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人凋亡相关基因TFAR19缺失突变体的原核表达、产物纯化及鉴定 被引量:10
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作者 李现亭 莫晓宁 +4 位作者 夏东岚 刘雅楠 宋泉声 张颖妹 马大龙 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期411-415,共5页
构建TF 1细胞凋亡相关基因 19(TF 1cellapoptosisrelatedgene 19,TFAR19)缺失突变体的原核表达载体 ,获取缺失突变体蛋白 ,用于TFAR19促凋亡分子机理的研究 .从真核表达载体pcDI TFAR19扩增出野生型TFAR19和 4个缺失突变体 ,重组到... 构建TF 1细胞凋亡相关基因 19(TF 1cellapoptosisrelatedgene 19,TFAR19)缺失突变体的原核表达载体 ,获取缺失突变体蛋白 ,用于TFAR19促凋亡分子机理的研究 .从真核表达载体pcDI TFAR19扩增出野生型TFAR19和 4个缺失突变体 ,重组到原核表达载体pGEX 4T 2 .经亲和层析方法对缺失体蛋白进行纯化后 ,再利用凝胶过滤的方法进一步纯化 .利用抗GST和抗TFAR19的单克隆抗体对蛋白进行免疫学鉴定 .用白血病细胞株HL 6 0检测蛋白活性 .成功地克隆并重组了野生型TFAR19及缺失突变体 pGEX 4T 2表达载体 ,对融合蛋白的表达条件进行了优化 .SDS PAGE结果显示 ,各个缺失突变体融合蛋白均有较高水平的表达 .免疫学检测证实获得了正确的表达产物 .活性检测证实 ,野生型TFAR19和缺失突变体 4可以明显促进去血清诱导的HL 6 0细胞凋亡 ,第 展开更多
关键词 凋亡相关基因 TFAR19缺失突变体 原核表达 产物纯化 鉴定 GST
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心肌梗死后心衰大鼠心肌细胞凋亡和凋亡相关基因表达的变化 被引量:14
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作者 吴强 李隆贵 耿昭华 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期434-436,共3页
目的 探讨心肌细胞凋亡在充血性心力衰竭 (CHF)发生、发展中的作用 ,Bcl 2和Fas及其配体 (FasL)对心肌细胞凋亡的调控机制。方法 采用心肌梗死 (MI)大鼠模型 ,观察雄性Wistar大鼠MI后 2、4及 8周的血流动力学参数、心室重塑指标、心... 目的 探讨心肌细胞凋亡在充血性心力衰竭 (CHF)发生、发展中的作用 ,Bcl 2和Fas及其配体 (FasL)对心肌细胞凋亡的调控机制。方法 采用心肌梗死 (MI)大鼠模型 ,观察雄性Wistar大鼠MI后 2、4及 8周的血流动力学参数、心室重塑指标、心肌细胞凋亡、Fas、FasL和Bcl 2的mRNA和蛋白表达的改变。结果 MI后 4周大鼠出现平均动脉压、±dp dtmax下降 ,左室舒张末压、右室 体重比增高 ,MI后 8周上述改变更为明显 ;MI后心肌细胞凋亡指数、Fas及FasL的mRNA和蛋白表达逐渐升高 ,Bcl 2的mRNA和蛋白表达下调。结论 心肌细胞凋亡在MI后CHF发生、发展过程中起着重要的作用 ,Fas和FasL表达上调、Bcl 2表达下降介导MI后心肌细胞凋亡的发生。 展开更多
关键词 细胞 心肌梗死 充血性心力衰竭 基因表达 凋亡相关基因 大鼠
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妊娠兔胎盘细胞凋亡及凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达的动态变化 被引量:6
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作者 刘喆 陈云 +1 位作者 杨颖 彭景楩 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第1期64-68,共5页
