兔源抗凋亡蛋白Bcl-2的表达、抗体的制备及初步应用 被引量：2

1

作者 陈萌萌 潘渊婷 +7 位作者 范志宇 胡波 宋艳华 魏后军 仇汝龙 朱伟峰 徐为中 王芳 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第6期1397-1401,共5页

为了原核表达兔源抗凋亡蛋白Bcl-2,并诱导表达纯化该蛋白后制备多抗,采用RT-PCR扩增Bcl-2编码序列,并将该序列克隆至pET-32a(+)载体,获得重组pET-32a-Bcl-2质粒转化BL21(DE3),筛选最佳表达条件,通过亲和层析纯化目的蛋白质,最后经Wester... 为了原核表达兔源抗凋亡蛋白Bcl-2,并诱导表达纯化该蛋白后制备多抗,采用RT-PCR扩增Bcl-2编码序列,并将该序列克隆至pET-32a(+)载体,获得重组pET-32a-Bcl-2质粒转化BL21(DE3),筛选最佳表达条件,通过亲和层析纯化目的蛋白质,最后经Western blot鉴定后免疫小鼠。结果显示,成功扩增Bcl-2编码序列并构建了pET-32a-Bcl-2表达载体;SDS-PAGE结果显示,在16℃,5 h,0.5 mmol/L IPTG的表达条件下,重组蛋白Bcl-2能够高效可溶性表达;Western blot结果表明纯化后的表达产物为高纯度的Bcl-2重组蛋白,将该蛋白质免疫小鼠后获得了特异性抗体,该抗体能够特异性识别重组Bcl-2蛋白,并应用该抗体鉴定RK13-B细胞中Bcl-2蛋白的过表达。 展开更多

关键词 兔源抗凋亡蛋白bcl-2 原核表达 亲和层析 多抗制备

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缺血后处理对兔缺血再灌注心肌细胞凋亡及Bcl-2和Bax蛋白表达的影响 被引量：7

2

作者 杨国杰 李运伟 +1 位作者 曾秋棠 都瑾 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2008年第1期57-59,共3页

目的:研究缺血后处理对缺血再灌注心肌细胞凋亡及Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。方法:24只大耳白兔随机分成4组:假手术组(S)、缺血再灌注组(IR)、缺血预适应组(IP)和缺血后处理组(IPO)。S组(6只):开胸只穿线不结扎血管,麻醉维持120min;IR... 目的:研究缺血后处理对缺血再灌注心肌细胞凋亡及Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。方法:24只大耳白兔随机分成4组:假手术组(S)、缺血再灌注组(IR)、缺血预适应组(IP)和缺血后处理组(IPO)。S组(6只):开胸只穿线不结扎血管,麻醉维持120min;IR组(6只):结扎30min,再灌注120min;IP组(6只):结扎5min,再灌注5min,反复3次诱导缺血预适应,之后再按IR组操作;IPO组(6只):结扎30min后,再灌注10s、缺血10s,反复6次,再灌注120min。应用TUNEL法观察各组心肌细胞凋亡,应用免疫组化SP法观察Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果:与IR组相比,IP组和IPO组心肌梗死范围减小,心肌细胞的凋亡指数降低(P<0.05),Bcl-2/Bax比例升高(P<0.05),而IP组和IPO组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:缺血后处理可以减轻再灌注心肌细胞的凋亡,这一过程可能是通过升高Bcl-2/Bax比值来实现的。 展开更多

关键词 缺血后处理 细胞凋亡 bcl-2蛋白 BAX蛋白 兔

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喉癌组织中抗凋亡基因Bcl-2蛋白的表达及临床相关性研究 被引量：3

3

作者 李家喜 王锦玲 +1 位作者 郭志祥 刘振声 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第2期110-112,共3页

抗凋亡基因Ｂｃｌ－２的表达可抑制细胞凋亡过程，是导致肿瘤发生的因素之一。采用免疫组化多重ＰＡＰ方法，检测了３５例喉癌及５例喉正常声带组织的Ｂｃｌ－２。Ｂｃｌ－２阳性反应主要位于喉癌细胞中，呈棕黄色细颗粒状。３５例喉癌... 抗凋亡基因Ｂｃｌ－２的表达可抑制细胞凋亡过程，是导致肿瘤发生的因素之一。采用免疫组化多重ＰＡＰ方法，检测了３５例喉癌及５例喉正常声带组织的Ｂｃｌ－２。Ｂｃｌ－２阳性反应主要位于喉癌细胞中，呈棕黄色细颗粒状。３５例喉癌组织中１３例Ｂｃｌ－２阳性，占３７．１％。５例喉正常声带组织中１例阳性，阳性反应位于间质中。结果提示Ｂｃｌ－２表达阳性组和阴性组术后生存曲线有明显不同，Ｂｃｌ－２表达阳性组比阴性组生存曲线明显下降，死亡危险度峰值提前１～４年出现，Ｂｃｌ－２表达与喉癌术后生存率有关。 展开更多

