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同时检测致病性大肠埃希氏菌和沙门氏菌及其耐药基因的微流体芯片检测方法的建立
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作者 傅彩霞 刘海莹 +3 位作者 栗云鹏 张玮 周德刚 张启龙 《动物医学进展》 北大核心 2025年第10期76-84,共9页
为实现多种致病性大肠埃希氏菌和沙门氏菌及其耐药基因的快速、准确检测,建立一种微流体芯片检测方法。通过筛选肠致病性大肠埃希氏菌、产肠毒素大肠埃希氏菌、肠出血性大肠埃希氏菌、肠炎沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌和... 为实现多种致病性大肠埃希氏菌和沙门氏菌及其耐药基因的快速、准确检测,建立一种微流体芯片检测方法。通过筛选肠致病性大肠埃希氏菌、产肠毒素大肠埃希氏菌、肠出血性大肠埃希氏菌、肠炎沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌的特异性基因作为病原鉴定基因,以喹诺酮类、氨基糖苷类、四环素类和氯霉素类4类抗菌药物的13个耐药基因作为耐药检测靶基因,针对12个病原鉴定基因和13个耐药基因,设计25对特异性引物,并在每个正向引物5′端添加通用标签序列;通过引物筛选验证、扩增程序优化、特异性试验、灵敏度试验、重复性试验和临床样品检测,建立了可同时鉴别检测多种致病性大肠埃希氏菌和沙门氏菌及其耐药基因的微流体芯片检测方法。结果显示,25个目标基因与其他病原或基因之间均无交叉反应,特异性好;25个基因的检测灵敏度在0.004~40 pg/μL之间,灵敏度高;重复检测稳定性好。建立的微流体芯片检测方法可用于同时进行多种致病性大肠埃希氏菌和沙门氏菌及其耐药基因的鉴别检测,具有快速、特异、敏感、稳定等优点,为动物疾病诊断和流行病学调查提供了有效途径。 展开更多
关键词 致病大肠 沙门 耐药基因 微流体芯片
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一株兔源大肠埃希氏菌噬菌体的分离及生物学特性分析 被引量:1
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作者 屈平平 王一鸣 +2 位作者 解红梅 温华梅 李涛 《动物医学进展》 北大核心 2024年第3期133-137,共5页
为了筛选高效裂解兔源致病性大肠埃希氏菌的宽谱噬菌体,用滴定法和双层平板法分离纯化出1株噬菌体vB-EcoS-tE10,用透射电镜观察该噬菌体的形态特征,并研究其生物学特性。结果表明,在透射电镜下其头部呈20面体,长径约为52.5 nm,横径约为5... 为了筛选高效裂解兔源致病性大肠埃希氏菌的宽谱噬菌体,用滴定法和双层平板法分离纯化出1株噬菌体vB-EcoS-tE10,用透射电镜观察该噬菌体的形态特征,并研究其生物学特性。结果表明,在透射电镜下其头部呈20面体,长径约为52.5 nm,横径约为51.6 nm,尾部长约86.9 nm,有明显的颈部。最佳感染复数为0.1,潜伏期为20 min,暴发期为80 min,裂解量为608 PFU/cell,在30~60℃作用0.5~1 h,其活性不受影响,在pH为6~9可保持很高的效价,能裂解9株兔源大肠埃希氏菌、1株鸡源大肠埃希氏菌和1株产肠毒素性大肠埃希氏菌K99,属于高效裂解性宽谱噬菌体,在大肠埃希氏菌噬菌体及裂解酶的开发和利用方面有较高价值。 展开更多
关键词 兔源致病性大肠埃希氏菌 裂解 生物学特
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禽致病性大肠埃希氏菌生物被膜形成的调控机制研究进展
3