以新西兰雌兔为动物模型 ,研究妊娠期间胎盘细胞凋亡及其凋亡调控蛋白Bcl 2和Bax表达的动态变化 .基因组DNA凝胶电泳实验检测到妊娠中期和晚期胎盘基因组DNA中出现典型的凋亡特征———DNA梯带 ,而且DNA断裂值在妊娠早、中、晚期分别为 ... 以新西兰雌兔为动物模型 ,研究妊娠期间胎盘细胞凋亡及其凋亡调控蛋白Bcl 2和Bax表达的动态变化 .基因组DNA凝胶电泳实验检测到妊娠中期和晚期胎盘基因组DNA中出现典型的凋亡特征———DNA梯带 ,而且DNA断裂值在妊娠早、中、晚期分别为 :0 14、 0 4 9和 1 4 3,与妊娠早期相比 ,妊娠中、晚期胎盘基因组DNA断裂值有显著性增加 .TUNEL实验和活化caspase 3的免疫定位实验表明 ,在妊娠早期胎盘中存在细胞凋亡 ,而且在各妊娠期中细胞凋亡主要发生于合体滋养层 .免疫印迹法分析表明 ,Bcl 2和Bax随妊娠的进行其表达量明显增加 ,Bax∶Bcl 2比值在妊娠早、中、晚期分别为 :0 89,0 91和 1 2 5 ,呈增加趋势 .实验结果说明 ,在兔正常妊娠中 ,胎盘合体滋养层细胞发生凋亡 ,且随妊娠的进行 ,凋亡细胞数量增多 ,胎盘细胞凋亡主要与细胞中Bax∶Bcl 2的比例相关 . 展开更多
关键词 妊娠兔 胎盘 细胞 BCL-2 BAX 凋亡相关基因 表达
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恢复期SARS患者T淋巴细胞凋亡相关基因蛋白表达 被引量:5
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作者 金荣华 张永宏 +7 位作者 任翊 胡中杰 吴昊 计云霞 武燕琳 孙国平 丁惠国 赵春惠 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期97-99,共3页
目的 :探讨SARS的免疫发病机理 ,研究恢复期SARS患者T淋巴细胞凋亡相关基因蛋白表达。方法 :流式细胞仪测定 15例恢复期SARS患者的T淋巴细胞及其亚群和凋亡相关基因蛋白———CD95、Bcl 2、DR5及人冠状病毒 2 2 9E受体—CD13表达 ;并以... 目的 :探讨SARS的免疫发病机理 ,研究恢复期SARS患者T淋巴细胞凋亡相关基因蛋白表达。方法 :流式细胞仪测定 15例恢复期SARS患者的T淋巴细胞及其亚群和凋亡相关基因蛋白———CD95、Bcl 2、DR5及人冠状病毒 2 2 9E受体—CD13表达 ;并以 10例高危、健康的医务人员为对照。结果 :恢复期SARS患者外周血T淋巴细胞亚群 (CD3、CD4、CD8)均恢复正常 ;CD4 DR5、CD13,CD8 DR5、CD13表达均阴性 ,与对照组无明显差异。但是 ,恢复期SARS患者CD4、CD8阳性细胞仍明显表达Fas和Bcl 2 ,其阳性细胞的百分数较对照组明显增多 (P <0 0 1)。结论 :Fas FasL途径导致T淋巴细胞凋亡可能是SARS患者的免疫发病机理之一 ,而恢复期Bcl 2表达增多对抑制T淋巴细胞的进一步凋亡、T淋巴细胞亚群恢复正常可能具有重要作用。SARS患者T淋巴细胞凋亡不通过Trail DR5 细胞凋亡途径。 展开更多
关键词 SARS T淋巴细胞 凋亡相关基因蛋白 流式细胞术 CD13
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佐太、β-HgS、HgCl_2对PC12细胞活性和凋亡相关基因表达影响的比较 被引量:6
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作者 耿卢婧 李岑 +2 位作者 夏政华 杜玉枝 魏立新 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期543-548,共6页
目的比较佐太、β-HgS、HgCl_2对PC12细胞活性和凋亡相关基因表达的影响。方法 MTT法测定3种药物对细胞活性的影响,实时荧光定量PCR法检测Bax、Bak、Bcl2、Fas、FasL表达。结果 0.250 g/L佐太作用2 h后细胞活性下降约10%,等汞量β-HgS... 目的比较佐太、β-HgS、HgCl_2对PC12细胞活性和凋亡相关基因表达的影响。方法 MTT法测定3种药物对细胞活性的影响,实时荧光定量PCR法检测Bax、Bak、Bcl2、Fas、FasL表达。结果 0.250 g/L佐太作用2 h后细胞活性下降约10%,等汞量β-HgS使其下降12%左右,而含汞量只有佐太1/10的HgCl_2却导致其下降约70%;佐太降低Bax、Bak、Bcl-2、FasL表达,β-HgS降低Bax、Bak、Fas、FasL表达,HgCl_2降低Bcl-2表达而增加Fas、FasL表达。结论佐太、β-HgS对PC12细胞的毒性远小于HgCl_2,两者可能对细胞中线粒体凋亡通路的激活有抑制作用,而HgCl_2可能通过激活死亡受体通路诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 佐太 β-HgS 氯化汞 PC12 细胞 凋亡相关基因
