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积雪草酸调控白细胞介素-6/信号转导子和转录激活子3/核转录因子-κB通路对哮喘小鼠Treg/Th17免疫平衡的影响
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作者 彭显 邹敏 杨宇斌 《儿科药学杂志》 CAS 2024年第10期5-10,共6页
目的:探讨积雪草酸调控白细胞介素(IL)-6/信号转导子和转录激活子3(STAT3)/核转录因子-κB(NF-κB)通路对哮喘小鼠Treg/Th17免疫平衡的影响。方法:采用卵清蛋白(OVA)致敏和激发来制备哮喘小鼠模型,随机分为模型组、积雪草酸低剂量组(54 ... 目的:探讨积雪草酸调控白细胞介素(IL)-6/信号转导子和转录激活子3(STAT3)/核转录因子-κB(NF-κB)通路对哮喘小鼠Treg/Th17免疫平衡的影响。方法:采用卵清蛋白(OVA)致敏和激发来制备哮喘小鼠模型,随机分为模型组、积雪草酸低剂量组(54 mg/kg)、积雪草酸高剂量组(108 mg/kg)、积雪草酸高剂量(108 mg/kg)+Colivelin(IL-6/STAT3/NF-κB激活剂,2 mg/kg)组,每组各10只。另选10只小鼠在致敏和激发阶段给予等剂量生理盐水设为对照组,用积雪草酸和Colivelin分组处理各组小鼠后检测其肺组织病理形态,肺泡灌洗液(BALF)中炎性细胞计数,外周血Treg/Th17,BALF和血清中Treg、Th17细胞分泌因子水平,肺组织IL-6/STAT3/NF-κB通路相关蛋白表达。结果:与对照组比较,模型组小鼠肺组织发生明显病理损伤,外周血Treg细胞占比和Treg/Th17,BALF和血清IL-10、IL-35水平降低(P<0.05)。肺部炎症评分,BALF中白细胞计数与嗜酸粒细胞计数,外周血Th17细胞占比,BALF和血清IL-17、IL-6水平,肺组织IL-6蛋白表达与p-STAT3/STAT3、p-NF-κB p65/NF-κB p65升高(P<0.05)。低、高剂量积雪草酸可逆转哮喘模型小鼠上述病理变化,且高剂量积雪草酸作用更强。Colivelin可减弱积雪草酸对哮喘模型小鼠上述病理变化的作用。结论:积雪草酸可通过减弱IL-6表达与STAT3、NF-κB的磷酸化,抑制哮喘小鼠炎症细胞及炎症因子产生,从而减轻气道炎症及肺组织损伤,改善肺功能。 展开更多
关键词 积雪草酸 白细胞介素-6/信号转导转录激活子3/核转录-κB 哮喘 Treg/Th17 免疫平衡
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咳喘宁对病毒诱发哮喘模型大鼠CD4^+、CD8^+T细胞内信号转导子和转录激活子6表达的影响 被引量:1
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作者 李英 罗银河 +2 位作者 王孟清 严杰 李玲 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2013年第10期25-28,共4页
目的通过观察咳喘宁对呼吸道合胞病毒(RSV)诱发哮喘模型大鼠CD4+、CD8+T细胞内信号转导子和转录激活子6(STAT6)表达的影响,阐明咳喘宁防治RSV诱发支气管哮喘的机理。方法分别从磷酸盐缓冲液(PBS)对照组、模型组大鼠外周血中提取单个核细... 目的通过观察咳喘宁对呼吸道合胞病毒(RSV)诱发哮喘模型大鼠CD4+、CD8+T细胞内信号转导子和转录激活子6(STAT6)表达的影响,阐明咳喘宁防治RSV诱发支气管哮喘的机理。方法分别从磷酸盐缓冲液(PBS)对照组、模型组大鼠外周血中提取单个核细胞,采用免疫磁珠法分离获得CD4+、CD8+T细胞并对其行纯度鉴定与活力检测。采用免疫荧光法,使用流式细胞仪测定T细胞内STAT6蛋白的表达水平,以中药咳喘宁进行干预,动态观察细胞培养过程中,咳喘宁对CD4+、CD8+T细胞中STAT6蛋白表达的调节作用。结果免疫磁珠法获得的CD4+、CD8+T细胞纯度与活力均支持实验的下行进展。与PBS对照组比较,模型组CD4+T细胞含量显著升高(P<0.01),CD8+T细胞含量升高不明显(P>0.05)。模型组大鼠CD4+T与CD8+T细胞内STAT6的表达增高,咳喘宁治疗组CD4+与CD8+T细胞内STAT6的表达水平比模型组显著下降,差异有统计学意义(P<0.01);与地塞米松、沙丁胺醇组比较,咳喘宁组CD4+、CD8+T细胞内STAT6的表达水平略高,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论咳喘宁通过下调哮喘模型大鼠CD4+、CD8+T细胞内STAT6的表达,纠正哮喘中Th2细胞的过度增殖分化,影响Th2免疫应答优势,从而减少伏痰的产生,达到防治支气管哮喘的目的 。 展开更多
关键词 咳喘宁 支气管哮喘 CD4+T细胞 CD8+T细胞 信号转导转录激活子6 大鼠
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水牛信号转导子和转录激活子1基因电子克隆及序列分析 被引量:8
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作者 邓廷贤 庞春英 +3 位作者 陈明棠 王建 杨炳壮 梁贤威 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第8期9-13,共5页
本研究运用生物信息学方法对水牛信号转导子和转录激活子1(signal transduction and activators of transcription1,STAT1)基因进行电子克隆及其序列分析。以牛STAT1基因序列作为探针电子克隆了水牛STAT1基因完整的编码序列并进行了RT-... 本研究运用生物信息学方法对水牛信号转导子和转录激活子1(signal transduction and activators of transcription1,STAT1)基因进行电子克隆及其序列分析。以牛STAT1基因序列作为探针电子克隆了水牛STAT1基因完整的编码序列并进行了RT-PCR验证。序列分析结果表明,水牛的STAT1基因序列长3437bp,包含1个2244bp的开发阅读框,共编码747个氨基酸。该基因cDNA编码区序列与普通牛、绵羊、人、猪、大鼠、小鼠和山羊同源性比对结果表明,其相似性分别为99%、98%、89%、93%、86%、85%和87%。经聚类分析结果表明,水牛与普通牛的分子进化关系最近。 展开更多
