内源性绵羊肺腺瘤病毒与宿主共进化研究进展 被引量：1

1

作者 张月梅 刘淑英 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第7期72-76,共5页

近年来的研究表明,内源性逆转录病毒作为哺乳动物基因组的重要组成部分,在与宿主共进化过程中发挥重要作用。对内源性绵羊肺腺瘤病毒的研究,为揭示哺乳动物内源性逆转录病毒与宿主共进化关系提供了一个独特的模型系统。内源性绵羊肺腺... 近年来的研究表明,内源性逆转录病毒作为哺乳动物基因组的重要组成部分,在与宿主共进化过程中发挥重要作用。对内源性绵羊肺腺瘤病毒的研究,为揭示哺乳动物内源性逆转录病毒与宿主共进化关系提供了一个独特的模型系统。内源性绵羊肺腺瘤病毒在与宿主共进化过程中不断的增强自身的宿主适应性,通过取代宿主原有的促进孕体发育及胎盘形成的机制而发挥作用。通过分析近年来国内外学者对于内源性逆转录病毒一些相关研究,从内源性逆转录病毒在进化中可能的作用、内源性绵羊肺腺瘤病毒的分类、基因结构特点、在与宿主共进化过程中可能的作用、对孕期激素的影响及与外源性绵羊肺腺瘤病毒相互作用关系等方面进行了综述。 展开更多

关键词 内源性绵羊肺腺瘤病毒 共进化 孕体发育

在线阅读 下载PDF 职称材料

绵羊肺腺瘤病及其诊断技术研究进展

2

作者 敬晓棋 萨如拉 +3 位作者 陈佳欣 韩杰 李晓龙 李河林 《榆林学院学报》 2025年第2期29-32,共4页

绵羊肺腺瘤病是引起羊传染性肺脏肿瘤性疾病的重要病原之一,是以渐进性消瘦、湿性咳嗽、水样鼻漏和呼吸性细支气管上皮的腺瘤样增生等为特征的呼吸道疾病。该病在我国多个地区广泛流行,危害羊产业的经济效益和养羊业健康发展。对绵羊肺... 绵羊肺腺瘤病是引起羊传染性肺脏肿瘤性疾病的重要病原之一,是以渐进性消瘦、湿性咳嗽、水样鼻漏和呼吸性细支气管上皮的腺瘤样增生等为特征的呼吸道疾病。该病在我国多个地区广泛流行,危害羊产业的经济效益和养羊业健康发展。对绵羊肺腺瘤病的流行病学、病原学、组织病理学检测方法和分子生物学检测方法展开综述,以期为绵羊肺腺瘤病的防控和净化提供新的思路。 展开更多

关键词 绵羊肺腺瘤病 绵羊肺腺瘤病毒 检测方法

在线阅读 下载PDF 职称材料

1株山羊内源性肺腺瘤反转录病毒的序列测定与分析

3

作者 周艳喜 李靖 +4 位作者 敖威华 刘霄卉 于立新 幺宏强 马学恩 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期838-842,共5页

参照内源性绵羊肺腺瘤病毒株enJSRV-20(EF680302.1)全基因组序列设计合成3对引物,以山羊基因组DNA为模板,应用PCR技术扩增山羊内源性病毒基因片段,分别连接PMD-18T载体并测序,完成了1株山羊内源性肺腺瘤反转录病毒全基因序列的测定。结... 参照内源性绵羊肺腺瘤病毒株enJSRV-20(EF680302.1)全基因组序列设计合成3对引物,以山羊基因组DNA为模板,应用PCR技术扩增山羊内源性病毒基因片段,分别连接PMD-18T载体并测序,完成了1株山羊内源性肺腺瘤反转录病毒全基因序列的测定。结果分析显示测定序列全长7 480bp,获得的序列与内源性绵羊肺腺瘤病毒株enJSRV-18(EF680301.1)的核苷酸相似性为93.4%,与外源性绵羊肺腺瘤病毒株JS-7(AF357971.1)的核苷酸相似性为88.1%。根据pro基因序列构建系统进化树,结果显示扩增序列与内源性绵羊反转录病毒株en-JSRV-5(EF680305.1)的亲缘关系最近。本研究有助于内源性肺腺瘤反转录病毒感染性克隆的构建和内源性肺腺瘤反转录病毒功能的研究。 展开更多

