促肾上腺皮质激素释放激素结合蛋白基因的研究进展 被引量：4

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作者 李媛媛 白春艳 +1 位作者 吴潇 潘玉春 《上海畜牧兽医通讯》 2008年第2期2-4,共3页

促肾上腺皮质激素释放激素结合蛋白(CRH-BP)是分子量为37千道尔顿的N-糖基化蛋白。它能够与促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)结合使CRH失活,而脑垂体细胞能够在CRH诱导下分泌促肾上腺皮质激素(ACTH),进而调节应激反应中产生的各种生理现... 促肾上腺皮质激素释放激素结合蛋白(CRH-BP)是分子量为37千道尔顿的N-糖基化蛋白。它能够与促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)结合使CRH失活,而脑垂体细胞能够在CRH诱导下分泌促肾上腺皮质激素(ACTH),进而调节应激反应中产生的各种生理现象。对CRH-BP基因的研究为CRH在生殖生理、药理学、动物应激反应等方面的研究开辟了新方向。本文介绍了近年来CRHBP基因在小鼠、人类上的研究进展,以便对该基因进行更深入的研究。 展开更多

关键词 促肾上腺皮质激素释放激素结合蛋白基因 促肾上腺皮质激素释放激素 应激

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促肾上腺皮质激素释放激素结合蛋白功能与调控研究进展 被引量：5

2

作者 易金娥 袁慧 文利新 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第11期95-100,共6页

促肾上腺皮质激素释放激素结合蛋白(CRH-BP)是37 ku的分泌糖蛋白,其结构与促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)受体不同,但与CRH和尿皮素(UCN)具有很高的亲和力。CRH-BP具有重要的生物调控作用,对CRH诱导的脑垂体促肾上腺皮质激素(adrenocort... 促肾上腺皮质激素释放激素结合蛋白(CRH-BP)是37 ku的分泌糖蛋白,其结构与促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)受体不同,但与CRH和尿皮素(UCN)具有很高的亲和力。CRH-BP具有重要的生物调控作用,对CRH诱导的脑垂体促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)的释放具有抑制作用。应激和代谢因素能改变体内CRH-BP的表达与调控,CRH-BP在生产分娩、炎性疾病、阿尔海默症(Alzheiner′s disease)和其他机能障碍等过程中也具有广泛的作用,这说明CRH-BP在大脑和脑垂体中可能还有其他潜在功能,研究CRH-BP在中枢和外周的作用及机理,有利于阐明其在病因学方面的潜在地位,有助于治疗CRH失调引起的机能紊乱。 展开更多

关键词 促肾上腺皮质激素释放激素结合蛋白 促肾上腺皮质激素释放激素 尿皮素 繁殖 应激 调控

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细胞角蛋白8在促肾上腺皮质激素释放因子诱导的肠上皮通透性改变中的作用 被引量：4

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作者 胡玥 陈超英 +1 位作者 张梦 吕宾 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期900-906,共7页

