目的:探讨人分泌型卷曲相关蛋白1(secreted frizzled related protein 1, SFRP1)基因在人毛乳头中的表达及其转录机制。方法:应用免疫组化观察SFRP1在雄激素性秃发(androgenetic alopecia, AGA)患者秃发区的毛囊与非AGA患者的正常毛囊...目的:探讨人分泌型卷曲相关蛋白1(secreted frizzled related protein 1, SFRP1)基因在人毛乳头中的表达及其转录机制。方法:应用免疫组化观察SFRP1在雄激素性秃发(androgenetic alopecia, AGA)患者秃发区的毛囊与非AGA患者的正常毛囊毛乳头部位的表达情况。采用按基因组序列设计的引物,通过PCR克隆人SFRP1启动子片段,将之插入荧光素酶报告基因载体pGL3-basic中,构建不同截短片段的重组质粒并瞬时转染毛乳头细胞,测定质粒在毛乳头细胞中的启动子活性,找到核心启动子区域,运用生物信息学方法预测其潜在的转录因子结合位点。结果:免疫组化结果显示AGA患者毛乳头中SFRP1表达量显著高于非AGA患者。经菌液PCR、双酶切、测序,成功构建了人SFRP1启动子及其截短片段重组质粒,并确定其启动子活性区域位于-100~+50bp区域内,且可能含有E2F3、HIF1A::ARNT、FOXC1、SP1等转录因子结合位点。结论:SFRP1在AGA患者毛乳头中表达呈阳性,人SFRP1启动子荧光素酶报告质粒构建成功,其转录因子结合位点初步确定,为进一步的研究奠定基础。展开更多
目的分析支气管哮喘急性发作期患儿血清分泌型卷曲相关蛋白1(secreted frizzed related protein 1,SFRP1)的水平及其临床意义。方法将陆军军医大学第一附属医院2019年1月至2020年2月收治的支气管哮喘急性发作期患儿136例纳入急性发作组...目的分析支气管哮喘急性发作期患儿血清分泌型卷曲相关蛋白1(secreted frizzed related protein 1,SFRP1)的水平及其临床意义。方法将陆军军医大学第一附属医院2019年1月至2020年2月收治的支气管哮喘急性发作期患儿136例纳入急性发作组,将同期于该院随访的支气管哮喘缓解期患儿98例纳入缓解组,另选取该院同期体检健康儿童100例纳入对照组。检测三组儿童血清SFRP1、炎性反应相关指标[可溶性人基质裂解素2(soluble suppression of tumorigenicity 2,sST2)、白介素-17(interleukin-17,IL-17)、白介素-33(interleukin-33,IL-33)]、气道重塑相关指标[转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、神经生长因子(nerve growth factor,NGF)]水平,并分析SFRP1水平与炎性反应和气道重塑相关指标水平之间的关系,同时评估血清SFRP1水平在儿童支气管哮喘急性发作期中的临床诊断效能。结果急性发作组和缓解组患儿血清SFRP1、sST2、IL-17、IL-33、VEGF、MMP-9、NGF水平均显著高于对照组(均P<0.05),TGF-β1水平均显著低于对照组(均P<0.05);且急性发作组患儿血清SFRP1、sST2、IL-17、IL-33、VEGF、MMP-9、NGF水平均显著高于缓解组(均P<0.05),TGF-β1水平显著低于缓解组(P<0.05)。Pearson相关性分析显示:急性发作组患儿血清SFRP1水平与TGF-β1水平呈负相关(r=-0.608,P<0.01);与sST2、IL-17、IL-33、VEGF、MMP-9、NGF水平均呈正相关(r=0.609、0.642、0.665、0.708、0.628、0.545,均P<0.01)。受试者操作特征曲线显示:血清SFRP1水平对儿童支气管哮喘急性发作期具有一定的诊断价值,曲线下面积为0.798(95%CI:0.729~0.893),约登指数为0.76;当选取血清SFRP1水平为94.34 pg/ml时,灵敏度、特异度和准确性最高,分别为0.84、0.89、0.83。结论血清SFRP1水平能够在一定程度上反映支气管哮喘急性发作期患儿病情严重程度,且其水平与患儿机体炎性反应和气道重塑具有一定相关性,可将其作为临床辅助诊断儿童气管哮喘急性发作的重要标志物。展开更多
目的观察甲基化抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-aza-2′-deoxycytidine,5-Aza-CdR)对肺癌SPC-A1细胞增殖、细胞划痕和凋亡的影响,探讨抑癌基因分泌型卷曲相关蛋白1(secreted frizzled related protein 1,SFRP1)和O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转...目的观察甲基化抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-aza-2′-deoxycytidine,5-Aza-CdR)对肺癌SPC-A1细胞增殖、细胞划痕和凋亡的影响,探讨抑癌基因分泌型卷曲相关蛋白1(secreted frizzled related protein 1,SFRP1)和O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O6-methylguanine-DNA-methyltransferase,MGMT)基因启动子区DNA甲基化mRNA和蛋白在其中的表达和意义。方法CCK-8法检测不同浓度的5-Aza-CdR对人肺癌SPC-A1细胞增殖影响,划痕实验测定5-Aza-CdR对SPC-A1细胞迁移能力的影响,Hoechst 33258染色检测(0、3、10、30μmol·L^(-1))5-Aza-CdR处理肺癌SPC-A1细胞24h后细胞凋亡情况,RT-PCR、Western blot法检测SPC-A1细胞中SFRP1和MGMT的mRNA、蛋白表达。