关键词 喉肿瘤 免疫学技术 抗凋亡基因 bcl-2蛋白

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罗格列酮对兔髂动脉球囊损伤后细胞凋亡及Bcl-2/Bax表达的影响 被引量：1

4

作者 曹选超 丁世芳 +2 位作者 蒋桔泉 卢青 赵璞 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第16期2643-2645,共3页

目的:观察罗格列酮对兔髂动脉球囊内膜剥脱术后细胞凋亡及凋亡调控蛋白Bcl-2、Bax表达的影响。方法:将30只雄性新西兰大耳白兔随机分为3组,正常对照组(普通饮食)、模型组(高脂饮食+球囊内膜剥脱术)和罗格列酮组(高脂饮食+球囊内膜剥脱术... 目的:观察罗格列酮对兔髂动脉球囊内膜剥脱术后细胞凋亡及凋亡调控蛋白Bcl-2、Bax表达的影响。方法:将30只雄性新西兰大耳白兔随机分为3组,正常对照组(普通饮食)、模型组(高脂饮食+球囊内膜剥脱术)和罗格列酮组(高脂饮食+球囊内膜剥脱术+罗格列酮),分别于术后第1、4周末处死动物,取髂动脉标本行病理形态学观察,TUNEL法检测细胞凋亡水平,免疫组化法测定Bax、Bcl-2蛋白表达的情况。结果:正常对照组仅见少量凋亡细胞和Bax、Bcl-2蛋白表达。与模型组相比,罗格列酮组在术后第1、4周末内膜增殖程度显著减轻(P<0.05),细胞凋亡程度、Bax蛋白表达明显增强(P<0.01),Bcl-2蛋白表达减少(P<0.01),细胞凋亡改变在术后1周末更为明显。结论:罗格列酮具有促进球囊损伤术后内膜平滑肌细胞凋亡、下调Bcl-2蛋白表达及上调Bax蛋白表达的作用。 展开更多

关键词 再灌注损伤 罗格列酮 细胞凋亡 bcl-2蛋白 BAX蛋白 兔

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兔脑出血灶周围脑组织细胞凋亡及bcl-2和bax的检测 被引量：4

5

作者 李维泷 苏芳忠 +2 位作者 陶胜忠 张云汉 苏玉林 《河南医科大学学报》 北大核心 2001年第6期678-680,共3页

目的 :探讨兔脑出血灶周围脑组织中bcl 2、bax蛋白表达和细胞凋亡的关系。方法 :家兔 40只 ,分为A、B、C、D 4组。B、C、D 3组采用兔自体血二次注射法制作脑出血模型 ,分别于模型制作完成后 12h ,2 4h ,72h断头处死 ,运用TUNEL法、免疫... 目的 :探讨兔脑出血灶周围脑组织中bcl 2、bax蛋白表达和细胞凋亡的关系。方法 :家兔 40只 ,分为A、B、C、D 4组。B、C、D 3组采用兔自体血二次注射法制作脑出血模型 ,分别于模型制作完成后 12h ,2 4h ,72h断头处死 ,运用TUNEL法、免疫组化SP技术 ,检测出血灶周围脑组织中细胞凋亡及bcl 2、bax蛋白表达。结果 :出血灶周围脑组织中细胞凋亡、bcl 2和bax蛋白表达在各组间差异有显著性 (P <0 .0 5 )。bcl 2蛋白表达与凋亡阳性细胞数呈负相关 (r=- 0 .781,P <0 .0 5 ) ,bax蛋白表达与其呈正相关 (r=0 .72 3,P <0 .0 5 )。结论 :出血灶周围脑组织中存在细胞凋亡 ,细胞凋亡的变化在一定程度上反映了周围脑组织的损伤程度。bcl 2和bax蛋白对凋亡具有调控作用。 展开更多

关键词 脑出血 细胞凋亡 bcl-2蛋白 BAX蛋白 兔

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BAG2对蛋白酶体抑制剂诱导人甲状腺癌细胞凋亡作用影响的观察