目的:探讨细胞角蛋白8(CK8)在促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)诱导的肠上皮细胞间通透性改变中的作用及机制。方法:培养人结肠腺癌HT29细胞株建立肠上皮屏障模型,采用免疫荧光法检测HT29细胞表面CRF受体1(CRFR1)及CRFR2的表达情况,并将... 目的:探讨细胞角蛋白8(CK8)在促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)诱导的肠上皮细胞间通透性改变中的作用及机制。方法:培养人结肠腺癌HT29细胞株建立肠上皮屏障模型,采用免疫荧光法检测HT29细胞表面CRF受体1(CRFR1)及CRFR2的表达情况,并将其分为对照组和CRF组,CRF组以100 nmol/L CRF处理细胞72 h。采用Transwell小室检测2组细胞FITC标记的dextran透过率,透射电镜观察2组细胞紧密连接结构变化,并用Western blot法检测2组细胞CK8及紧密连接相关蛋白(ZO-1和occludin)的表达,免疫荧光检测CK8表达微结构变化,ELISA检测加药5 min、10 min、30 min、1 h及2 h后蛋白激酶C(PKC)活性。采用sh-CK8慢病毒构建CK8低表达HT29细胞,检测给予CRF处理后相应蛋白表达量、FITC标记的dextran透过率及PKC活性的改变。结果:HT29细胞表面存在CRFR1及CRFR2受体,而CRF处理后,FITC标记的dextran透过率高于对照组(P<0.05),透射电镜观察可见对照组细胞紧密连接通道关闭, CRF处理后紧密连接开放。同时,CRF可引起HT29细胞CK8的荧光强度增高,呈颗粒样浓聚,其蛋白表达明显增加(P<0.05),而occludin和ZO-1表达下调(P<0.05)。此外,CRF处理1 h时,PKC的活性下降(P<0.05)。sh-CK8慢病毒转染HT29细胞后成功建立低表达CK8细胞株,与阴性对照组相比,CRF刺激后肠上皮细胞通透性并未明显降低, occludin蛋白表达仍下调(P<0.05),而ZO-1则无明显改变。同时,与阴性对照组相比,CK8低表达后,CRF刺激并未引起PKC活性的下降。结论:CK8可能通过抑制PKC活性参与CRF诱导的肠上皮通透性的增加,同时可能存在其它信号通路共同参与。 展开更多

关键词 肠易激综合征 细胞角蛋白8 促肾上腺皮质激素释放因子 紧密连接 蛋白激酶C

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促肾上腺皮质激素释放激素受体1基因多态与抗抑郁药物疗效的关联研究 被引量：2

4

作者 王娟 禹顺英 +1 位作者 沈一峰 李华芳 《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期420-424,共5页

目的探讨促肾上腺皮质激素释放激素受体1(corticotropin-releasing hormone receptor1,CRHR1)基因多态性与选择性5-羟色胺再摄取抑制剂(Selective Serotonin Reuptake Inhibitors,SSRIs)、5-羟色胺和去甲肾上腺素再摄取抑制剂(Serotonin... 目的探讨促肾上腺皮质激素释放激素受体1(corticotropin-releasing hormone receptor1,CRHR1)基因多态性与选择性5-羟色胺再摄取抑制剂(Selective Serotonin Reuptake Inhibitors,SSRIs)、5-羟色胺和去甲肾上腺素再摄取抑制剂(Serotonin and Norepinephrine Reuptake Inhibitors,SNRIs)抗抑郁疗效差异的相关性。方法对符合美国精神障碍诊断与统计手册第4版(Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders,Fourth Edi-tion,DSM-Ⅳ)抑郁症诊断标准的271例抑郁症患者予以单一新型抗抑郁药(SSRIs或SNRIs)常规剂量治疗至少6周,以治疗前后17项汉密尔顿抑郁量表(Hamilton Depression Scale,HAMD)总分减分率作为评估疗效的指标。采用TaqMan探针法检测CRHR1基因上4个单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphism,SNP)的基因型,比较有效组(HAMD-17减分率≥50%)和无效组(HAMD-17减分率<50%)之间4个位点基因型及多位点组成单倍型的不同。结果治疗4周末:CRHR1基因rs17689966位点A等位基因及AA基因型携带者在治疗无效组的频率均显著高于有效组(88.0%vs.77.0%,P=0.004;75.8%vs.59.0%,P=0.004)。有3种单倍型在有效组和无效组之间的分布差异有统计学意义,分别是T-A/T-G(rs242924-rs17689966:86.6%vs.74.7%,P=0.002;8.1%vs.15.5%,P=0.018),G-T-G(rs4458044-rs rs242924-rs17689966:8.2%vs.15.5%,P=0.019)。治疗6周末:CRHR1基因4个SNPs的基因型、等位基因频率及单倍型分析在不同疗效患者组间分布差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论CRHR1基因多态性可能与SSRIs、SNRIs类药物的早期疗效相关。 展开更多

