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新生儿免疫球蛋白重链可变区基因重排研究
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作者 毛晓健 肖昕 +1 位作者 熊爱华 钱新华 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1901-1904,共4页
目的探讨不同胎龄新生儿免疫球蛋白(Ig)重链可变区(VH)基因重排情况。方法排除宫内感染的新生儿,其中胎龄27周4例,28~32周9例、33~36周12例、37~42周13例,提取其外周血RNA、进行逆转录PCR(RT-PCR)扩增其IgVH基因、6%变性聚丙烯酰胺... 目的探讨不同胎龄新生儿免疫球蛋白(Ig)重链可变区(VH)基因重排情况。方法排除宫内感染的新生儿,其中胎龄27周4例,28~32周9例、33~36周12例、37~42周13例,提取其外周血RNA、进行逆转录PCR(RT-PCR)扩增其IgVH基因、6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染显色。结果各个胎龄VH1~VH7各家族均有多个重排条带表达,同一个VH家族重排基因的平均中分子量在各个胎龄组间差异无显著性。结论27~42周新生儿IgVH基因VH1~VH7家族重排均具有多样性;对同一个VH家族来说,28~42周各胎龄组IgVH基因重排无显著性差异。 展开更多
关键词 新生儿 免疫球蛋白 重链可变 基因重排
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细胞内RT-PCR扩增免疫球蛋白重链可变区基因 被引量:1
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作者 李昌龙 赵满仓 +2 位作者 王抒 蒋雷 李健斋 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1995年第4期380-382,共3页
通常,逆转录PCR(RT-PCR)需要高质量的mRNA,操作过程复杂,效率低且易受到RNase的破坏,为了简化操作,提高效率,用10%甲醛盐溶液固定杂交瘤细胞,以Np-40渗透化处理细胞后做RT-PCR,获得了大约3... 通常,逆转录PCR(RT-PCR)需要高质量的mRNA,操作过程复杂,效率低且易受到RNase的破坏,为了简化操作,提高效率,用10%甲醛盐溶液固定杂交瘤细胞,以Np-40渗透化处理细胞后做RT-PCR,获得了大约350bp的特异性免疫球蛋白重链可变区基因片段,与用同一对引物得到的常规RT-PCR扩增产物一致.这项技术可用于获得特定结构基因片段,连结并扩增嵌合蛋白基因及构建多克隆免疫球蛋白文库等. 展开更多
关键词 细胞 RT-PCR 重链可变基因 免疫球蛋白
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免疫检查点分子T细胞激活抑制物免疫球蛋白可变区结构域(VISTA)的研究进展 被引量:5
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作者 轩春晓 柳军 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期266-269,共4页
T细胞激活抑制物免疫球蛋白可变区结构域(VISTA)是可抑制T细胞应答的负向免疫检查点分子,主要表达于造血细胞,具有受体和配体的双重功能,在肿瘤微环境和肿瘤浸润淋巴结中表达升高。VISTA可抑制T细胞对肿瘤抗原的应答,抑制T细胞分化为调... T细胞激活抑制物免疫球蛋白可变区结构域(VISTA)是可抑制T细胞应答的负向免疫检查点分子,主要表达于造血细胞,具有受体和配体的双重功能,在肿瘤微环境和肿瘤浸润淋巴结中表达升高。VISTA可抑制T细胞对肿瘤抗原的应答,抑制T细胞分化为调节性T细胞(Treg),降低白细胞介素2(IL-2)的产生,具有免疫抑制和免疫调节的功能。但是VISTA并不会对B细胞的增殖产生影响。VISTA与转移性黑素瘤、诱导性黑素瘤和年龄相关的炎症表型的发生相关,并且具有与不同于程序性死亡蛋白1及配体1(PD-1/PD-L1)信号通路,联用VISTA/PD-1的单克隆抗体可取得更好的治疗效果。此外,VISTA在小鼠急性移植物抗宿主疾病模型上也表现出显著的调节作用。VISTA在免疫抑制中具有明确的功能,可能是这一生物学行为的核心控制元件,然而其天然配体及其发挥作用的内在机制尚不清楚。提示我们VISTA作为新发现的负向免疫检查点有望成为肿瘤免疫治疗的新靶点。 展开更多
关键词 T细胞激活抑制物免疫球蛋白可变结构域(VISTA) 肿瘤免疫 负向免疫检查点 综述
