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鲮生长激素cDNA的克隆及其重组表达产物的促生长活性 被引量:6
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作者 江世贵 张殿昌 +2 位作者 苏天凤 周发林 吕俊霖 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2004年第6期23-27,共5页
利用RT-PCR技术从鲮脑垂体组织中克隆出生长激素cDNA片段,克隆的mcGH全长567bp,编码由188个氨基酸残基组成的GH成熟肽。构建了表达载体pQE30-mcGH,转化大肠杆菌M15(pREP4),在初步优化发酵条件的基础上实现了鲮mcGH在大肠杆菌中的高... 利用RT-PCR技术从鲮脑垂体组织中克隆出生长激素cDNA片段,克隆的mcGH全长567bp,编码由188个氨基酸残基组成的GH成熟肽。构建了表达载体pQE30-mcGH,转化大肠杆菌M15(pREP4),在初步优化发酵条件的基础上实现了鲮mcGH在大肠杆菌中的高效表达,表达的重组蛋白占菌体总蛋白的32.13%,经westem blotting分析证实所表达的重组蛋白是mcGH。表达产物主要以包涵体的形式存在。重组蛋白变性、复性后,经Nichelating Sepharose亲和层析纯化,SDS-PAGE显示,纯化的mcGH纯度约为94%。纯化的mcGH腹腔注射莫桑比克罗非鱼(Oreochromis mossambicus),经4周处理后,实验组1和2的体长增长率分别比对照组快9.38%和9.75%,体重增长率分别快23.42%和62.48%。经t检验统计分析表明,表达的重组mcGH具有显著的促罗非鱼生长作用(P<0.05)。 展开更多
关键词 生长激素 重组表达产物 RT-PCR 促生长活性 分子克隆 水产养殖 分子调控机制
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天然免疫促生长活性剂的关键创新技术——B型—EZO添加剂的研制和应用
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作者 姜礼燔 宗网华 《内陆水产》 2002年第2期10-11,共2页
关键词 鱼类 B型-EZO添加剂 饲料添加剂 天然免疫促生长活性
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天然免疫促生长活性物质在特种水产养殖中的应用
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作者 樊俊峰 宗网华 《内陆水产》 2004年第8期39-40,共2页
关键词 天然免疫促生长活性物质 特种水产养殖 产量 免疫功能
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鲜人参根中的一种大分子馏分的促生长活性
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作者 Eun,S.M. 王文英 《国外特种经济动植物》 1991年第4期34-37,共4页
关键词 人参 大分子馏分 促生长活性
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生防内生细菌Jaas ed1挥发性有机物的抑菌促生长作用
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作者 林玲 罗晓宇 +2 位作者 王卿 张昕 邓晟 《江苏农业科学》 北大核心 2024年第21期143-148,共6页