关键词 山羊内源性肺腺瘤反转录病毒 全基因序列 PCR扩增

在线阅读 下载PDF 职称材料

绵羊肺腺瘤病毒致瘤机制研究进展 被引量：5

4

作者 刘畅 敖威华 +4 位作者 李磊 于立新 么宏强 周建华 马学恩 《动物医学进展》 北大核心 2015年第1期79-82,共4页

绵羊肺腺瘤(OPA)是由绵羊肺腺瘤病毒(OPAV)引起的一种慢性、传染性绵羊肺脏肿瘤性疾病,该病对养羊业,特别是种羊的发展有重大影响,世界动物卫生组织将其列为必须通报的动物疫病。论文就近年来国内外关于OPAV致瘤机制的相关研究进行了综... 绵羊肺腺瘤(OPA)是由绵羊肺腺瘤病毒(OPAV)引起的一种慢性、传染性绵羊肺脏肿瘤性疾病,该病对养羊业,特别是种羊的发展有重大影响,世界动物卫生组织将其列为必须通报的动物疫病。论文就近年来国内外关于OPAV致瘤机制的相关研究进行了综述,包括OPAV的转录特异性和囊膜蛋白的致瘤作用和OPAV受体等。这对深入研究OPAV的致瘤机制及确定相应的防控靶点,具有重要的理论意义和潜在的应用价值。 展开更多

关键词 绵羊肺腺瘤病毒 绵羊肺腺瘤 致瘤机制 囊膜蛋白

在线阅读 下载PDF 职称材料

绵羊肺腺瘤病毒NM株前病毒gag基因的克隆与序列分析 被引量：6

5

作者 刘淑英 马学恩 李景鹏 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期54-57,共4页

参照GenBank中已发表的绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)的全基因序列,设计合成3对引物,对JSRVNM株的gag基因分3段进行PCR扩增,经琼脂糖凝胶电泳分析,分别呈3条531、888和949bp的特异条带,将其分别克隆入pMD 18T载体中,进行序列测定并拼接序列,得... 参照GenBank中已发表的绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)的全基因序列,设计合成3对引物,对JSRVNM株的gag基因分3段进行PCR扩增,经琼脂糖凝胶电泳分析,分别呈3条531、888和949bp的特异条带,将其分别克隆入pMD 18T载体中,进行序列测定并拼接序列,得到完整的gag基因序列。分析结果表明,与南非代表株(基因序列号NC 001494)的gag基因序列比较,核苷酸同源性为89 0%,推导出的氨基酸同源性为90%。与美国代表株(基因序列号AF105220)的gag基因序列比较,核苷酸同源性为86 3%,氨基酸同源性为87%。 展开更多

关键词 GAG基因 肺腺瘤病 绵羊 氨基酸同源性 序列比较 序列分析 病毒 基因序列 核苷酸 克隆

在线阅读 下载PDF 职称材料

绵羊肺腺瘤病毒SU蛋白与Hyal-2蛋白的结合域研究 被引量：4

6

作者 张月梅 赵世华 +1 位作者 么宏强 马学恩 《动物医学进展》 北大核心 2016年第4期49-53,共5页

试验证明绵羊的Hyal-2不仅可以与绵羊肺腺瘤病毒的囊膜蛋白Env结合,也可以单独与绵羊肺腺瘤病毒SU蛋白亚基结合。为了进一步研究绵羊Hyal-2与SU蛋白可能结合的区域,应用在线生物学软件预测了SU蛋白的膜外区(对应编码基因序列238bp^867bp... 试验证明绵羊的Hyal-2不仅可以与绵羊肺腺瘤病毒的囊膜蛋白Env结合,也可以单独与绵羊肺腺瘤病毒SU蛋白亚基结合。为了进一步研究绵羊Hyal-2与SU蛋白可能结合的区域,应用在线生物学软件预测了SU蛋白的膜外区(对应编码基因序列238bp^867bp)将之前已经构建的缺失型SU蛋白真核表达载体pEGFP-C1-(su1-su5)与pDsRed-monomer-N1-hyal-2共转染293T细胞,运用激光共聚焦方法结合免疫共沉淀方法确定SU蛋白和Hyal-2蛋白可能结合区域。激光共聚焦显微镜观察结果表明,SU1-SU5与Hyal-2均存在细胞内共定位。免疫共沉淀方法检测缺失型蛋白SU1-SU5与绵羊Hyal-2均不存在相互作用。su基因所缺失区域238bp^867bp对于SU蛋白与受体的结合都是必不可少的。 展开更多

