应用改进的免疫荧光组织化学染色法对水稻根尖细胞微管结构的观察 被引量：2

1

作者 计淑霞 盖国琛 +1 位作者 戴绍军 刘炜 《山东农业科学》 2010年第4期40-42,55,共4页

植物细胞微管在细胞形态建成中具有重要作用。它体积小,且结构始终处于动态变化之中,因此观察到清晰的微管形态有一定的困难。本实验以水稻根尖为材料,介绍了一种改进的植物细胞微管免疫荧光组织化学染色方法,用此方法可以观察到清晰、... 植物细胞微管在细胞形态建成中具有重要作用。它体积小,且结构始终处于动态变化之中,因此观察到清晰的微管形态有一定的困难。本实验以水稻根尖为材料,介绍了一种改进的植物细胞微管免疫荧光组织化学染色方法,用此方法可以观察到清晰、完整的植物微管形态,此法对观察其它植物细胞微管结构也具有指导作用。 展开更多

关键词 植物细胞 微管 水稻根尖 免疫荧光组织化学染色

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NF1基因表达产物在大鼠脑的分布-免疫荧光组化法

2

作者 陈永锋 齐建国 章为 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期294-300,306,共8页

用免疫荧光组织化学方法观察了 NF1基因表达产物神经纤维素在正常成年大鼠脑中的分布 ,结果如下 :(1)大脑皮质中神经纤维素阳性细胞最为密集 ;其次 ,在海马结构、丘脑前核群、丘脑内侧核群、丘脑板内核群、丘脑中线核群及下丘脑室周核... 用免疫荧光组织化学方法观察了 NF1基因表达产物神经纤维素在正常成年大鼠脑中的分布 ,结果如下 :(1)大脑皮质中神经纤维素阳性细胞最为密集 ;其次 ,在海马结构、丘脑前核群、丘脑内侧核群、丘脑板内核群、丘脑中线核群及下丘脑室周核、室旁核中神经纤维素阳性细胞也较密集 ;在杏仁核、下丘脑前区、下丘脑外侧区、下丘脑后区以及隔外侧核、隔内侧核、尾壳核、屏状核、苍白球、三叉神经脊束核等部位 ,也可见到数量不等的神经纤维素阳性细胞稀疏分布。 (2 )神经纤维素免疫阳性反应产物除了分布于神经细胞胞质外 ,在细胞核也有分布。 (3 )结合抗星形胶质细胞特异性酶 (胶质纤维酸性蛋白 )免疫组化反应 。 展开更多

关键词 神经纤维素 免疫荧光组织化学 脑 大鼠 NF1基因

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Nogo-66受体在大鼠神经组织中的表达 被引量：7

3

作者 谢琳 贺翔鸽 +4 位作者 何凤慈 马建洲 龙在云 王永堂 刘媛 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第23期2335-2337,共3页

目的观察Nogo-66受体(NgR)蛋白在脑、脊髓、视网膜、视神经及坐骨神经的表达。方法采用免疫荧光组织化学-激光共聚焦显微镜观察9只正常SD大鼠脑、脊髓、视网膜、视神经及坐骨神经中NgR蛋白表达。结果9只大鼠脑、脊髓、视网膜、视神经切... 目的观察Nogo-66受体(NgR)蛋白在脑、脊髓、视网膜、视神经及坐骨神经的表达。方法采用免疫荧光组织化学-激光共聚焦显微镜观察9只正常SD大鼠脑、脊髓、视网膜、视神经及坐骨神经中NgR蛋白表达。结果9只大鼠脑、脊髓、视网膜、视神经切片中NgR蛋白均表达阳性,荧光染色位于神经元及其突起。9只大鼠坐骨神经切片中NgR蛋白均表达阴性。结论在大鼠中枢神经系统神经元中NgR广泛分布,而在周围神经坐骨神经则无NgR表达,提示NgR的阳性表达与中枢神经系统再生能力低下密切相关。 展开更多

关键词 中枢神经系统 周围神经系统 NgR蛋白 免疫荧光组织化学 激光共聚焦显微镜

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热应激对小鼠睾丸组织Hsp70表达的影响 被引量：2

4

作者 姜忠玲 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第11期5269-5270,5273,共3页

