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重组刺桐胰蛋白酶抑制剂a在大肠杆菌中的表达和纯化被引量：4: 1; 作者王新陈海旭 +3 位作者陆坚峰张毅屈贤铭杨胜利《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期337-341,共5页; 为了大量制备重组刺桐胰蛋白酶抑制剂a(rETIa) ,对构建的基因工程菌株E .coliBL2 1(DE3)pET2 2b mETIa进行了表达条件的优化 .用摇瓶培养 ,rETIa蛋白占菌体总蛋白 4 0 %以上 .经破碎菌体洗涤包涵体溶解包涵体复性初步纯化后 ,再... 展开更多; 关键词重组刺桐胰蛋白酶抑制剂a 大肠杆菌表达纯化; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组刺桐胰蛋白酶抑制剂a的制备及其在tPA突变体纯化中的应用被引量：4: 2; 作者王新屈贤铭杨胜利《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第3期420-423,共4页; 将基因工程菌株E .coliBL2 1(DE3)pET2 2b mETIa高密度发酵 ,用异丙基硫代 β D 半乳糖苷 (IPTG)诱导 ,重组刺桐胰蛋白酶抑制剂a (rETIa)蛋白在E .coli中得到较高水平表达 ,表达量占菌体总蛋白的 4 0 %以上 .经菌体破碎、包涵体变性、复... 展开更多; 关键词重组刺桐胰蛋白酶抑制剂a 制备 tPA突变体纯化应用高效表达亲和层析; 在线阅读下载PDF 职称材料

刺桐胰蛋白酶抑制剂亲和层析填料的制备及应用被引量：4: 3; 作者陈嫚任启生 +1 位作者宋新荣冯长根《北京理工大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第2期172-175,共4页; 研究用交联琼脂糖为载体 ,三聚氯氰为活化剂 ,刺桐胰蛋白酶抑制剂为配基 ,制备亲和填料的方法 .通过紫外和红外光谱分析 ,对制备的填料进行表征 .用制备的亲和填料吸附重组人组织型纤溶酶原激活剂突变体(reteplase,r- PA) ,研究吸附与... 展开更多; 关键词三聚氯氰刺桐胰蛋白酶抑制剂重组人组织型纤溶酶原激活剂突变体亲和色谱; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组刺桐胰蛋白酶抑制剂的制备及活性鉴定(英文): 4; 作者马志峰孙自勇 +1 位作者陈均勇刘建宁《南京大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期462-469,共8页; 刺桐胰蛋白酶抑制剂(ETI)是一种Kunitz型胰蛋白酶抑制剂,能够抑制胰蛋白酶及组织型纤溶酶原激活剂的活性,因此ETI可以作为配体与固定相偶联用于亲和层析.利用化学合成及聚合酶链式反应(PCR)的方法获得ETI的编码基因,然后用NdeI/SacI酶... 展开更多; 关键词刺桐胰蛋白酶抑制剂(eti) 胰蛋白酶瑞替普酶纤溶酶抑制; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组刺桐胰蛋白酶抑制剂a在大肠杆菌中的表达和纯化被引量：4: 1; 作者王新陈海旭陆坚峰张毅屈贤铭杨胜利; 机构中国科学院上海生物工程研究中心; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期337-341,共5页; 文摘为了大量制备重组刺桐胰蛋白酶抑制剂a(rETIa) ,对构建的基因工程菌株E .coliBL2 1(DE3)pET2 2b mETIa进行了表达条件的优化 .用摇瓶培养 ,rETIa蛋白占菌体总蛋白 4 0 %以上 .经破碎菌体洗涤包涵体溶解包涵体复性初步纯化后 ,再经二步柱层析纯化获得电泳纯的rETIa蛋白 .测定了rETIa对胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、组织型纤溶酶原激活因子缺失突变体 (NTA)的抑制活性 .; 关键词重组刺桐胰蛋白酶抑制剂a 大肠杆菌表达纯化; Keywords retia, E.coli BL21(DE3), high expression, purification; 分类号 Q943.2 [生物学—植物学] Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组刺桐胰蛋白酶抑制剂a的制备及其在tPA突变体纯化中的应用被引量：4: 2; 作者王新屈贤铭杨胜利; 机构中国科学院上海生物工程研究中心; 出处《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第3期420-423,共4页; 文摘将基因工程菌株E .coliBL2 1(DE3)pET2 2b mETIa高密度发酵 ,用异丙基硫代 β D 半乳糖苷 (IPTG)诱导 ,重组刺桐胰蛋白酶抑制剂a (rETIa)蛋白在E .coli中得到较高水平表达 ,表达量占菌体总蛋白的 4 0 %以上 .