作者 于鲁敏 信阳 +3 位作者 杨传宗 罗茜 高艳宏 薛挺 《动物医学进展》 北大核心 2024年第1期100-103,共4页
禽致病性大肠埃希氏菌能够引起禽类感染性细菌病,给禽类养殖业造成了重大的经济损失,并严重限制了禽类养殖业的健康发展。为了了解禽致病性大肠埃希氏菌的感染机制,论文简述了生物被膜的形成过程及其危害。细菌生物被膜的形成不但增强... 禽致病性大肠埃希氏菌能够引起禽类感染性细菌病,给禽类养殖业造成了重大的经济损失,并严重限制了禽类养殖业的健康发展。为了了解禽致病性大肠埃希氏菌的感染机制,论文简述了生物被膜的形成过程及其危害。细菌生物被膜的形成不但增强细菌对抗菌药物的耐药性,而且导致宿主持续和反复性感染,同时还很难被预防、控制和清除。论文还分析了普遍存在于各类细菌中的重要调控系统——群体感应、双组份系统和第二信使的信号转导途径及其调控机制,并阐述了群体感应、双组份系统和第二信使以及两系统间的互作网络对细菌生物被膜的影响。因此,了解多系统共同调控生物被膜形成的分子机制或许可以作为破坏生物被膜形成的新策略,从而为控制由生物被膜引起的感染和抗菌药物耐药性提供研究方向。 展开更多
关键词 致病大肠 生物被膜 群体感应 双组份系统 第二信使
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猪源大肠埃希菌分离鉴定、耐药性、致病性研究及噬菌体分离 被引量:1
4
作者 童谣 王文雪 +14 位作者 卢萌萌 张博扬 李皓斌 邢瑞洋 孙江涛 贾雨康 姚美慧 魏润钰 李栋梁 姜鹏 吕博 王梓旭 刘春雪 杜莉 任庆海 《养猪》 2024年第3期55-61,共7页
大肠埃希菌是引起仔猪腹泻常见的细菌病原体。本实验以山东省聊城市产房腹泻仔猪为研究对象,采集腹泻仔猪粪便,通过对细菌分离、纯化,经16s rDNA基因扩增及全基因组测序,最后确诊为大肠埃希菌,该菌株全基因组序列的全长为4584108 bp;并... 大肠埃希菌是引起仔猪腹泻常见的细菌病原体。本实验以山东省聊城市产房腹泻仔猪为研究对象,采集腹泻仔猪粪便,通过对细菌分离、纯化,经16s rDNA基因扩增及全基因组测序,最后确诊为大肠埃希菌,该菌株全基因组序列的全长为4584108 bp;并对分离到的大肠埃希菌进行药敏试验、耐药及毒力基因检测、小鼠致病力试验及对应的噬菌体分离纯化。结果表明,该大肠埃希菌为O11血清型,主要耐药基因为blaSHV、blaTEM、aadA1、sul1、tetA;主要毒力基因为fyuA、ler;对阿奇霉素、丁胺卡那、新霉素敏感,对头孢氨苄、阿莫西林、四环素类抗生素严重耐药;对小鼠致病力强(109 CFU/mL);同时,分离纯化了5株对应的大肠埃希菌噬菌体,为大肠埃希菌的多重防控提供理论依据。 展开更多
关键词 大肠 分离 耐药 致病
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鸡源大肠埃希氏菌的致病性与某些生物学特性关系的研究 被引量:3
5
作者 郝永清 张爱荣 +1 位作者 周雪霞 乌尼 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1996年第1期11-12,共2页
近年来,鸡大肠埃希氏菌病在全国各地普遍发生,给我国的养鸡业造成很大的损失,引起了许多禽病工作者和养禽单位的高度重视,各地分离到许多不同血清型的鸡致病性大肠埃希氏菌,并就其生物学特性进行了一定的研究,但就其生物学特性与致病性... 近年来,鸡大肠埃希氏菌病在全国各地普遍发生,给我国的养鸡业造成很大的损失,引起了许多禽病工作者和养禽单位的高度重视,各地分离到许多不同血清型的鸡致病性大肠埃希氏菌,并就其生物学特性进行了一定的研究,但就其生物学特性与致病性的关系方面系统报道较少,为此我们进行了一些问题的探索性研究。 展开更多