关键词 水牛 信号转导转录激活子1基因 克隆 生物信息学
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益气养阴方对糖尿病肾病气阴两虚大鼠肾组织Janus激酶/信号转导子和转录激活子通路的影响 被引量:15
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作者 周雪梅 陈雪功 +4 位作者 程立 董昌武 王建青 程维克 张红梅 《安徽中医学院学报》 CAS 2013年第1期70-72,共3页
目的通过检测大鼠肾组织Janus激酶/信号转导子和转录激活子(Janus kinase/signal transducerand activator of transcription,JAK/STAT)的表达,探讨益气养阴方干预糖尿病肾病(diabetic nephropa-thy,DN)气阴两虚证的机制。方法将33只大... 目的通过检测大鼠肾组织Janus激酶/信号转导子和转录激活子(Janus kinase/signal transducerand activator of transcription,JAK/STAT)的表达,探讨益气养阴方干预糖尿病肾病(diabetic nephropa-thy,DN)气阴两虚证的机制。方法将33只大鼠随机分为正常组、DN组、DN气阴两虚组、西药组和中药组,采用链脲佐菌素复制DN模型,采用青皮、枳实、附子耗气伤阴复制气阴两虚模型,采用免疫组织化学法检测肾组织JAK1/3、STAT1的表达。结果与正常组比较,DN组和DN气阴两虚组JAK1/3和STAT1表达水平显著升高(P<0.01);中药组和西药组JAK1/3表达水平低于DN组和DN气阴两虚组,但差异无统计学意义(P>0.05);中药组和西药组STAT1表达水平显著低于DN组和DN气阴两虚组(P<0.05)。结论益气养阴中药可通过调节DN气阴两虚证大鼠肾组织JAK/STAT信号的异常表达,而发挥对早期肾脏损伤的防治作用。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 JANUS激酶 信号转导转录激活子(JAK STAT) 气阴两虚证 益气养阴
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miRNA-155靶向Wnt5a调控转录激活子3信号通路在支气管哮喘发生发展中的作用 被引量:6
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作者 梁音 张剑 +2 位作者 王新卫 刘新年 张海英 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2020年第9期931-936,共6页
目的 miRNA-155在支气管哮喘中的作用及其机制研究较少,文章拟探讨miRNA-155通过靶向Wnt5a调控转录激活子3(STAT3)信号通路在大鼠支气管哮喘发生发展中的作用。方法将SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、阴性对照组和miRNA-155表达抑... 目的 miRNA-155在支气管哮喘中的作用及其机制研究较少,文章拟探讨miRNA-155通过靶向Wnt5a调控转录激活子3(STAT3)信号通路在大鼠支气管哮喘发生发展中的作用。方法将SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、阴性对照组和miRNA-155表达抑制组,每组12只,正常对照组大鼠腹腔注射等渗盐水,阴性对照组大鼠在支气管哮喘模型建立后转染NC拮抗物;miRNA-155表达抑制组大鼠在支气管哮喘模型建立后转染miRNA-155拮抗物;分别于转染后7 d麻醉处死,采用HE染色法观察肺组织损伤情况;采用qRT-PCR法检测各组大鼠肺组织miRNA-155、Wnt5a mRNA表达水平;采用双荧光素酶报告基因实验验证miRNA-155与Wnt5a的靶向关系;采用Western blot法检测各组大鼠肺组织Wnt5a、STAT3、p-STAT3的蛋白表达水平;采用ELISA法分别检测肺组织匀浆IL-6、TNF-α表达水平。结果与正常对照组比较,阴性对照组大鼠肺功能指标FVC、FEV1及PEF均降低而FEV1/FVC升高(P<0.05),且miRNA-155表达水平升高,Wnt5a基因mRNA和蛋白表达水平均降低(P<0.05);与阴性对照组相比,miRNA-155表达抑制组大鼠肺功能均有不同程度的提高(P<0.05),miRNA-155表达水平降低(P<0.05),Wnt5a基因mRNA和蛋白表达水平均升高(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验分析结果显示,miRNA-155和Wnt5a能够靶向结合;与正常对照组大鼠肺组织STAT3、p-STAT3的蛋白表达水平[(0.20±0.05)、(0.22±0.05)]相比,阴性对照组[(1.35±0.05)和(1.11±0.05)]和miRNA-155表达抑制组大鼠[(1.01±0.06)、(0.52±0.07)]均升高(P<0.05),miRNA-155表达抑制组大鼠肺组织STAT3、p-STAT3蛋白表达水平较阴性对照组降低(P<0.05);与正常对照组大鼠肺组织IL-6、TNF-α表达水平[(95.92±8.78)、(88.99±8.12)pg/mL]相比,阴性对照组[(206.11±18.63)、(177.54±13.12)pg/mL]和miRNA-155表达抑制组[(156.17±9.55)、(131.94±9.25)pg/mL]均升高(P<0.05);与阴性对照组相比,miRNA-155表达抑制组大鼠肺组织IL-6、TNF-α表达水平降低(P<0.05)。结论 miRNA-155通过靶向Wnt5a激活STAT3信号通路促进支气管哮喘的发生发展。 展开更多