6

作者 王玉林 王彪 +1 位作者 孟欣 巴颖 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期349-353,共5页

背景与目的：蛋白酶体抑制剂对不同组织来源的肿瘤均有抑制其增长和促进细胞凋亡的作用，其作用机制可能与Bcl-2相关抗凋亡基因2（Bcl-2-associated athanogene 2，BAG2）有关，本研究探讨BAG2在蛋白酶体抑制剂诱导甲状腺癌细胞凋亡中... 背景与目的：蛋白酶体抑制剂对不同组织来源的肿瘤均有抑制其增长和促进细胞凋亡的作用，其作用机制可能与Bcl-2相关抗凋亡基因2（Bcl-2-associated athanogene 2，BAG2）有关，本研究探讨BAG2在蛋白酶体抑制剂诱导甲状腺癌细胞凋亡中的作用。方法：选取人甲状腺未分化癌细胞系ARO、FRO、KTC1、KTC2、KTC3、8305C和8505C，分别设培养液处理空白对照组、蛋白酶体抑制剂MG132处理组；利用实时定量逆转录聚合酶链反应（quantitative real-time polymerase chain reaction，qRT-PCR）检测各组细胞BAG2 mRNA表达及MG132诱导其表达的时效性；利用蛋白质印迹法（Western blot）检测各组细胞BAG2蛋白表达。结果：MTT结果显示，FRO和KTC2细胞系对蛋白酶体抑制剂最为敏感，与空白对照组相比，MG132能不同程度的增加各种细胞BAG2 mRNA及蛋白的表达水平（P〈0.01），在FRO和KTC2细胞中，BAG2 mRNA水平较对照组增加20-25倍，蛋白质的表达水平也显著增加；时间效应实验中，敏感的FRO细胞BAG2 mRNA水平增加快，没有延迟期；并且增加的最高水平显著高于非敏感的ARO细胞（P〈0.01）。结论：BAG2是由蛋白酶体抑制作用诱导产生的新型分子，在蛋白酶体抑制剂诱导的甲状腺癌细胞的死亡中起着促凋亡作用。 展开更多

关键词 bcl-2相关抗凋亡基因2 蛋白酶体抑制剂 凋亡 甲状腺肿瘤 bcl-2-associated athanogene 2

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Bcl-2和p53蛋白在牙龈增生中的表达研究

7

作者 张睿 刘娇艳 +3 位作者 李德纯 张明珠 彭艺 税艳青 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期300-303,共4页

目的:研究Bcl-2(B-cell leukemia-2)蛋白和p53蛋白在牙龈增生中的表达,探讨其与增生牙龈中抗凋亡作用机制的相关性。方法:选择符合临床诊断的11例炎症性牙龈增生患者作为实验组,正常牙龈组织11例作为对照组;通过免疫组织化学法探究增生... 目的:研究Bcl-2(B-cell leukemia-2)蛋白和p53蛋白在牙龈增生中的表达,探讨其与增生牙龈中抗凋亡作用机制的相关性。方法:选择符合临床诊断的11例炎症性牙龈增生患者作为实验组,正常牙龈组织11例作为对照组;通过免疫组织化学法探究增生牙龈组织和正常牙龈组织中Bcl-2蛋白和p53蛋白的表达情况。结果:增生牙龈组织中Bcl-2蛋白和p53蛋白的阳性表达均明显高于正常牙龈组织(P<0.05)。结论:Bcl-2蛋白和p53蛋白在牙龈增生中发挥重要作用,抗凋亡抑制作用参与了牙龈增生的发病过程。 展开更多

关键词 牙龈增生 抗凋亡作用 bcl-2蛋白 P53蛋白

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Bax、Bag-l、Bcl-2在乳腺肿瘤组织中的表达及意义 被引量：3

