者 徐厚平 罗钢 庞显伦 黄素琼 周仲芳 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第16期2071-2076,共6页

目的 探讨原发性高血压(EH)患者血清自噬相关蛋白9a(ATG9a)、半乳糖凝集素-3(Gal-3)与左心室肥厚(LVH)的关系。方法 前瞻性选取2020年7月至2022年12月在西南医科大学附属中医医院体检的原发性高血压患者84例(NLVH组)和原发性高血压合并... 目的 探讨原发性高血压(EH)患者血清自噬相关蛋白9a(ATG9a)、半乳糖凝集素-3(Gal-3)与左心室肥厚(LVH)的关系。方法 前瞻性选取2020年7月至2022年12月在西南医科大学附属中医医院体检的原发性高血压患者84例(NLVH组)和原发性高血压合并左心室肥厚(LVH组)患者69例,同时纳入115例健康体检人群为对照组。分析原发性高血压患者血清ATG9a、Gal-3水平与左心室肥厚的相关性。结果 与对照组比较,NLVH组与LVH组合并冠心病比例、合并血脂异常比例、BMI、收缩压、舒张压、同型半胱氨酸、丙氨酸氨基转移酶、甘油三酯、总胆固醇、空腹血糖、左心室舒张末期后壁厚度(LVPWTD)、舒张末期室间隔厚度(IVSTD)、左心室质量指数(LVMI)、ATG9a、Cal-3显著增高,HDL-C显著降低(P<0.05);与NLVH组比较,LVH组高血压病程、收缩压、舒张压、LVPWTD、左心室舒张末期内径(LVEDD)、IVSTD、LVMI、ATG9a、Cal-3显著增高,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线显示,血清ATG9a、Cal-3水平的曲线下面积分别为0.829(95%CI:0.765~0.893)、0.819(95%CI:0.753~0.884),差异有统计学意义(P<0.001)。结论 原发性高血压患者血清ATG9a、Cal-3水平与左心室肥厚存在相关性,ATG9a、Cal-3可作为临床上辅助诊断、评估原发性高血压合并左心室肥厚的指标之一。 展开更多

关键词 原发性高血压 左心室肥厚 自噬相关蛋白9a 半乳糖凝集素-3

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沙库巴曲/缬沙坦对心肌肥厚兔半乳糖凝集素-3以及基质金属蛋白酶-9表达的影响 被引量：6

11

作者 蒋松辰 高尚远 +1 位作者 谢发江 江凤 《海南医学院学报》 CAS 2019年第8期561-565,共5页

目的:研究沙库巴曲/缬沙坦对压力负荷诱导的心肌肥厚新西兰兔半乳糖凝集素-3(Gal-3)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法:24只健康雄性8周龄新西兰兔随机分为假手术组(Sham)、模型组(Model)、沙库巴曲/缬沙坦组(Sacu/Vals),每组8... 目的:研究沙库巴曲/缬沙坦对压力负荷诱导的心肌肥厚新西兰兔半乳糖凝集素-3(Gal-3)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法:24只健康雄性8周龄新西兰兔随机分为假手术组(Sham)、模型组(Model)、沙库巴曲/缬沙坦组(Sacu/Vals),每组8只,后两组行腹主动脉缩窄术构建心肌肥厚模型,8周建模成功后沙库巴曲/缬沙坦组予以药物灌胃,其余两组予以等体积生理盐水。16周末取所有兔心,测左心室质量指数和全心质量指数以及取左心室心肌组织行HE染色评估心肌肥厚水平,western blot检测心肌组织Gal-3、MMP-9的表达。结果:⑴与假手术组相比,模型组、沙库巴曲/缬沙坦组HMI、LVMI增加(P<0.05);与模型组相比,沙库巴曲/缬沙坦组HMI、LVMI降低(P<0.05)。⑵假手术组心肌纤维排列整齐,呈束状排列,形态完整,未见明显纤维组织。模型组心肌纤维排列紊乱,大部分断裂,细胞水肿,心肌间质可见纤维结缔组织。沙库巴曲/缬沙坦组与模型组相比,心肌纤维排列基本整齐,细胞水肿明显减轻。⑶与假手术相比,模型组、沙库巴曲/缬沙坦组Gal-3、MMP-9蛋白表达量增加(P<0.05);与模型组相比,沙库巴曲/缬沙坦组Gal-3、MMP-9蛋白表达量降低(P<0.05)。结论:沙库巴曲/缬沙坦能减轻兔心肌肥厚,其机制可能跟下调Gal-3、 MMP-9蛋白表达相关。 展开更多