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重组人内抑素对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织凋亡相关基因表达的影响 被引量:6
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作者 黄学应 陈飞虎 +2 位作者 刘永靖 张晓明 袁凤来 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2007年第12期1359-1363,共5页
目的:观察重组人内抑素(rh-end)对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织p53、fas和bcl-2基因表达的影响。方法:采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法,定量检测该药对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织p53、fas和bcl-2 mRNA表达的影响。结果:与模型组相比,rh... 目的:观察重组人内抑素(rh-end)对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织p53、fas和bcl-2基因表达的影响。方法:采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法,定量检测该药对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织p53、fas和bcl-2 mRNA表达的影响。结果:与模型组相比,rh-end治疗组大鼠滑膜组织fas和bcl-2 mR- NA表达水平增加,p53 mRNA表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:rh-end可经fas介导诱导佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞凋亡,且不依赖于p53,不能被bcl-2所抑制。 展开更多
关键词 重组人内抑素 佐剂性关节炎 滑膜细胞 凋亡相关基因
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TF-1细胞凋亡相关基因19在系统性红斑狼疮发病中的作用 被引量:5
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作者 宋清华 王晶 +4 位作者 陈英玉 狄春晖 孙荣华 陈学荣 李世荫 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期189-193,T004,共6页
目的 :探讨TF - 1细胞凋亡相关基因 1 9(TFAR1 9)在系统性红斑狼疮 (SLE)发病诱因中的作用及其与SLE病情的关系。方法 :应用倒置相差显微镜、Ladder方法、Westernblotting方法、荧光免疫显微镜、ELISA方法检测中波紫外线 (UVB)诱导HaCa... 目的 :探讨TF - 1细胞凋亡相关基因 1 9(TFAR1 9)在系统性红斑狼疮 (SLE)发病诱因中的作用及其与SLE病情的关系。方法 :应用倒置相差显微镜、Ladder方法、Westernblotting方法、荧光免疫显微镜、ELISA方法检测中波紫外线 (UVB)诱导HaCaT细胞凋亡时TFAR1 9的表达及其与SLE患者病情的关系。结果 :在剂量为 30mJ/cm2的UVB照射 2 4h后 ,HaCaT细胞开始凋亡 ,TFAR1 9在此过程中有表达 ,发现活动期SLE患者血清中TFAR1 9的抗体值高于稳定期和正常对照组的值 (P≤ 0 .0 5)。结论 :在UVB诱导角质形成细胞HaCaT凋亡的过程中 ,有TFAR1 9的参与并发挥了作用 ,提示TFAR1 展开更多
关键词 系统性红斑狼疮 细胞 紫外线B TF-1细胞凋亡相关基因19
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猪源凋亡相关基因SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR方法的建立 被引量:3
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作者 李玉明 王刚 +6 位作者 汪志艳 刘永刚 涂亚斌 王淑杰 姜成刚 王延群 蔡雪辉 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期369-373,共5页
