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塞姆利基森林病毒的冷冻电镜结构研究
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作者 贾旭东 李锶铎 +2 位作者 于宏洋 张勤奋 何键 《电子显微学报》 北大核心 2025年第1期18-27,共10页
塞姆利基森林病毒(Semliki Forest virus,SFV)是一种典型的甲病毒,主要通过节肢动物作为媒介进行传播,对人类及多种哺乳动物构成潜在的感染威胁。然而当前针对SFV的结构生物学研究相对不足,限制了对其在病毒-宿主互作、入侵机制以及病... 塞姆利基森林病毒(Semliki Forest virus,SFV)是一种典型的甲病毒,主要通过节肢动物作为媒介进行传播,对人类及多种哺乳动物构成潜在的感染威胁。然而当前针对SFV的结构生物学研究相对不足,限制了对其在病毒-宿主互作、入侵机制以及病毒颗粒组装与成熟过程的认知。本研究采用冷冻电镜技术对SFV成熟颗粒的三维结构进行了高精度解析,并系统分析了囊膜蛋白E1和E2上的N-糖基化位点及二硫键,揭示了这些结构特征在维持病毒蛋白稳定性中的关键作用。这些发现对于阐明SFV的生物学特性、推动抗病毒药物研发及优化疫苗设计都具有重要意义。 展开更多
关键词 塞姆利基森林病毒 甲病毒 N-糖基化 二硫键 冷冻电镜
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冷冻电镜揭示长期低温保存的冰冻人血浆中全长补体C3仍可稳定存在
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作者 朱莉 武迪 武一 《电子显微学报》 北大核心 2025年第1期36-43,共8页
补体是血浆中存在的一组重要蛋白质,在机体遭受病原体感染或组织损伤时通过先天免疫途径被激活,发挥抗感染和清除损伤细胞的作用。补体C3是补体系统的核心成分,在三条补体激活途径中均起到至关重要的作用,且在血浆中的含量最为丰富。冰... 补体是血浆中存在的一组重要蛋白质,在机体遭受病原体感染或组织损伤时通过先天免疫途径被激活,发挥抗感染和清除损伤细胞的作用。补体C3是补体系统的核心成分,在三条补体激活途径中均起到至关重要的作用,且在血浆中的含量最为丰富。冰冻人血浆通常由健康志愿者献血后采集,通过迅速冷冻保存制备而成,广泛用于多种医学治疗。然而,关于冰冻人血浆的低温保存条件和时长对补体C3结构完整性的影响尚缺乏准确详细的评估。在本研究中,作者发现,冰冻人血浆在-20℃保存后转为-80℃的条件下保存长达5年,其中的补体C3组分仍能保持完整的结构,且通过冷冻电镜单颗粒重构达到了2.43Å的分辨率,其中ASN63和ASN917上发生的糖基化修饰亦可被解析。与已解析的C3晶体结构相比,RMSD值差异较大区域在α链末端的C345C结构域,与解析的ISG65-C3复合体冷冻电镜结构相比,C3部分的RMSD值差异较大处仅在C345C末端的一段α螺旋。结果表明,在严格的低温保存条件下,尽管保存时间较长,冰冻人血浆中的关键补体组分C3仍能保持结构完整性和稳定性,从而保障其生物学功能的发挥。由此推测,血浆中其他重要的补体组分在类似保存条件和时长下也可维持其天然构象。这一结论为实验室或工业中由冰冻人血浆提纯制备补体各组分蛋白时,对冰冻血浆的保存条件及期限的设定提供了一定的科学依据和参考。 展开更多
关键词 冰冻血浆 补体系统 补体C3 冷冻电镜 三维重构
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不同状态禽呼肠孤病毒的冷冻电镜结构研究
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作者 刘京路 高立 +6 位作者 王有望 祁小乐 张雪利 包珂岩 高玉龙 王笑梅 朱平 《电子显微学报》 北大核心 2025年第1期10-17,共8页
