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人源细胞内物质转运调节分子ARFGAP1对细胞分泌功能的影响被引量：1: 1; 作者刘晓勤张成岗 +2 位作者邢桂春陈清棠贺福初《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期237-243,共7页; ARF GAP是重要的细胞内物质转运调节分子 .最近 ,在人胎肝 c DNA文库中发现一种新基因 ,其编码的氨基酸序列与大鼠的 ARF1 GAP有 32 %同源性 ,故将其命名为“ARFGAP1”.对ARFGAP1进行功能研究 ,利用分子克隆技术构建绿色荧光蛋白 (GFP) ... 展开更多; 关键词细胞内物质转运细胞分泌功能 ARFGAP1 分泌型碱性磷酸酶; 在线阅读下载PDF 职称材料

四个达摩凤蝶新孵幼虫细胞系的建立及其生物学特性被引量：2: 2; 作者丁伟峰冯颖 +3 位作者张欣李娴王成业谢世聪《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期826-835,共10页; [目的]建立达摩凤蝶Papilio demoleus Linnaeus新孵幼虫细胞系,并对其生物学特性进行研究。[方法]使用改良配方的Grace培养基并辅以20%胎牛血清,通过原代和传代培养建立达摩凤蝶新孵幼虫细胞系。通过显微观察、细胞活力分析、核型分析... 展开更多; 关键词达摩凤蝶新孵幼虫昆虫细胞系分泌型碱性磷酸酶重组杆状病毒; 在线阅读下载PDF 职称材料

GC盒不是人胰岛素基因启动子中关键顺式作用元件: 3; 作者牛新捷王作仁 Jochen Seufert 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期78-80,共3页; 目的鉴定人胰岛素基因启动子中的GC盒(-348￣-338)是否是启动子中的关键顺式作用元件。方法用PCR克隆人胰岛素基因启动子,构建由人胰岛素基因启动子驱动的分泌型碱性磷酸酶(SEAP)报告质粒,并对报告质粒中人胰岛素基因启动子中的GC盒进... 展开更多; 关键词胰岛素基因 GC盒启动子分泌型碱性磷酸酶顺式作用元件; 在线阅读下载PDF 职称材料

以NF-_κB为靶的药物筛选方法的建立与应用研究被引量：9: 4; 作者马艳霞徐波 +3 位作者崔景荣王鹂吴军李敏《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第2期149-154,共6页; 核转录因子-3B(NF-4B)通过调节其靶基因的表达,在机体免疫应答、炎症与肿瘤的发生发展过程中发挥着重要功能,因此也被认为是预防和治疗肿瘤与炎症的理想靶点.pNiFty-SEAP质粒被成功地转入HEK293细胞,因此该转染细胞含有5×NF-5B基... 展开更多; 关键词 NF-ΚB 分泌型胎盘碱性磷酸酶炎症肿瘤药物筛选; 在线阅读下载PDF 职称材料

两种报告基因在达摩凤蝶细胞克隆株RIRI-PaDe-2-C6中的表达: 5; 作者刘志刚丁伟峰 +4 位作者孙娜张欣李娴谢世聪冯颖《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2018年第4期31-37,共7页; [目的]前期研究中,项目组从达摩凤蝶细胞系RIRI-Pa De-2中分离培养出单细胞克隆株RIRI-Pa De-2-C6,通过感染野生型苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(Ac MNPV)发现克隆株RIRI-Pa De-2-C6对病毒敏感性高于原细胞系RIRI-Pa De-2。本研究将对达... 展开更多; 关键词达摩风蝶单细胞克隆昆虫细胞系口一半乳糖苷酶分泌型碱性磷酸酶重组杆状病毒; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人源细胞内物质转运调节分子ARFGAP1对细胞分泌功能的影响被引量：1: 1; 作者刘晓勤张成岗邢桂春陈清棠贺福初; 机构军事医学科学院放射医学研究所北京大学第一医院神经内科; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期237-243,共7页; 基金国家自然科学基金!