关键词 沙库巴曲/缬沙坦 心肌肥厚 半乳糖凝集素-3 基质金属蛋白酶-9 新西兰兔

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半乳糖上调内皮细胞Siglec-9聚糖配体水平抑制巨噬细胞活性

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作者 吴妮婷 摄渊婷 +2 位作者 刘红梅 李瑾 贾乙 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第13期1502-1511,共10页

目的探究半乳糖对人原代肺动脉内皮细胞上唾液酸特异性Ig样凝集素-9(sialic-acid-binding immunoglobulin-like lectin 9,Siglec-9)聚糖配体表达的影响及作用机制。方法采用流式细胞术确定内皮细胞表面Siglec-9聚糖配体的表达并鉴定该... 目的探究半乳糖对人原代肺动脉内皮细胞上唾液酸特异性Ig样凝集素-9(sialic-acid-binding immunoglobulin-like lectin 9,Siglec-9)聚糖配体表达的影响及作用机制。方法采用流式细胞术确定内皮细胞表面Siglec-9聚糖配体的表达并鉴定该聚糖配体末端糖苷键类型;分别用左旋葡萄糖、葡萄糖、N-乙酰基葡萄糖、甘露糖、N-乙酰基甘露糖、半乳糖、唾液酸、蔗糖处理内皮细胞48 h,采用流式细胞术检测内皮细胞Siglec-9聚糖配体的表达;将内皮细胞分为对照组和半乳糖组(n=3),Western blot、流式细胞术、免疫荧光分析半乳糖对内皮细胞Siglec-9聚糖配体表达的影响;α2-3,6,8唾液酸酶处理内皮细胞后,Western blot检测半乳糖对内皮细胞Siglec-9聚糖配体恢复时间的影响;半乳糖处理内皮细胞后,Western blot检测分析细胞内唾液酸合成关键酶(GNE、NANS、NANP、CMAS、NPL以及ST3Gals)表达水平,并用RT-qPCR验证相关蛋白的mRNA表达;siRNA敲低NANP、CMAS及ST3Gal-Ⅲ,Western blot检测内皮细胞Siglec-9聚糖配体水平变化;巨噬细胞与内皮细胞共培养实验分析Siglec-9聚糖配体的增加对巨噬细胞的凋亡与吞噬能力的影响。结果内皮细胞上表达有Siglec-9聚糖配体且该配体为末端结构为α2-3连接的唾液酸糖蛋白;与对照组比较,半乳糖组内皮细胞上该聚糖配体表达水平显著增加(P<0.01),但半乳糖的添加对该配体的自我恢复时间无影响;与对照组比较,半乳糖处理的内皮细胞中NANP、CMAS、ST3Gal-Ⅲ表达水平升高(P<0.05,P<0.01),且RT-qPCR验证结果与其一致;抑制内皮细胞中NANP、CMAS、ST3Gal-Ⅲ的表达后,内皮细胞Siglec-9聚糖配体水平下降(P<0.01)。共培养实验中,与未处理组比较,半乳糖处理的内皮细胞促进巨噬细胞凋亡增加(P<0.01),并导致其吞噬能力减弱(P<0.05)。结论半乳糖通过NANP-CMAS-ST3Gal-Ⅲ通路上调内皮细胞上Siglec-9聚糖配体水平,从而抑制巨噬细胞活性。 展开更多

关键词 半乳糖 内皮细胞 唾液酸特异性Ig样凝集素-9聚糖配体 唾液酸合成关键酶 巨噬细胞

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半乳糖凝集素糖结合的新模式：一个糖结合域的双重配体结合(英文) 被引量：1

13

作者 卞乘凤 张英 +1 位作者 李德峰 王大成 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2011年第9期810-815,共6页

半乳糖凝集素家族通过糖识别结构域(CRD)可以专一性识别和结合含β-半乳糖的多糖配体来发挥其生物学功能.到目前发现的CRD对β-半乳糖的识别模式是非常保守的,在结构已知的半乳糖凝集素结构中,一个CRD只能结合一个多糖配体分子.最近,通... 半乳糖凝集素家族通过糖识别结构域(CRD)可以专一性识别和结合含β-半乳糖的多糖配体来发挥其生物学功能.到目前发现的CRD对β-半乳糖的识别模式是非常保守的,在结构已知的半乳糖凝集素结构中,一个CRD只能结合一个多糖配体分子.最近,通过对人源半乳糖凝聚素-3 CRD与对硝基TF二糖(TFN)复合物的晶体结构解析首次发现,一个CRD可以同时结合2个TFN分子.与这2个TFN分子有双向结合的残基突变体E165A结构分析显示,一个残基的突变引起的结构上的微小变化会使结合位点2丧失结合糖底物的能力,而位点1的配体结合却不受影响.这表明,结合位点1对糖底物保守的识别和结合是基本的、主要的,而结合位点2对于糖有条件的结合,是额外的、次要的.序列比对和立体化学分析显示,参与新位点2结合的关键残基在其他半乳糖凝集素分子中都是保守的,而它们参与糖配体结合并不常见,表明它们作用的发挥是有条件的.可能在复杂寡聚结构的情况下,如有多重分支结构,双重结合位点将有利于对这类配体分子的辨识和结合,已有一系列研究报道,具有分支结构的寡糖与半乳糖分子的亲和势明显高于单价糖配体,与上述分析相一致.对这类双重位点糖结合的可能生物学意义进行了讨论. 展开更多