禽呼肠孤病毒(Avian reovirus,ARV)是一种双链RNA病毒,对家禽养殖业构成严重威胁。本文利用冷冻电镜技术解析了ARV病毒的完整病毒颗粒(virion)以及处于转录状态的病毒核心颗粒(T⁃core)的高分辨率三维结构。对比分析表明,ARV病毒virion和... 禽呼肠孤病毒(Avian reovirus,ARV)是一种双链RNA病毒,对家禽养殖业构成严重威胁。本文利用冷冻电镜技术解析了ARV病毒的完整病毒颗粒(virion)以及处于转录状态的病毒核心颗粒(T⁃core)的高分辨率三维结构。对比分析表明,ARV病毒virion和T⁃core颗粒的塔状突起蛋白λC存在明显结构差异,显示其在病毒转录过程中的重要作用。在病毒转录态核心颗粒中,作者发现σA蛋白与双链RNA存在较强结合,并确认了起关键作用的氨基酸残基。同时,分析了ARV病毒内部转录酶复合体RdRP以及基因组三维结构,获得了处于转录过程中ARV病毒核心颗粒内部基因组的三维分布. 展开更多
关键词 禽呼肠孤病毒 冷冻电镜 塔状突起 RDRP 双链RNA
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石墨烯载网在冷冻电镜样品制备中的应用研究
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作者 宋佶岭 张晨辉 +2 位作者 付韵桥 王宏伟 刘楠 《电子显微学报》 北大核心 2025年第1期106-114,共9页
在冷冻电镜结构解析过程中,样品制备是关键限速步骤之一,经常受到气液界面等问题困扰。石墨烯支撑膜能够富集生物样品颗粒、降低电子束照射导致的样品漂移和充电效应,并且具有较低的背景噪音,已经被应用于冷冻样品的制备,缓解气液界面... 在冷冻电镜结构解析过程中,样品制备是关键限速步骤之一,经常受到气液界面等问题困扰。石墨烯支撑膜能够富集生物样品颗粒、降低电子束照射导致的样品漂移和充电效应,并且具有较低的背景噪音,已经被应用于冷冻样品的制备,缓解气液界面等问题造成的影响,提高样品制备成功率。为了更广泛地将石墨烯载网用以冷冻电镜样品制备,本文介绍了石墨烯膜覆盖度的表征办法和对比了不同亲水化处理条件对石墨烯支撑膜产生的影响,着重针对使用石墨烯载网制备冷冻样品时出现的一些异常冰层现象进行了研究分析,并讨论了冷冻样品制备过程中溶液的扩散过程。该研究加深了对石墨烯表面液体分布和扩散过程的理解,为优化使用石墨烯载网用以冷冻电镜样品制备提供了基础。 展开更多
关键词 冷冻电镜 样品制备 石墨烯 生物大分子
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冷冻电镜结构揭示RNA修饰对核糖体组装和翻译的影响
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作者 张云阳 高宁 《电子显微学报》 北大核心 2025年第1期115-123,共9页
RNA修饰广泛存在于所有主要RNA类别(包括信使RNA、转运RNA和核糖体RNA)中,核糖体RNA(ribosomal RNA,rRNA)因其刚性的结构,为使用冷冻电镜(Cryogenic electron microscopy,Cryo-EM)技术探讨RNA修饰的结构与功能之间的关系提供了一个理想... RNA修饰广泛存在于所有主要RNA类别(包括信使RNA、转运RNA和核糖体RNA)中,核糖体RNA(ribosomal RNA,rRNA)因其刚性的结构,为使用冷冻电镜(Cryogenic electron microscopy,Cryo-EM)技术探讨RNA修饰的结构与功能之间的关系提供了一个理想的平台。rRNA的修饰主要包括甲基化修饰和假尿嘧啶化修饰,这些修饰不仅扩展了rRNA的化学和拓扑属性,还显著影响核糖体亚基的组装和翻译的效率。特别是在肽基转移酶中心(Peptidyl transferase center,PTC)的A-loop区域,rRNA修饰通过影响转运RNA(transfer RNA,tRNA)的选择和肽链的延伸,显著提高蛋白质合成效率。冷冻电镜结构分析在揭示RNA修饰对核糖体组装和翻译的影响方面发挥了重要作用。本综述基于生物化学数据和冷冻电镜结构,详细探讨了rRNA修饰的生物学重要性,并特别强调了A-loop在PTC中的功能和其修饰对核糖体性能的影响。研究表明,A-loop的修饰在原核细胞、真核细胞中显示出高度的保守性,这反映了其在确保蛋白质正确延伸中的关键作用。rRNA的修饰主要由小核仁RNA(small nucleolar RNA,snoRNA)介导,但也包括由独立的甲基转移酶(如RrmJ/Spb1家族)执行的2′-O-甲基化,RrmJ/Spb1家族蛋白识别组装中的核糖体并对A-loop进行修饰,成为核糖体组装过程中关键的质量控制检查点,本综述还分析了RrmJ/Spb1功能缺失或者突变对核糖体组装产生的严重影响。 展开更多