关键词 鸡病 大肠 致病 生物学特
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鸡源致病性大肠埃希氏菌致病性及抗生素敏感性试验
6
作者 匡存林 陈宏军 肖文华 《动物科学与动物医学》 2004年第12期59-61,共3页
关键词 E.COLI 致病大肠 治疗 抗生素敏感试验 药物 合并用药 临床 免疫失败 防制
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朱鹮源大肠埃希氏菌分离鉴定及耐药性与致病性研究 被引量:2
7
作者 赵浩宇 赵学亮 +6 位作者 张域琪 吴滨滨 闫振达 董晓宇 杨增岐 王娟 党如意 《动物医学进展》 北大核心 2023年第4期134-138,共5页
为分析陕西楼观台朱鹮源大肠埃希氏菌携带情况,无菌采集朱鹮咽拭子和肛拭子进行细菌分离鉴定,成功从肛拭子中分离到一株疑似大肠埃希氏菌菌株,对分离菌株进行生化试验、16S rRNA测序鉴定、药敏试验、耐药基因鉴定、毒力基因鉴定及小鼠... 为分析陕西楼观台朱鹮源大肠埃希氏菌携带情况,无菌采集朱鹮咽拭子和肛拭子进行细菌分离鉴定,成功从肛拭子中分离到一株疑似大肠埃希氏菌菌株,对分离菌株进行生化试验、16S rRNA测序鉴定、药敏试验、耐药基因鉴定、毒力基因鉴定及小鼠致病性试验。经鉴定该菌株为大肠埃希氏菌,命名为XNZH1,该菌株对氧氟沙星、安普霉素、大观霉素、四环素和氟苯尼考耐药,携带耐药基因sul2和毒力基因etrA。小鼠致病性试验结果显示,经腹腔接种的6只小鼠均在接种后18 h内死亡,且从脑组织中分离到该菌,推测该菌可穿过血脑屏障。进化树分析表明,该菌株与分离株MH532531.1同源性高达98%。试验结果表明朱鹮源大肠埃希氏菌具有高度耐药性和致病性,结果可为朱鹮大肠埃希氏菌病的防控及合理用药提供依据。 展开更多
关键词 朱鹮 大肠 致病 耐药 分子分型
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猪源肠外致病性大肠埃希氏菌的分离鉴定与药敏试验 被引量:1
8
作者 苏梦茹 叶超 +3 位作者 赵学亮 冯航 王娟 杨增岐 《动物医学进展》 北大核心 2022年第7期124-128,共5页
为对陕西某猪场仔猪肺炎病例进行确诊,无菌采集患病仔猪肺脏,并进行细菌分离培养、生化试验、16S rRNA基因测序、小鼠致病性试验、药敏试验以及耐药基因检测。结果表明,分离到的菌株其培养特性和生化试验与大肠埃希氏菌一致,16S rRNA基... 为对陕西某猪场仔猪肺炎病例进行确诊,无菌采集患病仔猪肺脏,并进行细菌分离培养、生化试验、16S rRNA基因测序、小鼠致病性试验、药敏试验以及耐药基因检测。结果表明,分离到的菌株其培养特性和生化试验与大肠埃希氏菌一致,16S rRNA基因测序与大肠埃希氏菌的同源性为98%;小鼠致病性试验验证了该菌株的致病性;药敏试验显示该菌对氨苄西林、复方阿莫西林、庆大霉素、四环素、头孢噻呋钠、头孢他啶、恩诺沙星、氟苯尼考和磺胺异恶唑等9种抗菌药物表现耐药,对替加环素、美罗培南和多黏菌素B敏感;耐药基因检测结果发现该菌携带sul3、tetA和TEM等耐药基因。研究结果确定了引起某猪场仔猪肺炎的病原菌,并对其生物学特性、耐药情况进行了研究,为临床诊断治疗提供参考。 展开更多
关键词 肠外致病大肠 分离鉴定 药敏试验
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牦牛致病性大肠埃希氏菌病的诊断 被引量:19
9
作者 曾群辉 查果 +2 位作者 旦巴次仁 索珍 潘多 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期144-145,共2页