关键词 促肾上腺皮质激素释放激素受体1基因 多态性 选择性5-羟色胺再摄取抑制剂 5-羟色胺和去甲肾上腺素再摄取抑制剂 抑郁症

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促肾上腺皮质激素释放激素与间隙连接蛋白43磷酸化在早产与分娩发动中的关系 被引量：2

5

作者 贺鑫 丁依玲 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第27期3122-3124,共3页

分娩动因与早产的研究是目前围生界讨论的热点,正常分娩时,子宫平滑肌收缩具有高度协调性,兴奋信号在紧密接触的平滑肌细胞间传递,这是分娩发动的基础,而这种特殊的信号传递是由子宫平滑肌细胞间隙连接蛋白43(Cx43)来完成的。研究发现... 分娩动因与早产的研究是目前围生界讨论的热点,正常分娩时,子宫平滑肌收缩具有高度协调性,兴奋信号在紧密接触的平滑肌细胞间传递,这是分娩发动的基础,而这种特殊的信号传递是由子宫平滑肌细胞间隙连接蛋白43(Cx43)来完成的。研究发现促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)在子宫收缩和分娩发动中起重要作用,且CRH水平与孕妇体内Cx43表达呈正相关。但是有研究表明生理状态下仅磷酸化的Cx43构成有功能的缝隙链接通道,本文主要对CRH影响Cx43及其磷酸化,从而启动分娩进行综述。 展开更多

关键词 早产 促肾上腺皮质激素释放激素 连接蛋白43 分娩发动

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游泳应激对下丘脑室旁核CRH/AVP基因转录的影响及糖皮质激素的作用 被引量：1

6

作者 姜雅秋 孙茵 +2 位作者 姜雷 王秋月 单忠艳 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期593-595,共3页

目的阐明游泳应激后下丘脑室旁核(PVN)促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)和血管加压素(AVP)基因转录的变化以及非生理剂量地塞米松对两基因转录的调节作用。方法生理盐水(100μl)或地塞米松(0.3mg/kg)腹腔内注射2h后,强迫游泳10min分别立... 目的阐明游泳应激后下丘脑室旁核(PVN)促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)和血管加压素(AVP)基因转录的变化以及非生理剂量地塞米松对两基因转录的调节作用。方法生理盐水(100μl)或地塞米松(0.3mg/kg)腹腔内注射2h后,强迫游泳10min分别立即断头取血;血中促肾上腺皮质激素(ACTH)水平应用放射免疫分析法(RIA)测定。合成[35S]标记的RNA探针,应用原位杂交组织化学方法及放射自显影的方法检测CRH mRNA、CRH hnRNA、AVP mRNA及AVP hnRNA的表达量,放射自显影图像应用NIH Image软件系统解析。所有数据均输入数据库,以statview软件进行统计分析。结果强迫游泳10min血中的ACTH明显升高,而地塞米松可部分抑制这种由于游泳应激引起的血中ACTH升高。游泳应激10min时PVN内的CRH hnRNA表达量明显升高,地塞米松的投与完全抑制了CRH hnRNA的增加(P<0.01,n=5)。在单纯生理盐水和地塞米松注射组PVN小细胞内AVP hnRNA的表达量极少,游泳应激10min小细胞内AVP hnRNA的表达量无明显变化,地塞米松对此也无任何影响。结论糖皮质激素可以抑制急性应激所致的CRH基因转录。与此不同的是强迫游泳应激后PVN小细胞区AVP基因转录水平却并未立即增加,说明虽然AVP与CRH基因均表达于PVN区同一神经元,但是其转录调控机制却不尽相同。 展开更多

关键词 应激 促肾上腺皮质激素释放激素 血管加压素 基因转录

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下丘脑-垂体-肾上腺轴系统基因多态性与青年人自杀未遂的关联研究 被引量：2

7

作者 王苏亚 冉柳毅 +4 位作者 张书懂 靳佳佳 甘瑶 艾明 况利 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期841-845,共5页