关键词 半乳糖凝集素家族 糖识别结构域(CRD) β-半乳糖 对硝基TF二糖(TFN) 双重结合模式

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β-1,4-半乳糖苷键在周围神经损伤后的表达变化

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作者 沈爱国 周鸣鸣 +3 位作者 丁斐 顾晓松 王汉洲 顾建新 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期272-276,共5页

为了探讨正常和损伤的周围神经中β-1,4-半乳糖苷键的表达定位和表达变化 ,本研究用特异识别β-1,4-半乳糖苷键的蓖麻凝集素 -I免疫组织化学方法结合 S-10 0和 neurofilam ent免疫双标记 ,研究了大鼠坐骨神经损伤对 β-1,4-半乳糖苷键... 为了探讨正常和损伤的周围神经中β-1,4-半乳糖苷键的表达定位和表达变化 ,本研究用特异识别β-1,4-半乳糖苷键的蓖麻凝集素 -I免疫组织化学方法结合 S-10 0和 neurofilam ent免疫双标记 ,研究了大鼠坐骨神经损伤对 β-1,4-半乳糖苷键的合成影响。结果表明 ,β-1,4-半乳糖苷键主要分布在正常和损伤坐骨神经的 Schwann细胞中 ,图像分析表明β-1,4-半乳糖苷键的表达在周围神经损伤后 1～ 2 d内有所增高 ,以后随时间延长表达量逐步下降。本研究结果提示 ,周围神经损伤对 β-1,4-半乳糖苷键的表达有影响 ,Schwann细胞表达的β-1。 展开更多

关键词 β—1 4-半乳糖苷键 周围神经损伤 表达变化 蓖麻凝集素-1

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α-半乳糖苷酶制剂在猪日粮中的应用 被引量：1

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作者 于桂阳 《饲料工业》 2006年第18期46-48,共3页

关键词 Α-半乳糖苷 猪日粮 酶制剂 抗营养因子 胰蛋白酶抑制因子 大豆加工 植物凝集素

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负性共刺激分子Tim-3和Galectin-9在子宫颈脱落细胞中的表达 被引量：5

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作者 张倩 杨婷 +6 位作者 裴美丽 赵敏伊 王丽 全诗敏 魏星 杨筱凤 赵娟 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期536-540,共5页

目的:了解负性共刺激分子T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3(Tim-3)和半乳糖凝集素-9(Galectin-9)在不同病变的子宫颈脱落细胞中的表达情况,以探讨负性共刺激分子与子宫颈癌发生、发展的关系。方法:收集2015年8月至2015年10月于西安交通大学... 目的:了解负性共刺激分子T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3(Tim-3)和半乳糖凝集素-9(Galectin-9)在不同病变的子宫颈脱落细胞中的表达情况,以探讨负性共刺激分子与子宫颈癌发生、发展的关系。方法:收集2015年8月至2015年10月于西安交通大学第一附属医院妇产科就诊患者子宫颈脱落细胞标本84例。其中正常子宫颈(NC)17例、低级别鳞状上皮内病变(LSIL)22例、高级别鳞状上皮内病变(HSIL)25例、子宫颈鳞状细胞癌(CC)20例。免疫细胞化学检测Tim-3、Galectin-9蛋白在子宫颈脱落细胞中的表达。结果:免疫细胞化学检测显示Tim-3在NC和异常子宫颈脱落上皮细胞的胞核和胞浆中均有表达,其在NC、LSIL、HSIL、CC中的表达率分别为82.35%、59.09%、52.00%、30.00%,HSIL和CC与NC相比差异有统计学意义(P<0.05)。Galectin-9表达于NC和异常子宫颈脱落上皮细胞的胞核中,NC、LSIL、HSIL、CC中的表达率分别为23.53%、36.36%、60.00%、85.00%,HSIL和CC与NC相比差异有统计学意义(P<0.05)。在人乳头瘤病毒(HPV)感染的子宫颈脱落细胞中,Tim-3呈高表达(P=0.000),Galectin-9(P=0.015)呈低表达。结论:在NC、LSIL、HSIL、SCC的脱落细胞中Tim-3表达逐级降低、Galectin-9表达逐级增高,这一表达模式可能与子宫颈病变进展和HPV感染有关。 展开更多