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免疫检查点分子T细胞激活抑制物免疫球蛋白可变区结构域(VISTA)研究进展 被引量:1
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作者 刘婉梅 郄称心 柳军(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期1263-1271,共9页
负性检查点调节因子(NCRs)可调节T细胞活化及免疫应答,在肿瘤和免疫性疾病中发挥重要作用。T细胞激活抑制物免疫球蛋白可变区结构域(VISTA)属于B7家族成员新型免疫检查点,在骨髓来源细胞中高表达,且可抑制T细胞活化和增殖,在调节先天和... 负性检查点调节因子(NCRs)可调节T细胞活化及免疫应答,在肿瘤和免疫性疾病中发挥重要作用。T细胞激活抑制物免疫球蛋白可变区结构域(VISTA)属于B7家族成员新型免疫检查点,在骨髓来源细胞中高表达,且可抑制T细胞活化和增殖,在调节先天和适应性免疫应答中发挥重要作用,成为免疫治疗干预的潜在靶标。本文将对VISTA的结构、表达、功能及其在疾病中的作用进行综述。 展开更多
关键词 免疫检查点 T细胞激活抑制物免疫球蛋白可变结构域 肿瘤免疫 自身免疫
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毛细胞白血病和毛细胞白血病变异型患者免疫球蛋白重链可变区基因分子特征分析 被引量:1
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作者 王轶 王婷玉 +5 位作者 王君 阎禹廷 吕瑞 熊文婕 邱录贵 易树华 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2022年第20期1073-1078,共6页
目的:本研究归纳毛细胞白血病(hairy cell leukemia,HCL)和毛细胞白血病变异型(hairy cell leukemia-variant,HCL-v)患者免疫球蛋白重链可变区(immunoglobulin heavy chain variable region,IGHV)基因分子特征,并探讨其与临床特征及预... 目的:本研究归纳毛细胞白血病(hairy cell leukemia,HCL)和毛细胞白血病变异型(hairy cell leukemia-variant,HCL-v)患者免疫球蛋白重链可变区(immunoglobulin heavy chain variable region,IGHV)基因分子特征,并探讨其与临床特征及预后的相关性。方法:回顾性分析2004年12月至2020年1月在中国医学科学院血液病医院完善IGHV检测的29例HCL患者和15例HCL-v患者临床和生存资料。结果:44例患者共检测出23种重排片段,VH4和VH4-34分别是两种疾病最常见的V区基因家族和重排片段。HCL和HCL-v患者中IGHV为突变状态的比例分别为72.4%和66.7%,发生VH4-34重排(VH4-34 rearrangement,VH4-34+)的患者IGHV突变率更低(P<0.001)。在HCL中,使用VH1基因家族患者脾大发生率更低(P=0.041);而VH4-34+或IGHV未突变状态(IGHV-unmutated,IGHV-UM)的患者具有更高的乳酸脱氢酶(VH4-34+P=0.049,IGHV-UM P=0.022)和β2微球蛋白(VH4-34+P=0.039,IGHV-UM P=0.036)水平,且VH4-34+患者BRAF V600E突变率更低(20%vs.85%,P=0.012)。单因素预后分析显示,VH4-34+是HCL患者无进展生存(progression-free survival,PFS)(P=0.001)和总生存(P=0.004)的不良预后因素,IGHV-UM则为HCL-v患者PFS(P=0.038)的危险因素。结论:HCL和HCL-v患者对VH4基因家族及VH4-34存在偏向性使用,VH4-34+和IGHV-UM间存在明显共现性。在HCL中,VH4-34+与高肿瘤负荷及更差生存相关,而IGHV-UM是HCL-v患者PFS的危险因素。 展开更多
关键词 毛细胞白血病 毛细胞白血病变异型 免疫球蛋白重链可变基因 疾病特征 预后
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伴发副肿瘤性天疱疮的Castleman瘤B细胞免疫球蛋白基因重排与超变分析 被引量:4
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作者 王京 卜定方 朱学骏 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期454-461,共8页