关键词 冷冻电镜 rRNA修饰 rRNA甲基化 肽基转移酶中心(PTC) A⁃loop 核糖体组装 翻译效率
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应用单张冷冻电镜显微照片解析近原子分辨率的单颗粒三维重构
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作者 杨梓 范潇 王宏伟 《电子显微学报》 北大核心 2025年第1期91-105,共15页
冷冻电镜单颗粒三维重构方法解析生物大分子结构通常需要收集大量的照片进行分析。本工作证明当冷冻样品质量足够好时,仅使用单张冷冻电镜显微照片上的蛋白颗粒图像就可以获得近原子级分辨率的单颗粒三维重构密度图,并分别解析了apoferr... 冷冻电镜单颗粒三维重构方法解析生物大分子结构通常需要收集大量的照片进行分析。本工作证明当冷冻样品质量足够好时,仅使用单张冷冻电镜显微照片上的蛋白颗粒图像就可以获得近原子级分辨率的单颗粒三维重构密度图,并分别解析了apoferritin和20S蛋白酶体的三维结构。研究发现,由于蛋白分子颗粒在样品中Z轴不同位置的分布和电子显微镜的像散作用对单张照片中衬度传递函数零点缺失形成了综合补偿效应,从而在单颗粒三维重构中有效恢复了空间频率全域内的结构信息。本研究通过分析不同累计曝光剂量数据的三维重构发现,保存无损高频信息以及足够角度搜索的低频信息的最低辐照剂量其实远低于当前通用的累积曝光量。据此,本工作估算了完成正确高分辨率三维结构解析所需要的最低辐照剂量以及最小颗粒数。本工作加深了我们对冷冻电镜数据信号在图像中保存的理解,为开发更好的冷冻电镜数据采集策略、更好地保存完整高频信号提供了实验上的启示。 展开更多
关键词 冷冻电镜(Cryo⁃EM) 单颗粒分析(SPA) 衬度传递函数(CTF) 信噪比(SNR)
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CryoSeek(酷寻)——利用冷冻电镜开启结构生物学发现的新范式
7
作者 王彤彤 李张强 颜宁 《电子显微学报》 北大核心 2025年第1期136-143,共8页
随着冷冻电镜技术的突破以及AI辅助的结构预测和自动模型搭建算法的发展,结构生物学正在经历由目标结构解析到结构引导的未知生物大分子发现的范式转变。本综述回顾了冷冻电镜的发展历史,并介绍CryoSeek(酷寻)研究策略:利用冷冻电镜探... 随着冷冻电镜技术的突破以及AI辅助的结构预测和自动模型搭建算法的发展,结构生物学正在经历由目标结构解析到结构引导的未知生物大分子发现的范式转变。本综述回顾了冷冻电镜的发展历史,并介绍CryoSeek(酷寻)研究策略:利用冷冻电镜探索自然环境中完全未知的生物大分子结构。作者从清华大学的荷塘采集水样作为CryoSeek研究的起点,经过过滤和富集后,通过冷冻电镜观察到多种纤维结构,并获得了两种相似螺旋TLP-1a/b的高分辨率图谱,其原子模型由AI辅助的CryoNet自动搭建。结构分析表明TLP-1a/b通过供体链交换模式组装。结构比对和序列分析显示TLP-1a/b可能是未鉴定的细菌菌毛。以上研究表明高分辨率结构解析引导并推动了未知生物大分子的识别,标志着结构生物学研究的新兴范式的建立。 展开更多
关键词 冷冻电镜 结构生物学 CryoSeek 纤维 供体链交换
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转运必需内体分选复合物螺旋纤丝Vps24⁃Vps2的冷冻电镜结构研究
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作者 刘德生 李耀旺 孙珊 《电子显微学报》 北大核心 2025年第1期28-35,共8页