关键词 绵羊肺腺瘤病毒 SU蛋白 Hyal-2蛋白 结合区域

在线阅读 下载PDF 职称材料

绵羊肺腺瘤病毒NM株囊膜蛋白的二级结构及其B细胞抗原表位预测 被引量：3

7

作者 刘月 张宇飞 +2 位作者 张亚坤 孙晓林 刘淑英 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第1期29-33,共5页

利用生物信息学预测绵羊肺腺瘤病毒(OPAV)NM株囊膜蛋白优势抗原表位,为寻找用于绵羊肺腺瘤病诊断和预防的候选抗原表位提供参考。参照OPAV-NM株env基因序列(登录号:JQ837489),应用Gamier-Robson方法、SOPMA方法和网络服务器PSIPRED、Pre... 利用生物信息学预测绵羊肺腺瘤病毒(OPAV)NM株囊膜蛋白优势抗原表位,为寻找用于绵羊肺腺瘤病诊断和预防的候选抗原表位提供参考。参照OPAV-NM株env基因序列(登录号:JQ837489),应用Gamier-Robson方法、SOPMA方法和网络服务器PSIPRED、Predictprotein预测OPAV-NM株囊膜蛋白的二级结构。用Kyte-Doolittle方法预测蛋白质的疏水区和亲水区,用Emini方法预测蛋白质表面可能性,以Jamson-Wolf方法预测蛋白的抗原指数,利用Bcepred、IEDB、ABCpred网络服务器预测囊膜蛋白的抗原性,然后综合评价囊膜蛋白的B细胞抗原表位。结果表明,囊膜蛋白(ENV)二级结构丰富,α螺旋和β折叠所占比例相对较多,也具有多处转角及无规则卷曲区域,提示OPAV-NM囊膜蛋白具有较多的优势抗原表位区段。这些优势抗原表位分别为第52～76,101～110,118～165,182～196,201～215,281～305,309～332,335～356,461～476,530～574位氨基酸,其中第461～476位和第530～574位的部分氨基酸序列位于胞外区,且第530～574区段位于en-OPAV和ex-OPAV的囊膜氨基酸序列的差异区,该段氨基酸序列对绵羊肺腺瘤病毒疫苗和诊断方法的研究有重要意义。 展开更多

关键词 绵羊肺腺瘤病毒 囊膜蛋白 B细胞表位 二级结构

在线阅读 下载PDF 职称材料

外源性绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白激活MAPK信号通路的分析 被引量：7

8

作者 孙晓林 杜方原 刘淑英 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1658-1666,共9页