目的 :我科近来研究了副肿瘤性天疱疮 (PNP)患者肿瘤在发病中的作用 ,证明 1例Castleman瘤产生针对表皮连接蛋白的抗体。本文进一步探讨肿瘤和抗体在疾病发生过程中的作用和PNP的发病机制。方法 :对 1例副肿瘤性天疱疮伴发已经证明可分... 目的 :我科近来研究了副肿瘤性天疱疮 (PNP)患者肿瘤在发病中的作用 ,证明 1例Castleman瘤产生针对表皮连接蛋白的抗体。本文进一步探讨肿瘤和抗体在疾病发生过程中的作用和PNP的发病机制。方法 :对 1例副肿瘤性天疱疮伴发已经证明可分泌自身反应性抗体的Castleman瘤患者肿瘤B细胞进行培养 ,免疫组化分析其表面标志 ;扩增患者肿瘤组织的RNA ,将PCR产物克隆、测序。对B细胞克隆的免疫球蛋白可变区基因重排和超变区突变特点进行分析。结果 :培养肿瘤细胞多数为CD2 0、HLA DR、smIgM、smIgG阳性。克隆得到IgVH 与IGHV3 9 0 1胚系基因片段接近 ,IgVL与IGKV4 1 0 1胚系基因片段同源。VH和VL 基因CDRs区的核苷酸改变均明显多于FRs区 ,并且在VH和VL 基因观察到的CDRs区替换突变数目远大于可能发生随机突变的值。结论 :本例伴发Castleman瘤的副肿瘤性天疱疮患者的肿瘤中存在特殊B细胞克隆 ,其已重排的免疫球蛋白可变区基因CDRs超变区发生明显体细胞突变 ,可能是抗原选择的结果。该克隆经过免疫球蛋白类别转换 ,可能直接产生与表皮自身抗原特异性结合的自身反应性IgG。 展开更多
关键词 副肿瘤性天疱疮 B细胞 患者 免疫球蛋白 抗体 克隆 可变基因 VL基因 PCR产物 随机突变
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SHM对山羊免疫球蛋白重链表达多样性的影响研究
7
作者 杜丽娟 王淑辉 +4 位作者 朱艳娇 康孟阳 赵海东 郑凯 孙秀柱 《家畜生态学报》 北大核心 2016年第11期17-24,96,共9页
山羊是重要家畜之一,目前关于其免疫球蛋白基因座的结构和表达多样性机制研究还较少。以西农萨能奶山羊为对象,通过体外克隆其免疫球蛋白重链重组的可变区并与潜在功能胚系基因比对,探究体细胞高突变在山羊免疫球蛋白重链可变区基因表... 山羊是重要家畜之一,目前关于其免疫球蛋白基因座的结构和表达多样性机制研究还较少。以西农萨能奶山羊为对象,通过体外克隆其免疫球蛋白重链重组的可变区并与潜在功能胚系基因比对,探究体细胞高突变在山羊免疫球蛋白重链可变区基因表达中的作用和机制。结果表明:山羊免疫球蛋白重链可变区表达过程中体细胞高突变的主要表现形式为碱基突变,插入/缺失突变较少。碱基替换突变偏好发生在A和G碱基,突变频率以A→G最高,其次为G→A和C→T;碱基发生转换的频率高于颠换,嘌呤碱基替换的数目是嘧啶的2倍左右;多数碱基替换发生在体细胞高突变的第二阶段,碱基改变集中在A:T碱基对上。碱基替换突变在可变区不同区域的替换频数表现为CDR2高于CDR1,FR3高于FR1和FR2。碱基的插入/缺失突变主要发生在CDRs,插入/缺失的碱基数目多为3或者3的倍数。总之,山羊免疫球蛋白重链可变区基因在表达过程中存在较为丰富的碱基突变,体细胞高突变是其重链可变区表达谱多样化的重要机制。 展开更多
关键词 山羊 免疫球蛋白 重链可变 体细胞高突变
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T-bet^(+)记忆B细胞来源边缘区淋巴瘤67例临床病理特征及预后分析
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作者 高传书 许周毅 +4 位作者 梁家毅 张亮 邵龙飞 王伟 王哲 《临床与实验病理学杂志》 北大核心 2025年第2期179-185,190,共8页
目的探讨T-bet^(+)记忆B细胞来源边缘区淋巴瘤(marginal zone lymphoma,MZL)的临床病理学特征及潜在的临床价值。方法收集67例MZL的临床资料,采用HE染色、免疫组化SP法、多重免疫荧光染色和B细胞受体高通量测序技术,观察MZL的组织学、... 目的探讨T-bet^(+)记忆B细胞来源边缘区淋巴瘤(marginal zone lymphoma,MZL)的临床病理学特征及潜在的临床价值。方法收集67例MZL的临床资料,采用HE染色、免疫组化SP法、多重免疫荧光染色和B细胞受体高通量测序技术,观察MZL的组织学、免疫表型和免疫球蛋白重链可变基因(immunoglobulin heavy chain variable gene,IGHV)谱系特征。结果67例MZL中T-bet阳性率为50.75%(34/67),其表达与患者性别、临床分期、Ki67增殖指数等临床病理特征相关(P<0.05),无进展生存较差(P=0.0122)。