结果5-Aza-CdR可以浓度梯度的抑制肺癌SPC-A1细胞增殖,IC 50为21.2μmol·L^(-1);5-Aza-CdR(3、10、30μmol·L^(-1))作用48 h后,肺癌SPC-A1细胞划痕愈合分别为对照组的(92.4±2.6)%、(83.6±4.2)%、(76.7±4.5)%;5-Aza-CdR处理肺癌SPC-A1细胞后,出现典型的细胞凋亡形态学改变;不同浓度5-Aza-CdR(3、10、30μmol·L^(-1))处理SPC-A1细胞24 h后,SFRP1、MGMT mRNA和蛋白表达增加(P<0.05)。结论5-Aza-CdR可抑制肺癌SPC-A1细胞增殖,抑制肺癌细胞划痕修复和促进凋亡,可能与升高MGMT和SFRPl的甲基化表达有关。展开更多
背景与目的:近年来发现Wnt通路中分泌型卷曲相关蛋白1(secreted frizzled related protein 1,sFRP1)、β-连环蛋白(β-catenin)的异常表达与肿瘤的形成密切相关。本研究旨在探讨sFRP1及β-catenin在宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithe...背景与目的:近年来发现Wnt通路中分泌型卷曲相关蛋白1(secreted frizzled related protein 1,sFRP1)、β-连环蛋白(β-catenin)的异常表达与肿瘤的形成密切相关。本研究旨在探讨sFRP1及β-catenin在宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)和宫颈癌组织的表达及其与宫颈癌形成和预后之间的关系。方法:采用免疫组织化学SP法检测20例正常宫颈组织、30例CIN和78例宫颈癌中sFRP1及β-catenin的表达;分析其表达与宫颈癌临床病理因素的关系及对预后的影响。结果:sFRP1在正常宫颈、CIN及宫颈癌组织中的阳性表达率分别为100.0%、70.0%及33.3%,差异有统计学意义(P<0.05)。sFRP1的表达与宫颈癌的临床分期及淋巴结转移显著相关,sFRP1阳性表达者5年生存率高于阴性表达者(79.8%vs 60.5%),差异有统计学意义(P<0.05);β-catenin在正常宫颈、CIN及宫颈癌组织中的异常表达率分别为5.0%、43.3%及70.5%,差异有统计学意义(P<0.05)。β-catenin的异常表达与宫颈癌的临床分期、淋巴结转移及病理学分级显著相关,正常表达的患者5年生存率高于异常表达者(83.7%vs 59.2%),差异有统计学意义(P<0.05);宫颈癌组织中sFRP1阳性表达与β-catenin的异常表达呈负相关(r=-0.557,P<0.001)。结论:sFRP1和β-catenin的表达与宫颈癌的发生、发展相关,且可作为预测宫颈癌患者预后的指标之一。展开更多
文摘目的:探讨人分泌型卷曲相关蛋白1(secreted frizzled related protein 1, SFRP1)基因在人毛乳头中的表达及其转录机制。方法:应用免疫组化观察SFRP1在雄激素性秃发(androgenetic alopecia, AGA)患者秃发区的毛囊与非AGA患者的正常毛囊毛乳头部位的表达情况。采用按基因组序列设计的引物,通过PCR克隆人SFRP1启动子片段,将之插入荧光素酶报告基因载体pGL3-basic中,构建不同截短片段的重组质粒并瞬时转染毛乳头细胞,测定质粒在毛乳头细胞中的启动子活性,找到核心启动子区域,运用生物信息学方法预测其潜在的转录因子结合位点。结果:免疫组化结果显示AGA患者毛乳头中SFRP1表达量显著高于非AGA患者。经菌液PCR、双酶切、测序,成功构建了人SFRP1启动子及其截短片段重组质粒,并确定其启动子活性区域位于-100~+50bp区域内,且可能含有E2F3、HIF1A::ARNT、FOXC1、SP1等转录因子结合位点。结论:SFRP1在AGA患者毛乳头中表达呈阳性,人SFRP1启动子荧光素酶报告质粒构建成功,其转录因子结合位点初步确定,为进一步的研究奠定基础。
文摘背景与目的:近年来发现Wnt通路中分泌型卷曲相关蛋白1(secreted frizzled related protein 1,sFRP1)、β-连环蛋白(β-catenin)的异常表达与肿瘤的形成密切相关。本研究旨在探讨sFRP1及β-catenin在宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)和宫颈癌组织的表达及其与宫颈癌形成和预后之间的关系。方法:采用免疫组织化学SP法检测20例正常宫颈组织、30例CIN和78例宫颈癌中sFRP1及β-catenin的表达;分析其表达与宫颈癌临床病理因素的关系及对预后的影响。结果:sFRP1在正常宫颈、CIN及宫颈癌组织中的阳性表达率分别为100.0%、70.0%及33.3%,差异有统计学意义(P<0.05)。sFRP1的表达与宫颈癌的临床分期及淋巴结转移显著相关,sFRP1阳性表达者5年生存率高于阴性表达者(79.8%vs 60.5%),差异有统计学意义(P<0.05);β-catenin在正常宫颈、CIN及宫颈癌组织中的异常表达率分别为5.0%、43.3%及70.5%,差异有统计学意义(P<0.05)。β-catenin的异常表达与宫颈癌的临床分期、淋巴结转移及病理学分级显著相关,正常表达的患者5年生存率高于异常表达者(83.7%vs 59.2%),差异有统计学意义(P<0.05);宫颈癌组织中sFRP1阳性表达与β-catenin的异常表达呈负相关(r=-0.557,P<0.001)。结论:sFRP1和β-catenin的表达与宫颈癌的发生、发展相关,且可作为预测宫颈癌患者预后的指标之一。