为检测高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染的猪胸腺中凋亡相关因子的变化,本研究针对猪TNF-α、TNFR1、FasL、Fas、Bax、Bcl-2、caspase-3基因及内参β-actin基因设计特异性引物,构建含有各自引物扩增序列的重组质粒作为阳性标... 为检测高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染的猪胸腺中凋亡相关因子的变化,本研究针对猪TNF-α、TNFR1、FasL、Fas、Bax、Bcl-2、caspase-3基因及内参β-actin基因设计特异性引物,构建含有各自引物扩增序列的重组质粒作为阳性标准品,建立了检测TNF-α、TNFR1、FasL、Fas、Bax、Bcl-2、caspase-3基因的SYBR Green I qRT-PCR方法。结果显示,该方法线性关系好(R2≥0.998),敏感性高,初始模板的检出下限为10拷贝/μL;特异性强,扩增产物形成单一的特异性熔解峰;重复性好,批内、批间重复试验的变异系数均小于3%,具有良好的重复性。本研究为细胞凋亡相关因子变化趋势的研究提供方法。 展开更多
关键词 凋亡相关基因 荧光定量PCR SYBR Green
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氦氖激光重复照射对培养瘢痕成纤维细胞凋亡相关基因表达的影响 被引量:3
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作者 舒彬 吴宗耀 +4 位作者 郝林林 沈岳 黄显凯 林永辉 冯光锐 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 2002年第5期266-268,共3页
目的 :从蛋白质水平探讨氦氖激光诱导瘢痕成纤维细胞凋亡的机制。方法 :以波长 6 32 .8nm、功率密度10 0mW /cm2 的氦氖激光照射培养瘢痕成纤维细胞 ,每日 1次 ,每次 30min ,连续照射 3天 ,然后分别采用激光共聚焦扫描显微镜、流式细胞... 目的 :从蛋白质水平探讨氦氖激光诱导瘢痕成纤维细胞凋亡的机制。方法 :以波长 6 32 .8nm、功率密度10 0mW /cm2 的氦氖激光照射培养瘢痕成纤维细胞 ,每日 1次 ,每次 30min ,连续照射 3天 ,然后分别采用激光共聚焦扫描显微镜、流式细胞仪测定Bcl- 2、Bax、Fas、ICE、p5 3、c -myc蛋白的细胞分布与表达。 结果 :在培养增生性瘢痕成纤维细胞有多种凋亡相关基因表达蛋白分布 ,氦氖激光照射后 ,Fas、ICE表达增加 ,Bcl- 2表达降低 ,Bax、p5 3、c -myc的表达无变化。结论 :氦氖激光诱导的瘢痕成纤维细胞凋亡与Fas、Bcl- 2。 展开更多
关键词 氦氖激光重复照射 瘢痕 成纤维细胞 凋亡相关基因 基因表达
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利心冲剂对心衰大鼠模型的治疗作用和凋亡相关基因的影响 被引量:4
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作者 高想 蒋凤蒙 +2 位作者 蒋凤荣 姜卫东 唐艳芬 《中华中医药学刊》 CAS 2009年第11期2310-2312,共3页
目的:探讨利心冲剂对心衰大鼠模型抗凋亡作用机制。方法:腹腔注射阿霉素(ADR)复制大鼠心衰模型,左心室插管术测定血流动力学指标,Real time PCR检测凋亡相关基因。结果:利心冲剂治疗组和模型组比较,左心室收缩内压显著升高;凋亡相关基因... 目的:探讨利心冲剂对心衰大鼠模型抗凋亡作用机制。方法:腹腔注射阿霉素(ADR)复制大鼠心衰模型,左心室插管术测定血流动力学指标,Real time PCR检测凋亡相关基因。结果:利心冲剂治疗组和模型组比较,左心室收缩内压显著升高;凋亡相关基因Bcl-2、Bcl-2/bax增高;均有显著性差异(P<0.05),利心冲剂治疗组心肌细胞变性坏死明显减轻。结论:利心冲剂提高凋亡相关基因Bcl-2、Bcl-2/bax表达,减轻心肌细胞凋亡,改善心脏收缩与舒张功能。 展开更多
关键词 利心冲剂 心衰大鼠模型 凋亡相关基因
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新的凋亡相关基因PDCD5在狼疮性肾炎患儿肾组织中的表达 被引量:4