关键词 子宫颈癌 T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3 半乳糖凝集素-9 人乳头瘤病毒 子宫颈脱落细胞

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结肠炎小鼠外周血和结肠上皮组织中Gal-9的表达 被引量：2

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作者 李治国 江红艳 +3 位作者 李林静 朱丽萍 刘静 冯百岁 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2015年第1期68-71,共4页

目的:探讨半乳糖凝集素-9(Gal-9)与炎症性结肠炎(IBP)的关系。方法:60只雄性Balb/c小鼠分为4组,每组15只。对照组:自由饮食。三硝基苯磺酸钠(TNBS)组:实验第1、8、15天分别用2.0、2.5和3.0 mg TNBS加体积分数50%的乙醇溶液100μL灌肠,... 目的:探讨半乳糖凝集素-9(Gal-9)与炎症性结肠炎(IBP)的关系。方法:60只雄性Balb/c小鼠分为4组,每组15只。对照组:自由饮食。三硝基苯磺酸钠(TNBS)组:实验第1、8、15天分别用2.0、2.5和3.0 mg TNBS加体积分数50%的乙醇溶液100μL灌肠,建立小鼠结肠炎模型。TNBS+鞭毛蛋白(CBir1)组:同上造模,并于实验第7、9、12、15天小鼠腹腔注射100μg/L的CBir1 100μL。TNBS+白细胞介素-17(IL-17)组:造模后,小鼠腹腔注射IL-17 500 ng,每周2次。第22天处死小鼠,ELISA方法检测外周血Gal-9含量,免疫组化法检测结肠上皮组织中Gal-9蛋白的表达。结果:各组小鼠血清和结肠上皮组织中Gal-9的表达差异有统计学意义(F/χ2=22.669和25.179,P均<0.001),TNBS组低于对照组,TNBS+CBir1组和TNBS+IL-17组低于TNBS组(P均<0.001)。结论:Gal-9可用来评估结肠炎的严重程度。 展开更多

关键词 半乳糖凝集素-9 炎症性肠病 鞭毛蛋白 白细胞介素-17 小鼠

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凝集素芯片法分析桥本氏甲状腺炎患者外周血DC细胞膜糖蛋白的表达 被引量：2

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作者 袁媛 唐晓磊 张林杰 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2016年第2期213-217,共5页

目的通过凝集素芯片法筛选桥本氏甲状腺炎(HT)患者外周血树突状细胞(DC)差异表达的膜表面糖蛋白,了解其在HT中的表达变化。方法通过制备包含有32种凝集素的凝集素芯片对16例HT患者和22例健康者外周血DC细胞膜表面糖蛋白的表达进行分析;... 目的通过凝集素芯片法筛选桥本氏甲状腺炎(HT)患者外周血树突状细胞(DC)差异表达的膜表面糖蛋白,了解其在HT中的表达变化。方法通过制备包含有32种凝集素的凝集素芯片对16例HT患者和22例健康者外周血DC细胞膜表面糖蛋白的表达进行分析;凝集素耦联葡聚糖拉下相应差异表达的糖蛋白并进行质谱鉴定;同时应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western blot法和流式细胞术对HT患者外周血DC中该糖蛋白的mRNA、蛋白表达及Galectin-9+DC比例进行分析。最后通过ELISA法检测DC与CD8+T细胞孵育上清液中IFN-γ、穿孔素、颗粒酶B浓度。结果凝集素芯片检测结果显示凝集素脱落酸素(ABA)对应的糖蛋白在HT组显著低于健康组(P<0.01)。对凝集素ABA耦联葡聚糖拉下后洗脱的蛋白进行质谱鉴定,结果显示,众多洗脱蛋白中半乳糖结合蛋白-9(Galectin-9)所占比例较为丰富;随后通过qRT-PCR和Western blot进一步验证Galectin-9在HT组DC中的表达低于健康组;流式细胞术结果则显示HT组DC Galectin-9low比例高于健康组,且其均能较健康组诱导CD8+T细胞产生3种高水平杀伤因子。结论HT患者外周血Galectin-9lowDC可能与HT相关。 展开更多