转运必需内体分选复合物-Ⅲ(endosomal sorting complex required for transport-Ⅲ,ESCRT-Ⅲ)介导了一系列细胞膜重塑事件,包括多囊体的形成、细胞分裂和病毒释放等。这些过程的关键步骤之一是将ESCRT-Ⅲ蛋白亚基组装成纤丝状结构。在... 转运必需内体分选复合物-Ⅲ(endosomal sorting complex required for transport-Ⅲ,ESCRT-Ⅲ)介导了一系列细胞膜重塑事件,包括多囊体的形成、细胞分裂和病毒释放等。这些过程的关键步骤之一是将ESCRT-Ⅲ蛋白亚基组装成纤丝状结构。在本研究中,作者利用冷冻电镜技术解析了由Vps24和Vps2融合蛋白(Vps24-Vps2)形成的双链螺旋纤丝的结构,分辨率为4.07A。在该结构中,呈伸展构象的Vps24-Vps2单体首先形成反向结合的二聚体,二聚体之间再错位结合形成一股螺旋,两股螺旋互相缠绕最终形成纤丝。该结构为理解ESCRT-Ⅲ丝状结构组装以及解聚过程提供了结构基础。 展开更多
关键词 转运必需内体分选复合物 ESCRT Vps24 Vps2 冷冻电镜结构
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岩土材料中冰分布状态的冷冻电镜表征方法
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作者 王子振 王晓康 +3 位作者 申凯翔 苏捷 赵志强 周卫东 《实验室研究与探索》 CAS 北大核心 2024年第2期8-12,114,共6页
为从微观角度定量描述冰在岩土材料中的分布特征,基于冷冻电镜技术提出了一种微观尺度的实验表征方法。针对不同冰饱和度人造岩芯样品的二次电子图像和能谱分析图,通过元素含量分布、升华前后图像对比确认了冰在岩土材料中的分布状态。... 为从微观角度定量描述冰在岩土材料中的分布特征,基于冷冻电镜技术提出了一种微观尺度的实验表征方法。针对不同冰饱和度人造岩芯样品的二次电子图像和能谱分析图,通过元素含量分布、升华前后图像对比确认了冰在岩土材料中的分布状态。随着冰饱和度的增加,骨架孔隙被冰填充、骨架颗粒表面被冰包裹区域增大,样品断面更密实平整,岩土骨架的堆积结构特征变弱。在背散射电子图像中,冰的图像比岩土骨架亮度低、灰度高,基于此构建了冰饱和度的数字图像计算方法。该方法计算的升华前冰饱和度与样品预制冰饱和度偏差小于5%,验证了其可靠性。 展开更多
关键词 岩土材料 冷冻电镜 冰分布状态 数字图像分析
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冷冻电镜观察固态锂电池界面 被引量:1
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作者 李伟萍 翁素婷 +3 位作者 方遒 苏东 王兆翔 王雪锋 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期86-95,共10页
固态锂电池(SSLBs)有望兼顾高能量密度和高安全性,是未来电池领域的重要发展方向。固态电解质(SSE)与电极材料之间存在界面阻抗大、相容性差等问题,严重地制约着它的发展。然而,由于辐照敏感特性,难以直接采用常规透射电子显微镜(TEM)... 固态锂电池(SSLBs)有望兼顾高能量密度和高安全性,是未来电池领域的重要发展方向。固态电解质(SSE)与电极材料之间存在界面阻抗大、相容性差等问题,严重地制约着它的发展。然而,由于辐照敏感特性,难以直接采用常规透射电子显微镜(TEM)观察界面结构。冷冻电镜(Cryo⁃EM)可以有效地缓解辐照损伤,提供更准确、真实的结构信息,有助于深入理解界面微观结构与SSLBs电化学性能之间的构效关系。本文综述了Cryo⁃EM用于观测SSLBs界面的晶体结构和化学组成,揭示了界面形成和演化机制以及SSLBs的失效机制。最后展望了Cryo⁃EM在表征SSLBs界面所面临的挑战和未来的研究方向。Cryo⁃EM在SSLBs界面研究中发挥越来越重要的作用,逐渐成为推动高性能SSLBs发展的必备技术。 展开更多