项目 (No.39730 310和 30 0 70 386 )&&; 文摘 ARF GAP是重要的细胞内物质转运调节分子 .最近 ,在人胎肝 c DNA文库中发现一种新基因 ,其编码的氨基酸序列与大鼠的 ARF1 GAP有 32 %同源性 ,故将其命名为“ARFGAP1”.对ARFGAP1进行功能研究 ,利用分子克隆技术构建绿色荧光蛋白 (GFP) - ARFGAP1融合基因表达质粒 (p EGFP- C1 - ARFGAP1 ) ,经脂质体转染将其导入 COS- 7细胞瞬时表达 ,利用绿色荧光确定ARFGAP1的亚细胞定位 .结果显示 ,ARFGAP1位于细胞质部分 ,表达量高时 ,在核周高尔基体区聚集呈团块状或颗粒状 .构建真核表达质粒 pc DNA3.1 /myc- His- ARFGAP1 ,在 COS- 7细胞中表达 ,并用 ARFGAP1和分泌型碱性磷酸酶 (SEAP)真核表达质粒共同转染 COS- 7细胞 ,发现ARFGAP1在细胞中过表达能部分抑制 SEAP的分泌 .结果证明 ,ARFGAP1对细胞的物质转运和分泌功能有调节作用 .; 关键词细胞内物质转运细胞分泌功能 ARFGAP1 分泌型碱性磷酸酶; Keywords ADP\|ribosylation factor(ARF), GTPase activating protein(GAP),subcellular localization,secreted alkaline phosphatase; 分类号 Q25 [生物学—细胞生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名四个达摩凤蝶新孵幼虫细胞系的建立及其生物学特性被引量：2: 2; 作者丁伟峰冯颖张欣李娴王成业谢世聪; 机构中国林业科学研究院资源昆虫研究所国家林业局资源昆虫培育与利用重点实验室; 出处《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期826-835,共10页; 基金国家林业局引进国际先进林业科学技术("948")项目(2013-4-53) 中央及公益性科研院所基本科研业务费专项资金(riricaf2012003M); 文摘 [目的]建立达摩凤蝶Papilio demoleus Linnaeus新孵幼虫细胞系,并对其生物学特性进行研究。[方法]使用改良配方的Grace培养基并辅以20%胎牛血清,通过原代和传代培养建立达摩凤蝶新孵幼虫细胞系。通过显微观察、细胞活力分析、核型分析和分子鉴定,获得4个新建细胞系的生物学特性数据。使用Bac-To-Bac杆状病毒表达系统构建重组分泌型碱性磷酸酶杆状病毒（Ac MNPV-SEAP）。使用有限稀释法测定达摩凤蝶细胞系对Ac MNPVSEAP的半数组织培养感染剂量（TCID50）,比较达摩凤蝶细胞系对Ac MNPV-SEAP的敏感性。[结果]建立了4个贴壁生长的达摩凤蝶新孵幼虫细胞系（RIRI-Pa De-1,RIRI-Pa De-2,RIRI-Pa De-3及RIRI-Pa De-4）,且均传至60代以上。形态学方面,细胞系RIRI-Pa De-1和RIRI-Pa De-4较为相近,均由圆形、梭形以及多边形细胞组成,细胞系RIRIPa De-2主要为圆形细胞,而RIRI-Pa De-3主要为类似表皮细胞和纤维状细胞。细胞增殖动力学方面,4个细胞系的群体倍增时间分别为69.77,67.42,81.48及65.43 h。核型分析显示4个细胞系染色体数量均呈正态分布,其中RIRI-Pa De-2,RIRI-Pa De-3以及RIRI-Pa De-4的染色体数目分布区间比较接近,在45～97条之间,RIRI-Pa De-1的染色体条数相比偏少,在36～90条之间。通过比对4个达摩凤蝶细胞系和虫卵的细胞色素c氧化酶亚基I（COI）基因序列,证明4个新建细胞系来源于达摩凤蝶组织。比较4个细胞系对Ac MNPV-SEAP敏感性发现RIRI-Pa De-3对此病毒较为敏感,可作为重组杆状病毒表达的宿主。[结论]虽然4个新建达摩凤蝶细胞系的来源相同,具有相同的遗传背景,但其生物学特征仍有明显差异,具有进一步研究的价值。