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作者 李欣 黄建萍 丁洁 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第10期607-609,共3页
为检测新的凋亡相关基因PDCD5在狼疮性肾炎患儿肾组织中的表达 ,分析其与肾组织细胞凋亡的关系 ,探讨PDCD5在狼疮性肾炎发病中的作用 ,用免疫组化及图象分析的方法 ,检测19例狼疮性肾炎患儿肾组织及9例对照肾组织中PDCD5的表达 ;同时16... 为检测新的凋亡相关基因PDCD5在狼疮性肾炎患儿肾组织中的表达 ,分析其与肾组织细胞凋亡的关系 ,探讨PDCD5在狼疮性肾炎发病中的作用 ,用免疫组化及图象分析的方法 ,检测19例狼疮性肾炎患儿肾组织及9例对照肾组织中PDCD5的表达 ;同时16/19例狼疮性肾炎和6/9例对照肾组织标本运用原位末端标记法(TUNEL)检测肾组织中的细胞凋亡。结果显示 :①在肾组织中可检测到PDCD5的表达 ,肾小管的表达量(0.20±0.02)强于肾小球的表达量 (0.09±0.01,P<0.05) ;②在狼疮性肾炎患儿肾组织中 ,PDCD5在肾小管的表达量 (0.13±0.01)强于肾小球的表达量 (0.07±0.01 ,P<0.05) ,PDCD5在肾小球的表达与对照组相比差异无显著性 ,在肾小管的表达明显低于对照组(P<0.05) ;③狼疮性肾炎患儿肾组织中肾小球、肾小管的凋亡细胞数均明显高于对照组(P<0.05)。本研究用免疫组化的方法首次检测了新的凋亡相关基因PDCD5在肾组织中的表达及分布 ;并发现在狼疮性肾炎患儿肾组织中PDCD5在肾小球的表达与对照组相比差异无显著性 ;在肾小管 ,虽然凋亡细胞数增加 ,但PDCD5的表达却下降。 展开更多
关键词 凋亡相关基因 PDCD5 狼疮性肾炎 小儿 基因表达
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中波紫外线诱导HaCaT细胞凋亡中TF-1细胞凋亡相关基因19的表达 被引量:2
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作者 宋清华 狄春晖 +3 位作者 陈英玉 钟英诚 陈学荣 李世荫 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第9期506-508,共3页
目的:研究在中波紫外线(UVB)诱导正常永生化角质形成细胞(HaCaT)凋亡过程中,T细胞凋亡相关基因19(TFAR 19)的表达时相及位置。方法:使用流式细胞仪、膜联蛋白V(Annexin-V)、激光扫描共聚焦显微镜等方法进行研究。结果:在凋亡过程中,TFAR... 目的:研究在中波紫外线(UVB)诱导正常永生化角质形成细胞(HaCaT)凋亡过程中,T细胞凋亡相关基因19(TFAR 19)的表达时相及位置。方法:使用流式细胞仪、膜联蛋白V(Annexin-V)、激光扫描共聚焦显微镜等方法进行研究。结果:在凋亡过程中,TFAR 19逐渐向核周聚积,最后向核膜内移位,在核膜及其周围以及核内表达。 结论:在UVB诱导HaCaT细胞凋亡的早期和晚期过程中TFAR 19均有表达。 展开更多
关键词 T细胞凋亡相关基因 HACAT细胞 中波紫外线
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干扰素/维甲酸诱导细胞凋亡相关基因19表达与紫外线诱导的人晶状体上皮细胞凋亡的关系 被引量:2
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作者 王思敏 冯浩 +2 位作者 林婷婷 刘加勇 宁宏 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期358-361,共4页
背景长期暴露于紫外线照射的环境中可通过破坏细胞线粒体的跨膜电位等机制促进相应组织中的细胞凋亡,包括人晶状体上皮细胞(LECs)。干扰素/维甲酸诱导细胞凋亡相关基因-19(GRIM-19)位于线粒体呼吸链Ⅰ上,与紫外线照射诱导的LECs... 背景长期暴露于紫外线照射的环境中可通过破坏细胞线粒体的跨膜电位等机制促进相应组织中的细胞凋亡,包括人晶状体上皮细胞(LECs)。干扰素/维甲酸诱导细胞凋亡相关基因-19(GRIM-19)位于线粒体呼吸链Ⅰ上,与紫外线照射诱导的LECs凋亡过程是否有关尚不明确。目的探讨GRIM-19与长波紫外线照射诱导的人LECs损伤的关系。