8

作者 王美玲 《海南医学院学报》 CAS 2014年第11期1472-1474,共3页

目的:探讨Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Bcl-2结合抗凋亡基因(Bag-1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)在乳腺肿瘤组织中的表达及临床意义。方法:选取本院乳腺浸润性导管癌及其癌旁组织各85例、乳腺导管内癌及其癌旁组织各70例,采用链霉菌抗... 目的:探讨Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Bcl-2结合抗凋亡基因(Bag-1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)在乳腺肿瘤组织中的表达及临床意义。方法:选取本院乳腺浸润性导管癌及其癌旁组织各85例、乳腺导管内癌及其癌旁组织各70例,采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(S-P)免疫组化法检测Bax、Bag-l、Bcl-2蛋白在各组织中的表达。结果:Bax蛋白在浸润性导管癌组织中的表达与癌旁正常组织及导管内癌组织比较,差异无统计学意义(P>0.05);Bag-1、Bcl-2蛋白在浸润性导管癌组织中的表达高于在癌旁正常组织,差异具有统计学意义(P<0.05);浸润性导管癌组织中Bag-1、Bcl-2蛋白阳性表达率明显高于导管内癌癌组织,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:乳腺癌组织中Bag-1、Bcl-2蛋白表达高于癌旁正常组织,在浸润性导管癌中的表达高于导管内癌组织,Bag-1、Bcl-2高表达可作为判断乳腺疾病良、恶性及预后的指标之一。 展开更多

关键词 乳腺肿瘤 BAX bcl-2相关X蛋白(Bax) bcl-2结合抗凋亡基因(Bag-1) B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(bcl-2) 表达

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急性髓系白血病维奈克拉耐药细胞株的构建及耐药机制研究

9

作者 刘凯帆 曾令基 +5 位作者 耿素霞 黄欣 李敏明 赖沛龙 翁建宇 杜欣 《中国实验血液学杂志》 北大核心 2025年第4期986-997,共12页

目的:构建BCL-2抑制剂维奈克拉耐药的急性髓系白血病(AML)细胞株,检测维奈克拉耐药细胞株对BCL-2家族蛋白的敏感性,并探讨其耐药的机制。方法:利用CCK-8法筛选对维奈克拉相对敏感的急性髓系白血病细胞株(MV4-11、MOLM13、OCI-AML2),低... 目的:构建BCL-2抑制剂维奈克拉耐药的急性髓系白血病(AML)细胞株,检测维奈克拉耐药细胞株对BCL-2家族蛋白的敏感性,并探讨其耐药的机制。方法:利用CCK-8法筛选对维奈克拉相对敏感的急性髓系白血病细胞株(MV4-11、MOLM13、OCI-AML2),低浓度维奈克拉持续诱导细胞株产生耐药,CCK-8法、流式细胞术分别检测耐药前后的细胞活力、凋亡率,BH3分析法分析耐药细胞株线粒体凋亡通路中促凋亡蛋白的失衡以及对药物敏感性的变化,并用实时荧光定量PCR检测耐药细胞系以及多药耐药患者BCL-2家族蛋白表达水平的改变。结果:成功构建了MV4-11、MOLM13、OCI-AML2的维奈克拉耐药细胞株,IC50均达到10倍以上,在相同浓度的维奈克拉作用下,耐药细胞凋亡率明显下降(P<0.05);BH3分析显示,耐药细胞株对促凋亡蛋白(如BIM、BID和NOXA)敏感性增加;实时荧光定量PCR检测结果显示,耐药细胞株中MCL1表达上调,NOXA1表达下调。维奈克拉耐药患者MCL1、NOXA1表达变化与本研究所建立的耐药细胞系结果一致。结论:本研究通过低浓度持续诱导法成功构建了维奈克拉耐药的AML细胞株,维奈克拉耐药导致了细胞线粒体凋亡通路的改变以及对促凋亡蛋白BIM、BID和NOXA的敏感性上升,这可能与耐药细胞中MCL1表达上调、NOXA1表达下调有关。 展开更多

关键词 急性髓系白血病 维奈克拉 bcl-2家族 耐药 抗凋亡蛋白

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BAG-1蛋白在人癌细胞中的表达和功能 被引量：4

10

作者 王伟强(综述) 陈军(审校) 《中国肺癌杂志》 CAS 2008年第3期470-472,共3页

1995年S Takayama等发现一个可以显著促进Bcl-2抗凋亡作用的蛋白，将其命名为BAG-1（Bcl-2-associated athanogene 1）。BAG-1是一种可以定位于细胞浆和细胞核的多功能蛋白，它不仅可以作用于Bcl-2和Raf-1等蛋白抑制细胞凋亡，而且通过... 1995年S Takayama等发现一个可以显著促进Bcl-2抗凋亡作用的蛋白，将其命名为BAG-1（Bcl-2-associated athanogene 1）。BAG-1是一种可以定位于细胞浆和细胞核的多功能蛋白，它不仅可以作用于Bcl-2和Raf-1等蛋白抑制细胞凋亡，而且通过作用于分子伴侣等多种蛋白分子调节细胞的增生、转录、迁移和运动。BAG-1调控的信号通路在癌症的发生、发展、侵袭以及病人对癌症治疗的反应性等方面起重要作用，所以恶性细胞中BAG-1表达水平的临床意义引起了人们的极大兴趣。 展开更多