旨在深入探究外源性绵羊肺腺瘤病毒(exJSRV)囊膜蛋白(Env)的致病机制,通过组织病理学观察和免疫组织化学染色,检测病肺的病理特征以及Env、EGFR和MAPK信号通路中p-Erk1/2和p-p38的阳性表达区,通过Western blot检测Erk1/2和p38在病肺中... 旨在深入探究外源性绵羊肺腺瘤病毒(exJSRV)囊膜蛋白(Env)的致病机制,通过组织病理学观察和免疫组织化学染色,检测病肺的病理特征以及Env、EGFR和MAPK信号通路中p-Erk1/2和p-p38的阳性表达区,通过Western blot检测Erk1/2和p38在病肺中的磷酸化水平。转染重组表达质粒pcDNA 4/myc-His/exJSRV-env到A549细胞中,通过Western blot检测Erk1/2和p38的磷酸化水平。通过CCK-8法检测转染重组表达质粒的A549细胞的增殖活力。免疫组化结果显示:JSRV Env蛋白主要表达于病肺组织的肺泡上皮细胞和肿瘤细胞,EGFR在病肺组织中过表达于肺泡上皮细胞,脱落的肿瘤细胞及间质细胞中,而在健康绵羊肺中只是少量表达于肺泡上皮细胞和支气管上皮细胞中,p-Erk1/2和p-p38在病肺组织中主要表达于肺泡上皮细胞和肿瘤细胞,EGFR、p-Erk1/2和p-p38的阳性表达区均与Env蛋白的阳性表达区一致。Western blot结果显示:病肺中p-Erk1/2和p-p38的磷酸化水平均极显著高于健康肺组织,转染重组表达质粒pcDNA4/myc-His/exJSRV-env的A549细胞中p-Erk1/2和p-p38的表达量均极显著高于对照组细胞,说明exJSRV-env确实激活了A549细胞的MAPK通路。而CCK8结果显示:转染重组表达质粒pcDNA4/myc-His/exJSRV-env的A549细胞增殖活力显著高于对照组细胞,说明exJSRV-env可能是通过激活的EGFR/MAPK通路促进A549细胞的恶性增殖,进而促使肿瘤的发生。本研究为进一步探索绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白的致病机制奠定了基础。 展开更多

关键词 外源性绵羊肺腺瘤病毒 囊膜蛋白 MAPK信号转导通路 细胞增殖

在线阅读 下载PDF 职称材料

绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白在大鼠体内的表达 被引量：1

9

作者 李靖 瓦西力 +4 位作者 周艳喜 么宏强 于立新 敖威华 马学恩 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第7期7-11,共5页

为探讨绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白(OPAV-Env)引起肺泡Ⅱ型上皮恶变的机理,将真核表达质粒pcDNA3.1-env用体内转染试剂经尾静脉转染到幼龄大鼠体内,用RT-PCR及免疫组化法检测绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白在大鼠体内的表达,并采用SSCP法及基因克... 为探讨绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白(OPAV-Env)引起肺泡Ⅱ型上皮恶变的机理,将真核表达质粒pcDNA3.1-env用体内转染试剂经尾静脉转染到幼龄大鼠体内,用RT-PCR及免疫组化法检测绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白在大鼠体内的表达,并采用SSCP法及基因克隆法结合序列分析检测H-ras基因是否发生突变。结果显示,绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白在大鼠肺脏组织存在表达,但转染21d后和正常大鼠比较,未发现大鼠H-ras基因发生突变。 展开更多

关键词 绵羊肺腺瘤病毒 RAS基因 免疫组化 单链构象多态性

在线阅读 下载PDF 职称材料

绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA方法的初步建立 被引量：1

10

作者 刘月 张宇飞 +1 位作者 孙晓林 刘淑英 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期800-807,共8页

为制备抗绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)囊膜蛋白(ENV)胞质尾区(CT)的单克隆抗体,利用生物信息学分析JSRV囊膜蛋白氨基酸序列,根据分析结果合成多肽,将此多肽分别连接钥孔血蓝蛋白(CT-KLH)和牛血清白蛋白(CT-BSA),用CT-KLH作为抗原免疫BALB/c小鼠... 为制备抗绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)囊膜蛋白(ENV)胞质尾区(CT)的单克隆抗体,利用生物信息学分析JSRV囊膜蛋白氨基酸序列,根据分析结果合成多肽,将此多肽分别连接钥孔血蓝蛋白(CT-KLH)和牛血清白蛋白(CT-BSA),用CT-KLH作为抗原免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞融合。建立间接ELISA方法筛选分泌抗CT蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,获得1株能稳定分泌抗CT蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为8E5,亚类为IgG2a/κ。间接ELISA检测培养上清效价为6.4×103,腹水效价为1×105。Western blot及免疫组化结果显示,这株杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体能识别JSRV抗原,与其发生特异性反应。试验结果证明,单抗8E5是绵羊肺腺瘤的重要诊断试剂。应用8E5细胞株分泌的单克隆抗体建立JSRV-ENV的双抗体夹心ELISA检测方法,该ELISA检测方法特异性、重复性和敏感性良好,为快速检测诊断绵羊肺腺瘤和研究囊膜蛋白功能奠定了基础。 展开更多