利用化学恒温培养箱对小鼠实施42℃1 h/d的热应激处理,建立持续的全身热应激动物模型。在热应激持续到8、13、21和35 d时,颈椎脱臼处死小鼠,应用免疫荧光组织化学和蛋白质印迹分析的方法检测睾丸组织Hsp70的表达。结果显示,对照组的小... 利用化学恒温培养箱对小鼠实施42℃1 h/d的热应激处理,建立持续的全身热应激动物模型。在热应激持续到8、13、21和35 d时,颈椎脱臼处死小鼠,应用免疫荧光组织化学和蛋白质印迹分析的方法检测睾丸组织Hsp70的表达。结果显示,对照组的小鼠睾丸组织Hsp70呈极强表达;热应激组小鼠睾丸组织Hsp70表达减弱,但随着热应激持续时间的延长,Hsp70表达逐渐恢复。热应激处理8 d后的小鼠睾丸组织Hsp70呈弱表达、13和21 d后呈极弱表达、35 d后呈弱表达。结果表明,Hsp70在小鼠睾丸正常的精子发生过程中发挥重要的作用;持续性的热应激可以使机体建立热适应,Hsp70可作为睾丸组织对热应激产生热适应的生物学标志之一。 展开更多

关键词 热应激 热休克蛋白70 免疫荧光组织化学 蛋白质免疫印迹分析 睾丸

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CD147和PCNA蛋白在人肺癌组织中的表达意义 被引量：11

5

作者 陈福春 潘琦 +2 位作者 张玉霞 陈道平 陈洪雷 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期1450-1452,共3页

目的:本研究利用新型半导体免疫荧光标记试剂-量子点(QDs)结合组织芯片技术检测CD147和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白在人肺癌组织中的表达,并与免疫酶法对比,探讨量子点免疫荧光组织化学技术的有效性和实用性。方法:利用QDs免疫荧光组织化... 目的:本研究利用新型半导体免疫荧光标记试剂-量子点(QDs)结合组织芯片技术检测CD147和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白在人肺癌组织中的表达,并与免疫酶法对比,探讨量子点免疫荧光组织化学技术的有效性和实用性。方法:利用QDs免疫荧光组织化学(QDs-IHC)技术分别检测人肺癌组织芯片中CD147和PC-NA的蛋白表达,同时检测了CD147与PCNA的共表达,并与传统免疫酶法的结果对比。结果:QDs-IHC和传统IHC检测结果显示:CD147和PCNA蛋白表达在对照组和肺癌组之间相比,差异均显著(P<0.05)。CD147和PC-NA蛋白表达之间呈显著正相关(r=0.533,P<0.01)。QDs-IHC检测2种蛋白表达的阳性率均高于IHC所检测的结果,但差异无显著(P>0.05)。结论:QDs-IHC和传统IHC均能检测到CD147和PCNA蛋白在肺癌组织中的表达,但QDs-IHC的灵敏性稍高于IHC,背景更干净。CD147与PCNA协同促进肺癌的恶性进展。 展开更多

关键词 肺肿瘤 CD147 量子点免疫荧光组织化学 增殖细胞核抗原

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5-HT_(1A)受体亚型与P物质、Ⅰ型囊泡膜谷氨酸转运体和甘丙肽在大鼠背根神经节神经元中的共表达 被引量：4

6

作者 陈晶 黄静 +3 位作者 汪伟 王亚云 李云庆 武胜昔 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期400-404,共5页

为探讨5-HT1A受体亚型参与感觉信息调控的机制,本文利用免疫荧光组织化学双重染色技术观察了该受体亚型与P物质(SP)、I型囊泡膜谷氨酸转运体(VGLUT1)和甘丙肽(Gal)在大鼠背根神经节(DRG)神经元内的共存状况。结果表明:5-HT1A受体亚型阳... 为探讨5-HT1A受体亚型参与感觉信息调控的机制,本文利用免疫荧光组织化学双重染色技术观察了该受体亚型与P物质(SP)、I型囊泡膜谷氨酸转运体(VGLUT1)和甘丙肽(Gal)在大鼠背根神经节(DRG)神经元内的共存状况。结果表明:5-HT1A受体亚型阳性神经元占DRG神经元总数的46.2%,阳性神经元以大型及小型神经元为主。在DRG内观察到了5-HT1A/SP、5-HT1A/VGLUT1以及5-HT1A/Gal双标神经元。其中5-HT1A/SP双标神经元占5-HT1A受体亚型阳性神经元的34.6%,占SP阳性神经元的72.0%;5-HT1A/VGLUT1双标神经元占5-HT1A受体亚型阳性神经元的24.1%,占VGLUT1阳性神经元的18.5%;5-HT1A/Gal双标神经元占5-HT1A免疫阳性神经元的17.6%,占Gal免疫阳性神经元的63.8%。5-HT1A/SP和5-HT1A/Gal双标神经元主要为DRG的小型神经元,而5-HT1A/VGLUT1双标神经元主要为大、中型神经元。上述结果提示,5-HT1A受体亚型可能通过调节SP、谷氨酸以及Gal在初级传入终末及外周神经末稍的释放发挥其感觉信息的调节作用。 展开更多

