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内皮抑素基因对裸鼠移植骨肉瘤的抑制作用 被引量:4
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作者 林建华 张俐 +1 位作者 吴朝阳 黄宇 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2008年第2期120-124,共5页
目的:探讨内皮抑素(endostatin,ES)基因对裸鼠骨肉瘤细胞UMR106移植瘤的抑制作用。方法:携带ES基因重组质粒体外扩增后,应用脂质体法转染骨肉瘤细胞UMR106,Zeocin抗性筛选得到ES-UMR106细胞。MTT法观察ES基因对肿瘤细胞增殖的影响,ELIS... 目的:探讨内皮抑素(endostatin,ES)基因对裸鼠骨肉瘤细胞UMR106移植瘤的抑制作用。方法:携带ES基因重组质粒体外扩增后,应用脂质体法转染骨肉瘤细胞UMR106,Zeocin抗性筛选得到ES-UMR106细胞。MTT法观察ES基因对肿瘤细胞增殖的影响,ELISA法检测转染后肿瘤细胞的ES分泌情况。MTT法观察ES基因对血管内皮细胞增殖能力的影响。应用ES-UMR106和UMR106细胞制作裸鼠皮下移植瘤模型,观察两组动物移植瘤生长情况、瘤组织的病理变化及肺转移的情况。结果:ES基因转染不影响UMR106细胞的增殖能力;ES-UMR106细胞可表达有生物活性的ES,转染后48hES在培养液中超过350ng/ml。ES-UMR106细胞分泌的ES可明显抑制血管内皮细胞增殖。与UMR106细胞相比,ES-UMR106细胞在裸鼠接种的移植瘤生长速度缓慢、包膜完整,病理组织学显示瘤体内血管稀少,肿瘤细胞广泛坏死;UMR106细胞移植瘤裸鼠肺组织出现转移灶(2/8),ES-UMR106细胞移植瘤裸鼠无肺转移灶。结论:携带ES基因重组质粒转染骨肉瘤UMR106细胞后可抑制该骨肉瘤细胞移植瘤的生长和转移。 展开更多
关键词 骨肉瘤 内皮抑素基因 基因治疗 抗血管治疗
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人内皮抑素基因的克隆与序列分析 被引量:2
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作者 吕茂民 马平 +1 位作者 贾莉玮 章金刚 《生物技术通报》 CAS CSCD 2003年第3期37-39,共3页
目的 :克隆与鉴定人内皮抑素基因功能区片段。方法 :采用反转录聚合酶链反应 (RT PCR)的方法 ,从人胎肝总RNA中扩增人内皮抑素基因 ,将其克隆入 pGEM T载体 ,命名为pT hES ,并应用A377自动序列分析仪进行序列分析。结果 :成功克隆了人... 目的 :克隆与鉴定人内皮抑素基因功能区片段。方法 :采用反转录聚合酶链反应 (RT PCR)的方法 ,从人胎肝总RNA中扩增人内皮抑素基因 ,将其克隆入 pGEM T载体 ,命名为pT hES ,并应用A377自动序列分析仪进行序列分析。结果 :成功克隆了人内皮抑素基因 ,经序列分析表明 ,所克隆的基因序列正确。这为利用基因工程技术生产重组蛋白奠定了基础。 展开更多
关键词 内皮抑素基因 克隆 序列分析 反转录聚合酶链反应
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携带人内皮抑素基因的重组腺相关病毒感染对人脐静脉内皮细胞增生的影响 被引量:1
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作者 汤明芳 于健 +1 位作者 钟彦彦 陆晓和 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2010年第6期522-525,550,共5页