关键词 固态锂电池(SSLBs) 冷冻电镜(cryo-em) 固态电解质界面相(SEI) 固态电解质(SSE) 正极电解质界面层(CEI)
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冷冻扫描电镜制样方法及其在含水样品中的应用 被引量:3
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作者 莫家媚 张少鸿 +3 位作者 卢思 付娟 陈晓丽 苏秋成 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期231-239,共9页
常规扫描电镜要求所观察的样品必须干燥、无水,而一些含水样品在干燥过程中会发生结构变化,无法真实反映样品的结构信息。冷冻扫描电镜无需对样品进行干燥处理,可以直接分析含水样品表面、界面和内部结构,是研究高度含水样品的强有力工... 常规扫描电镜要求所观察的样品必须干燥、无水,而一些含水样品在干燥过程中会发生结构变化,无法真实反映样品的结构信息。冷冻扫描电镜无需对样品进行干燥处理,可以直接分析含水样品表面、界面和内部结构,是研究高度含水样品的强有力工具。样品的制样方法在冷冻扫描电镜技术中占有重要地位,它直接关系到样品真实形貌特征的反映和对超微结构的正确解读。本文综述了冷冻扫描电镜的制样方法,并阐述冷冻扫描电镜技术在天然气水合物、微生物、乳液、水凝胶、动植物等含水样品中的应用。 展开更多
关键词 冷冻扫描电镜 制样方法 含水样品 应用
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原位冷冻电镜技术和可视蛋白质组学前沿 被引量:1
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作者 李宽莹 王闻雪 +2 位作者 朱赟 薛亮 孙飞 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2024年第10期2456-2477,共22页
近年来,随着原位冷冻电镜技术和人工智能技术的不断发展,结构生物学的研究模式发生了重大转变。结构解析不再局限于分离提纯的单一生物大分子,而是在细胞甚至组织内原位直接解析生物大分子的高分辨率结构,并对亚细胞区域整体分子景观进... 近年来,随着原位冷冻电镜技术和人工智能技术的不断发展,结构生物学的研究模式发生了重大转变。结构解析不再局限于分离提纯的单一生物大分子,而是在细胞甚至组织内原位直接解析生物大分子的高分辨率结构,并对亚细胞区域整体分子景观进行结构探索,从而更深刻地理解细胞与组织内生命活动的分子机制。通过展示细胞内不同蛋白质复合物的精细原位结构,可以进一步生成蛋白质组的可视化定量空间分子结构功能图谱,即可视蛋白质组学。以原位冷冻电镜技术为代表的新技术能够在空间水平阐明细胞内蛋白质组的三维相互作用网络,促进从整体上系统性地理解细胞内生物大分子结构功能与互作机制。为推动中国原位冷冻电镜技术和可视蛋白质组学的发展,本文总结了其研究模式和最新前沿进展,结合具体实例展示了新概念与新技术的先进性,并对发展前景进行了展望。 展开更多
关键词 结构生物学 细胞生物学 系统生物学 冷冻电镜 冷冻电子断层成像 可视蛋白质组学 子断层结构分析 冷冻光电关联 人工智能
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一种多尺度图像融合的冷冻电镜颗粒挑选方法
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作者 何睦 钮焱 李军 《计算机应用与软件》 北大核心 2024年第9期250-256,共7页
当前主流的冷冻电镜颗粒挑选方法往往需要大量人工生成的训练集或者优质颗粒模板,或者颗粒挑选过程极为复杂。为了提高冷冻电镜颗粒挑选的效率,简化颗粒挑选流程,提出一种自动挑选颗粒方法,在图像预处理阶段使用基于Lanczos采样图像融... 当前主流的冷冻电镜颗粒挑选方法往往需要大量人工生成的训练集或者优质颗粒模板,或者颗粒挑选过程极为复杂。为了提高冷冻电镜颗粒挑选的效率,简化颗粒挑选流程,提出一种自动挑选颗粒方法,在图像预处理阶段使用基于Lanczos采样图像融合方法提高图像质量,随后使用基于最大类间方差的图像阈值分割方法分离颗粒与背景,实现颗粒挑选。在EMPAIR公共数据集的实验结果表明,该方法与其他方法相比,具有更高的召回率与精确率。 展开更多