关键词 5-HT1A受体亚型 P物质 VGLUT1 甘丙肽 背根神经节 免疫荧光组织化学

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NgR蛋白在新生SD大鼠视网膜中的表达 被引量：5

7

作者 尹小磊 叶剑 陈春林 《眼科新进展》 CAS 2007年第2期81-83,共3页

目的观察NgR(Nogo-66 receptor)蛋白在出生24hSD大鼠视网膜中的表达。方法使用免疫荧光组织化学技术及激光共聚焦显微镜观察6只出生24h的正常SD大鼠视网膜中NgR蛋白的表达。结果在6只出生24h的正常SD大鼠视网膜神经节细胞及其突起上可... 目的观察NgR(Nogo-66 receptor)蛋白在出生24hSD大鼠视网膜中的表达。方法使用免疫荧光组织化学技术及激光共聚焦显微镜观察6只出生24h的正常SD大鼠视网膜中NgR蛋白的表达。结果在6只出生24h的正常SD大鼠视网膜神经节细胞及其突起上可以观察到NgR蛋白的表达,且该蛋白主要分布在视网膜神经节细胞核的周围。结论出生24h的SD大鼠视网膜中就已经存在NgR蛋白,为进一步研究哺乳动物中枢神经系统损伤后轴突再生修复奠定了基础。 展开更多

关键词 视网膜 NGR 大鼠 免疫荧光组织化学 激光共聚焦显微镜

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大鼠脊髓内囊泡膜谷氨酸转运体与星形胶质细胞之间的联系(英文) 被引量：2

8

作者 董玉琳 庞有旺 +1 位作者 张富兴 李金莲 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期389-393,共5页

本研究应用双重免疫荧光组织化学法观察了大鼠脊髓胶质细胞内囊泡膜谷氨酸转运体 (VGlu Ts包括 VGlu T1,VG-lu T2及 VGlu T3 )的表达状况。结果显示 :大鼠脊髓内 VGlu T1、VGlu T2和 VGlu T3样阳性轴突终末与星形胶质细胞之间形成密切接... 本研究应用双重免疫荧光组织化学法观察了大鼠脊髓胶质细胞内囊泡膜谷氨酸转运体 (VGlu Ts包括 VGlu T1,VG-lu T2及 VGlu T3 )的表达状况。结果显示 :大鼠脊髓内 VGlu T1、VGlu T2和 VGlu T3样阳性轴突终末与星形胶质细胞之间形成密切接触 ;部分星形胶质细胞同时呈 VGlu T3样免疫阳性。上述结果提示 ,脊髓内谷氨酸能神经终末与星形胶质细胞之间存在着信号传递 ;且在星形胶质细胞通过胞吐作用释放谷氨酸的过程中 VGlu T3可能发挥重要作用。 展开更多

关键词 大鼠 囊泡膜谷氨酸转运体 脊髓 星形胶质细胞 免疫荧光组织化学

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PAR4在背根神经节感觉神经元的表达及与TRPV1和CGRP的共存 被引量：3

9

作者 陈丹 张在峰 王昭金 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期493-496,共4页

目的:研究蛋白酶活化受体4(PAR4)在小鼠背根神经节(DRG)感觉神经元的表达,及与瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)和降钙素基因相关肽(CGRP)的共存,为探讨PAR4在感觉神经伤害性刺激信号传导中的作用提供形态学依据。方法:免疫荧光组织化学... 目的:研究蛋白酶活化受体4(PAR4)在小鼠背根神经节(DRG)感觉神经元的表达,及与瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)和降钙素基因相关肽(CGRP)的共存,为探讨PAR4在感觉神经伤害性刺激信号传导中的作用提供形态学依据。方法:免疫荧光组织化学双标方法结合激光共聚焦显微镜技术。结果:DRG内大量的感觉神经元表达PAR4。PAR4阳性胞体多为中、小型神经元,并可见部分阳性神经纤维。免疫荧光双标显示许多PAR4阳性神经元表达TRPV1或与CGRP共存。几乎所有的TRPV1阳性神经元均表达PAR4,大部分CGRP标记神经元呈PAR4阳性,另外还可见到许多CGRP/TRPV1双标神经元。结论:小鼠DRG初级感觉神经元广泛的表达PAR4,该受体可能通过影响TRPV1和CGRP参与伤害性刺激的调节。 展开更多