关键词 支气管哮喘 miRNA-155 WNT5A 信号转导转录激活子3
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特异性信号转导阻滞剂AG490对人肝癌HepG2细胞增殖、凋亡的影响及机制
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作者 赵冀安 赵洪正 +3 位作者 周小慧 孙会凤 朱俊青 胡毅平 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第41期38-40,共3页
目的探讨特异性信号转导阻滞剂AG490对人肝癌Hep G2细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法将培养好的人肝癌细胞株Hep G2用4、6、8 mg/kg的AG490(AG490 4 mg/kg组、AG490 6 mg/kg组、AG490 8 mg/kg组)进行处理,另设对照组(仅加PBS)。A... 目的探讨特异性信号转导阻滞剂AG490对人肝癌Hep G2细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法将培养好的人肝癌细胞株Hep G2用4、6、8 mg/kg的AG490(AG490 4 mg/kg组、AG490 6 mg/kg组、AG490 8 mg/kg组)进行处理,另设对照组(仅加PBS)。AG490干预24 h,MTT法测算细胞增殖抑制率;流式细胞术测算细胞周期及凋亡率;采用Hoechst 33342染色法观察细胞形态学变化;采用Western blotting法检测Hep G2细胞中P-JAK2、P-STAT3、Bcl-2、Bax、Survivin、Caspase-3蛋白表达。结果 AG490干预24 h,与对照组比较,AG490 4 mg/kg组、AG490 6 mg/kg组、AG490 8 mg/kg组细胞增殖抑制率、G0/G1期细胞比例、细胞凋亡率逐渐升高(P均<0.05),且呈浓度依赖性(P均<0.05);Hep G2细胞核染色质固缩浓集、碎裂,凋亡小体形成,蓝色荧光增强,且AG490浓度越高以上变化越明显;P-JAK2、P-STAT3、Bcl-2、Survivin蛋白表达降低,而Bax、Caspase-3蛋白表达升高(P均<0.05)。结论 AG490可能通过抑制JAK2/STAT3信号通路表达抑制人肝癌Hep G2细胞增殖并促进其凋亡。 展开更多
关键词 肝肿瘤 HEPG2 细胞 JANUS 激酶 2/信号转导与转录激活子 3 信号通路 信号转导阻滞剂 AG490
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STAT6介导白细胞介素-13诱导巨核细胞系HEL细胞血小板膜糖蛋白Ⅱb和血管性血友病因子的表达
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作者 石小玉 李文林 +2 位作者 蔡伟 周莹 唐洪林 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期329-332,共4页
目的:探索信号转导子和转录激活因子6(STAT6)介导白细胞介素-13(IL-13)对巨核细胞系-人红白血病HEL细胞(HEL)血小板膜糖蛋白Ⅱb(GPⅡb)和血管性血友病因子(vWF)表达的作用,部分阐明IL-13的信号转导通路。方法:RT-PCR检测GP... 目的:探索信号转导子和转录激活因子6(STAT6)介导白细胞介素-13(IL-13)对巨核细胞系-人红白血病HEL细胞(HEL)血小板膜糖蛋白Ⅱb(GPⅡb)和血管性血友病因子(vWF)表达的作用,部分阐明IL-13的信号转导通路。方法:RT-PCR检测GPⅡb和vWF mRNA的表达,免疫印迹法检测磷酸化的STAT6、GPⅡb和vWF蛋白的表达,图像分析检测电泳条带吸光度。结果:IL-13(100μg/L)作用HEL细胞,使HEL细胞STAT6磷酸化,磷酸化抑制剂A77-1726(50μmol/L)阻断了IL-13诱导的HEL细胞STAT6磷酸化。IL-13(100μg/L)上调了HEL细胞GPⅡb和vWF mRNA和蛋白的表达,A77-1726(50μmol/L)抑制了STAT6介导的IL-13诱导HEL细胞GPⅡb和vWF mRNA和蛋白的表达。结论:IL-13上调了HEL细胞GPⅡb和vWF的表达,STAT6介导了IL-13上调HEL细胞GPⅡb和vWF的表达。 展开更多
关键词 信号转导子与转录激活子6 白细胞介素-13 人红白血病细胞 血小板膜糖蛋白Ⅱb 血管性血友病因
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艾灸对癌性疲劳小鼠JAK-STAT信号通路的影响 被引量:5
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作者 李丹 胡凯文 +1 位作者 韩丽 赵百孝 《环球中医药》 CAS 2022年第5期725-730,共6页
目的观察艾灸对癌性疲劳模型小鼠及其JAK-STAT信号通路表达的影响。方法将55只BALB/C小鼠随机分为空白组10只、模型组15只、艾灸组15只及红外组15只。选择4T1乳腺癌细胞系在雌性BALB/C小鼠左腋下移植,顺铂构建癌性疲劳小鼠模型,干预4周... 目的观察艾灸对癌性疲劳模型小鼠及其JAK-STAT信号通路表达的影响。方法将55只BALB/C小鼠随机分为空白组10只、模型组15只、艾灸组15只及红外组15只。选择4T1乳腺癌细胞系在雌性BALB/C小鼠左腋下移植,顺铂构建癌性疲劳小鼠模型,干预4周后检测疲劳跑台实验及悬尾实验,并运用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清炎症细胞因子白介素-6(interleukin-1,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)含量;实时荧光定量PCR法检测蛋白酪氨酸激酶(Janus kinase 1,Jak1)、信号传导及转录激活蛋白3(signal transducer and activator of transcription,STAT)及IL-6 mRNA表达;蛋白免疫印迹法(western blot,WB)法检测Jak1、Phospho-Jak1、STAT3、Phospho-STAT3蛋白表达。