; 关键词达摩凤蝶新孵幼虫昆虫细胞系分泌型碱性磷酸酶重组杆状病毒; Keywords Papilio demoleus neonate larvae insect cell line secreted alkaline phosphatase recombinant baculovirus; 分类号 Q965.8 [生物学—昆虫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名GC盒不是人胰岛素基因启动子中关键顺式作用元件: 3; 作者牛新捷王作仁 Jochen Seufert; 机构西安交通大学第一医院肝胆外科德国弗莱堡大学医学院内分泌和糖尿病科; 出处《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期78-80,共3页; 基金德国教育与科研部基金(FKZ01GN0115)~~; 文摘目的鉴定人胰岛素基因启动子中的GC盒(-348￣-338)是否是启动子中的关键顺式作用元件。方法用PCR克隆人胰岛素基因启动子,构建由人胰岛素基因启动子驱动的分泌型碱性磷酸酶(SEAP)报告质粒,并对报告质粒中人胰岛素基因启动子中的GC盒进行删除和突变。将报告质粒转染到!细胞系"TC3中,测定细胞培养液上清中SEAP的活性强度,进而判定GC盒与人胰岛素基因启动子转录活性的关系。结果删除和突变人胰岛素启动子中的GC盒不能显著改变胰岛素基因启动子在#细胞中的转录活性。结论人胰岛素基因启动子中GC盒不是一个关键顺式作用元件。; 关键词胰岛素基因 GC盒启动子分泌型碱性磷酸酶顺式作用元件; Keywords insulin gene GC-box promoter secreted alkaline phosphatase cis-acting element; 分类号 R346 [医药卫生—基础医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名以NF-_κB为靶的药物筛选方法的建立与应用研究被引量：9: 4; 作者马艳霞徐波崔景荣王鹂吴军李敏; 机构北京大学天然药物与仿生药物国家重点实验室; 出处《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第2期149-154,共6页; 基金国家高技术研究发展计划(863)新药筛选及关键技术研究(2002AA2Z343C) 中法先进性研究计划资助课题(PRA-B-02-01).~~; 文摘核转录因子-3B(NF-4B)通过调节其靶基因的表达,在机体免疫应答、炎症与肿瘤的发生发展过程中发挥着重要功能,因此也被认为是预防和治疗肿瘤与炎症的理想靶点.pNiFty-SEAP质粒被成功地转入HEK293细胞,因此该转染细胞含有5×NF-5B基序的增强子、SEAP报告基因和Zeocin抗生素抗性筛选基因.通过检测报告基因表达水平可反映NF-6B的活化状态.在以pNiFty-SEAP/HEK293细胞为基础建立的筛选体系中,TNF7和PMA等已知的NF-8B激活剂能剂量与时间依赖性地促进NF-9B的活化,而PDTC和NAC等NF-:B抑制剂的作用则相反.该筛选体系不仅具有稳定、特异、高通量等特点,而且可同时检测NF-;B的激活剂与抑制剂,将为发现作用于NF-<B信号传导通路的抗肿瘤与免疫调节药物提供有效的实验方法.; 关键词 NF-ΚB 分泌型胎盘碱性磷酸酶炎症肿瘤药物筛选; Keywords NF-κB , SEAP, inflammation ,cancer , drug screening; 分类号 R965.1 [医药卫生—药理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名两种报告基因在达摩凤蝶细胞克隆株RIRI-PaDe-2-C6中的表达: 5; 作者刘志刚丁伟峰孙娜张欣李娴谢世聪冯颖; 机构中国林业科学研究院资源昆虫研究所; 出处《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2018年第4期31-37,共7页; 基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资助项目(CAFYBB2016ZD005) 中国林业科学研究院资源昆虫研究所中央及公益性科研院所基本科研业务费专项资金(riricaf2012003M)资助; 文摘 [目的]前期研究中,项目组从达摩凤蝶细胞系RIRI-Pa De-2中分离培养出单细胞克隆株RIRI-Pa De-2-C6,通过感染野生型苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(Ac MNPV)发现克隆株RIRI-Pa De-2-C6对病毒敏感性高于原细胞系RIRI-Pa De-2。