方法将人LECs系SRA01/04用常规培养方法在含质量分数10%胎牛血清的α-MEM培养液中进行培养,当细胞生长至对数生长期并达到80%融合时用长波紫外线照射,时间分别为5、10、15、20、25min,长波紫外线剂量分别为30、60、90、120、150mJ/cm^2,照射后继续培养1h,对照组细胞与实验组培养方法相同,但不用长波紫外线照射。采用流式细胞技术测定各组培养的凋亡率,应用Westernblot法检测各组培养上清液中GRIM-19蛋白的表达强度和相对表达量,采用单因素方差分析法对不同组间LECs凋亡率和GRIM-19蛋白相对表达量的差异进行比较,用Pearson积矩线性相关分析法评估LECs凋亡率与GRIM-19蛋白相对表达量的关系。结果不同剂量的紫外线照射培养的LECs后各组细胞凋亡率的总体比较差异有统计学意义(F=149.32,P〈0.01),其中60、90、120及150mJ/em。紫外线照射组与对照组比较,细胞凋亡率均明显增加,差异均有统计学意义(q=-17.02、-25.20、-29.41、-8.61,P〈0.01)。不同剂量的紫外线照射培养的LECs后细胞上清液中GRIM·19的表达明显增强,各组LECs上清液中GRIM-19的相对表达量(GRIM-19/β-actin)的总体差异有统计学意义(F=6.87,P〈0.05),其中60、90、120、150mJ/cm。紫外线照射组细胞上清液中GRIM-19的相对表达量分别为2.01±O.76、2.98±1.80、3.97±1.61和2.42±1.28,均明显高于对照组的0.56±0.23,差异均有统计学意义(q=-4.12、-5.04、-7.09、-3.85,P〈0.01)。Pearson积矩线性相关分析结果表明,LECs上清液中GRIM-19蛋白的相对表达量与LECs凋亡率呈正相关(r=0.7I,P〈0.01)。结论正常人LECs中可见GRIM-19的表达,但紫外线引起的人LECs凋亡过程与细胞中GRIM-19的表达上调-致;GRIM-19蛋白相对表达量与长波紫外线照射呈剂量依赖性。 展开更多
关键词 干扰素 维甲酸诱导细胞凋亡相关基因19 人晶状体上皮细胞 长波紫外线 细胞
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暴露性干眼症大鼠模型角膜上皮细胞凋亡相关基因的表达 被引量:11
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作者 田明霞 王传富 《眼科新进展》 CAS 2006年第10期747-750,共4页
目的探讨暴露性干眼症大鼠模型角膜上皮细胞凋亡相关基因的表达与组织损伤的关系。方法25只健康成年Wistar大鼠随机分为4组实验组和1组正常组,每组5只。实验组通过睑缘缝线机械性阻止大鼠瞬目,充分暴露各组大鼠角膜0.5h、6h、24h及1周后... 目的探讨暴露性干眼症大鼠模型角膜上皮细胞凋亡相关基因的表达与组织损伤的关系。方法25只健康成年Wistar大鼠随机分为4组实验组和1组正常组,每组5只。实验组通过睑缘缝线机械性阻止大鼠瞬目,充分暴露各组大鼠角膜0.5h、6h、24h及1周后,用角膜荧光素染色及SchirmerⅠ试验对实验组大鼠进行临床诊断;然后分别处死每组大鼠,取双眼角膜进行免疫组织化学染色,研究角膜组织中凋亡相关基因蛋白Bcl-2及Bax的表达。正常组大鼠不进行处理,处死后取双眼角膜标本按实验组同样步骤处理。结果不同实验组大鼠角膜上皮细胞Bax表达阳性细胞数与正常对照组相比增加,而Bcl-2表达阳性细胞数较对照组减少,且差异具有显著性(P<0.05);角膜上皮细胞Bax表达阳性细胞数与暴露时间呈正线性相关(r=0.76,P<0.05),而Bcl-2表达阳性细胞数与暴露时间呈负线性相关(r=-0.57,P<0.05)。结论暴露性干眼症角膜组织中上皮细胞凋亡可能是导致角膜上皮破坏进而功能丧失的原因之一,Bax增加及Bcl-2减少与角膜上皮细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 干眼症 动物模型 角膜 凋亡相关基因
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凋亡相关基因PNAS-2参与硫化砷抗APL细胞的研究 被引量:3
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作者 朱坚轶 顾春红 +3 位作者 陈芳源 滕晔 韩洁英 欧阳仁荣 《上海第二医科大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第5期443-446,共4页