结果与空白组比较,模型组小鼠的疲劳跑台时间、距离明显减少(P<0.01),电击次数及悬尾时间显著增加(P<0.01);与模型组比较,红外组、艾灸组小鼠跑台时间、距离增加(P<0.05),跑台电击次数和悬尾不动时间减少(P<0.05);与红外组比较,艾灸组悬尾小鼠不动时间减少(P<0.05)。在观察对JAK-STAT信号通路表达情况中,与空白组比较,模型组IL-6、TNF-α含量升高(P<0.01);与模型组相比,艾灸组和红外组IL-6、TNF-α、Phospho-Jak1、Phospho-STAT3蛋白表达量及IL-6、Jak1及STAT3 mRNA表达量降低(P<0.05);与红外组相比,艾灸组IL-6、TNF-α含量,Jak1、STAT3及IL-6 mRNA表达量减少(P<0.05)。结论艾灸可能通过下调炎症因子介导的JAK-STAT信号通路,起到改善癌性疲劳的作用,而红外线是艾灸起效的因素之一。 展开更多
关键词 艾灸 红外灸疗仪 癌性疲劳 白介素-6 Janus激酶—信号转导与转录激活子 炎症因 荷瘤动物 顺铂
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JAK2/STAT3信号通路介导小鼠骨性关节炎中软骨细胞代谢和抗氧化应激的研究 被引量:4
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作者 刘军 甄平 +6 位作者 李旭升 李慎松 田琦 常彦峰 高展望 张航向 陈慧 《中华老年多器官疾病杂志》 2015年第7期540-546,共7页
目的:在小鼠骨性关节炎(OA)模型中观察Janus酪氨酸蛋白激酶2/信号转导子与转录激活子蛋白3(JAK2/STAT3)信号通路对软骨细胞代谢的影响以及线粒体抗氧化应激能力的改变,探讨JAK2/STAT3信号通路在此过程中的作用。方法将10只C57BL/... 目的:在小鼠骨性关节炎(OA)模型中观察Janus酪氨酸蛋白激酶2/信号转导子与转录激活子蛋白3(JAK2/STAT3)信号通路对软骨细胞代谢的影响以及线粒体抗氧化应激能力的改变,探讨JAK2/STAT3信号通路在此过程中的作用。方法将10只C57BL/6小鼠随机分为两组,选择其中一组小鼠建立OA模型,3周后取材,培养软骨细胞作为实验组,其余小鼠正常培养细胞作为对照组。在对照组和实验组中分别加入JAK2/STAT3信号通路激动剂SC-39100,运用蛋白印迹法(Western blotting)检测各组细胞p-JAK2、p-STAT3、B淋巴细胞瘤?2(Bcl-2)蛋白和Bax蛋白的表达,同时检测各组线粒体氧化应激指标琥珀酸脱氢酶(SDH)、细胞色素c氧化酶(COX)、丙二醛(MDA)改变。结果与对照组相比,OA模型组软骨细胞p-JAK2、p-STAT3、Bcl-2蛋白的表达偏低(P<0.05)、Bax蛋白的表达水平偏高(P<0.05),且OA模型组软骨细胞SDH和COX的表达水平均偏低(P<0.05)、MDA的含量偏高(P<0.05);当OA模型组加入SC-39100后,p-JAK2、p-STAT3、Bcl-2表达均较OA模型组升高(P<0.05)、Bax蛋白表达下降(P<0.05),SDH和COX的表达水平均较OA模型组升高(P<0.05),MDA的含量较OA模型组降低(P<0.05);对照组中加入SC-39100后的各指标与加入SC-39100前比较,差异均无统计学意义(P>0.05);OA模型加入SC-39100组后的各指标与对照组加入SC-39100比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 JAK2/STAT3信号通路和OA中软骨细胞变化密切相关,JAK2/STAT3信号通路激活后可抑制软骨细胞的凋亡;当激活的JAK2/STAT3信号通路活化时会增加软骨细胞线粒体抗氧化应激能力。 展开更多
关键词 骨性关节炎 软骨细胞 Janus酪氨酸蛋白激酶2/信号转导转录激活子蛋白3 抗氧化应激
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食管肿瘤癌变过程中Stat3和Ki-67基因表达变化及意义 被引量:4
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作者 贵永贤 李小环 +5 位作者 赵立群 张亚冰 张聚真 裘一兵 杨静 杨观瑞 《山东医药》 CAS 北大核心 2008年第26期29-31,共3页
目的探讨食管肿瘤癌变的机制。方法对1998年食管内镜普查诊断为食管异型增生的57例患者随访2 a,40例仍为异型增生(未癌变组),17例进展为早期癌(癌变组)。对2次活检组织标本分别采用免疫组化SP法行信号转导子和转录激活子3(Stat3)和Ki-6... 目的探讨食管肿瘤癌变的机制。方法对1998年食管内镜普查诊断为食管异型增生的57例患者随访2 a,40例仍为异型增生(未癌变组),17例进展为早期癌(癌变组)。对2次活检组织标本分别采用免疫组化SP法行信号转导子和转录激活子3(Stat3)和Ki-67蛋白检测。结果1998年标本Stat3和Ki-67在两组表达差异无统计学意义(P>0.05);2000年标本二者表达均升高,但癌变组高于非癌变组(P<0.05)。癌变组Stat3和Ki-67 2 a中由阴性变为阳性的比率均分别高于非癌变组(P<0.05)。17例食管早期癌标本中Stat3和Ki-67的相关分析示二者存在正相关(P<0.05)。结论Stat3和Ki-67尤其是Stat3可能在食管癌变中起关键作用,阻断Stat3的表达可能阻断Ki-67表达,从而阻断食管癌变进程;此可能为食管癌的基因治疗提供理想靶点。 展开更多
关键词 食管早期癌 异型增生 信号转导转录激活子3