关键词 蛋白酶活化受体4 瞬时受体电位香草酸亚型1 降钙素基因相关肽 背根神经节 免疫荧光组织化学 小鼠

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OVX-OP大鼠腺垂体FS细胞中S-100蛋白表达的共聚焦显微镜研究 被引量：2

10

作者 马兴 李起鸿 +2 位作者 王全平 吕荣 王春梅 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2001年第1期12-14,共3页

目的　探讨神经组织蛋白S - 10 0在去卵巢致骨质疏松症大鼠 (OVX -OP)腺垂体滤泡星形细胞 (FS细胞 )中的表达。方法　采用适龄SD大鼠 40只 ,随机均分为卵巢切除 (OVX)组和假性手术对照 (Sham组 ) ,于术前和术后 6周末测量大鼠全身及腰... 目的　探讨神经组织蛋白S - 10 0在去卵巢致骨质疏松症大鼠 (OVX -OP)腺垂体滤泡星形细胞 (FS细胞 )中的表达。方法　采用适龄SD大鼠 40只 ,随机均分为卵巢切除 (OVX)组和假性手术对照 (Sham组 ) ,于术前和术后 6周末测量大鼠全身及腰椎骨密度 (BMD)。取垂体 ,应用免疫荧光组织化学法结合激光扫描共聚焦显微镜 (LSCM)分析技术 ,检测FS细胞中S - 10 0表达。结果　术后 6周末OVX组大鼠全身及腰椎BMD均明显低于Sham组值 (P <0 0 1,P <0 0 1)。S - 10 0阳性荧光标记物定位于FS细胞的胞浆中。FS细胞具有典型的细胞突结构、与腺垂体中丰富的血窦直接相邻、结成了腺垂体中发达的活性细胞网络、在结构上与多种腺垂体内分泌细胞密切相连。两组间S- 10 0荧光强度和表达阳性率无显著差异 (P >0 0 5 )。结论　SD大鼠OVX术后 6周出现骨质疏松变化 ,FS细胞在形态结构和定位上的特征及其在数量上的稳定性可能是中枢调节骨代谢因素作用的一个细胞基础。 展开更多

关键词 神经组织蛋白S-100 免疫荧光组织化学 激光扫描共聚焦显微镜

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GAD_(67)-GFP基因敲入小鼠脊髓背角GABA能神经元与不同5-HT受体亚型的共存研究 被引量：1

11

作者 王亚云 黄静 +2 位作者 汪伟 武胜昔 李云庆 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期338-342,共5页

为初步探讨5-HT受体亚型对脊髓背角内抑制性GABA能神经元的介导作用,本研究以GAD67-GFP基因敲入小鼠为工具,利用免疫荧光双标记方法,检测了5-HT受体亚型与脊髓背角GABA能阳性神经元的共存情况。结果显示,GABA能阳性细胞与5-HT1A,5-HT2A... 为初步探讨5-HT受体亚型对脊髓背角内抑制性GABA能神经元的介导作用,本研究以GAD67-GFP基因敲入小鼠为工具,利用免疫荧光双标记方法,检测了5-HT受体亚型与脊髓背角GABA能阳性神经元的共存情况。结果显示,GABA能阳性细胞与5-HT1A,5-HT2A和5-HT3等受体亚型共存,且共存率存在明显不同。以上结果提示5-HT受体各亚型在脊髓水平发挥不同的作用,从而参与完成5-HT复杂的生理效应。 展开更多

关键词 5-羟色胺 γ-氨基丁酸 5-羟色胺受体亚型 脊髓背角 免疫荧光组织化学

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孤束核内儿茶酚胺能神经元汇聚内脏传入与口面部躯体伤害性信息并向臂旁核投射 被引量：1

12

作者 郭峰 马文领 +1 位作者 张文斌 张富兴 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期173-177,共5页