目的：探讨下丘脑-垂体-肾上腺（hypothalamic-pituitary-adrenal axis,HPA）轴系统促肾上腺皮质激素释放激素受体1（corticotropin-releasing hormone receptor 1,CRHR1）、促肾上腺皮质激素释放激素结合蛋白（corticotropin-releasing... 目的：探讨下丘脑-垂体-肾上腺（hypothalamic-pituitary-adrenal axis,HPA）轴系统促肾上腺皮质激素释放激素受体1（corticotropin-releasing hormone receptor 1,CRHR1）、促肾上腺皮质激素释放激素结合蛋白（corticotropin-releasing hormone binding protein,CRHBP）以及FK506结合蛋白（FK506 binding protein 5,FKBP5）基因多态性与青年人自杀未遂行为的关联性。方法：采用i MLDRTM多重SNP分型,检测71例自杀未遂青年人（自杀未遂组,年龄15～24岁）和116例健康对照（对照组）CRHR1基因（rs110402、rs7209436）、FKBP5基因（rs3800373、rs1360780）以及CRHBP基因（rs10474485、rs7728378）6个多态位点,并对基因型、等位基因及单体型频率进行比较。结果：6个位点基因型与等位基因频率在病例组和对照组中分布无统计学差异（P〉0.05）。由rs110402、rs7209436位点构成的单体型,rs3800373、rs1360780位点构成的单体型,rs10474485、rs7728378构成的单体型在2组之间分布无统计学差异（P〉0.05）。矫正精神疾病史后,在多个遗传模式中,rs7728378显示与自杀未遂有关联。共显性模式：C/T（OR=3.53,95%CI=1.45～8.64,P=0.011）、T/T（OR=3.40,95%CI=1.04～11.14,P=0.011）;显性模式：C/T-T/T（OR=3.51,95%CI=1.46～8.43,P=0.003）;超显性模式：C/T（OR=2.19,95%CI=1.08～4.45,P=0.026）;累加模式：C/C、C/T及T/T（OR=1.95,95%CI=1.12～3.41,P=0.016）。结论：CRHBP基因位点rs7728378多态性与青年人的自杀未遂相关,该位点的杂合基因型C/T可能增加自杀未遂的风险。 展开更多

关键词 青年人 自杀未遂 单核苷酸多态性 下丘脑-垂体-肾上腺轴 促肾上腺皮质激素释放激素结合蛋白

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热应激对肉仔鸡糖皮质激素受体的影响 被引量：4

8

作者 赵红波 盛清凯 王可 《山东农业科学》 2011年第9期102-104,107,共4页

选用3日龄肉仔鸡,皮下注射4 mg/kg皮质酮,研究了热应激对肉仔鸡糖皮质激素受体的影响。结果表明,皮下注射皮质酮3 h后,显著增加了热应激蛋白HSP70mRNA的表达量,降低了肉仔鸡下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素CRFmRNA和糖皮质激素受体GRmRN... 选用3日龄肉仔鸡,皮下注射4 mg/kg皮质酮,研究了热应激对肉仔鸡糖皮质激素受体的影响。结果表明,皮下注射皮质酮3 h后,显著增加了热应激蛋白HSP70mRNA的表达量,降低了肉仔鸡下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素CRFmRNA和糖皮质激素受体GRmRNA的表达量。 展开更多

关键词 肉仔鸡 皮质酮 热应激蛋白 促肾上腺皮质激素释放激素 糖皮质激素受体

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失血性休克后下丘脑室旁核内CRH和AVP基因转录的动态变化 被引量：2

9

作者 姜雅秋 姜蕾 +2 位作者 孙茵 单忠艳 滕卫平 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期191-193,共3页