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CPB期间静脉泵注Dex的大鼠海马CA1区神经细胞凋亡情况、脑皮质组织IL-6表达变化及其机制
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作者 张璐 谢玉波 +3 位作者 陈燕桦 卢伊芝 何芳 梁蓓薇 《山东医药》 CAS 2020年第36期38-41,共4页
目的观察体外循环(CPB)期间静脉泵注右美托咪定(Dex)的大鼠海马CA1区神经细胞凋亡情况、脑皮质组织IL-6表达变化,并探讨其机制。方法48只SPF级成年健康雄性SD大鼠随机分为3组各16只。Dex组(D组)在制模前10 min按照5μg/kg的负荷剂量静... 目的观察体外循环(CPB)期间静脉泵注右美托咪定(Dex)的大鼠海马CA1区神经细胞凋亡情况、脑皮质组织IL-6表达变化,并探讨其机制。方法48只SPF级成年健康雄性SD大鼠随机分为3组各16只。Dex组(D组)在制模前10 min按照5μg/kg的负荷剂量静脉泵注Dex,后制备CPB模型,制模后转CPB机2 h,转流期间Dex以5μg/(kg·h)的泵注速度维持,转流2 h后停CPB机;体外循环组(C组)建立大鼠CPB模型,模型制备方法参照D组,制模后转CPB机2 h,转流期间给予与D组等量生理盐水;假手术组(S组)只作动静脉血管穿刺置管,不转CPB机,给予与D组等量生理盐水。CPB转流结束后立即处死各组8只大鼠,取脑组织,TUNEL法检测海马CA1区凋亡神经细胞,计算神经细胞凋亡率。CPB转流2 h结束后立即处死各组余下的8只大鼠,冰上分离皮质和海马组织,ELISA法检测皮质组织匀浆上清液白细胞介素6(IL-6),Western blot法检测海马组织磷酸化Janus激酶2(pJAK2)、磷酸化STAT3(pSTAT3)蛋白。结果与S组比较,C组大鼠海马CA1区神经细胞凋亡率、皮质组织匀浆上清液IL-6水平及海马组织pJAK2、pSTAT3蛋白相对表达量升高(P均<0.05);与C组比较,D组大鼠海马CA1区神经细胞凋亡率、皮质组织匀浆上清液IL-6水平及海马组织pJAK2、pSTAT3蛋白相对表达量降低(P均<0.05)。结论CPB期间静脉泵注Dex可减轻大鼠神经细胞凋亡和脑部炎症,机制可能与其可抑制JAK2/STAT3信号通路的激活有关。 展开更多
关键词 右美托咪定 体外循环 白细胞介素6 神经细胞 JANUS激酶2 信号转导转录激活子3
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脂多糖刺激干扰素调节因子3促进小鼠腹腔巨噬细胞白介素-17表达
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作者 李婷 黄小园 +2 位作者 马凤 廖承浩 王凯 《解剖学杂志》 CAS 2022年第3期219-221,278,共4页
目的:探讨干扰素调节因子3(IRF3)对脂多糖(LPS)刺激小鼠腹腔巨噬细胞促进白细胞介素-17(IL-17)表达的初步作用机制。方法:小鼠腹腔注射3%巯基乙酸肉汤,3 d后提取C57BL/6野生和IRF3基因敲除小鼠的腹腔巨噬细胞,培养过夜后添加LPS。收集... 目的:探讨干扰素调节因子3(IRF3)对脂多糖(LPS)刺激小鼠腹腔巨噬细胞促进白细胞介素-17(IL-17)表达的初步作用机制。方法:小鼠腹腔注射3%巯基乙酸肉汤,3 d后提取C57BL/6野生和IRF3基因敲除小鼠的腹腔巨噬细胞,培养过夜后添加LPS。收集细胞培养上清液,酶联免疫吸附试验检测细胞因子IL-17和白细胞介素-6(IL-6)的表达;提取细胞蛋白质,免疫印迹检测细胞核因子κB抑制蛋白(IκB)α、IRF3、磷酸化信号转导子和转录激活子3(STAT3)的蛋白水平。结果:LPS刺激小鼠腹腔巨噬细胞后,IRF3可显著地促进IL-17的产生,同时伴随着IL-6的产生、IκBα蛋白的降解及STAT3的磷酸化。结论:IRF3可能通过促进IL-6的产生,间接地激活STAT3的磷酸化,进而促进IL-17的产生。 展开更多
关键词 巨噬细胞 干扰素调节因3 白细胞介素-17 白细胞介素-6 信号转导转录激活子3 脂多糖
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秦艽对佐剂性关节炎大鼠JAK2/STAT3信号通路的调控作用 被引量:9
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作者 杨琳 林万程 邓龙飞 《中医药临床杂志》 2016年第6期848-852,共5页
目的:研究秦艽醇提物抑制佐剂性关节炎(adjuvantinduced arthritis,AA)大鼠及阻断Janus激酶2-信号转导子和转录激活子3(JAK2/STAT3)信号通路的可能机制。方法:雄性,SD大鼠,48只,随机分为6组,每组8只。除正常组外,采用弗氏完全佐剂诱导A... 目的:研究秦艽醇提物抑制佐剂性关节炎(adjuvantinduced arthritis,AA)大鼠及阻断Janus激酶2-信号转导子和转录激活子3(JAK2/STAT3)信号通路的可能机制。方法:雄性,SD大鼠,48只,随机分为6组,每组8只。除正常组外,采用弗氏完全佐剂诱导AA大鼠模型。致炎第12天后,各组给予相应药物,每日1次,连续16d,处死,对大鼠体质量进行监测,并对大鼠进行关节评分;HE染色,对固定部位踝关节进行病理学观察;酶联免疫吸附实验(ELISA)法测SD大鼠血清中IL-6、IL-10和TNF-α的含量;Western blot法检测磷酸化JAK2(p-JAK2)、磷酸化STAT3(p-STAT3)的相对蛋白表达。结果:与模型组相比,秦艽醇提物(2.5、5、10g/kg)组不仅可减轻大鼠关节病理损伤程度,减少血管翳生成,减轻组织增生,还可明显抑制p-JAK2、p-STAT3蛋白的相对表达。结论:秦艽醇提物对AA大鼠具有较好的抑制作用,可能通过抑制JAK2及STAT3过度激活磷酸化,即抑制p-JAK2、p-STAT3蛋白相对表达水平,进而阻断JAK2/STAT3信号转导通路有关。 展开更多
关键词 秦艽 佐剂性关节炎 Janus激酶2-信号转导转录激活子3信号通路