为了研究内脏初级传入与口面部深层组织躯体伤害性信息是否汇聚于孤束核(NTS)中向臂旁核(PBN)投射的儿茶酚胺(CA)能神经元。本实验将SD大鼠随机分为两组。第一组动物以生物素化的葡聚糖胺(BDA)注入颈部迷走神经主干跨节追踪,四甲基罗达... 为了研究内脏初级传入与口面部深层组织躯体伤害性信息是否汇聚于孤束核(NTS)中向臂旁核(PBN)投射的儿茶酚胺(CA)能神经元。本实验将SD大鼠随机分为两组。第一组动物以生物素化的葡聚糖胺(BDA)注入颈部迷走神经主干跨节追踪,四甲基罗达明(TMR)注入臂旁外侧核(LPB)逆行追踪,福尔马林刺激咬肌并行FOS的免疫荧光组织化学染色;第二组动物以BDA注入颈部迷走神经主干跨节追踪,福尔马林刺激咬肌并行FOS和酪氨酸羟化酶(TH)染色。在激光扫描共聚焦显微镜下对两组大鼠NTS内的标记细胞和纤维进行了观察。两组实验中,主要在NTS的内侧、中间内侧和连合亚核内观察到重叠分布的TMR、FOS或TH、FOS单标神经元。其中部分TMR逆行标记的或TH阳性神经元呈FOS阳性并与BDA跨节标记的纤维和终末形成紧密接触。提示大鼠NTS内的CA能神经元可能汇聚了内脏初级传入和口面部深层组织的躯体伤害性刺激信息并向LPB投射。 展开更多

关键词 孤束核 臂旁核 咬肌 儿茶酚胺能 内脏初级传入 伤害性信息 免疫荧光组织化学 大鼠

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大鼠囊泡膜谷氨酸转运体样和P物质样阳性终末与三叉神经中脑核神经元的联系 被引量：1

13

作者 陈鹏 李金莲 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期1-6,共6页

最近在哺乳类动物脑内克隆出两种囊泡膜谷氨酸转运体— VGlu T1和 VGlu T2 ,目前人们已将两者作为脑内谷氨酸能终末的特异性标记物。本研究应用免疫荧光组织化学三重染色技术 ,在激光共聚焦显微镜下对大鼠三叉神经中脑核 (Vme)内VGlu T1... 最近在哺乳类动物脑内克隆出两种囊泡膜谷氨酸转运体— VGlu T1和 VGlu T2 ,目前人们已将两者作为脑内谷氨酸能终末的特异性标记物。本研究应用免疫荧光组织化学三重染色技术 ,在激光共聚焦显微镜下对大鼠三叉神经中脑核 (Vme)内VGlu T1/VGlu T2样和 P物质 (SP)样阳性终末与磷酸激活的谷氨酰胺酶 (PAG)样阳性神经元之间的联系进行了观察。结果显示 :(1) Vme内有较多的 PAG样阳性神经元 ,在吻尾方向上亘其全长出现 ,这些神经元绝大多数为大的假单极神经元 ,直径为2 5～ 5 0 μm。(2 )大量的 VGlu T1样、VGlu T2样和 SP样免疫阳性的神经纤维和终末广泛分布于 Vme内 ,其中 VGlu T2样阳性纤维和终末的分布密度高于 VGlu T1;部分 SP样阳性纤维和终末同时呈 VGlu T1样或 VGlu T2样免疫阳性。 (3 )一些 VGlu T1/VGlu T2样、SP样或 VGlu T1/VGlu T2和 SP双重标记的免疫阳性终扣分别包绕在 PAG样阳性的 Vm e神经元胞体周围 ,并与之形成密切接触。以上结果提示 :Vme神经元在将口面部本体感觉信息向更高一级中枢传递过程中 ,可能接受中枢其它来源的谷氨酸能和 SP能终末的调控 ,其中谷氨酸能的投射末梢可能通过与突触后膜上的相应受体结合而发挥作用而 展开更多

关键词 囊泡膜谷氨酸转运体 谷氨酸 P物质 免疫荧光组织化学 三叉神经中脑核 大鼠 神经元

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VR1与CGRP和IB4在大鼠结状神经节和岩神经节内的共存 被引量：1

14

作者 王昭金 王延清 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期284-288,共5页

应用免疫荧光组织化学三标方法结合激光共聚焦显微镜技术研究了辣椒素受体(VR1)在大鼠舌咽神经和迷走神经内脏感觉神经节结状神经节(NG)和岩神经节(PG)内的表达,以及与降钙素基因相关肽(CGRP)、植物凝集素(IB4)的共存。结果显示:VR1在NG... 应用免疫荧光组织化学三标方法结合激光共聚焦显微镜技术研究了辣椒素受体(VR1)在大鼠舌咽神经和迷走神经内脏感觉神经节结状神经节(NG)和岩神经节(PG)内的表达,以及与降钙素基因相关肽(CGRP)、植物凝集素(IB4)的共存。结果显示:VR1在NG和PG内中、小型神经元胞体和神经纤维存在广泛的表达。许多VR1阳性神经元呈IB4阳性或与CGRP共存。在NG,CGRP阳性神经元数量较少,约有71.4%±3.8%VR1阳性神经元与IB4共存,只有7.1%±1.2%VR1阳性细胞与CGRP共存。PG内CGRP阳性神经元胞体数量较多,有55.7%±3.1%VR1阳性神经元与IB4共存;有38.7%±2.7%VR1阳性细胞同时呈CGRP阳性。两个神经节内IB4/CGRP双标神经元或VR1/CGRP/IB4三标神经元数量稀少。上述结果提示舌咽神经和迷走神经内脏感觉神经节内存在VR1/IB4和VR1/CGRP两种不同的与伤害性刺激相关的VR1阳性神经元亚群。 展开更多