关键词 绵羊肺腺瘤病毒 囊膜蛋白 B细胞表位 单克隆抗体 ELISA

在线阅读 下载PDF 职称材料

绵羊肺腺瘤病毒衣壳蛋白杂交瘤细胞系的建立

11

作者 斯日古楞 么宏强 马学恩 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第1期28-32,共5页

为了制备特异性的抗绵羊肺腺瘤病毒(jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV)内蒙株衣壳蛋白(CA)的单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞系,以原核表达CA蛋白为抗原,免疫BALB/c小鼠,经4次免疫后,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞经杂交瘤技术进行融合,同时... 为了制备特异性的抗绵羊肺腺瘤病毒(jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV)内蒙株衣壳蛋白(CA)的单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞系,以原核表达CA蛋白为抗原,免疫BALB/c小鼠,经4次免疫后,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞经杂交瘤技术进行融合,同时以表达蛋白作为包被抗原进行特异性ELISA检测,共筛选到6株阳性杂交瘤细胞株。经过3次亚克隆后,最终得到了5株能稳定分泌抗体的单细胞克隆株;再利用CA真核表达蛋白以间接免疫荧光法,对此5株杂交瘤细胞进行进一步的特异性鉴定。结果显示,有3株具有特异性强荧光反应,也能检测到目的基因的表达产物。本试验获得了3株稳定分泌抗JSRV-NM株CA蛋白McAb的杂交瘤细胞系,为建立检测病原的特异性诊断方法、分析JSRV-NM株CA蛋白的功能及鉴定B细胞抗原表位等奠定基础。 展开更多

关键词 绵羊肺腺瘤病毒 衣壳蛋白 杂交瘤技术 酶联免疫吸附试验 间接免疫荧光方法

在线阅读 下载PDF 职称材料

绵羊肺腺瘤病毒检测方法的研究进展 被引量：5

12

作者 朱福余 于立新 +1 位作者 么宏强 马学恩 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第4期236-241,共6页

绵羊肺腺瘤(OPA)是由β-反转录病毒属绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)引起的一种肿瘤性传染病,该病潜伏期长,经呼吸道传播,冬季圈养种羊发病率高,目前无治疗措施,病死率为100%。OPA的持续存在对种羊生产形成了潜在威胁并造成较大经济损失,严重危... 绵羊肺腺瘤(OPA)是由β-反转录病毒属绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)引起的一种肿瘤性传染病,该病潜伏期长,经呼吸道传播,冬季圈养种羊发病率高,目前无治疗措施,病死率为100%。OPA的持续存在对种羊生产形成了潜在威胁并造成较大经济损失,严重危害养羊业健康发展。所以,对OPA的早期精确诊断是防制本病的前提,尤其是在出入境检验检疫过程中对进出口羊的JSRV检测尤为重要。随着分子生物学技术的不断发展,JSRV分子生物学检测方法也得到不断的创新和改进。作者就近年来针对检测JSRV的聚合酶链式反应(PCR)、核酸探针杂交技术、酶联免疫吸附试验(ELISA)、环介导等温扩增技术(LAMP)等方法的研究概况作一综述,为寻找快速准确并适用于出入境检疫的JSRV检测方法和进一步发展研究新型JSRV检测方法提供参考。 展开更多

关键词 绵羊肺腺瘤 绵羊肺腺瘤反转录病毒 检测方法

在线阅读 下载PDF 职称材料

绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白引起绵羊绒毛膜滋养层细胞的恶性转化 被引量：7

13

作者 赵娟 徐斯日古楞 +1 位作者 李慧萍 刘淑英 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期1089-1095,共7页