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miR-98-5p通过STAT3通路抑制骨关节炎的发展
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作者 陈晓超 刘艳武 +3 位作者 党海峰 陈永锋 郝赋 康飞科 《山西医科大学学报》 CAS 2024年第5期627-637,共11页
目的探究miR-98-5p调节骨关节炎(OA)发生发展的可能分子机制。方法①将大鼠软骨细胞分为对照组、白介素-1β(IL-1β)组、NC-agomir组、miR-98-5p-agomir组、NC-antagomir组和miR-98-5p-antagomir组。对照组软骨细胞采用正常DMEM培养基培... 目的探究miR-98-5p调节骨关节炎(OA)发生发展的可能分子机制。方法①将大鼠软骨细胞分为对照组、白介素-1β(IL-1β)组、NC-agomir组、miR-98-5p-agomir组、NC-antagomir组和miR-98-5p-antagomir组。对照组软骨细胞采用正常DMEM培养基培养,其他组细胞在转染成功后在添加10 ng/mL IL-1β的培养基中继续培养24 h。采用MTT法和TUNEL法检测软骨细胞增殖和凋亡水平。采用RT-qPCR检测miR-98-5p、STAT3、Bcl-2、Bax、IL-1β、IL-6和TNF-α的转录水平。采用ELISA法检测细胞培养上清液中的IL-1β、IL-6和TNF-α蛋白水平。采用Western blot检测Bcl-2、Bax、p-STAT3和STAT3蛋白水平。②采用前交叉韧带切断加内侧半月板部分切除法建立OA大鼠模型。OA模型大鼠分为OA组、NC-agomir+OA组和miR-98-5p-agomir+OA组,每组12只;另取12只健康大鼠为假手术组。假手术组和OA组大鼠关节腔内注射40μL生理盐水,NC-agomir+OA组和miR-98-5p-agomir+OA组大鼠关节腔内分别注射40μL的NC-agomir和miR-98-5p-agomir(1 nmol/μL),每周注射1次,共4周。采用番红O-固绿染色观察大鼠软骨退变。采用TUNEL染色观察软骨细胞凋亡。采用RT-qPCR检测软骨组织中miR-98-5p、STAT3、Bcl-2、Bax、IL-1β、IL-6和TNF-α的转录水平。采用ELISA法检测软骨组织中IL-1β、IL-6和TNF-α蛋白水平。采用Western blot检测软骨组织中Bcl-2、Bax、p-STAT3和STAT3蛋白水平。结果①与IL-1β组和NC-agomir组比较,miR-98-5p-agomir组相对细胞活力、Bcl-2 mRNA和蛋白水平和miR-98-5p水平均升高(P<0.05),TUNEL阳性率,Bax、IL-1β、IL-6、TNF-α、STAT3 mRNA和蛋白水平,p-STAT3蛋白水平和p-STAT3/STAT3比值均降低(P<0.05)。与IL-1β组和NC-antagomir组比较,miR-98-5p-antagomir组相对细胞活力、Bcl-2 mRNA和蛋白水平、以及miR-98-5p水平均降低(P<0.05),TUNEL阳性率,Bax、IL-1β、IL-6、TNF-α、STAT3的mRNA和蛋白水平,p-STAT3蛋白水平以及p-STAT3/STAT3比值均升高(P<0.05)。②与OA组和NC-agomir+OA组比较,miR-98-5p-agomir+OA组OARSI评分,TUNEL阳性率,Bax、IL-1β、IL-6、TNF-α、STAT3 mRNA和蛋白水平,p-STAT3蛋白水平和p-STAT3/STAT3比值均降低(P<0.05),Bcl-2 mRNA和蛋白水平、以及miR-98-5p水平均升高(P<0.05)。结论上调miR-98-5p可能通过降低STAT3的活性抑制OA中的炎症反应和细胞凋亡,从而抑制OA的发展。 展开更多
关键词 骨关节炎 miR-98-5p 信号转导转录激活子3 炎症 细胞凋亡
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IL-10受体沉默的树突状细胞瘤苗对食管鳞癌细胞体内外免疫活性的影响
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作者 朱晓磊 雷秀文 +3 位作者 刘婷婷 朱自江 田拂晓 王栋 《山西医科大学学报》 CAS 2024年第10期1251-1261,共11页
目的探讨IL-10受体(IL-10R)沉默的树突状细胞(DC)瘤苗对食管鳞癌细胞体内外免疫活性的影响。方法从食管鳞癌患者外周血中提取DC,使用倒置显微镜和扫描电镜对DC细胞形态进行鉴定,流式细胞仪上机检测DC细胞的表型。将TE11细胞分为空白对... 目的探讨IL-10受体(IL-10R)沉默的树突状细胞(DC)瘤苗对食管鳞癌细胞体内外免疫活性的影响。方法从食管鳞癌患者外周血中提取DC,使用倒置显微镜和扫描电镜对DC细胞形态进行鉴定,流式细胞仪上机检测DC细胞的表型。将TE11细胞分为空白对照组、DC-CTL组、NC-shRNA-DC-CTL组和IL-10R-shRNA-DC-CTL组。制作负载热休克凋亡的TE11细胞抗原的DC,然后使用Lipofectamine 3000分别进行IL-10R-shRNA慢病毒和NC-shRNA慢病毒转染,最后通过不同处理的DC诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)。通过MTT法检测DC对TE11细胞的杀伤率,采用ELISA法检测TE11细胞培养上清液中IL-12和干扰素(IFN)-γ含量。将荷瘤小鼠随机分为对照组、未转染的DC组(DC组)、NC-shRNA-DC组和IL-10R-shRNA-DC组,每组6只。将DC悬液或生理盐水注射至小鼠淋巴结,每周注射1次,共注射4次。每隔7 d用游标卡尺测量肿瘤体积。采用免疫组织化学染色检测肿瘤组织中Ki67表达水平,TUNEL染色检测肿瘤组织TUNEL阳性率,流式细胞术分析肿瘤浸润淋巴细胞中CD8^(+)T细胞的比例,采用ELISA法检测肿瘤组织中IL-12和IFN-γ水平,采用RT-qPCR检测肿瘤组织中IL-10 mRNA和IL-10R mRNA水平。