目的评价携带人内皮抑素(endostatin,ES)基因的重组腺相关病毒(rAAV)感染对人脐静脉内皮细胞(ECV304细胞)增生的影响。方法以不同感染复数的rAAV-ES感染ECV304细胞,Western blotting检测细胞裂解液中ES蛋白的表达,ELISA法检测ES蛋白的... 目的评价携带人内皮抑素(endostatin,ES)基因的重组腺相关病毒(rAAV)感染对人脐静脉内皮细胞(ECV304细胞)增生的影响。方法以不同感染复数的rAAV-ES感染ECV304细胞,Western blotting检测细胞裂解液中ES蛋白的表达,ELISA法检测ES蛋白的分泌情况,流式细胞仪分析感染后ECV304的细胞周期,MTT法检测ECV304增殖情况。结果感染了rAAV-ES的ECV304细胞可表达并分泌ES蛋白,表达高峰在感染后96h,表达量为96.93μg·L-1;感染后的ECV304细胞增殖受到抑制,流式细胞仪分析其周期中G0与G1期细胞比例明显增加,S期细胞比例显著减少;MTT检测显示以感染复数为5×105vg.cell-1感染96h时对ECV304细胞增殖的抑制率最高(54.54±1.37)%。结论 rAAV-ES感染ECV304细胞后有高水平的ES蛋白表达并能显著抑制ECV304细胞的增殖。 展开更多
关键词 重组腺相关病毒 内皮抑素基因 感染 脐静脉内皮细胞 增生
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腺病毒载体介导的内皮抑素基因的体外生物活性及其对小鼠黑色素瘤形成的影响
4
作者 曹瑞华 廖万清 +1 位作者 温海 刘翠杰 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期158-160,共3页
新生血管形成对肿瘤的生长具有重要意义。因此抑制血管生成成为肿瘤治疗研究的热点之一。目前发现内皮抑素的抗肿瘤血管生成作用最强,而且内皮抑素基因治疗避免了直接注射其蛋白形式的诸多缺点。本研究探讨腺病毒载体介导的内皮抑素基因... 新生血管形成对肿瘤的生长具有重要意义。因此抑制血管生成成为肿瘤治疗研究的热点之一。目前发现内皮抑素的抗肿瘤血管生成作用最强,而且内皮抑素基因治疗避免了直接注射其蛋白形式的诸多缺点。本研究探讨腺病毒载体介导的内皮抑素基因(Ad—mES)的体外生物活性及其对小鼠黑色素瘤形成的影响,以期为高度恶性、易转移的黑色素瘤提供新的治疗方向。 展开更多
关键词 腺病毒载体 内皮抑素基因 黑色素瘤
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内皮抑素基因联合重组干扰素-α蛋白对卵巢癌抑制作用的研究 被引量:3
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作者 魏增涛 卢爱英 +5 位作者 王晓燕 马春红 孙汶生 张艳 朱法良 郭春 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期594-594,595-596,I0001,共4页
目的:探讨联合应用内皮抑素基因和重组干扰素-α(IFN-α)蛋白对鼠卵巢癌移植瘤的抑制作用。方法:利用人卵巢上皮癌细胞株(3AO细胞)制备卵巢癌移植瘤动物模型,以重组IFN-α和脂质体介导分泌型内皮抑素重组载体基因(pVAX-sEn)瘤内及瘤周注... 目的:探讨联合应用内皮抑素基因和重组干扰素-α(IFN-α)蛋白对鼠卵巢癌移植瘤的抑制作用。方法:利用人卵巢上皮癌细胞株(3AO细胞)制备卵巢癌移植瘤动物模型,以重组IFN-α和脂质体介导分泌型内皮抑素重组载体基因(pVAX-sEn)瘤内及瘤周注射,每周2次,测量瘤体大小,流式细胞仪检测pVAX-sEn基因转染对肿瘤细胞细胞周期的影响,免疫组化法检测肿瘤微血管密度。结果:联合注射组瘤体体积显著小于pVAX-sEn单用组(P<0.01);联合治疗组肿瘤细胞凋亡率为18.5%,高于pVAX-sEn单用组;联合治疗组肿瘤细胞坏死明显,血管较少,肿瘤微血管密度为3.16±1.12,明显少于pVAX-sEn单用组(P<0.01)。结论:脂质体介导pVAX-sEn瘤内注射可有效抑制卵巢癌移植瘤的生长,联合应用重组IFN-α效果更显著。 展开更多
关键词 内皮抑素 分泌型内皮抑素重组载体基因 干扰素 卵巢癌
