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HBV包膜-核心蛋白融合基因DNA疫苗诱导小鼠持久的细胞免疫应答 被引量:13
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作者 赵平 姜春鹏 +2 位作者 赵兰娟 温新宇 戚中田 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第4期576-582,共7页
构建编码HBV包膜 核心蛋白融合基因的DNA疫苗pSC、pSS1S2C和编码HBV包膜蛋白或核心蛋白基因的DNA疫苗 pHBs、pHBc ,分别肌肉注射免疫BALB/c小鼠 ,检测小鼠的血清抗体、T细胞增殖和细胞毒性T淋巴细胞反应 ,比较融合基因DNA疫苗与单基因... 构建编码HBV包膜 核心蛋白融合基因的DNA疫苗pSC、pSS1S2C和编码HBV包膜蛋白或核心蛋白基因的DNA疫苗 pHBs、pHBc ,分别肌肉注射免疫BALB/c小鼠 ,检测小鼠的血清抗体、T细胞增殖和细胞毒性T淋巴细胞反应 ,比较融合基因DNA疫苗与单基因DNA疫苗诱生免疫应答的强度 ,发现融合基因DNA疫苗诱生抗体的效率明显不及单基因DNA疫苗 ,但其能诱导更强、更持久的细胞免疫应答 ,表明HBV包膜 核心蛋白融合基因DNA疫苗对于治疗慢性乙型肝炎可能比单基因DNA疫苗更为有效 . 展开更多
关键词 HBV 包膜-核心蛋白融合基因 DNA疫苗 诱导 小鼠 细胞免疫应答
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表达产气荚膜梭菌α-β融合蛋白基因工程菌株的构建 被引量:2
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作者 卫广森 许崇波 《中国兽药杂志》 2001年第5期5-9,共5页
用 PCR从含产气荚膜梭菌 α毒素基因的质粒 p XETA1中扩增出 α毒素基因 ,用 Nco I和 Bam HI双酶切该α毒素基因 ,回收 0 .95 kb的α毒素基因片段 ,再用 Nco I和 Bam HI双酶切含产气荚膜梭菌 β毒素基因质粒 p XETB2 ,与上述回收的 α... 用 PCR从含产气荚膜梭菌 α毒素基因的质粒 p XETA1中扩增出 α毒素基因 ,用 Nco I和 Bam HI双酶切该α毒素基因 ,回收 0 .95 kb的α毒素基因片段 ,再用 Nco I和 Bam HI双酶切含产气荚膜梭菌 β毒素基因质粒 p XETB2 ,与上述回收的 α毒素基因片段连接 ,转化至受体菌 BL2 1( DE3)中。经 Nco I、Bam HI、Not I酶切反应鉴定和核苷酸序列分析证实 ,获得了理想重组质粒p XCPAB2 ,该重组质粒含有α-β融合基因。重组菌株 BL 2 1 ( DE3) ( p XCPAB2 )经 IPTG诱导后 ,其表达产物经 ELISA检测和 SDS- PAGE分析 ,结果表明重组菌株可以高效表达α-β融合蛋白 ,该融合蛋白占菌体总蛋白的 2 2 .1 4%。用从 IPTG诱导的工程菌中提取的包涵体或经甲醛灭活的工程菌制成抗原免疫小鼠 ,免疫小鼠至少能抵抗 2 MLD的 C型产气荚膜梭菌的攻击。这表明构建的工程菌株 BL2 1 ( DE3) ( p XCPAB2 ) 展开更多
关键词 气荚梭菌 α-β融合蛋白 基因工程 菌株 动物 坏死性肠
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融合His标签的HCV包膜糖蛋白E2的真核表达及意义 被引量:1
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作者 杜德伟 贾战生 +5 位作者 秦鸿雁 孙强 刘秋平 聂青和 周永兴 韩骅 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期904-906,共3页
目的 构建HCV包膜糖蛋白E2与His标签融合的真核表达载体并在CHO细胞中表达 ,为研究HCV包膜糖蛋白的功能奠定基础。方法 利用PCR技术从HCV基因组序列中扩增出编码HCV包膜糖蛋白E2的基因 ,将其插入原核表达载体pET2 8(a)载体中 ,构建pET... 目的 构建HCV包膜糖蛋白E2与His标签融合的真核表达载体并在CHO细胞中表达 ,为研究HCV包膜糖蛋白的功能奠定基础。方法 利用PCR技术从HCV基因组序列中扩增出编码HCV包膜糖蛋白E2的基因 ,将其插入原核表达载体pET2 8(a)载体中 ,构建pET2 8(a) HCVE2 ,从pET2 8(a) HCVE2上获得His HCVE2融合基因 ,插入pcDNA3 1,构建表达HCV包膜糖蛋白E2与His标签融合蛋白的真核表达载体pcDNA3 1 His E2。用脂质体介导法将pcDNA3 1 His E2转染CHO细胞 ,通过间接免疫荧光、Westernblot检测融合蛋白在CHO细胞内的表达。结果 转染HCVE2与His融合基因的真核表达载体的CHO细胞内有融合蛋白的表达。结论 与His标签融合的HCV包膜糖蛋白E2能够在CHO细胞内表达。 展开更多
关键词 肝炎病毒 丙型 蛋白E2 融合基因 真核表达
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