采用Western blot检测肿瘤组织中IL-10、IL-10R、信号转导子和转录激活子3(STAT3)、p-STAT3、程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)和程序性死亡配体1(PD-L1)的蛋白表达水平。结果倒置显微镜和扫描电镜证实分离的细胞符合DC形态学,DC的特异性标志物CD11c、MHC-Ⅱ、HLA-DR和CD83的阳性率分别为91.43%,89.53%,88.62%和90.74%。与空白对照组相比,DC-CTL组、NC-shRNA-DC-CTL组和IL-10R-shRNA-DC-CTL组TE11细胞杀伤率升高(P<0.05),TE11细胞培养上清液中IL-12和IFN-γ的水平升高(P<0.05);与DC-CTL组和NC-shRNA-DC-CTL组相比,IL-10R-shRNA-DC-CTL组TE11细胞杀伤率升高(P<0.05),TE11细胞培养上清液中IL-12和IFN-γ的水平升高(P<0.05)。与对照组相比,DC组、NC-shRNA-DC组和IL-10R-shRNA-DC组大鼠肿瘤体积和Ki67阳性率降低(P<0.05),TUNEL阳性率升高(P<0.05),肿瘤浸润淋巴细胞中CD8^(+)T细胞比例及肿瘤组织中IL-12和IFN-γ的水平升高(P<0.05),肿瘤组织中IL-10和IL-10R mRNA和蛋白水平、STAT3磷酸化水平以及PD-1和PD-L1蛋白水平降低(P<0.05);与DC组和NC-shRNA-DC组相比,IL-10R-shRNA-DC组肿瘤体积和Ki67阳性率降低(P<0.05),TUNEL阳性率升高(P<0.05),肿瘤浸润淋巴细胞中CD8^(+)T细胞比例及肿瘤组织中IL-12和IFN-γ的水平升高(P<0.05),肿瘤组织中IL-10和IL-10R mRNA和蛋白水平、STAT3磷酸化水平以及PD-1和PD-L1蛋白水平降低(P<0.05)。结论IL-10R沉默的DC瘤苗具有体内外抗食管鳞癌活性,可有效增强CD8^(+)T细胞免疫活性,抑制STAT3激活以及PD-1/PD-L1免疫检查点。 展开更多
关键词 食管鳞癌 树突状细胞瘤苗 白细胞介素-10受体 免疫 抗原呈递能力 信号转导转录激活子3 程序性细胞死亡蛋白1
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RANTES和STAT3在难治性支原体肺炎患儿外周血中的表达及意义
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作者 申远方 李志 王芳 《河南医学研究》 CAS 2024年第15期2791-2795,共5页
目的探究受激活调节正常T细胞表达和分泌因子(RANTES)、信号转导子和转录激活子3(STAT3)在儿童支原体肺炎外周血中的表达,并评估其对难治性支原体肺炎(RMPP)的预测价值。方法选取2023年8—10月在河南省儿童医院郑州儿童医院住院的儿童... 目的探究受激活调节正常T细胞表达和分泌因子(RANTES)、信号转导子和转录激活子3(STAT3)在儿童支原体肺炎外周血中的表达,并评估其对难治性支原体肺炎(RMPP)的预测价值。方法选取2023年8—10月在河南省儿童医院郑州儿童医院住院的儿童支原体肺炎患儿103例,患儿均接受全程治疗,根据患儿治疗1周后是否仍出现持续发热、病情加重情况将患儿分为MPP组和RMPP组,对两组患儿外周血中RANTES、STAT3表达情况进行检测,并分析两组患儿相关实验室指标情况。收集两组患儿的一般资料,对可能诱发RMPP的因素进行单因素和多因素分析。结果RMPP组RANTES水平及STAT3 mRNA相对表达水平均高于MPP组(P<0.05)。RMPP组中性粒细胞计数、白细胞计数、C反应蛋白、血小板计数、乳酸脱氢酶以及红细胞沉降率等实验室指标均高于MPP组(P<0.05)。经单因素及多因素分析,RANTES和STAT3水平、乳酸脱氢酶水平和抗生素使用均与RMPP的发生有关(P<0.05)。结论RANTES和STAT3表达水平升高可以提示儿童支原体肺炎预后不良。 展开更多
关键词 激活调节正常T细胞表达和分泌因 信号转导转录激活子3 难治性支原体肺炎 危险因素
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雷公藤甲素干预白细胞介素13诱导足细胞损伤的作用研究 被引量:8
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作者 汤天凤 洪亦眉 +3 位作者 陈朝红 张明超 黎磊石 刘志红 《医学研究生学报》 CAS 2010年第11期1140-1144,共5页
目的足细胞骨架及相关蛋白的异常是引起以足细胞损伤为特征的局灶节段肾小球硬化(focal segmental glo-merular sclerosis,FSGS)的原因之一,而雷公藤甲素在FSGS的治疗中有着积极意义。文中旨在观察雷公藤甲素对足细胞的保护和治疗作用,... 目的足细胞骨架及相关蛋白的异常是引起以足细胞损伤为特征的局灶节段肾小球硬化(focal segmental glo-merular sclerosis,FSGS)的原因之一,而雷公藤甲素在FSGS的治疗中有着积极意义。文中旨在观察雷公藤甲素对足细胞的保护和治疗作用,进一步探讨其作用机制。方法以50 ng/ml白细胞介素13(IL-13)诱导小鼠足细胞系(heat-sensitive mousepodocytes,HSMP)建立足细胞损伤模型,保护实验予雷公藤甲素(3 ng/ml)或/和地塞米松(1μmol/L)预处理足细胞30 min,治疗实验则在IL-13作用足细胞24 h后,换雷公藤甲素或(和)地塞米松干预72 h。免疫荧光法分析足细胞骨架相关蛋白F-actin和细胞间连接蛋白ZO-1的变化情况,Western blot方法检测细胞内信号通路STAT6的磷酸化水平。结果足细胞骨架蛋白F-actin和ZO-1的染色结果显示:雷公藤甲素和地塞米松均可明显阻断和治疗IL-13诱导的足细胞损伤,F-actin的表达得以部分恢复,细胞骨架重排,ZO-1表达增强,连续性得以恢复,两者联合使用无明显协同作用。进一步研究表明,雷公藤甲素和地塞米松均可抑制IL-13诱导的足细胞内细胞因子相关的STAT6信号通路的活化,地塞米松的效果更强,而联合用药无明显协同作用。结论雷公藤甲素在体外对IL-13诱导损伤的足细胞有明显的保护和治疗作用,其作用与地塞米松相似。其保护作用可能与其抑制IL-13诱导STAT6信号通路的活化有关,而治疗作用的机制尚待进一步研究。 展开更多