关键词 BAG-1蛋白 人癌细胞 bcl-2 癌症治疗 抗凋亡作用 RAF-1 功能蛋白 细胞凋亡

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BAG3蛋白Ser187位点磷酸化诱导人甲状腺癌FRO细胞上皮间质转化 被引量：2

11

作者 陈明红 李美欣 +3 位作者 刘宝琴 李超 王华芹 李宁 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1213-1219,共7页

Bcl-2相关抗凋亡蛋白3(Bcl-2 associated athanogene 3,BAG3)是BAG家族的重要成员,调节肿瘤细胞的粘附、迁移和侵袭,促进恶性肿瘤的复发和转移.本室前期工作证明,PKCδ可催化BAG3的Ser187位点磷酸化.本文研究BAG3蛋白磷酸化修饰对甲状腺... Bcl-2相关抗凋亡蛋白3(Bcl-2 associated athanogene 3,BAG3)是BAG家族的重要成员,调节肿瘤细胞的粘附、迁移和侵袭,促进恶性肿瘤的复发和转移.本室前期工作证明,PKCδ可催化BAG3的Ser187位点磷酸化.本文研究BAG3蛋白磷酸化修饰对甲状腺癌FRO细胞EMT表型转化的影响.稳定转染野生型WT-BAG3、模拟磷酸化型S187D-BAG3、阻碍磷酸化型S187A-BAG3 FRO细胞后,观察细胞形态的变化.结果显示,稳定转染模拟磷酸化型S187D-BAG3引起甲状腺癌FRO细胞呈现明显的间质细胞形态.实时PCR和Western印迹,结果显示,稳定表达S187D-BAG3显著上调间质细胞标记物N-cadherin和波形蛋白mRNA与蛋白质在FRO细胞的表达,但下调上皮细胞标记物E-cadherin的mRNA和蛋白质的表达.同时,免疫荧光结果显示,稳定过表达S187D-BAG3的FRO细胞,E-cadherin和β-catenin出现向核周的内化.本文结果提示,BAG3蛋白磷酸化修饰可诱导甲状腺癌FRO细胞上皮间质转化. 展开更多

关键词 bcl-2相关抗凋亡蛋白3(BAG3) 磷酸化 上皮细胞间质转化

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BAG3蛋白Ser187磷酸化位点定点突变促进FRO细胞迁移和侵袭 被引量：2

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作者 李宁 曹艳莎 +3 位作者 李婳 赵津平 任甫 李克研 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期868-875,共8页

Bcl-2相关抗凋亡蛋白3(Bcl-2 associated athanogene 3,BAG3)是BAG家族的重要成员,调节肿瘤细胞的黏附、迁移和侵袭,促进恶性肿瘤的复发和转移。我们的前期工作证明,PKCδ可催化BAG3的Ser187位点磷酸化。本文研究BAG3蛋白磷酸化修饰对... Bcl-2相关抗凋亡蛋白3(Bcl-2 associated athanogene 3,BAG3)是BAG家族的重要成员,调节肿瘤细胞的黏附、迁移和侵袭,促进恶性肿瘤的复发和转移。我们的前期工作证明,PKCδ可催化BAG3的Ser187位点磷酸化。本文研究BAG3蛋白磷酸化修饰对甲状腺癌FRO细胞迁移、侵袭的影响及其可能机制。通过定点突变的方法,将BAG3蛋白的187位丝氨酸突变为天冬氨酸(S187D)模拟磷酸化,或者将丝氨酸突变为丙氨酸(S187A)抵抗磷酸化,从而间接推测BAG3蛋白Ser187位点磷酸化对FRO细胞迁移、侵袭的影响。FRO细胞转染野生型BAG3、模拟磷酸化型BAG3、阻碍磷酸化型BAG3,通过划痕愈合实验和Transwell转移小室实验,观察BAG3蛋白磷酸化对FRO细胞迁移、侵袭的影响。进一步通过PKC激活剂和抑制剂,研究BAG3蛋白磷酸化对FRO细胞迁移、侵袭影响的机制。结果显示,FRO BAG3-S187D模拟磷酸化组细胞在培养24 h、48 h时,划痕愈合率分别达到35%和80%。Transwell及三维Matrigel转移小室实验显示,平均每个视野穿膜细胞数分别达到180和350个,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。PKC激活剂TPA及抑制剂Rottelerin处理FRO WT-BAG3细胞,24 h愈合率分别为40%和15%,48 h划痕愈合率分别为55%和18%,Transwell穿膜细胞数分别为240和70个,与对照组细胞相比,差异显著(P<0.05)。本研究提示,BAG3蛋白Ser187磷酸化修饰,可促进甲状腺癌FRO细胞迁移、侵袭,其机制可能与PKC信号通路有关。 展开更多