关键词 冷冻电镜 颗粒挑选 Lanczos采样 图像融合 阈值分割
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一种用于冷冻电镜样品装载的工作台
14
作者 饶桂波 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期215-218,共4页
本文介绍一种自行设计用于冷冻电镜样品装载的工作台。在保持操作区域相对低温及低气流扰动下,其可以将湿度降至10%以内。在该操作台里完成装载的冷冻样品,几乎没有冰晶污染,可用于冷冻电镜高分辨数据采集。
关键词 冷冻电镜 样品装载 冰晶污染
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南方科技大学冷冻电镜中心建设与管理
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作者 马晓旻 和思淼 +3 位作者 吴静 高远瞩 许淑嫚 王培毅 《实验室研究与探索》 CAS 北大核心 2024年第9期213-218,240,共7页
近十年来,300 kV冷冻电镜已成为生物大分子结构解析、材料形貌及成分分析的有力工具。南方科技大学冷冻电镜中心是国内拥有该类设备最多的科研实验室,而且是国内首家集中化、自动化、可视化管理的冷冻电镜中心。它的建成填补了中国南方... 近十年来,300 kV冷冻电镜已成为生物大分子结构解析、材料形貌及成分分析的有力工具。南方科技大学冷冻电镜中心是国内拥有该类设备最多的科研实验室,而且是国内首家集中化、自动化、可视化管理的冷冻电镜中心。它的建成填补了中国南方地区无高端冷冻电镜的历史空白。结合学校冷冻电镜中心大型仪器设备的状况、开放共享管理系统及运行模式,从管理框架和开放共享等方面探讨了该中心的管理及运行机制,为粤港澳大湾区结构生物学领域发展提供了重要支撑。 展开更多
关键词 大型仪器设备平台 开放共享 冷冻电镜 分级管理
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基于冷冻电镜无倾转成像数据的新型蛋白质原位结构解析方法
16
作者 赵明洁 曹端方 章新政 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2024年第10期2418-2429,共12页
与体外纯化的蛋白质复合物相比,细胞内处于工作状态的蛋白质复合物往往更为完整,并且其三维结构处于完全生理的构象,这对于理解蛋白质复合物在生命活动中发挥重要功能的结构基础尤为关键,也可以为药物设计等提供更精确的靶点信息。直接... 与体外纯化的蛋白质复合物相比,细胞内处于工作状态的蛋白质复合物往往更为完整,并且其三维结构处于完全生理的构象,这对于理解蛋白质复合物在生命活动中发挥重要功能的结构基础尤为关键,也可以为药物设计等提供更精确的靶点信息。直接在细胞内解析蛋白质复合物的三维结构也被称为蛋白质的细胞原位结构解析,而冷冻电镜电子断层重构技术是原位结构解析的关键技术,但是电子断层重构技术的序列倾转数据采集通量低、数据处理较为繁琐,并且达到准原子分辨率对样品有特殊要求,这些问题成为了限制原位结构解析分辨率和实际应用的瓶颈。近年来,一种基于单张无倾转数据的蛋白质原位结构解析方法发展迅速,可以高通量地对细胞中的蛋白质复合物进行高分辨率结构解析,本综述将分析这类方法的原理,讨论这个方法相较于传统断层重构方法的优缺点,并对蛋白质的细胞原位结构解析进行展望。希望可以通过这篇综述,帮助结构生物学科研人员更好地选择合适的工具。 展开更多
关键词 蛋白质原位重构 冷冻电镜原位结构解析 isSPA滤波 无倾转数据 高通量
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冷冻扫描电镜及其在生命科学研究中的应用 被引量:21
17
作者 肖媛 李婷婷 +1 位作者 周芳 左艳霞 《电子显微学报》 CAS CSCD 2015年第5期447-451,共5页