T-bet是影响MZL疾病进展的风险因素。T-bet^(+)MZL组织镜下常见被T-bet^(+)肿瘤B细胞围绕生长的淋巴滤泡生发中心、腺体滤泡上皮细胞包围T-bet^(+)肿瘤B细胞形成“MALT ball”型淋巴上皮病变及IgG+浆细胞分化的肿瘤细胞。这些组织学特征在T-bet-MZL组织中少见(P<0.05)。T-bet^(+)MZL和T-bet-MZL的VH基因取用存在重叠,常见VH家族为IGHV4和IGHV3,取用片段为IGHV4-34和IGHV3-30。T-bet表达对VH基因的取用未产生偏倚影响(P>0.05)。T-bet表达与MZL的体细胞超突变(somatic hypermutation,SHM)状态有关(P=0.0149),T-bet^(+)MZL的SHM率主要为2%~4.9%,T-bet-MZL的SHM率多数>5%。VH基因取用与患者临床病理特征无关(P>0.05)。T-bet^(+)MZL中IGHV4患者的无进展生存较差(P=0.0382)。结论T-bet在MZL中表达,与MZL的组织学特征、浆细胞免疫表型和IGHV基因SHM等临床病理特征密切相关,患者预后较差,其可能是影响MZL进展的潜在分子学标志物。 展开更多
关键词 淋巴瘤 T-bet^(+)记忆B细胞 边缘 浆细胞分化 免疫球蛋白重链可变基因 体细胞超突变
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抗人CD14新克隆ZCH-7-2F9单抗轻重链可变区基因克隆与序列分析 被引量:1
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作者 宁铂涛 汤永民 +2 位作者 曹江 沈红强 钱柏芹 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2007年第4期348-354,共7页
目的:获取抗人CD14单克隆抗体(单抗)ZCH-7-2F9(简称2F9)轻链可变区(VL)和重链可变区(VH)基因,为2F9单链抗体(ScFv2F9)的构建奠定基础。方法:复苏2F9和NS-1细胞株,并亚克隆2F9细胞株,从其最佳克隆93A10提取总RNA,RQ1 RNase-Free DNase处... 目的:获取抗人CD14单克隆抗体(单抗)ZCH-7-2F9(简称2F9)轻链可变区(VL)和重链可变区(VH)基因,为2F9单链抗体(ScFv2F9)的构建奠定基础。方法:复苏2F9和NS-1细胞株,并亚克隆2F9细胞株,从其最佳克隆93A10提取总RNA,RQ1 RNase-Free DNase处理污染的DNA,与NS-1细胞进行同步对照,通过RT-PCR,扩增获得2F9单抗VL基因和VH基因,分别克隆入pGEM○R-T Easy载体,然后转化DH5α细菌,酶切鉴定并纯化阳性重组子,测序后进行在线核苷酸序列分析。结果:2F9单抗VL基因全长321 bp,编码107个氨基酸,归属于小鼠Ig的Vκ基因,氨基酸序列分析结果显示,VL含有明确的4个框架区(FR)和3个抗原决定簇互补区(CDR),在第23位和第88位为半胱氨酸,是与抗体二硫键形成有关的两种特征性氨基酸;其VH基因全长360 bp,编码120个氨基酸,归属于小鼠Ig的VH基因,氨基酸序列分析结果显示,VH含有明确的4个框架区和3个抗原决定簇互补区,在第22位和第96位为半胱氨酸,是与抗体二硫键形成有关的两种特征性氨基酸。结论:经核苷酸序列分析证明所克隆的基因分别是2F9单抗的VL和VH基因,为2F9基因工程抗体研究奠定了坚实的基础。 展开更多
关键词 抗体 单克隆 抗原 CD14 序列分析 免疫球蛋白可变区/遗传学 基因
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抗胃癌单抗3H11可变区氨基端序列对抗体活性的影响 被引量:4
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作者 李竞 王琰 +5 位作者 王卓智 刘群英 化冰 陈宇萍 朱迎春 董志伟 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1999年第4期369-373,共5页
采用 R T P C R 方法, 利用第一骨架区通用引物扩增重链 Fd 段和κ链的基因, 克隆到 Fab 表达载体中, 在大肠杆菌中获得了表达但未检测到抗原结合活性. 根据已克隆的3 H11 V L、 V H 的真实序列, 重新设计... 采用 R T P C R 方法, 利用第一骨架区通用引物扩增重链 Fd 段和κ链的基因, 克隆到 Fab 表达载体中, 在大肠杆菌中获得了表达但未检测到抗原结合活性. 根据已克隆的3 H11 V L、 V H 的真实序列, 重新设计κ链及 Fd 段5′端引物, 分别将骨架区引物在κ链及 Fd 段5′端所造成的氨基酸残基改变纠正为原始序列, 构建分别含有矫正后κ链或矫正后 Fd 以及二个链均得到矫正的 Fab 表达载体, 这些载体在大肠杆菌中均获得类似水平的表达, 对任何一个链的矫正均可部分恢复 Fab 段胃癌细胞的结合活性. 结果说明在构建小分子抗体时, P C R 引物引入的轻。 展开更多