关键词 bcl-2相关抗凋亡蛋白3 磷酸化 迁移 侵袭

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肉桂醛对糖尿病溃疡血管内皮细胞Bax/Bak和凋亡的影响

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作者 金哲羽 谢晨磊 +6 位作者 范心琪 杨树 董睿怡 白雁瑜 丁雅容 周忠志 陈丽 《陆军军医大学学报》 2025年第21期2678-2687,共10页

目的探究肉桂醛(cinnamic aldehyde,CA)对糖尿病溃疡创面组织血管内皮细胞中Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)和Bcl-2拮抗因子(Bcl-2 homologous antagonist/killer,Bak)及细胞凋亡的影响。方法(1)将48只5周龄健康SPF级... 目的探究肉桂醛(cinnamic aldehyde,CA)对糖尿病溃疡创面组织血管内皮细胞中Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)和Bcl-2拮抗因子(Bcl-2 homologous antagonist/killer,Bak)及细胞凋亡的影响。方法(1)将48只5周龄健康SPF级雄性SD大鼠(体质量180~220 g)采用随机数字法选取12只作为空白(Con)组,剩余36只作为糖尿病(Diabetes)组。对Diabetes组进行50 mg/kg的STZ-柠檬酸钠混合液腹腔注射联合高脂饲料喂养建立糖尿病大鼠模型。将Diabetes组采用随机数字法分为(n=12):模型(Model)组、CA组和贝复新(rb-bFGF)组,Con组和Model组创面常规消毒后予以生理盐水涂抹,CA组涂抹含4μmol/L CA的聚乙二醇400(PEG 400)凝胶,rb-bFGF组创面涂抹贝复新凝胶。记录大鼠糖尿病造模后血糖监测情况,分别于干预后第3、7、14天计算各组创面愈合率,干预后第14天HE染色监测创面组织病理变化和Western blot法检测Bax、Bak表达水平。(2)采用175 mmol/L高糖干预人脐静脉血管内皮细胞(EA.hy926)48 h,建立细胞高糖损伤模型。实验细胞分为正常(Cell-Con)组、模型(Cell-Model)组、CA(Cell-CA)组。通过划痕实验检测血管内皮细胞迁移能力,成管实验检测血管内皮细胞形成血管的能力,运用免疫荧光技术分析Bax、Bak荧光蛋白的表达水平,运用TUNEL染色检测血管内皮细胞凋亡水平。结果(1)动物实验结果显示,造模后Diabetes组大鼠血糖值明显高于Con组(P<0.05)。干预后第7、14天,与Con组相比,Model组创面愈合率显著下降(P<0.05)。干预后第14天,Con组全损皮层完成上皮化,而Model组溃疡处炎症细胞密集浸润,新生血管罕见,创面表面表现为持续液体渗出,并伴有炎症反应,Bax、Bak表达显著上升(P<0.05)。与Model组相比,CA组和rb-bFGF组上皮化进程明显,肉芽组织趋于成熟,愈合情况良好,创面愈合率显著上升(P<0.05),CA组Bax、Bak表达显著下降(P<0.05),rb-bFGF组Bax、Bak表达显著下降(P<0.05)。(2)细胞实验结果显示,与Cell-Con组相比,Cell-Model组血管内皮细胞迁移活力、成管能力均显著下降(P<0.05),Bax、Bak荧光蛋白表达水平上升(P<0.05),细胞凋亡明显增加(P<0.05)。与Cell-Model组相比,Cell-CA组血管内皮细胞迁移活力、成管能力均显著上升(P<0.05),Bax、Bak荧光蛋白表达水平降低(P<0.05),细胞凋亡明显减少(P<0.05)。结论CA能够抑制凋亡相关蛋白Bax、Bak的表达,促进血管内皮细胞迁移与成管,抑制高糖下的血管内皮细胞凋亡,可能是促进糖尿病溃疡大鼠伤口愈合的重要原因。 展开更多

关键词 肉桂醛 糖尿病溃疡 细胞凋亡 bcl-2相关X蛋白 bcl-2拮抗因子

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