冷冻扫描电镜基于扫描电镜的超低温冷冻制样及传输技术发展而来,具有能在高真空状态下观察含水样品、分辨率高、制样简单快速、可对样品进行断裂刻蚀等优点,是生命科学研究的有力工具,尤其适合柔软样品的成像和监测冰冻环境对组织和细... 冷冻扫描电镜基于扫描电镜的超低温冷冻制样及传输技术发展而来,具有能在高真空状态下观察含水样品、分辨率高、制样简单快速、可对样品进行断裂刻蚀等优点,是生命科学研究的有力工具,尤其适合柔软样品的成像和监测冰冻环境对组织和细胞的影响。能否获得高质量的冷冻扫描电镜图像,取决于样品制备和观察条件是否合理和优化,要求操作人员能够快速高效地根据样品选择操作条件、捕捉快速变化的样品表面信息。 展开更多
关键词 冷冻扫描电镜 含水样品 低温冷冻制样
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冷冻电镜单颗粒技术解析生物大分子结构综述 被引量:9
18
作者 张世超 欧阳燕 +1 位作者 刘善辉 朱莉 《生物学杂志》 CAS CSCD 2017年第3期74-77,共4页
冷冻电镜单颗粒技术是从20世纪80年代发展起来的结构生物学新技术,特别是最近几年,由于高分辨成像设备的应用以及图像处理方法的改进,该领域取得了革命性的技术突破,分辨率达到原子水平,迅速发展成为结构生物学新的主流研究技术,尤其适... 冷冻电镜单颗粒技术是从20世纪80年代发展起来的结构生物学新技术,特别是最近几年,由于高分辨成像设备的应用以及图像处理方法的改进,该领域取得了革命性的技术突破,分辨率达到原子水平,迅速发展成为结构生物学新的主流研究技术,尤其适合于研究生物大分子复合物的结构。简述了冷冻电镜单颗粒技术解析生物大分子结构的技术流程、最新技术进步以及未来发展方向。 展开更多
关键词 冷冻电镜 单颗粒 三维重构 蛋白质结构
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混合纤维素微孔滤膜用于液体藻类的冷冻扫描电镜样品制备 被引量:8
19
作者 肖媛 周芳 +2 位作者 李婷婷 乔志仙 左艳霞 《电子显微学报》 CAS CSCD 2017年第1期71-75,共5页
为了优化针对液体培养藻类细胞的冷冻扫描电镜制样条件,以铜绿微囊藻和蛋白核小球藻为材料,比较了混合纤维素微孔滤膜(混合膜)和滤纸对藻细胞的富集作用以及冷冻扫描电镜观察效果。结果表明:混合膜的孔隙较小且孔径分布均匀,正反两面均... 为了优化针对液体培养藻类细胞的冷冻扫描电镜制样条件,以铜绿微囊藻和蛋白核小球藻为材料,比较了混合纤维素微孔滤膜(混合膜)和滤纸对藻细胞的富集作用以及冷冻扫描电镜观察效果。结果表明:混合膜的孔隙较小且孔径分布均匀,正反两面均能有效吸附藻细胞。与滤纸相比,混合膜上吸附的藻细胞数量较多,细胞形态饱满,无皱缩变形,成像效果好。混合膜比滤纸更适合于微小藻类液体样品的冷冻扫描电镜样品制备。 展开更多
关键词 冷冻扫描电镜技术 混合纤维素微孔滤膜 藻类
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电镜冷冻蚀刻技术在肌营养不良症研究中的应用 被引量:5
20
作者 钟秀容 陈文列 +3 位作者 陈莲云 王柠 吴翊饮 慕容慎行 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2000年第1期89-90,共2页
目的:探讨电镜冷冻蚀刻技术在Duchenne 型肌营养不良症( DMD) 研究中的应用。方法:电镜观察DMD 及正常对照的骨骼肌和红细胞的冷冻蚀刻样品。结果:DMD 患者红细胞与肌细胞一样,其细胞膜中的蛋白颗粒显著减少。... 目的:探讨电镜冷冻蚀刻技术在Duchenne 型肌营养不良症( DMD) 研究中的应用。方法:电镜观察DMD 及正常对照的骨骼肌和红细胞的冷冻蚀刻样品。结果:DMD 患者红细胞与肌细胞一样,其细胞膜中的蛋白颗粒显著减少。结论:①冷冻蚀刻技术有助于DMD 的诊断,其细胞膜存在缺陷;②可取红细胞代替肌组织进行诊断。 展开更多
关键词 电镜冷冻蚀刻 肌营养不良 骨骼肌 红细胞
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