关键词 胃癌 免疫球蛋白 可变基因 单克隆抗体
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抗人CD3单抗重、轻链可变区基因的体外扩增、克隆和序列分析 被引量:1
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作者 杨安钢 许辉 +4 位作者 吉昌华 韩骅 杨立宏 金伯泉 苏成芝 《生物化学杂志》 CSCD 1994年第2期213-217,共5页
根据免疫球蛋白重链和轻链可变区基因5’端序列和J区序列,化学合成适合于体外扩增抗体重、轻链可变区基因的二对引物。从体外培养的OKT3杂交瘤细胞中提取总RNA,反转录生成cDNA,以cDNA为模板,分别加入合成的重、轻... 根据免疫球蛋白重链和轻链可变区基因5’端序列和J区序列,化学合成适合于体外扩增抗体重、轻链可变区基因的二对引物。从体外培养的OKT3杂交瘤细胞中提取总RNA,反转录生成cDNA,以cDNA为模板,分别加入合成的重、轻链可变区引物进行PCR,扩增出抗体重、轻链可变区基因片段。将扩增产物分别插入pUC19质粒,筛选出阳性克隆,用链终止法进行DNA序列测定。所测重链可变区基因全长357bp,编码119个氨基酸,轻链可变区基因全长321bp,编码107个氨基酸。 展开更多
关键词 免疫球蛋白 可变 基因 序列分析
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人B细胞淋巴瘤独特型DNA疫苗诱导抗肿瘤免疫反应的实验研究 被引量:2
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作者 仲凯励 张伟京 +3 位作者 原野 吴英 张明伟 毛宁 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第6期609-615,共7页
本研究目的在于探讨含人B细胞淋巴瘤免疫球蛋白重链可变区基因片段的DNA疫苗诱导小鼠抗肿瘤免疫反应的情况 ,为人B细胞淋巴瘤疫苗的应用提供基础实验研究资料。本研究通过PCR方法获得人B细胞淋巴瘤细胞系Namalwa膜表面免疫球蛋白重链可... 本研究目的在于探讨含人B细胞淋巴瘤免疫球蛋白重链可变区基因片段的DNA疫苗诱导小鼠抗肿瘤免疫反应的情况 ,为人B细胞淋巴瘤疫苗的应用提供基础实验研究资料。本研究通过PCR方法获得人B细胞淋巴瘤细胞系Namalwa膜表面免疫球蛋白重链可变区 (VH)基因片段 ,同时克隆小鼠单核细胞趋化蛋白 3(MCP 3)作为免疫佐剂分子 ,进一步以重组PCR的方法获得MCP 3和VH基因的融合基因片段 ,构建DNA疫苗重组质粒。在体外以瞬时转染的方法证实以融合基因片段作为抗原基因的DNA疫苗质粒能够在真核细胞中正确表达。DNA疫苗质粒大量提取后免疫小鼠 ,用流式细胞术检测小鼠抗体生成情况 ,并用LDH释放法测定CTL活性以检测抗独特型细胞免疫。结果表明 ,从接种疫苗第 8周开始小鼠体内特异性抗独特型抗体明显升高 ,并且抗体滴度可维持高水平至少至第 2 0周。在DNA疫苗免疫组中 5只免疫小鼠有 3只产生抗体。所诱导的抗体只特异性识别肿瘤细胞表面独特型抗原 ,而不识别人A5 4 9对照细胞。用乳酸脱氢酶释放法未测到明显CTL反应的产生。结论 :以MCP 3与VH的融合作为抗原基因构建的DNA疫苗能够诱导小鼠体内产生抗淋巴瘤细胞的特异性抗独特型抗体 ,为DNA疫苗临床用于人B细胞淋巴瘤治疗提供了初步实验支持。 展开更多
关键词 B细胞 DNA疫苗 免疫球蛋白重链可变 VH 肿瘤 免疫反应 淋巴瘤 抗体
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Iα1基因hs1,2区B等位基因与IgA肾病的易感性相关 被引量:1
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作者 古宏标 李幼姬 +4 位作者 杜勇 黄玮俊 李彩霞 陈素琴 王一鸣 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期2221-2224,共4页