西藏那曲地区牦牛发病死亡数量较大 ,本病症状与大肠埃希氏菌病极为相似。通过对流行病学调查 ,临床症状及病理变化观察 ,细菌学、血清学检查鉴定 ,动物回归试验 。
关键词 牦牛 致病大肠 诊断
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禽致病性大肠埃希氏菌的分离鉴定与耐药性监测 被引量:10
10
作者 韩伟 张铁 +3 位作者 王春光 张国磊 吕建存 钟秀会 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2007年第7期41-42,共2页
关键词 大肠 致病大肠 分离鉴定 耐药监测 生物学特 科学依据 有效防治 秦皇岛
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江苏境内鸡源大肠埃希氏菌的某些生物学特性 被引量:4
11
作者 恽时锋 兰邹然 +2 位作者 王伟武 郑明球 蔡宝祥 《上海农业学报》 CSCD 1997年第4期7-10,共4页
从江苏九个蛋鸡场47羽疑似大肠杆菌病的病、死鸡的肝、脾、心包液、腹水、输卵管、脑实质、眼球液中分离鉴定出23株大肠埃希氏菌,分离率为48.94%。对其中17株进行血清型鉴定,共有11种血清型,其中O20、O78、及O89较为多见,分别占... 从江苏九个蛋鸡场47羽疑似大肠杆菌病的病、死鸡的肝、脾、心包液、腹水、输卵管、脑实质、眼球液中分离鉴定出23株大肠埃希氏菌,分离率为48.94%。对其中17株进行血清型鉴定,共有11种血清型,其中O20、O78、及O89较为多见,分别占待检菌株的11.77%、1765%和11.77%,其余为O9、O18、O26、O3O、O36、O88、O131及O149,其中Og、O18、O30、O36、O131及O149为国内外首次发现,未定型菌2株。文中还对分离菌的致病性及抗生素敏感性进行了研究。 展开更多
关键词 鸡病 大肠 致病 抗生素敏感
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鸡大肠埃希氏菌地方菌株的致病性与药敏试验 被引量:4
12
作者 曹斌 肖文华 +1 位作者 李勇军 葛竹兴 《中国动物检疫》 CAS 2003年第3期24-25,共2页
分别从死亡鸡胚、病死鸡中分离大肠埃希氏菌 ,进行致病性与药敏试验 ,并鉴定致病性较强的菌株的血清型。结果表明 ,所分离的菌株绝大多数对一日龄鸡有致病性 ,所有血清型对头孢唑啉高度敏感。
关键词 大肠 地方 致病 药敏试验
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鸭源致病性大肠埃希氏菌生物学特性的研究 被引量:4
13
作者 陈兴生 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第5期340-342,共3页
对从自然病例鸭实质脏器中分离的致病性大肠埃希氏菌的生物学特性进行了观察。结果表明 ,不同血清型和同一血清型不同菌株的培养特性、生化试验基本一致 ,抗生素耐药性呈多重性 。
关键词 大肠 生物学特 致病
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鸡源大肠埃希氏菌部分生物学特性研究 被引量:1
14
作者 鄢明华 丁伯良 +6 位作者 王英珍 李秀丽 黄金海 赵向华 白朋勋 王东 张健 《动物科学与动物医学》 2003年第7期66-68,共3页