经菌体破碎、包涵体变性、复性 ,二步柱层析纯化得到电泳纯的rETIa蛋白 .测得rETIa对t PA突变体(NTA)的抑制平衡常数Ki 为 8 72× 10 -8mol/L .据此利用纯化的rETIa蛋白制备rETIa Sepharose 4B亲和层析柱 .直接一步纯化NTA复性液 ,纯化的NTA纯度达 90 %以上 ,收率为 96 2 % ,纯化倍数为 13 2 ,比活为(5 6 5 7± 71 3)U/μg .; 关键词重组刺桐胰蛋白酶抑制剂a 制备 tPA突变体纯化应用高效表达亲和层析; Keywords retia high cell density affinity chromatography tPA deletion variant (NTA); 分类号 TQ460.38 [化学工程—制药化工] Q789 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名刺桐胰蛋白酶抑制剂亲和层析填料的制备及应用被引量：4: 3; 作者陈嫚任启生宋新荣冯长根; 机构北京理工大学机电工程学院北京江中泽生科技有限责任公司; 出处《北京理工大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第2期172-175,共4页; 文摘研究用交联琼脂糖为载体 ,三聚氯氰为活化剂 ,刺桐胰蛋白酶抑制剂为配基 ,制备亲和填料的方法 .通过紫外和红外光谱分析 ,对制备的填料进行表征 .用制备的亲和填料吸附重组人组织型纤溶酶原激活剂突变体(reteplase,r- PA) ,研究吸附与解吸附条件 .结果表明 ,用该方法制备的亲和填料 ,制备工艺简单 ,吸附性能良好 ,对r- PA的吸附量为 8.76 mg· g- 1 .解吸附完全 ,不影响活性 ,可以用来分离纯化 r- PA.; 关键词三聚氯氰刺桐胰蛋白酶抑制剂重组人组织型纤溶酶原激活剂突变体亲和色谱; Keywords cyanuric chloride Erythrina trypsin inhibitor reteplase affinity chromatography; 分类号 O647.3 [理学—物理化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组刺桐胰蛋白酶抑制剂的制备及活性鉴定(英文): 4; 作者马志峰孙自勇陈均勇刘建宁; 机构南京大学分子医学研究所; 出处《南京大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期462-469,共8页; 文摘刺桐胰蛋白酶抑制剂(ETI)是一种Kunitz型胰蛋白酶抑制剂,能够抑制胰蛋白酶及组织型纤溶酶原激活剂的活性,因此ETI可以作为配体与固定相偶联用于亲和层析.利用化学合成及聚合酶链式反应(PCR)的方法获得ETI的编码基因,然后用NdeI/SacI酶切并插入载体pET25b ( +)中构建重组表达质粒pET25b ( +)/ETI .重组表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)后,用IPTG诱导使重组ETI(rETI)过量表达形成包涵体.包涵体经过洗涤、复性及CM离子交换柱纯化,每升培养液可获得14 mgrETI ,其纯度超过92 %.活性测定表明,rETI对凝血酶及尿激酶的活性没有抑制作用,但能显著抑制胰蛋白酶、瑞替普酶及纤溶酶的活性,抑制常数Ki分别为5 .14×10-9,9 .4×10-8和2 .08×10-8mol/L.; 关键词刺桐胰蛋白酶抑制剂(eti) 胰蛋白酶瑞替普酶纤溶酶抑制; Keywords Erythrina trypsin inhibitor （eti）, trypsin, reteplase, plasmin, inhibition; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	重组刺桐胰蛋白酶抑制剂a在大肠杆菌中的表达和纯化	王新陈海旭陆坚峰张毅屈贤铭杨胜利	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2002	4	在线阅读下载PDF 职称材料
2	重组刺桐胰蛋白酶抑制剂a的制备及其在tPA突变体纯化中的应用	王新屈贤铭杨胜利	《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心	2002	4	在线阅读下载PDF 职称材料
3	刺桐胰蛋白酶抑制剂亲和层析填料的制备及应用	陈嫚任启生宋新荣冯长根	《北京理工大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心	2005	4	在线阅读下载PDF 职称材料
4	重组刺桐胰蛋白酶抑制剂的制备及活性鉴定(英文)	马志峰孙自勇陈均勇刘建宁	《南京大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2005	0	在线阅读下载PDF 职称材料