关键词 桥本氏甲状腺炎 树突状细胞 凝集素芯片 半乳糖结合蛋白-9

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食管鳞状细胞癌组织中Galectin-9和MMP-2蛋白的表达及与预后的关系 被引量：5

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作者 郭素平 马军 +3 位作者 唐芙爱 鲁迪 段芳龄 郭琦 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2012年第6期749-752,共4页

目的:探讨食管鳞状细胞癌(简称食管鳞癌)组织中Galectin-9和MMP-2蛋白的表达及与预后的关系。方法:制备组织芯片,应用免疫组化SP法检测63例食管鳞癌及其癌旁正常食管黏膜组织中Galectin-9和MMP-2蛋白的表达,分析2种蛋白的表达与临床病... 目的:探讨食管鳞状细胞癌(简称食管鳞癌)组织中Galectin-9和MMP-2蛋白的表达及与预后的关系。方法:制备组织芯片,应用免疫组化SP法检测63例食管鳞癌及其癌旁正常食管黏膜组织中Galectin-9和MMP-2蛋白的表达,分析2种蛋白的表达与临床病理指标和预后的关系。结果:食管鳞癌组织中Galectin-9蛋白的阳性表达率为62.5%,低于癌旁正常食管黏膜组织的89.3%(χ2=11.529,P<0.001),其表达与肿瘤的分化程度有关(P=0.001),且阳性表达者生存期更长(P=0.013)。食管鳞癌组织中MMP-2蛋白的阳性表达率为67.9%,高于癌旁正常食管黏膜组织的35.7%(χ2=9.633,P=0.001),其表达与肿瘤浸润深度、TNM分期、淋巴结转移有关(P均<0.05),且阳性表达者生存期较短(P=0.036)。结论:食管鳞癌组织中Galectin-9低表达,MMP-2高表达;检测二者可用于判断食管鳞癌预后。 展开更多

关键词 食管肿瘤 鳞状细胞癌 组织芯片 半乳糖凝集素-9 基质金属蛋白酶-2 预后

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活动性肺结核患者Tim-3/Galectin-9的表达变化及其与巨噬细胞相关细胞因子的相关性 被引量：13

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作者 代娇 宋秋玲 +2 位作者 段慧英 王露乔 毕静 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第7期1101-1105,共5页

目的探究活动期肺结核(ATB)患者血清可溶性T细胞免疫球蛋白黏蛋白3(sTim-3)和半乳糖凝集素-9(sGal-9)水平,以及外周血单个核细胞(PBMC)中Tim-3/Gal-9的表达变化,及其与M1型巨噬细胞特征因子诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和M2型巨噬细胞特征... 目的探究活动期肺结核(ATB)患者血清可溶性T细胞免疫球蛋白黏蛋白3(sTim-3)和半乳糖凝集素-9(sGal-9)水平,以及外周血单个核细胞(PBMC)中Tim-3/Gal-9的表达变化,及其与M1型巨噬细胞特征因子诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和M2型巨噬细胞特征因子精氨酸酶-1(Arg-1)的相关性。方法选取ATB患者33例,31例潜伏期肺结核患者(LTBI)以及同期健康体检者30例。酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清sTim-3和sGal-9水平以及巨噬细胞特征因子iNOS和Arg-1;实时荧光定量PCR测定外周血单个核细胞(PBMC)表面Tim-3/Gal-9的表达变化。结果 ATB患者血清sTim-3、sGal-9、iNOS、Arg-1以及外周血PBMC上Tim-3和Gal-9 mRNA水平与LTBI组和对照组差异均有统计学意义(P <0.05);空洞型ATB患者血清iNOS、Arg-1以及PBMC上Tim-3 mRNA水平与非空洞型ATB患者间差异均具有统计学意义(P <0.05);相关性分析发现ATB患者血清sTim-3、Tim-3 mRNA与iNOS呈负相关(r=-0.333 7、-0.515 1,P <0.05),与Arg-1呈正相关(r=0.537 9、0.382 5,P <0.05);而sGal-9和Gal-9 mRNA与iNOS间无相关性,sGal-9与Arg-1间亦无相关性,Gal-9 mRNA与Arg-1间呈正相关(r=0.485 9,P <0.05);治疗后血清sTim-3、sGal-9和Arg-1及PBMC上Tim-3和Gal-9 mRNA表达水平较治疗前均显著下降,而iNOS则显著上调。结论 Tim-3/Gal-9在ATB患者治疗前后均中存在一定的变化,并与巨噬细胞极化特征标志物存在一定的相关性。 展开更多

关键词 活动性肺结核 T细胞免疫球蛋白黏蛋白3 半乳糖凝集素-9 诱导型一氧化氮合酶 精氨酸酶-1

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