关键词 白细胞介素13 足细胞 信号转导-转录激活子6 雷公藤甲素
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大鼠STAT3基因靶向shRNA真核表达载体的构建及鉴定 被引量:2
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作者 张五星 周伟 +5 位作者 赵学伟 丁晓然 周喆 张智敏 周焕芝 石炳毅 《山东医药》 CAS 北大核心 2010年第17期13-15,共3页
目的针对大鼠信号转导子及转录激活子3(STAT3)基因序列,构建特异性短发夹状RNA(shRNA)真核表达载体。方法根据STAT3基因序列及shRNA设计原则,设计4条干扰效果最佳的shRNA,化学合成4对引物,通过PCR扩增获得dsDNA模板,采用DNA重组技术与pG... 目的针对大鼠信号转导子及转录激活子3(STAT3)基因序列,构建特异性短发夹状RNA(shRNA)真核表达载体。方法根据STAT3基因序列及shRNA设计原则,设计4条干扰效果最佳的shRNA,化学合成4对引物,通过PCR扩增获得dsDNA模板,采用DNA重组技术与pGCsi-U6/Hygro/GFP空载体连接,转化DH5a感受态细胞经诱导表达筛选阳性克隆子,抽提重组质粒,进行DNA测序鉴定。结果转化大肠杆菌涂布平板长出阳性菌落,测序结果与所设计的STAT3 shRNA转录模板序列一致。结论所设计的shRNA编码序列被正确地插入到质粒骨架中,成功构建了STAT3基因的shRNA表达载体。 展开更多
关键词 信号转导转录激活子3 短发夹RNA 质粒 RNA干扰
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非重型再生障碍性贫血患者血清对32D细胞凋亡及Stat3蛋白磷酸化的影响 被引量:2
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作者 林赠华 刘红 +3 位作者 姜胜华 陆伟 宋国齐 李俊宏 《山东医药》 CAS 北大核心 2011年第37期16-18,共3页
目的探讨非重型再生障碍性贫血(NSAA)患者血清对32D细胞凋亡及细胞内信号转导子和转录激活子(Stat3)蛋白磷酸化的影响。方法采集12例NSAA患者(NSAA组)和12例正常健康体检者(对照组)血清,分别孵育小鼠32D细胞后进行细胞计数并检测细胞存... 目的探讨非重型再生障碍性贫血(NSAA)患者血清对32D细胞凋亡及细胞内信号转导子和转录激活子(Stat3)蛋白磷酸化的影响。方法采集12例NSAA患者(NSAA组)和12例正常健康体检者(对照组)血清,分别孵育小鼠32D细胞后进行细胞计数并检测细胞存活率、凋亡率及细胞内Stat3蛋白的磷酸化水平。结果血清孵育12、24、36、48 h后,NSAA组32D细胞内的Stat3蛋白磷酸化水平均高于对照组,以孵育24 h后差异最大(P<0.05)。孵育24 h后,NSAA组较对照组细胞计数显著减少(P<0.05),细胞存活率低于对照组但无统计学意义,而细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.05)。结论 NSAA患者的血清在体外作用24 h后可诱导32D细胞凋亡并上调Stat3蛋白磷酸化水平,Stat3蛋白的磷酸化增多可能参与NSAA患者血清诱导32D细胞凋亡的信号传导过程。 展开更多
关键词 贫血 再生障碍性 细胞凋亡 信号转导转录激活子3
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高脂血清对人主动脉血管平滑肌细胞增殖的影响及其机制
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作者 刘晴 汤潜 +2 位作者 王莎莎 韩彦弢 王春波 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第47期61-63,共3页
目的观察高脂血清对人主动脉血管平滑肌细胞(HASMC)增殖的影响,并探讨其机制。方法取对数生长期HASMC细胞分为实验组和和对照组,实验组包括实验1、2、3组,另设空白对照组。对照组常规培养;实验1、2、3组分别加入10%、15%、20%浓度的高... 目的观察高脂血清对人主动脉血管平滑肌细胞(HASMC)增殖的影响,并探讨其机制。方法取对数生长期HASMC细胞分为实验组和和对照组,实验组包括实验1、2、3组,另设空白对照组。对照组常规培养;实验1、2、3组分别加入10%、15%、20%浓度的高脂血清培养;空白对照组仅加培养基无细胞。继续培养6、12、24、48 h,用CCK-8法测算实验组HASMC细胞增殖率;培养24 h时采用实时荧光定量PCR法检测各组HASMC中GRIM-19和p-STAT3 mRNA,采用Western blotting法检测GRIM-19和p-STAT3蛋白。结果相同时间点细胞增殖率实验3组高于实验2组,实验2组高于实验1组,P均<0.05。随着高脂血清培养时间增加,各组HASMC细胞增殖率呈递增趋势,P均<0.05。培养24 h时HASMC中GRIM-19 mRNA和蛋白实验3组低于实验2组,实验2组低于实验1组,P均<0.05;HASMC中p-STAT3 mRNA和蛋白实验3组高于实验2组,实验2组高于实验1组,P均<0.05。结论高脂血清可以促进HASMC增殖。与10%、15%的高脂血清相比,20%高脂血清促进HASMC增殖的效果最为明显。其作用机制可能与GRIM-19下调p-STAT3表达有关。 展开更多
关键词 人主动脉血管平滑肌细胞 细胞增殖 维甲酸干扰素诱导凋亡相关基因 转录信号转导子与激活子3
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