目的研究Iα1hs1,2VNTR多态性与我国IgA肾病的相关关系。方法采集419例肾活检证实的IgA肾病患者及其一级亲属、条件相当的201例健康志愿者血样,提取基因组DNA。用PCR产物直接电泳法鉴定Iα1hs1,2VNTR基因型,采用以家庭为基础的传递/不... 目的研究Iα1hs1,2VNTR多态性与我国IgA肾病的相关关系。方法采集419例肾活检证实的IgA肾病患者及其一级亲属、条件相当的201例健康志愿者血样,提取基因组DNA。用PCR产物直接电泳法鉴定Iα1hs1,2VNTR基因型,采用以家庭为基础的传递/不平衡分析(TDT)和单倍型相对危险度(HRR),以及病例-对照研究分析Iα1hs1,2VNTR多态性与我国IgA肾病的相关关系。结果①TDT分析结果显示Iα1hs1,2VNTR B等位基因从杂合子父母向患者传递的频率显著高于预期值(101Trios,χ2=6.818,P<0.01,扩展TDT分析也得到相同结果(164家庭,χ2=7.583,P<0.01)。②与TDT结果一致,HRR分析同样显示Iα1hs1,2VNTR B等位基因的过度传递(P<0.05,χ2=4.122,HRR=1.180),而BB基因型具有更强的患病倾向(P<0.05,χ2=4.411,OR=1.538)。③病例-对照研究显示IgA肾病组B等位基因频率显著高于正常对照组(χ2=6.968,P<0.05)。结论Iα1hs1,2VNTR基因多态性与我国IgA肾病患者的易感性相关。 展开更多
关键词 肾小球肾炎 IGA 免疫球蛋白A 增强子元件(遗传学) 可变数量串联重复 多态性现象(遗传学)
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我国汉族人群α1基因数目可变串联重复序列分布特征的研究
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作者 古宏标 黄玮俊 +6 位作者 杜勇 李彩霞 李幼姬 薛超 陈素琴 胡彬 王一鸣 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期752-756,共5页
目的:研究我国汉族人群免疫球蛋白α1基因中3个数目可变串联重复序列(VNTR)多态性分布特征,及其与已报道的高加索人群相比较的特点。方法:从现存数据库中寻找α1基因内的3个VNTR位点,即α1基因3’端的hs1,2增强子内的VNTR1、其上游6Kb的... 目的:研究我国汉族人群免疫球蛋白α1基因中3个数目可变串联重复序列(VNTR)多态性分布特征,及其与已报道的高加索人群相比较的特点。方法:从现存数据库中寻找α1基因内的3个VNTR位点,即α1基因3’端的hs1,2增强子内的VNTR1、其上游6Kb的VNTR2和位于α1基因第5外显子的E5VNTR。提取2 0 1例广东汉族人基因组DNA ,PCR分别扩增含上述3个VNTR位点片段,2 % - 3%凝胶电泳分带鉴定基因型,并以测序证实。结果:与高加索人群比较我国汉族人群α1基因VNTR1多态性分布特征表现为:C(3次重复)等位基因频率明显升高(10. 0 %vs 1 0 % ) ,A(1次重复)等位基因频率偏低(30 . 3%vs36. 1% - 39 .4 % ) ,差异显著(χ2 =72 .85 ,P <0 .0 1)。基因型BB占37. 8% ,AB占32. 3% ,AA占12 % ,BC占11 .4 % ,AC占4 5 % ,CC占2. 0 % ,BC、AC基因型分布频率显著高于高加索人群,而AB型分布频率显著低于高加索人群(χ2 =73. 77,P <0 .0 1)。另外两个数据库中报道的VNTR位点(VNTR 2及E5VNTR)在我们所测人群中呈均一分布,PCR产物长度分别为136bp(VNTR 2 )和5 35bp(E5VNTR)。结论:我国汉族人群α1基因VNTR多态性分布与基因组数据库中基于高加索人群的资料不尽相同,其中Iα1hs1,2VN TR1多态性不同于高加索人群。 展开更多
关键词 免疫球蛋白A 可变数量串联重复 多态现象(遗传学) 中国人
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家畜自然抗病力的遗传控制和培育(上)
15
作者 王治华 《中国牛业科学》 1991年第1期10-13,共4页
本文以翔实的资料论述了家畜自然抗病力的起源及其在传染病控制中的意义。从免疫遗传学的角度解释了自然抗病力的发生机制及其遗传控制。介绍了家富自然抗病力的研究方法,并且回顾了前人在本领域中所作研究的典型范例,其中包括牛持续性... 本文以翔实的资料论述了家畜自然抗病力的起源及其在传染病控制中的意义。从免疫遗传学的角度解释了自然抗病力的发生机制及其遗传控制。介绍了家富自然抗病力的研究方法,并且回顾了前人在本领域中所作研究的典型范例,其中包括牛持续性白细胞增生病和牛布鲁氏菌病等。最后提出了家畜自然抗病力的培育方法,并且展望了本研究领域的前景。 展开更多
关键词 遗传控制 免疫遗传学 传染病控制 白细胞增生病 布鲁氏菌病 培育方法 典型范例 流产布氏杆菌 持续性 抗体可变