本研究将对达摩凤蝶单细胞克隆株RIRI-Pa De-2-C6的生物学特性和外源蛋白表达特性进行研究,并与原细胞系RIRI-Pa De-2进行比较,评价其用于外源蛋白表达的可行性。[方法]使用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统构建重组β-半乳糖苷酶杆状病毒(Ac MNPV-Gal)和重组分泌型碱性磷酸酶杆状病毒(Ac MNPV-SEAP),分别侵染RIRI-Pa De-2和RIRI-Pa De-2-C6。在感染后的24、48、72、96、120、144、168 h检测2种重组蛋白的表达量,并对2个细胞系的形态学、生长曲线、倍增时间及核型进行分析和比较。[结果]表明:RIRI-Pa De-2和RIRI-Pa De-2-C6均可表达β-半乳糖苷酶(β-Gal)和分泌型碱性磷酸酶(SEAP),单细胞克隆株RIRI-Pa De-2-C6对重组β-Gal的表达水平显著高于原细胞系RIRI-Pa De-2(P<0.05),在接种Ac MNPV-Gal后96 h表达量达到最高。RIRI-Pa De-2-C6对重组SEAP的表达水平与RIRI-Pa De-2无显著差异(P>0.05)。显微观察发现,RIRI-Pa De-2-C6的细胞类型全部为梭形,比原细胞系RIRI-Pa De-2的细胞组成更加单一。RIRI-Pa De-2-C6的群体倍增时间为94.94 h,比原细胞系RIRI-Pa De-2的倍增时间(67.42 h)长。核型分析显示,RIRI-Pa De-2-C6的染色体数量呈正态分布,数目为21 82条,与RIRIPa De-2的染色体数目分布范围(48 97条)存在显著差异(P<0.05)。[结论]通过单细胞克隆方法获得的克隆株RIRI-Pa De-2-C6无论在外源蛋白表达以及基础生物学特性方面均有别于原细胞系RIRI-Pa De-2。; 关键词达摩风蝶单细胞克隆昆虫细胞系口一半乳糖苷酶分泌型碱性磷酸酶重组杆状病毒; Keywords Papilio demoleus single cell cloning insect cell line β-galactosidase secreted alkaline phosphatase re-combinant baculovirus; 分类号 Q965.8 [生物学—昆虫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	人源细胞内物质转运调节分子ARFGAP1对细胞分泌功能的影响	刘晓勤张成岗邢桂春陈清棠贺福初	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2001	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	四个达摩凤蝶新孵幼虫细胞系的建立及其生物学特性	丁伟峰冯颖张欣李娴王成业谢世聪	《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心	2015	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	GC盒不是人胰岛素基因启动子中关键顺式作用元件	牛新捷王作仁 Jochen Seufert	《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2007	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	以NF-_κB为靶的药物筛选方法的建立与应用研究	马艳霞徐波崔景荣王鹂吴军李敏	《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心	2006	9	在线阅读下载PDF 职称材料
5	两种报告基因在达摩凤蝶细胞克隆株RIRI-PaDe-2-C6中的表达	刘志刚丁伟峰孙娜张欣李娴谢世聪冯颖	《林业科学研究》 CSCD 北大核心	2018	0	在线阅读下载PDF 职称材料