对从天津地区分离到的71株鸡大肠杆菌的部分生物学特性包括致病性、血清型、耐药特性和免疫原性等进行了研究。结果表明其中60株为致病性菌株,占分离菌株的84.5%;60个致病性菌株共定型出45个菌株,分属O1、O2、O5、O6、O20、O45、O53、O7... 对从天津地区分离到的71株鸡大肠杆菌的部分生物学特性包括致病性、血清型、耐药特性和免疫原性等进行了研究。结果表明其中60株为致病性菌株,占分离菌株的84.5%;60个致病性菌株共定型出45个菌株,分属O1、O2、O5、O6、O20、O45、O53、O74、O75、O78、O88、O89、O92、O107、O111、O145等16个血清型,其中O78、O88、O2、O45、O53和O145为优势血清型,占定型菌株的73.4%;试验菌株具有广泛的耐药性,60个致病性菌株均为多重耐药。免疫原性测定试验结果表明,O2、O78、O88血清型菌株均可对相同血清型菌株提供很好的保护,但3个血清型菌株之间缺乏有效的保护。 展开更多
关键词 大肠 生物学特 致病 血清型 耐药 免疫原
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鸡致病性大肠埃希氏菌的分离鉴定及多价油乳剂灭活苗的研制
15
作者 郭海勇 单晓枫 +1 位作者 刘清河 钱爱东 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2006年第11期18-19,共2页
关键词 致病大肠 多价油乳剂灭活苗 大肠 分离鉴定 优势血清型 分离 血清学特征 生化特
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鸡大肠埃希氏菌致病性、菌毛表达及血凝特性
16
作者 恽时锋 郑明球 潘震寰 《上海农业学报》 CSCD 1999年第2期36-40,共5页
观察比较了鸡大肠埃希氏菌某些分离株腹腔接种、气管接种对1日龄鸡的致病性,研究了在体外不同培养条件下,菌株菌毛的表达情况、菌株的血凝谱及血凝特性。结果表明,菌株经腹腔接种及气管接种途径对鸡的致病性一致;致病性与菌毛有关... 观察比较了鸡大肠埃希氏菌某些分离株腹腔接种、气管接种对1日龄鸡的致病性,研究了在体外不同培养条件下,菌株菌毛的表达情况、菌株的血凝谱及血凝特性。结果表明,菌株经腹腔接种及气管接种途径对鸡的致病性一致;致病性与菌毛有关,具有致病性的菌株,在体外经37℃72h培养,均能表达菌毛,其中大部分菌株表达Ⅰ型菌毛,对鸡不具有致病性的菌株在体外不表达菌毛;不同菌株的血凝谱及血凝方式具有一定的差异,大部分菌株的血凝能被D-甘露糖抑制,表现为甘露糖敏感型血凝(MSHA)。还分析了菌株血凝谱与致病宿主之间的关系。 展开更多
关键词 大肠 致病 血凝
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青海牧区犊牛腹泻大肠埃希氏菌毒力基因及血清型分布特征研究 被引量:5
17
作者 石田 韩生义 +3 位作者 李淑萍 胡国元 李玲霞 李生庆 《动物医学进展》 北大核心 2024年第6期20-25,共6页
为掌握青海牧区致牦牛腹泻大肠埃希氏菌病的流行特征,以期为牦牛大肠埃希氏菌性腹泻的预防和治疗提供依据,对青海省玉树、果洛、海北地区采集的99份犊牦牛腹泻相关样本进行致病性大肠埃希氏菌的分离培养及O抗原血清分型、毒力基因扩增... 为掌握青海牧区致牦牛腹泻大肠埃希氏菌病的流行特征,以期为牦牛大肠埃希氏菌性腹泻的预防和治疗提供依据,对青海省玉树、果洛、海北地区采集的99份犊牦牛腹泻相关样本进行致病性大肠埃希氏菌的分离培养及O抗原血清分型、毒力基因扩增及小鼠毒性试验等研究。结果显示,分离菌株主要携带F17、ompA、fimC、espA、HPI、LEE、VT1、SLT2等毒力基因,未检出K88、K99、LT1等毒力基因,小鼠最低致死剂量为2.5×10^(9)CFU/mL,优势血清型为O25、O55和O107,分别占定型血清的25.40%、14.29%和19.05%,系统主要发育群为B1群。研究结果将为后续青海地区致犊牦牛腹泻大肠杆菌病的治疗、发病机制探讨及疫苗研制提供支撑。 展开更多