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免疫检查点VISTA及其在自身免疫性疾病中作用的研究现状 被引量:1
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作者 钱宇婧 张美芬(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第22期2810-2814,共5页
自身免疫性疾病是一类由于机体免疫耐受功能紊乱导致的慢性炎症性疾病,病因不清。T细胞激活抑制物免疫球蛋白可变区结构域(VISTA)是一个新的、独特的负性免疫检查点分子,多数研究认为,VISTA可抑制T淋巴细胞和髓系细胞的活化和功能,在自... 自身免疫性疾病是一类由于机体免疫耐受功能紊乱导致的慢性炎症性疾病,病因不清。T细胞激活抑制物免疫球蛋白可变区结构域(VISTA)是一个新的、独特的负性免疫检查点分子,多数研究认为,VISTA可抑制T淋巴细胞和髓系细胞的活化和功能,在自身免疫性疾病(如系统性红斑狼疮、自身免疫性脑脊髓炎、银屑病、自身免疫性肝炎)的发生发展中具有保护作用,并可作为十分有效的潜在免疫治疗靶点。本文将对VISTA及其在自身免疫性疾病中的作用研究进展做一综述。 展开更多
关键词 T细胞激活抑制物免疫球蛋白可变结构域 自身免疫性疾病 免疫检查点 综述
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新型免疫检查点在肿瘤治疗中的研究进展 被引量:1
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作者 吴坤 吴锦 +1 位作者 方梦莹 刘文洪 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1050-1054,共5页
免疫治疗在肿瘤治疗中显示出强大的生命力,其中免疫检查点的研究引起广泛关注。程序性死亡蛋白1(PD-1)和细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(CTLA4)已在肿瘤治疗中取得较好的成果。此外,一些新型检查点,如腺苷酸A2A受体(A2AR),B7同源物3(B7-H3)... 免疫治疗在肿瘤治疗中显示出强大的生命力,其中免疫检查点的研究引起广泛关注。程序性死亡蛋白1(PD-1)和细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(CTLA4)已在肿瘤治疗中取得较好的成果。此外,一些新型检查点,如腺苷酸A2A受体(A2AR),B7同源物3(B7-H3),吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO),淋巴细胞激活基因3(LAG-3),T细胞免疫球蛋白及黏蛋白结构域蛋白3(TIM-3)/CD366和T细胞活化的Ig可变区结构域抑制物(VISTA)等正处于研究中。其中,LAG-3、TIM-3和VISTA这三个检查点的抗瘤研究较多,阻断它们也可以取得抑制肿瘤细胞增殖、增强免疫细胞活化和提高生存率等效果。另外,这三个检查点阻滞剂可以和PD-1阻滞剂等联合使用,并且已经在临床试验中取得较好疗效。我们主要总结了各新型免疫检查点的研究进展及其在肿瘤治疗中的优缺点。 展开更多
关键词 免疫治疗 淋巴细胞激活基因3(LAG-3) T细胞免疫球蛋白及黏蛋白结构域蛋白3(TIM-3)/HAVCR2/CD366 T细胞活化的Ig可变结构域抑制物(VISTA) 免疫检查点阻滞剂 综述
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抗膀胱癌单抗Fab段基因的克隆及表达 被引量:3
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作者 周丽君 王琰 +2 位作者 白银 张海荣 余莉章 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2002年第2期117-121,共5页
目的:克隆抗膀胱癌单抗BDI的Fab段基因并在大肠杆菌中表达。方法:用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR),从分泌抗人膀胱癌的鼠单抗杂交瘤细胞系中克隆k链和Fd段基因,克隆到Fab表达载体中,在大肠杆菌表达噬菌体抗体和可溶Fab;运用PCR介导... 目的:克隆抗膀胱癌单抗BDI的Fab段基因并在大肠杆菌中表达。方法:用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR),从分泌抗人膀胱癌的鼠单抗杂交瘤细胞系中克隆k链和Fd段基因,克隆到Fab表达载体中,在大肠杆菌表达噬菌体抗体和可溶Fab;运用PCR介导的定位点突变改造V_H氨基端序列;用ELISA、免疫组化法等进行特异性鉴定。结果:从分泌抗膀胱癌的鼠单抗杂交瘤细胞系中克隆了重链Fd段和k链基因,在大肠杆菌中获得有抗原结合活性的噬菌体抗体和可溶性Fab的表达,但活性很弱,将V_H氨基端序列矫正为亲本单抗原始序列后,明显改善了其活性,通过ELISA、免疫组化及模拟抗体库筛选证实了所获抗体片段的特异性结合及在抗体库技术中的可用性。结论:获得了功能性抗膀胱癌小分子抗体,并再次提示抗体氨基端序列对抗体活性的影响的重要性。 展开更多