目的:探讨失血性休克对下丘脑室旁核(PVN)促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)和血管加压素(AVP)基因转录的影响。方法:大鼠分别于失血后0、15、30、60、120min断头;RIA法测血中激素水平;应用[35S]标识的RNA探针进行原位杂交实验,分析失血后... 目的:探讨失血性休克对下丘脑室旁核(PVN)促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)和血管加压素(AVP)基因转录的影响。方法:大鼠分别于失血后0、15、30、60、120min断头;RIA法测血中激素水平;应用[35S]标识的RNA探针进行原位杂交实验,分析失血后PVN内CRH和AVP基因转录的动力学变化。结果:血中促肾上腺皮质激素(ACTH)及AVP于失血后15min达高峰(P<0.01),失血后60min时基本恢复到基础水平;PVN内CRHh nRNA在失血前几乎无表达,于失血后15min表达量已显著升高(P<0.01),30min达峰值(P<0.01),120min内基本恢复,失血前CRHmRNA在PVN就有大量表达,于失血后15min及120min两次有意义升高(P<0.01);失血前AVPhnRNA在PVN的小细胞领域基本没有表达,于失血后15min开始有意义增加(P<0.01),30min达峰值(P<0.01)后一直持续,失血前AVPmRNA在该领域的表达量很少,失血后60min时其表达量有意义增加(P<0.01),并持续到失血后120min;失血前AVPhnRNA在PVN的大细胞领域就有大量表达,于失血后15min开始显著升高(P<0.01),并一直持续,失血前AVPmRNA在该领域的表达量很多,失血后其表达量没有明显变化。结论:在失血性休克时共存于小细胞领域的CRH和AVP的基因转录的动态变化不同,分别存在于大小细胞两领域的AVP的基因转录的动态变化不同。 展开更多

关键词 失血性休克 促肾上腺皮质激素释放激素 血管加压素 基因转录

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重组ACTH(4-10)与GDNF融合蛋白及其生物活性研究

10

作者 陈哲宇 张勇 +2 位作者 何成 路长林 吴祥甫 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第1期67-71,共5页

通过PCR方法构建了促肾上腺皮质激素 4 10 (ACTH (4 10 ) )与胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)的融合基因 ,并将它重组克隆到表达载体 pET 2 8a (+ )中 ,构建表达质粒pET ACTH (4 10 ) GDNF ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,经IPTG诱导可... 通过PCR方法构建了促肾上腺皮质激素 4 10 (ACTH (4 10 ) )与胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)的融合基因 ,并将它重组克隆到表达载体 pET 2 8a (+ )中 ,构建表达质粒pET ACTH (4 10 ) GDNF ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,经IPTG诱导可高效表达ACTH (4 10 ) GDNF融合蛋白 .用Ni2 + NTA树脂一步法纯化目的蛋白 ,纯度达 85 %以上 .纯化和复性的ACTH (4 10 ) GDNF融合蛋白能显著促进脊髓神经元存活 ,作用强于ACTH (4 10 )及GDNF蛋白 . 展开更多

关键词 促肾上腺皮质激素4-10 胶质细胞源性营养因子 融合蛋白 基因表达

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太平洋真宽水蚤(Eurytemora pacifica)CRH-BP基因克隆及表达分析

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作者 王斌 武敏敏 +1 位作者 胡利腾 张建设 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期210-219,共10页

促肾上腺皮质激素释放激素结合蛋白(CRH-BP)是一种糖基化蛋白,与促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)具有很高的亲和力,对CRH诱导的脑垂体促肾上腺皮质激素(ACTH)的释放起到抑制作用。本研究采用RT-PCR与RACE基因克隆方法首次获得太平洋真宽... 促肾上腺皮质激素释放激素结合蛋白(CRH-BP)是一种糖基化蛋白,与促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)具有很高的亲和力,对CRH诱导的脑垂体促肾上腺皮质激素(ACTH)的释放起到抑制作用。本研究采用RT-PCR与RACE基因克隆方法首次获得太平洋真宽水蚤(Eurytemora pacifica)CRH-BP基因全长cDNA序列(GenBank登录号:MF289345)1950bp,其中ORF区1245bp编码415个氨基酸,5′非编码区841bp,3′非编码区294bp,理论分子量/等电点为45.816/5.87。生物学序列分析结果表明,太平洋真宽水蚤CRH-BP氨基酸序列与桡足类中近亲真宽水蚤同源性最高;具有6个蛋白修饰位点及蛋白家族标签序列,具有明显的跨膜结构域及信号肽。实时荧光定量PCR分析结果表明,太平洋真宽水蚤CRH-BP基因在盐度、温度及pH环境胁迫中的mRNA表达量均具有一定的时间梯度表达性与浓度梯度表达性特征。本文通过对太平洋真宽水蚤CRH-BP基因结构及不同环境因子刺激下的表达特点的研究为探究桡足类在环境应激、生殖生理及免疫调控等方面奠定了理论基础。 展开更多