为了明确绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)囊膜蛋白(Env)的致瘤作用,将重组真核表达质粒pEGFP-C1/exJSRVenv和pEGFP-C1/enJSRV-env分别转染到永生化绵羊绒毛膜滋养层细胞(STCs)中,筛选最佳转染条件并利用软琼脂集落形成试验检测是否引起细胞的恶性... 为了明确绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)囊膜蛋白(Env)的致瘤作用,将重组真核表达质粒pEGFP-C1/exJSRVenv和pEGFP-C1/enJSRV-env分别转染到永生化绵羊绒毛膜滋养层细胞(STCs)中,筛选最佳转染条件并利用软琼脂集落形成试验检测是否引起细胞的恶性转化;用平板克隆试验检测囊膜蛋白的表达对细胞增殖的影响。结果显示:在STCs中转染pEGFP-C1/exJSRV-env质粒后细胞在软琼脂中生长并产生集落,同时表现细胞接触抑制性消失;转染pEGFP-C1/enJSRV-env质粒的STCs则表现为不能在软琼脂中产生集落;平板克隆试验结果经SPSS软件分析,转染pEGFP-C1/exJSRV-env的绵羊绒毛膜滋养层细胞的克隆形成率显著高于转染pEGFP-C1/enJSRV-env细胞、pEGFP-C1空载体的细胞以及未转染的细胞(P<0.01)。exJSRV-Env的表达可以诱导STCs发生恶性转化以及细胞增殖。本试验可以为进一步探讨绵羊肺腺瘤逆转录病毒囊膜蛋白的功能提供理论依据,并为研究绵羊肺腺瘤病的致瘤机制提供新思路。 展开更多

关键词 绵羊肺腺瘤逆转录病毒 囊膜蛋白 恶性转化 细胞增殖

在线阅读 下载PDF 职称材料

人工感染绵羊肺腺瘤病毒内蒙株羔羊的临床病理学研究 被引量：2

14

作者 武志红 么宏强 马学恩 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第8期172-178,共7页

试验旨在探讨试验性感染绵羊肺腺瘤病毒内蒙株(jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV-NM)对羊的淋巴细胞亚群、淋巴细胞凋亡、血气指标的影响。用含JSRV-NM株的病毒悬液1 mL气管内接种1日龄羔羊,对人工感染羊进行了临床症状观察、血液学检... 试验旨在探讨试验性感染绵羊肺腺瘤病毒内蒙株(jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV-NM)对羊的淋巴细胞亚群、淋巴细胞凋亡、血气指标的影响。用含JSRV-NM株的病毒悬液1 mL气管内接种1日龄羔羊,对人工感染羊进行了临床症状观察、血液学检查、病理生理学的系统病理学研究。在不同时段用流式细胞仪检测外周血中淋巴细胞及其亚群的动态变化及淋巴细胞凋亡情况。同时,对血液做血气分析和血清酶的检测。人工感染羔羊均出现了一些轻微的绵羊肺腺瘤病(sheep pul-monary adenomatosis,SPA)临床症状。SPA攻毒组感染JSRV-NM株后前60 d,外周血中CD4+、CD8+T细胞保持较高水平;到感染后90 d呈现下降趋势。对淋巴细胞凋亡检测的结果显示,在感染JSRV-NM株前60 d,凋亡细胞都保持较高水平;而感染第90天后,晚期细胞凋亡显著低于对照组。血气分析结果显示,阴离子隙(AnGap)、细胞外液碱剩余(BE(ecf))、氯离子浓度(Cl-)、氧分压p(O2)、实际碳酸氢根(HCO3act)、标准碳酸氢根(HCO3std)、二氧化碳总量(TCO2)、氧饱和度(O2SAT)、氧含量(O2CT)9项在不同时期与对照组存在显著差异。接毒羔羊尚未发生SPA的典型症状,但试验羔羊的病情已经出现,处于SPA疾病的早期表现;病羊在感染JSRV-NM病毒株后,在一定时期内,血液中CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞的变化是SPA病羊在疾病过程中细胞免疫和淋巴细胞受损的重要表现之一;外周血淋巴细胞会呈现不同程度的凋亡,JSRV-NM株诱导机体免疫细胞凋亡是一种重要的临床表现;本试验结果初步证明,血气分析方法在临床诊断绵羊肺腺瘤病时有一定的参考价值。 展开更多