关键词 克隆 表达 抗膀胱癌单抗 免疫球蛋白可变基因 FAB 膀胱癌
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抗大肠癌噬菌体人单链抗体的初步鉴定及序列分析 被引量:2
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作者 朱建高 胡锦跃 +4 位作者 李官成 李跃辉 周国华 孙去病 李小玲 《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第2期95-98,共4页
目的 :对抗大肠癌细胞的单克隆噬菌体单链抗体进行初步鉴定和测序分析。方法 :采用细胞ELISA ,免疫组化 ,DNA序列测定和计算机分析方法 ,对 5个单克隆噬菌体抗体 (CH2 73,CH2 0 5 ,CH2 0 9,CHA12 ,CH72 3)进行初步鉴定和序列分析。结果... 目的 :对抗大肠癌细胞的单克隆噬菌体单链抗体进行初步鉴定和测序分析。方法 :采用细胞ELISA ,免疫组化 ,DNA序列测定和计算机分析方法 ,对 5个单克隆噬菌体抗体 (CH2 73,CH2 0 5 ,CH2 0 9,CHA12 ,CH72 3)进行初步鉴定和序列分析。结果 :5个抗体均对人大肠癌细胞、人胚肾上皮细胞和其它某些人肿瘤细胞反应 ,也与人正常肝细胞有弱阳性反应 ,但不与鼠源性的癌细胞和正常细胞反应。细胞免疫组化进一步证实了ELISA结果的正确性。大肠癌免疫组化对大肠癌组织有特异性的结合反应 ,而不与正常大肠组织反应。测序结果为CH2 73ScFv全长 732bp ;V ,D ,J分别属于VH3 30 D1 2 6 JH3 linker V1 13 JL2 ,GenBank序号为AY0 2 8777和AY0 2 8996 ;CH2 0 5全长 36 6bp ,V ,D ,J分别VH1 4 6 D6 13 JH3,GenBank序号为AF35 936 5 ;CH2 0 9,CHA12和CH72 3的ScFv基因完全相同 ,全长 72 3bp ,其VH DH JH与CH2 73ScFv基因中的VH DH JH 完全一致 ,V ,D ,J分别属于VH3 30 D1 2 6 JH3 linker L2 Jκ2 ,GenBank序号为AF36 3774。结论 :噬菌体抗体具有结合人大肠癌组织和细胞的活性 。 展开更多
关键词 抗大肠癌噬菌体 单链抗体 初步鉴定 序列分析 免疫组化 大肠癌 免疫球蛋白可变基因
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慢性淋巴细胞性白血病预后相关分子标记的研究进展 被引量:2
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作者 毛洁 毛峥嵘 周韧 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期250-256,共7页
慢性淋巴细胞性白血病(CLL)是成人白血病中最常见的一种。IGVH基因的突变状态是CLL患者最重要的预后标记,而Zeta链相关蛋白激酶(ZAP-70)可作为IGVH突变状态的替代标记。CD38是一种促使B细胞活化和增殖的Ⅱ类跨膜糖蛋白,能提高CLL细胞的... 慢性淋巴细胞性白血病(CLL)是成人白血病中最常见的一种。IGVH基因的突变状态是CLL患者最重要的预后标记,而Zeta链相关蛋白激酶(ZAP-70)可作为IGVH突变状态的替代标记。CD38是一种促使B细胞活化和增殖的Ⅱ类跨膜糖蛋白,能提高CLL细胞的生存率,促进其增殖,也可作为CLL的独立预后指标。另外,超过80%的CLL患者存在染色体畸变,最常见的异常是染色体的丢失,其中13q14缺失最为常见(35%);而最常见的染色体增加为12q的三体性(23%)。人类白细胞抗原G(HLA-G)表达增高预示CLL的恶性进展及其生存期的缩短。Toll样受体是天然免疫的重要组成部分,TLR激动剂与放化疗、单克隆抗体,以及肿瘤疫苗联合应用将给CLL的治疗带来重大突破。 展开更多
关键词 白血病 淋巴细胞 慢性 蛋白质酪氨酸激酶 染色体畸变 免疫球蛋白可变 受体 细胞表面 预后
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