关键词 太平洋真宽水蚤 促肾上腺激素释放激素结合蛋白 基因克隆 环境胁迫 实时荧光定量PCR

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CRH通过PKA途径调节大鼠下丘脑CRH表达的研究 被引量：3

12

作者 陈立朝 许民辉 周继红 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第16期1459-1462,共4页

目的　探讨促肾上腺皮质激素释放激素 (corticotropin releasinghormone ,CRH)刺激下丘脑神经元表达CRH的信号调控机制。方法　通过大鼠下丘脑脑片实验模型 ,运用免疫组织化学、Westernblot技术 ,观察CRH激活下丘脑促肾上腺皮质激素释... 目的　探讨促肾上腺皮质激素释放激素 (corticotropin releasinghormone ,CRH)刺激下丘脑神经元表达CRH的信号调控机制。方法　通过大鼠下丘脑脑片实验模型 ,运用免疫组织化学、Westernblot技术 ,观察CRH激活下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素Ⅰ型受体 (corticotropin releasinghormonetype 1receptor ,CRH1R)后蛋白激酶A(proteinkinaseA ,PKA)信号通路的活性变化 ,及其与CRH表达的关系。结果　CRH可引起下丘脑脑片磷酸化PKA、磷酸化CREB及CRH含量明显增加 ,而CP 15 45 2 6、H89可显著抑制磷酸化PKA、磷酸化CREB及CRH含量的增加。结论　在严重创伤应激反应中 ,CRH通过PKA途径实现对下丘脑神经元CRH的表达的超短正反馈调节。 展开更多

关键词 应激反应 下丘脑脑片 促肾上腺皮质激素释放激素 促肾上腺皮质激素释放激素受体 蛋白激酶A CAMP反应元件结合蛋白 CP-154526 H89 大鼠

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CRH刺激大鼠下丘脑脑片CRH及CRH1R的表达研究 被引量：2

13

作者 陈立朝 许民辉 周继红 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第13期1161-1164,共4页

目的　通过CRH刺激大鼠下丘脑脑片 ,探讨下丘脑CRH和CRH1R在下丘脑中的分布和表达规律。方法　采用大鼠下丘脑脑片实验模型 ,运用免疫组织化学技术 ,观察CRH刺激大鼠下丘脑脑片后CRH和CRH1R在下丘脑中的分布和表达规律。结果　CRH刺激... 目的　通过CRH刺激大鼠下丘脑脑片 ,探讨下丘脑CRH和CRH1R在下丘脑中的分布和表达规律。方法　采用大鼠下丘脑脑片实验模型 ,运用免疫组织化学技术 ,观察CRH刺激大鼠下丘脑脑片后CRH和CRH1R在下丘脑中的分布和表达规律。结果　CRH刺激下丘脑脑片后下丘脑CRH和CRHlR含量明显增多 ,而CP 15 45 2 6、H89可显著抑制CRH和CRHlR的增加。结论　CRH刺激下丘脑脑片后增多的CRH与CRHlR结合后进一步引起下丘脑神经元CRH和CRHlR表达增加。提示在严重创伤应激反应中 ,CRH通过PKA途径实现对下丘脑神经元CRH的表达的超短正反馈调节。 展开更多

关键词 应激反应 下丘脑脑片 促肾上腺皮质激素释放激素 蛋白激酶A CAMP反应元件结合蛋白 CP-154526 H89 人鼠

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CRH对人子宫平滑肌细胞Cx43磷酸化水平及细胞间隙连接通讯的影响 被引量：1