关键词 绵羊肺腺瘤病 绵羊肺腺瘤病病毒 人工感染 血气分析 流式细胞术

在线阅读 下载PDF 职称材料

绵羊肺腺瘤病研究进展 被引量：30

15

作者 刘淑英 马学恩 《动物医学进展》 CSCD 2003年第1期19-22,共4页

绵羊肺腺瘤病 ( OPA)是由外源性的 D型和 B型绵羊肺腺瘤反转录病毒 ( JSRV)引起的肺脏肿瘤性疾病 ,该病毒主要在肺肿瘤上皮细胞内高水平表达 ,病毒基因组内 L TR的活化和病毒囊膜蛋白的表达是引起体外细胞转化癌变的主要因素 ,其致瘤的... 绵羊肺腺瘤病 ( OPA)是由外源性的 D型和 B型绵羊肺腺瘤反转录病毒 ( JSRV)引起的肺脏肿瘤性疾病 ,该病毒主要在肺肿瘤上皮细胞内高水平表达 ,病毒基因组内 L TR的活化和病毒囊膜蛋白的表达是引起体外细胞转化癌变的主要因素 ,其致瘤的可能机制是通过激活磷酯酰肌醇 3 -激酶 ( PI-3 K)和蛋白酶 K( AKT)信号通路来启动细胞内抑制细胞凋亡和刺激细胞增生的信号转导系统 ,从而引起细胞增生癌变。该病与人的细支气管 -肺泡癌 ( BAC)极相似 ,通过对 OPA的研究 ,不仅为早期诊断及预防该病提出新方法 ,而且为揭示 BAC的分子发病机制及探索其基因治疗提供新思路。 展开更多

关键词 绵羊 肺腺瘤病 分子发病机制 基因治疗 绵羊肺腺瘤反转录病毒

在线阅读 下载PDF 职称材料

绵羊肺腺瘤kras和其他相关基因突变的检测 被引量：3

16

作者 周艳喜 于立新 +4 位作者 张月梅 敖威华 朱富余 么宏强 马学恩 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第2期6-11,共6页

为了解绵羊肺腺瘤与基因突变的关系,从绵羊肺腺瘤病毒感染的病羊肺脏组织扩增kras、nras、pik3ca、egfr、p53基因突变频率高的位点所在外显子核苷酸序列,应用PCR-SSCP技术和测序分析检测基因突变。结果显示,nras、pik3ca、egfr基因未检... 为了解绵羊肺腺瘤与基因突变的关系,从绵羊肺腺瘤病毒感染的病羊肺脏组织扩增kras、nras、pik3ca、egfr、p53基因突变频率高的位点所在外显子核苷酸序列,应用PCR-SSCP技术和测序分析检测基因突变。结果显示,nras、pik3ca、egfr基因未检测到突变。2个阳性样品kras基因第1外显子检测出突变,核苷酸突变为点为35G→T,编码的氨基酸位于第12密码子为12G→V。1个阳性样品p53基因第7外显子检测出突变,核苷酸突变位点为825T→C,编码的氨基酸未发生突变,依然是C。为绵羊肺腺瘤病毒(OPAV)分子致病机制的研究提供了参考资料。 展开更多

关键词 绵羊肺腺瘤病毒 RAS基因 P53基因 信号转导

在线阅读 下载PDF 职称材料

德克赛尔杂交绵羊肺腺瘤的诊断 被引量：4

17

作者 王金良 沈志强 +1 位作者 刘吉山 张文杰 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第4期132-134,共3页

绵羊肺腺瘤(OPA)是由绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)引起的一种可感染绵羊和山羊肺脏的肿瘤性疾病,近几年国内陆续有绵羊感染的报道,给国内的养羊业造成巨大的经济损失。对山东某肉羊养殖场的发病羊进行临床症状观察,病理剖检及实验室诊断,通过... 绵羊肺腺瘤(OPA)是由绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)引起的一种可感染绵羊和山羊肺脏的肿瘤性疾病,近几年国内陆续有绵羊感染的报道,给国内的养羊业造成巨大的经济损失。对山东某肉羊养殖场的发病羊进行临床症状观察,病理剖检及实验室诊断,通过外源性绵羊肺腺瘤病毒(exJSRV)套式RT-PCR检测方法,确诊发病绵羊为绵羊肺腺瘤病毒感染。鉴于养殖场中该病的存在及对养羊业的危害,建议加强对绵羊肺腺瘤病毒的诊断及监控。 展开更多