关键词 辣椒素受体 降钙素基因相关肽 植物凝集素 结状神经节 岩神经节 免疫荧光组织化学 大鼠

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胸腺肽-β4在小鼠卵母细胞和早期胚胎中的表达与分布规律

15

作者 张岩 李树峰 +3 位作者 杨彩荣 郑可佳 李宁 严云勤 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1193-1201,共9页

胸腺肽-β4(thymosin-β4,Tb4)是一种重要的G-actin遮蔽因子(G-actin sequestering factor),在细胞微丝活动中有着调节G-actin活性的作用.以往报道证实了Tb4在细胞中具有广泛的生理作用,但其在哺乳动物卵母细胞成熟和早期胚胎发育等方... 胸腺肽-β4(thymosin-β4,Tb4)是一种重要的G-actin遮蔽因子(G-actin sequestering factor),在细胞微丝活动中有着调节G-actin活性的作用.以往报道证实了Tb4在细胞中具有广泛的生理作用,但其在哺乳动物卵母细胞成熟和早期胚胎发育等方面的作用,迄今还没有系统的研究报道.以昆明白小鼠卵巢、卵母细胞和早期胚胎作为实验材料,以免疫(荧光)组织化学和RT-PCR技术为主要研究方法,对Tb4的表达与分布进行了研究.结果显示,Tb4在相关发育过程中,存在差异性的表达和定位变化.结果表明,在小鼠卵母细胞成熟和早期胚胎的发育过程,Tb4能够通过表达与分布的变化对细胞微丝活动和细胞增殖活动进行调控,对小鼠卵母细胞成熟、早期胚胎发育以及胚胎着床过程有重要的作用. 展开更多

关键词 胸腺肽-β4 小鼠 卵母细胞 胚胎 微丝 免疫荧光组织化学 激光共聚焦扫描显微镜

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GAD67-GFP基因敲入小鼠黑质网状部神经元GABA与氯离子转运体KCC2和NKCC1的共存

16

作者 李俊杰 魏燕燕 +5 位作者 千年松 季茹 武胜昔 李云庆 王亚云 窦科峰 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期147-152,共6页

为了观察谷氨酸脱羧酶67-绿色荧光蛋白(GAD67-GFP)基因敲入小鼠黑质网状部(SNr)内,表达GFP的GABA能神经元与一对功能相反的Cl-共转运体(K+-Cl-cotransporter2,KCC2;Na+-K+-Cl-cotransporter1,NKCC1)的共存情况,本研究分别运用原位分子... 为了观察谷氨酸脱羧酶67-绿色荧光蛋白(GAD67-GFP)基因敲入小鼠黑质网状部(SNr)内,表达GFP的GABA能神经元与一对功能相反的Cl-共转运体(K+-Cl-cotransporter2,KCC2;Na+-K+-Cl-cotransporter1,NKCC1)的共存情况,本研究分别运用原位分子杂交与免疫组织化学相结合以及GFP与KCC2或NKCC1免疫荧光染色相结合的双重标记方法,在光学显微镜和激光共聚焦显微镜下同时进行观察。结果显示:(1)SNr内95%以上的GFP阳性神经元同时表达KCC2 mRNA,而50%表达KCC2 mRNA的阳性神经元呈GFP阳性;(2)SNr内80%以上的GFP阳性神经元同时表达NKCC1 mRNA,约35%表达NKCC1 mRNA的阳性神经元呈GFP阳性;(3)SNr内90%以上的GFP阳性神经元同时表达KCC2,双标神经元约占KCC2阳性神经元的50.5%;(4)SNr内80.5%以上的GFP阳性神经元同时表达NKCC1,双标神经元约占NKCC1阳性神经元的42.5%。以上结果表明,SNr内表达GFP的GABA能神经元大部分与KCC2和NKCC1共存,提示氯离子共转运体可能对SNr内GABA能神经元起重要的调控作用。 展开更多

关键词 黑质网状部 GABA能神经元 KCC2 NKCC1 原位分子杂交 免疫荧光组织化学 GAD67-GFP基因敲入小鼠

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GAD67-GFP基因敲入小鼠三叉上核内向三叉神经运动核投射的GFP阳性神经元表达c-fos的研究