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作者 胡芸 贺鑫 丁依玲 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期155-161,共7页

目的:探讨人类促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)对人子宫平滑肌细胞间隙连接蛋白43磷酸化水平(P-Cx43)以及其对子宫平滑肌细胞间隙连接通道(GJIC)功能的影响。方法:原代培养人未孕子宫平滑肌细胞,给予不同浓度的CRH(0,5.85,58.5,585,5850 ... 目的:探讨人类促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)对人子宫平滑肌细胞间隙连接蛋白43磷酸化水平(P-Cx43)以及其对子宫平滑肌细胞间隙连接通道(GJIC)功能的影响。方法:原代培养人未孕子宫平滑肌细胞,给予不同浓度的CRH(0,5.85,58.5,585,5850 pmol/L)进行干预,采用Western印迹分别定量检测CRH各浓度组中子宫平滑肌细胞P-Cx43与非磷酸化Cx43蛋白(NP-Cx43)的表达;细胞划痕实验检测CRH各浓度组中GJIC的变化。结果:CRH各干预组子宫平滑肌细胞中P-Cx43蛋白的表达明显高于对照组,随着CRH干预浓度的递增,呈剂量依赖趋势,各组之间差异有统计学意义(P<0.01);而对照组和干预组之间NP-Cx43蛋白的表达差异无统计学意义(P>0.05);CRH干预后各浓度组荧光黄染料在子宫平滑肌细胞中传输的细胞数明显高于对照组,各组之间比较差异有统计学意义(P<0.01)。同时,随着CRH干预浓度的递增,荧光黄染料传输至最远细胞级所需要的时间呈剂量依赖趋势,各组之间比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:CRH可上调原代子宫平滑肌细胞中P-Cx43蛋白的表达,增强GJIC的功能。 展开更多

关键词 促肾上腺皮质激素释放激素 间隙链接蛋白43 人未孕子宫平滑肌细胞 分娩

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母血中游离CRH、PLAC1、Selectin-P的mRNA表达水平与子痫前期的相关性研究 被引量：1

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作者 董迪荣 《海南医学院学报》 CAS 2009年第7期711-713,共3页

目的:比较孕妇血浆中胎盘来源的外周血促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、胎盘特异蛋白-1(PLAC1)、选择素P(Selectin-P)基因的mRNA表达水平在子痫前期患者和正常孕妇之间的区别。方法:选择30例子痫前期病例(病例组)及40例正常孕妇(对照组... 目的:比较孕妇血浆中胎盘来源的外周血促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、胎盘特异蛋白-1(PLAC1)、选择素P(Selectin-P)基因的mRNA表达水平在子痫前期患者和正常孕妇之间的区别。方法:选择30例子痫前期病例(病例组)及40例正常孕妇(对照组)采集外周血提取RNA,分析上述3个基因的游离mRNA表达水平,并在两组间采用t检验比较。结果:CRH、PLAC1和Selectin-P在病例组及对照组的孕妇外周血中均有表达,病例组孕妇外周血中CRH、PLAC1、Selectin-P的表达水平明显高于对照组(P<0.05)。结论:孕母血浆中的胎盘来源的游离CRH、PLAC1、Selectin-P表达水平对于妊娠期高血压疾病,子痫前期的发病具有预测价值。 展开更多

关键词 肾上腺皮质激素释放激素 胎盘特异蛋白 选择素P 基因 子痫前期

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稳定表达CRFR1的HEK293细胞株建立与功能鉴定 被引量：3

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作者 葛治娟 于金梅 +2 位作者 马晓芸 刘晓燕 郑建全 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1113-1116,共4页