目的探讨凋亡相关基因PNAS2在硫化砷抗急性早幼粒细胞白血病(APL)中的作用。方法应用基因表达谱芯片检测NB4细胞在10mg/L硫化砷作用前后的基因表达改变,RT-PCR方法验证基因表达谱芯片结果和检测白血病原代细胞中PNAS2基因的表达情况。结... 目的探讨凋亡相关基因PNAS2在硫化砷抗急性早幼粒细胞白血病(APL)中的作用。方法应用基因表达谱芯片检测NB4细胞在10mg/L硫化砷作用前后的基因表达改变,RT-PCR方法验证基因表达谱芯片结果和检测白血病原代细胞中PNAS2基因的表达情况。结果10mg/L硫化砷作用后的NB4细胞中,PNAS2基因表达特异性下调,且呈时间依赖性,类似变化在K562和U937细胞中未见;10mg/L硫化砷作用后2例M3患者的原代细胞PNAS2基因表达明显下调,1例M4患者原代细胞该基因表达未见明显改变。结论PNAS2基因可能是硫化砷抗APL的靶基因之一。 展开更多
关键词 凋亡相关基因 急性早幼粒细胞白血病 L细胞 硫化砷作用 基因表达谱芯片 NB4细胞 基因表达改变 原代细胞 RT-PCR U937细胞 特异性下调 时间依赖性 芯片检测 方法应用 表达情况 方法验证 K562 基因 APL 患者
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灵芪胶囊大鼠含药血清对人肺腺癌细胞A549凋亡相关基因C-myc与Survivin表达的影响 被引量:3
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作者 刚宏林 杨东光 苏云明 《医药导报》 CAS 2009年第5期574-577,共4页
目的观察灵芪胶囊(LQC)含药血清在体外对人肺腺癌A549细胞增殖及凋亡相关基因表达的影响。方法采用MTT比色法测定LQC含药血清对体外处理A549细胞株24,48,72,96h的增殖抑制率。采用RT-PCR检测A549细胞株C-myc和Survivin相关基因mRNA的表... 目的观察灵芪胶囊(LQC)含药血清在体外对人肺腺癌A549细胞增殖及凋亡相关基因表达的影响。方法采用MTT比色法测定LQC含药血清对体外处理A549细胞株24,48,72,96h的增殖抑制率。采用RT-PCR检测A549细胞株C-myc和Survivin相关基因mRNA的表达。Wright-Giemsa染色方法观察灵芪胶囊含药血清对肿瘤细胞形态的影响。结果不同浓度LQC含药血清对A549细胞增殖具有抑制作用,抑制作用均与浓度呈正相关。RT-PCR结果显示,Survivin基因的mRNA表达水平明显下降,而C-myc基因的mRNA表达水平显著增强。同时亦使肿瘤细胞的形态结构发生改变。结论LQC含药血清对A549细胞株增殖具有抑制作用,可能与调控相关凋亡基因的表达有关,这为LQC产生抗肿瘤生物学效应提供了理论依据。 展开更多
关键词 灵芪胶囊 血清药理学 A549细胞 凋亡相关基因
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凋亡相关基因表达与早期脑损伤时间关系研究 被引量:3
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作者 宋旭东 史为栋 秦启生 《法医学杂志》 CAS CSCD 2003年第2期78-80,共3页
目的 探讨脑挫伤早期细胞凋亡相关基因Bcl-2、Fas表达的变化规律与损伤时间关系。方法 运用光镜观察脑挫伤后脑组织的形态学变化,同时应用图像分析技术检测脑挫伤早期不同时程Bcl-2、Fas免疫组化染色平均光度值的变化规律。结果 伤后8h... 目的 探讨脑挫伤早期细胞凋亡相关基因Bcl-2、Fas表达的变化规律与损伤时间关系。方法 运用光镜观察脑挫伤后脑组织的形态学变化,同时应用图像分析技术检测脑挫伤早期不同时程Bcl-2、Fas免疫组化染色平均光度值的变化规律。结果 伤后8h在脑挫伤周围可见典型的凋亡神经细胞;伤后30min损伤灶周围神经细胞出现Bcl-2、Fas阳性表达,以后呈逐渐上升趋势且表达范围亦逐渐扩大,其中Bcl-2蛋白表达在伤后4h达高峰,随后呈下降的趋势,至伤后10~12h其表达程度与伤后1h相比无明显差异。结论检测细胞凋亡相关基因的表达可用于早期脑损伤时间的推断及生前与死后脑损伤的鉴别。 展开更多
关键词 凋亡相关基因 脑损伤 BCL-2基因 FAS基因 细胞 光镜 法医学鉴定
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凋亡相关基因pnas-2的表达谱分析 被引量:1
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作者 王海嵘 朱坚轶 +5 位作者 顾春红 钟华 钟济华 韩洁英 陈芳源 欧阳仁荣 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第2期282-285,共4页