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作者 葛顺楠 郭威 +2 位作者 刘涛 武胜昔 李金莲 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期571-576,共6页

本文综合应用逆行束路追踪(将四甲基罗达明-TMR注入一侧三叉神经运动核)和免疫荧光组织化学三重标记技术,在激光共聚焦显微镜下对谷氨酸脱羧酶67-绿色荧光蛋白(GAD67-GFP)基因敲入小鼠在口周部给予伤害性刺激时,三叉上核(Vsup)内向对侧... 本文综合应用逆行束路追踪(将四甲基罗达明-TMR注入一侧三叉神经运动核)和免疫荧光组织化学三重标记技术,在激光共聚焦显微镜下对谷氨酸脱羧酶67-绿色荧光蛋白(GAD67-GFP)基因敲入小鼠在口周部给予伤害性刺激时,三叉上核(Vsup)内向对侧三叉神经运动核(Vmo)投射的呈GFP阳性的GABA能神经元表达c-fos的情况进行了研究。结果显示:(1)Vsup内可观察到许多GFP阳性神经元,细胞较小;(2)也可观察到许多TMR或c-fos单标神经元较密集地分布于Vsup内,其中c-fos阳性产物只见于神经元的胞核,在胞浆内未见表达;(3)在激光共聚焦显微镜下可进一步观察到部分神经元同时呈GFP/TMR、TMR/c-fos、GFP/c-fos双重标记或GFP/TMR/c-fos三重标记。其中GFP/TMR双标神经元分别占GFP或TMR阳性神经元的17.8%和19.2%;TMR/c-fos双标神经元分别占TMR或c-fos阳性神经元的34.9%和31.3%;GFP/c-fos双标神经元分别占GFP或c-fos阳性神经元的21.2%和20.5%;而GFP/TMR/c-fos三标神经元分别占GFP、TMR或c-fos阳性神经元的11.1%、12%和10.8%。以上结果表明小鼠Vsup内部分GABA能神经元可接受来自同侧的口面部伤害性信息,并对这些信息进行整合后,直接发出投射纤维至Vmo;故Vsup内部分GABA能运动前神经元可能参与口面部伤害性反射局部环路的构成。 展开更多

关键词 三叉上核 三叉神经运动核 Γ-氨基丁酸 C-FOS 逆行束路追踪 免疫荧光组织化学 GAD67-GFP基因敲入小鼠

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Galβ-1,4-GlcNAc在钳夹伤后大鼠坐骨神经中的表达变化

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作者 朱敏 沈爱国 +2 位作者 丁炯 顾晓松 王鹤鸣 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2006年第6期658-661,共4页

目的:分析Galβ-1,4-GlcNAc在正常和钳夹伤后大鼠坐骨神经中的表达变化。方法:采用免疫荧光和凝集素组织化学的方法检测Galβ-1,4-GlcNAc在正常和夹伤的大鼠坐骨神经中的表达定位。然后用图像分析的方法分析Galβ-1,4-GlcNAc在正常和夹... 目的:分析Galβ-1,4-GlcNAc在正常和钳夹伤后大鼠坐骨神经中的表达变化。方法:采用免疫荧光和凝集素组织化学的方法检测Galβ-1,4-GlcNAc在正常和夹伤的大鼠坐骨神经中的表达定位。然后用图像分析的方法分析Galβ-1,4-GlcNAc在正常和夹伤的大鼠坐骨神经中的表达变化。结果:运用免疫荧光、凝集素组织化学方法和图像分析的方法检测Galβ-1,4-GlcNAc在夹伤后的坐骨神经中的表达定位及变化,发现其表达在外周神经中的雪旺细胞中并于夹伤后的一周达到高峰,于夹伤后两周恢复至正常水平。结论:提示Galβ-1,4-GlcNAc在坐骨神经夹伤后发生表达变化,并且主要表达在坐骨神经的雪旺细胞中,说明Galβ-1,4-GlcNAc在周围神经再生的早期发挥着重要的作用。 展开更多

关键词 Ga1β-1 4-G1cNAc 免疫荧光组织化学方法 凝集素组织化学方法 坐骨神经 大鼠

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大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核浅层内囊泡膜谷氨酸转运体样和P物质样阳性终末与Sindibis病毒转染表达GFP神经元之间的联系

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作者 李金莲 刘涛 +1 位作者 金子武嗣 古田贵宽 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期206-210,T002,共6页