目的建立稳定表达CRFR1的HEK293细胞株,并鉴定cAMP评价体系构建是否成功。方法采用Lipofectamine2000将CRFR1质粒转染至HEK293细胞中,经G418筛选单克隆阳性细胞,采用Western blot技术、RT-PCR法、免疫荧光法证实稳定表达CRFR1细胞株构... 目的建立稳定表达CRFR1的HEK293细胞株,并鉴定cAMP评价体系构建是否成功。方法采用Lipofectamine2000将CRFR1质粒转染至HEK293细胞中,经G418筛选单克隆阳性细胞,采用Western blot技术、RT-PCR法、免疫荧光法证实稳定表达CRFR1细胞株构建成功。并用CRF刺激稳定表达CRFR1的HEK293细胞株,绘制CRF刺激HEK293-CRFR1细胞释放cAMP的量效曲线。结果 Western blot、RT-PCR、免疫荧光结果表明,CRFR1受体在HEK293细胞系中成功表达。cAMP释放量效实验显示,CRF刺激HEK293-CRFR1细胞释放cAMP的EC50为(5.64±0.05)×10-10mol·L-1。结论成功建立了稳定表达CRFR1的HEK293细胞株,并且cAMP含量评价体系构建成功,为研究CRFR1的生物学功能及筛选CRFR1受体靶向药物奠定了基础。 展开更多

关键词 促肾上腺皮质激素释放因子 CRFR1 HEK293细胞 转染 CAMP G蛋白偶联受体

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海马CRHR1受体介导妊娠期慢性应激致子代雄性小鼠抑郁

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作者 张阔 陈鹏 +2 位作者 钱志侃 陶龙 姚余有 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第3期337-342,共6页

目的探讨妊娠期慢性应激诱导子代雄性小鼠抑郁的作用机制。方法将8周龄含有纯和flox基因的雌性C57小鼠[flox/flox,促肾上腺皮质激素释放激素受体1(CRHR1)基因正常表达]与含有杂合flox基因且含有cre基因的雄性C57小鼠(flox/+,with cre;CR... 目的探讨妊娠期慢性应激诱导子代雄性小鼠抑郁的作用机制。方法将8周龄含有纯和flox基因的雌性C57小鼠[flox/flox,促肾上腺皮质激素释放激素受体1(CRHR1)基因正常表达]与含有杂合flox基因且含有cre基因的雄性C57小鼠(flox/+,with cre;CRHR1基因条件性敲除)合笼,待母鼠怀孕后将其随机分为正常处理组和慢性应激组,子鼠出生后选取雄性子鼠,分为妊娠期正常对照+子代基因正常组(CON组)、妊娠期正常对照+子代CRHR1基因敲除杂合子组(CON+CKOH组)、妊娠期正常对照+子代CRHR1基因敲除纯合子组(CON+CKOA组)、妊娠期慢性应激+子代基因正常组(CUMS组)、妊娠期慢性应激+子代CRHR1基因敲除杂合子组(CUMS+CKOH组)、妊娠期慢性应激+子代CRHR1基因敲除纯合子组(CUMS+CKOA组)。通过强迫游泳实验、悬尾实验和糖水偏好实验检测子代的抑郁程度;运用TUNEL染色观察海马CA3区锥体神经元病理改变;Western blot技术测定海马组织mTOR和p-mTOR(Ser2448)蛋白含量。结果妊娠期慢性应激导致雄性子代呈现抑郁样行为,海马CA3区神经元凋亡指数增加,海马mTOR和p-mTOR蛋白的表达水平降低。而小鼠经海马CRHR1基因条件性敲除后,可改善妊娠期慢性应激造成的子代抑郁样行为和海马CA3区神经元细胞凋亡,上调子代mTOR和p-mTOR蛋白的表达水平。结论妊娠期慢性应激可导致子代出现抑郁样行为,其作用机制可能是妊娠期慢性应激通过CRH作用于海马CRHR1受体,从而抑制mTOR通路的激活,导致海马CA3区神经细胞损伤,进而使子代抑郁。 展开更多

关键词 抑郁 妊娠期慢性应激 海马 促肾上腺皮质激素释放激素受体1 条件性基因敲除 cre/loxp技术

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