为了确定凋亡相关基因pnas-2在正常组织及急性白血病患者组织中的表达谱,应用Northern blot检测了pnas-2在心脏、脑、胎盘、肺、肝脏、骨骼肌、肾脏、胰腺、脾脏、淋巴结、胸腺、白细胞、骨髓和胎肝等组织中的表达,应用实时PCR(real-tim... 为了确定凋亡相关基因pnas-2在正常组织及急性白血病患者组织中的表达谱,应用Northern blot检测了pnas-2在心脏、脑、胎盘、肺、肝脏、骨骼肌、肾脏、胰腺、脾脏、淋巴结、胸腺、白细胞、骨髓和胎肝等组织中的表达,应用实时PCR(real-time PCR)和Northemblot检测了该基因在急性白血病44份初发、9份未缓解、27份缓解、12份复发样本中的表达,并检测了pnas-2在31例恶性肿瘤患者癌组织及正常组织中的表达。结果表明,pnas-2基因除了在胎盘中表达外,在其他检测的组织中均无表达。pnas-2基因在初发,未CR和复发急性白血病患者中的表达显著高于CR和癌肿患者的癌组织及正常组织中的表达。在7例急性白血病患者的自身前后对照中,pnas-2的表达变化与病程演变有关,即初发时高表达,未CR时无明显改变,但在CR时显著下降,复发时表达又上升。结论:pnas-2的高表达在急性白血病中是特异的,可能是一种癌基因,并很可能参与了白血病的发病。 展开更多
关键词 凋亡相关基因 PNAS-2 急性白血病 基因
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暴露性干眼病大鼠模型结膜上皮细胞凋亡相关基因的表达 被引量:4
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作者 田明霞 王传富 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2007年第2期105-108,共4页
目的探讨暴露性干眼病大鼠模型结膜上皮细胞凋亡相关基因的表达与组织损伤的关系。方法25只健康成年Wistar大鼠随机分为4组实验组和1组正常组。实验结束分别处死每组大鼠,取双眼结膜进行免疫组织化学染色观察结膜组织中凋亡相关基因bax... 目的探讨暴露性干眼病大鼠模型结膜上皮细胞凋亡相关基因的表达与组织损伤的关系。方法25只健康成年Wistar大鼠随机分为4组实验组和1组正常组。实验结束分别处死每组大鼠,取双眼结膜进行免疫组织化学染色观察结膜组织中凋亡相关基因bax及Bcl-2的表达情况。结果各实验组大鼠结膜上皮细胞Bax表达阳性细胞数与正常组相比增加,而Bcl-2阳性表达细胞数较正常组减少,差异均有统计学意义(P<0.05);结膜上皮细胞Bax表达阳性细胞数与暴露时间呈正线性相关(r=0.76,P<0.05),而Bcl-2表达阳性细胞数与暴露时间呈负线性相关(r=-0.78,P<0.05)。结论暴露性干眼病结膜组织中上皮细胞凋亡可能是导致结膜上皮破坏进而功能丧失的原因之一,bax增加及Bcl-2减少与结膜上皮细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 干眼病 动物模型 结膜 凋亡相关基因
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应用cDNA微阵列技术研究胶质母细胞瘤凋亡相关基因的表达 被引量:2
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作者 肖新如 赵继宗 张懋植 《首都医科大学学报》 CAS 2005年第4期392-396,共5页
目的研究胶质母细胞瘤凋亡相关基因的表达。以探讨凋亡相关基因的异常表达在肿瘤的发生、发展过程中的作用。方法采用cDNA微阵列技术,研究胶质母细胞瘤与正常脑组织之间凋亡相关基因表达的差异。采用看家基因对杂交信号进行校正。差异大... 目的研究胶质母细胞瘤凋亡相关基因的表达。以探讨凋亡相关基因的异常表达在肿瘤的发生、发展过程中的作用。方法采用cDNA微阵列技术,研究胶质母细胞瘤与正常脑组织之间凋亡相关基因表达的差异。采用看家基因对杂交信号进行校正。差异大于1.5倍的基因视为差异有显著性意义,并从中选择6个基因采用RT-PCR进行验证。结果共有28个基因的表达存在差异,其中有17个基因在胶质母细胞瘤表达升高,11个表达下降。RT-PCR结果与基因芯片结果一致。结论众多凋亡相关基因参与了胶质母细胞瘤的发生和发展,其中部分基因如CRAF1、hHR23B等是新发现的与胶质母细胞瘤有关的基因。 展开更多
关键词 CDNA微阵列 胶质母细胞瘤 凋亡相关基因
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