关键词 德克赛尔杂交绵羊 肺腺瘤病毒 诊断

在线阅读 下载PDF 职称材料

绵羊肺腺瘤PCR诊断方法的建立及应用 被引量：2

18

作者 周艳喜 苏佳 +2 位作者 李靖 刘霄卉 马学恩 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第10期24-28,共5页

利用特异性PCR方法实现对绵羊肺腺瘤病毒(OPAV)快速精确诊断和病毒类型的分析。参照GenBank中公布的外源性绵羊肺腺瘤病毒基因序列,针对病毒env基因YXXM基序设计了特异性PCR引物,建立了特异性PCR检测方法。成功扩增出病毒囊膜基因(env)... 利用特异性PCR方法实现对绵羊肺腺瘤病毒(OPAV)快速精确诊断和病毒类型的分析。参照GenBank中公布的外源性绵羊肺腺瘤病毒基因序列,针对病毒env基因YXXM基序设计了特异性PCR引物,建立了特异性PCR检测方法。成功扩增出病毒囊膜基因(env)多变区序列片段(ST)通过序列比对确定病毒类型。此方法操作简便,可用于绵羊肺腺瘤的快速诊断,可望在绵羊肺腺瘤发病机制等研究中起到重要作用。 展开更多

关键词 绵羊肺腺瘤病毒 聚合酶链反应 检测

在线阅读 下载PDF 职称材料

绵羊肺腺瘤病自然病例肺组织的超微结构观察 被引量：1

19

作者 幺宏强 其木格 马学恩 《电子显微学报》 CAS CSCD 2006年第B08期226-226,共1页

关键词 绵羊肺腺瘤病毒 超微结构观察 自然病例 肺组织 virus 肿瘤性疾病 接触传染性 SPA

在线阅读 下载PDF 职称材料

enJSRV囊膜蛋白及其受体的瞬时表达与绵羊绒毛膜滋养层细胞融合的诱导研究 被引量：6

20

作者 张宇飞 石晶 刘淑英 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1924-1933,共10页

旨在深入研究内源性绵羊肺腺瘤病毒(enJSRV)囊膜蛋白在绵羊胎盘形成过程中的作用,本研究体外培养了蒙古绵羊绒毛膜滋养层细胞,采用RT-PCR技术扩增出enJSRV-env基因及其受体Hyal2基因全长序列,定向克隆于真核表达载体pEGFP-C1上。优化绒... 旨在深入研究内源性绵羊肺腺瘤病毒(enJSRV)囊膜蛋白在绵羊胎盘形成过程中的作用,本研究体外培养了蒙古绵羊绒毛膜滋养层细胞,采用RT-PCR技术扩增出enJSRV-env基因及其受体Hyal2基因全长序列,定向克隆于真核表达载体pEGFP-C1上。优化绒毛膜滋养层细胞电转染条件和测定电转效率。将构建好的真核表达质粒分别电转染到绒毛膜滋养层细胞中,在荧光显微镜下观察enJSRV囊膜蛋白及其受体Hyal2的瞬时表达情况。并研究高表达enJSRV-env基因及通过RNA干扰沉默enJSRV-env基因对绒毛膜滋养层细胞的细胞融合活性的影响。结果显示,真核表达质粒构建成功,分别命名为pEGFP-C1/enJSRV-env及pEGFP-C1/Hyal2。研究表明,绵羊绒毛膜滋养层细胞最佳电转染条件为脉冲电压150 V,脉冲时间5.0 ms,电击2次,间隔50 ms。转染pEGFP-C1/enJSRV-env质粒及pEGFP-C1/enJSRV-env与pEGFP-C1/Hyal2共转染的绵羊绒毛膜滋养层细胞中多核细胞数目明显增加,平均每个视野分别可以观察到1.8和2.3个多核细胞。说明enJSRV-env对绒毛膜滋养层细胞的细胞融合有一定的促进作用。本研究为进一步探究enJSRV囊膜蛋白的结构和功能及绒毛膜滋养层细胞融合机理提供试验基础。 展开更多

关键词 内源性绵羊肺腺瘤病毒 内源性逆转录病毒 囊膜蛋白 绒毛膜滋养层细胞 细胞融合

在线阅读 下载PDF 职称材料