关键词 牦牛 致病大肠 毒力基因 血清分型 系统发育
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3种致泻性大肠埃希氏菌多重PCR检测方法的研究 被引量:10
18
作者 张铁男 李继昌 +2 位作者 鲁成武 霍贵成 刘宁 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2007年第9期17-19,共3页
关键词 大肠 PCR检测方法 多重 侵袭 毒力因子 遗传特 致病机理 肠出血
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一株分离自肉雏鸡脑部大肠埃希氏菌的某些生物学特性 被引量:2
19
作者 恽时锋 潘震寰 +1 位作者 郑明球 蔡宝祥 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期57-61,共5页
对一株分离自以神经紊乱为主要症状肉雏鸡脑实质的E.coli(LCB)的某些生物学特性进行了研究。包括对KM小鼠及1d鸡的致病性、血清学特性、抗生素敏感性、菌毛的表达及电镜观察、血凝性、溶血性。结果表明,该菌株血清型属... 对一株分离自以神经紊乱为主要症状肉雏鸡脑实质的E.coli(LCB)的某些生物学特性进行了研究。包括对KM小鼠及1d鸡的致病性、血清学特性、抗生素敏感性、菌毛的表达及电镜观察、血凝性、溶血性。结果表明,该菌株血清型属0131,为国内外首次发现,腹腔接种对KM小鼠具有高致病性,脑内接种对1d鸡也具高致病性,但腹腔及气管接种对1d鸡无致病性,不产生溶血素,在NB中经37℃72h培养不表达菌毛;对鸭、犬的RBC表现强凝集,对鸡、豚鼠、马的RBC表现弱凝集,血凝能被D-甘露糖抑制,表现为MSHA;菌株对PIP、CFZ高敏,对GEN、NEO、CTN中度敏感,对其它抗生素则低敏或耐药。 展开更多
关键词 大肠 血清型 致病 生物学特
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和牛源致病性大肠杆菌的分离鉴定
20
作者 兰世捷 苗艳 +10 位作者 陈亮 朱庆贺 李丹 张蕾 于辰龙 丁丽艳 冯万宇 沈思思 王志强 田秋丰 张备 《现代畜牧科技》 2024年第8期14-18,共5页
为查明和牛犊牛腹泻死亡原因,该试验采集齐齐哈尔市龙江县和牛腹泻犊牛的新鲜粪便10份进行细菌的分离培养、生化鉴定、16S rRNA基因测序。选择1株腹泻样品的纯化菌为供试菌株进行致病性试验、药敏试验、毒力基因检测和同源性分析。结果... 为查明和牛犊牛腹泻死亡原因,该试验采集齐齐哈尔市龙江县和牛腹泻犊牛的新鲜粪便10份进行细菌的分离培养、生化鉴定、16S rRNA基因测序。选择1株腹泻样品的纯化菌为供试菌株进行致病性试验、药敏试验、毒力基因检测和同源性分析。结果显示,从10份样品中分离的10株病原菌与大肠埃希氏菌生长形态及生化特征一致,分离率为100%;供试菌株命名为Wagyu.1;毒力基因检测结果显示,K88、CS31A、BfpA、EAST1和hlyA基因为阳性;16S rRNA序列与GenBank中大肠埃希氏菌同源性为93.6%~99.9%,系统进化树显示,Wagyu.1与人源大肠埃希氏菌62-b pink菌株(Genbank登录号:MN208129)在同一个分支,亲缘关系最近;体外药敏试验结果显示,仅对头孢他啶和头孢吡肟最敏感。结果表明,分离株Wagyu.1为一种毒力较强的致病性大肠埃希氏菌,其与人源大肠埃希氏菌的亲缘关系最近,建议加强人畜分流管理,减少疫病的发生。 展开更多
关键词 和牛 致病大肠 分离鉴定 系统进化树 毒力基因
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