应用 GFP基因重组病毒标记技术和免疫荧光组织化学技术 ,在荧光显微镜和激光扫描共聚焦显微镜下观察了大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核 (Vc)浅层内两种囊泡膜谷氨酸转运体 (VGlu T1样和 DNPI样 )以及 SP样阳性纤维和终末与 Sindibis病毒转... 应用 GFP基因重组病毒标记技术和免疫荧光组织化学技术 ,在荧光显微镜和激光扫描共聚焦显微镜下观察了大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核 (Vc)浅层内两种囊泡膜谷氨酸转运体 (VGlu T1样和 DNPI样 )以及 SP样阳性纤维和终末与 Sindibis病毒转染表达绿色荧光蛋白阳性神经元之间的联系。目的在于为探索兴奋性神经递质和 SP参与面口部伤害性信息在 Vc浅层内的传递和调控提供形态学依据 ;并为今后更好地开展绿色荧光蛋白基因重组病毒标记法的研究探索新路。结果显示 :(1)绿色荧光蛋白基因重组 Sindibis病毒注入一侧 Vc浅层后 ,仅在同侧 Vc注射部位附近的 ～ 层内观察到 5～ 9个绿色荧光蛋白标记神经元 ,这些神经元的胞体为小型 (≤ 15μm) ,呈圆形、多角形或不规则形 ;(2 ) Vc浅层内均可见大量的 VGlu T1样、DNPI样和 SP样阳性纤维和终末 ,其中 VGlu T1样阳性纤维和终末主要密集分布于 层的内侧部和 层 , 层和 层外侧部较为稀疏 ;而 DNPI则主要密集分布于 层和 层 , 层相对地较为稀疏 ;SP样阳性纤维和终末主要分布于 层和 层 ;(3 ) VGlu T1样、DNPI样和 SP样阳性终扣分别聚集于绿色荧光蛋白标记神经元的胞体或树突周围 ,并与之形成密切接触。以上结果提示 ,Vc浅层内两种囊泡膜谷氨酸转运体样和 展开更多

关键词 大鼠 三叉神经脊束核尾侧亚核 浅层内囊泡膜 阳性终末 Sindibis病毒转染 GFP神经元之 联系 谷氨酸转运体 P物质 免疫荧光组织化学

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大鼠三叉神经本体觉中枢通路中VGluT1样阳性胞体和终末的生后发育、分布以及与PAG样阳性神经元的联系

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作者 庞有旺 张富兴 李金莲 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期493-498,共6页

本研究应用免疫组织化学和免疫荧光组织化学技术,在光镜和激光共聚焦显微镜下观察了大鼠脑干内三叉神经本体觉中枢通路中I型囊泡膜谷氨酸转运体(VGluT1)样阳性神经元胞体和纤维终末的生后发育、表达和分布以及与磷酸激活的谷氨酰胺酶(P... 本研究应用免疫组织化学和免疫荧光组织化学技术,在光镜和激光共聚焦显微镜下观察了大鼠脑干内三叉神经本体觉中枢通路中I型囊泡膜谷氨酸转运体(VGluT1)样阳性神经元胞体和纤维终末的生后发育、表达和分布以及与磷酸激活的谷氨酰胺酶(PAG)样阳性神经元之间的联系。结果显示:(1)新生(P0)大鼠所有的三叉神经中脑核(Vme)神经元的胞体内均可观察到VGluT1的表达,3d(P3)时,VGluT1的表达最强,之后至P11,VGluT1的表达随着发育逐渐下降。P11后,在Vme神经元的胞体内未检测到VGluT1样免疫阳性产物,但在阴性胞体周围可观察到VGluT1样免疫阳性终末分布;(2)生后0d,三叉神经脊束核吻侧亚核背内侧部及其邻接的外侧网状结构(Vodm-LRF)、三叉神经感觉主核背内侧部(Vpdm)和三叉上核尾外侧部(Vsup-CL)内已可观察到VGluT1样阳性纤维终末分布。生后7d,VGluT1样阳性纤维终末开始在三叉神经运动核腹侧区(AVM)、上橄榄核背侧区(ADO)出现;(3)激光共聚焦显微镜下,于生后12d在Vme、Vodm和Vpdm内和生后21d在Vsup-CL内分别观察到一些VGluT1样阳性终末与PAG样阳性神经元的胞体或树突形成密切接触。以上结果提示:VGluT1可能与生后发育过程中大鼠脑干内三叉神经本体感觉中枢通路的兴奋性联系的建立密切相关。 展开更多

关键词 Ⅰ型囊泡膜谷氨酸转运体 磷酸激活的谷氨酰胺酶 三叉神经本体觉中枢通路 发育 免疫荧光组织化学 大鼠

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