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人内皮抑素基因治疗卵巢癌裸鼠移植瘤的研究
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作者 蒋茂荣 孙怀昌 李厚达 《中国比较医学杂志》 CAS 2005年第1期3-6,共4页
目的 探索人内皮抑素基因治疗人肿瘤的可行性。方法 将人卵巢癌 (SKOV3)瘤组织或其细胞移植于裸鼠皮下 ,建立成裸鼠移植瘤模型 ;用高保真PCR从含有人内皮抑素基因的重组质粒中扩增出与人生长激素信号肽序列融合的人内皮抑素编码区 ,... 目的 探索人内皮抑素基因治疗人肿瘤的可行性。方法 将人卵巢癌 (SKOV3)瘤组织或其细胞移植于裸鼠皮下 ,建立成裸鼠移植瘤模型 ;用高保真PCR从含有人内皮抑素基因的重组质粒中扩增出与人生长激素信号肽序列融合的人内皮抑素编码区 ,将此基因克隆入pGEM_T载体中 ,经序列测定证明其序列的正确性 ;将此基因克隆入真核表达载体pcDNA3,经免疫荧光试验证明能在COS_1细胞中表达。结果 用重组质粒注射已形成移植瘤的裸鼠 ,能显著抑制移植瘤的生长 ;将基因注射与肿瘤移植同时进行 ,基因注射不仅能部分抑制移植瘤的形成 ,而且能抑制移植瘤的生长。结论 本研究构建的分泌型表达人内皮抑素的重组质粒可以用于肿瘤的基因治疗研究。 展开更多
关键词 治疗 裸鼠移植瘤 肿瘤 注射 内皮抑素基因 重组质粒 卵巢癌 T载体 基因克隆 人生长激素
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内皮抑素及内皮抑素基因抗肿瘤的分子影像学研究进展 被引量:1
7
作者 张贺诚 陈正光 《放射学实践》 北大核心 2009年第12期1380-1382,共3页
关键词 抗肿瘤血管生成治疗 内皮抑素基因 分子影像学 新生血管形成 抑制肿瘤生长 影像检查技术 肿瘤新生血管 生长因子
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肿瘤特异增殖腺病毒CNHK200-hEndo的构建及其抗裸鼠肺癌移植瘤疗效 被引量:1
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作者 施军霞 苏长青 +1 位作者 李林芳 钱其军 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2008年第2期176-178,共3页
目的:构建一种携带抗肿瘤血管生成基因Endostatin的新型肿瘤基因-病毒治疗系统CNHK200-hEndo,观察其对人肺癌细胞裸鼠移植瘤的治疗效果。方法:克隆人抗血管生成基因Endostatin,利用病毒重组技术将该基因插入肿瘤特异性增殖腺病毒CNHK20... 目的:构建一种携带抗肿瘤血管生成基因Endostatin的新型肿瘤基因-病毒治疗系统CNHK200-hEndo,观察其对人肺癌细胞裸鼠移植瘤的治疗效果。方法:克隆人抗血管生成基因Endostatin,利用病毒重组技术将该基因插入肿瘤特异性增殖腺病毒CNHK200的基因组中,扩增并纯化CNHK200-hEndo病毒。建立裸鼠肺癌细胞移植瘤模型,观察CNHK200-hEndo抗肿瘤的效果,并与非增殖病毒Ad-hEndo对照。结果:成功构建一种新型的基因-病毒治疗系统CNHK200-hEndo,其E1b55kDa蛋白表达缺失。CNHK200-hEndo能在肿瘤细胞内大量增殖并高效表达Endostatin蛋白,表达量明显高于非增殖病毒Ad-hEndo(P<0.05)。动物实验证实,CNHK200-hEndo对人类肺癌细胞的裸鼠移植瘤模型具有抑制肿瘤生长的疗效,与Ad-hEndo和空白对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:构建的基因-病毒治疗系统CNHK200-hEndo能在肺癌细胞中增殖复制,提高Endostatin蛋白的表达,明显抑制肺癌细胞移植瘤的生长。 展开更多
关键词 腺病毒 肺癌 基因治疗 内皮抑素基因 血管生成
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