用二分格平皿对峙培养法测定生防内生细菌Jaas ed1的挥发性有机物对土传病原真菌和拟南芥生长的影响。结果表明,菌株Jaas ed1的挥发性有机物能抑制茄子黄萎菌微菌核的萌发,抑制率为85.5%。扫描电镜观察到挥发性有机物处理7 d后,西瓜枯... 用二分格平皿对峙培养法测定生防内生细菌Jaas ed1的挥发性有机物对土传病原真菌和拟南芥生长的影响。结果表明,菌株Jaas ed1的挥发性有机物能抑制茄子黄萎菌微菌核的萌发,抑制率为85.5%。扫描电镜观察到挥发性有机物处理7 d后,西瓜枯萎菌菌丝形态遭到破坏,菌丝表面粗糙,有明显塌陷区,部分菌丝干瘪,有的菌丝甚至消融断裂;而空白对照菌丝干净、饱满,其表面光滑、形态完整。挥发性有机物对茄子黄萎菌、西瓜枯萎菌、辣椒菌核菌等7种土传病原真菌的菌丝生长都有抑制作用,抑制率在23.1%~89.8%之间。挥发性有机物能促进拟南芥的生长,拟南芥单株鲜重是空白对照的2.7倍。通过顶空固相微萃取法收集菌株Jaas ed1产生的挥发性有机物,再经气质联用仪分析其组分,发现该菌株挥发性有机物包含苯甲醛、壬醛、2,6-二甲基-十一烷、反式-2-十一烯酸、十八烯酸-3-(十八烷基氧基)丙酯、2-甲基二十六烷、三十四烷、15-二十九烷酮等19种有机化合物。综上所述,菌株Jaas ed1能产生抑制土传病原真菌生长发育和促进植物生长的挥发性有机物,该菌株及其产生的挥发性有机物具有开发为生防产品的潜力。 展开更多
关键词 生防内生细菌 挥发性有机物 抑菌活性 促生长活性 顶空-固相微萃取-气质联用
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N,N′-二氧喹喔啉甲醛衍生物的合成及促家禽生长活性研究 被引量:3
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作者 马敬中 江洪 《饲料工业》 2005年第3期9-12,共4页
用γ-丁内酯、水杨酸酯、二酸酐与水合肼反应制备了5种酰肼中间体;用醛酮与水合肼反应制备了4种单腙;用氨基脲类、芳香胺类和上述酰肼、单腙与N,N'-二氧喹喔啉-2-甲醛反应合成了15种衍生物用元素分析、MS、IR和HNMR对这些新衍生物... 用γ-丁内酯、水杨酸酯、二酸酐与水合肼反应制备了5种酰肼中间体;用醛酮与水合肼反应制备了4种单腙;用氨基脲类、芳香胺类和上述酰肼、单腙与N,N'-二氧喹喔啉-2-甲醛反应合成了15种衍生物用元素分析、MS、IR和HNMR对这些新衍生物的结构进行了表征,并且用这些新衍生物对鸡进行了促生长活性研究。研究结果显示5种新衍生物具有明显的促鸡生长作用,相对增重率在25%以上。 展开更多
关键词 N N’-二氧喹喔啉甲醛衍生物 合成 结构表征 促生长活性
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1,4—二氧喹喔啉—2—甲醛席夫碱的合成与促鸡生长活性研究 被引量:1
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作者 马敬中 占升卫 胡超男 《饲料工业》 2006年第10期10-13,共4页
用水杨醛、1,4—二氧喹喔啉—2—甲醛与邻苯二胺反应制备了二种单席夫碱中间体,用2种中间体、8种取代芳香胺与1,4—二氧喹喔啉—2—甲醛反应合成了10种新席夫碱。用元素分析法、MS法(质谱法)、IR法(红外吸收光谱分析法)和1HNMR法(核磁... 用水杨醛、1,4—二氧喹喔啉—2—甲醛与邻苯二胺反应制备了二种单席夫碱中间体,用2种中间体、8种取代芳香胺与1,4—二氧喹喔啉—2—甲醛反应合成了10种新席夫碱。用元素分析法、MS法(质谱法)、IR法(红外吸收光谱分析法)和1HNMR法(核磁共振氢谱法)对这些新席夫碱的结构进行了表征。用这些新席夫碱对鸡进行了促生长活性实验,实验结果显示了苯胺、对—氯苯胺和对—乙酰胺基苯胺的席夫碱有明显促进鸡生长的作用,相对增重率在30%以上。 展开更多
关键词 1 4-二氧喹喔啉-2-甲醛席夫碱 合成 结构表征 生长活性
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真核表达人生长激素促进家兔生长及免疫原性分析
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作者 陈金武 齐璐璐 +1 位作者 段莹莹 徐忠东 《农业灾害研究》 2018年第3期71-74,共4页
[目的]获得稳定表达重组人生长激素的中华仓鼠卵巢细胞株,并分析目的蛋白体内促动物生长活性及免疫原性。[方法]PCR扩增获得rh GH基因,构建重组表达质粒rh GH1-p Opti VEC,并进行双酶切及测序鉴定。脂质体法转染CHO/DG44 dhfr-细胞,利用... [目的]获得稳定表达重组人生长激素的中华仓鼠卵巢细胞株,并分析目的蛋白体内促动物生长活性及免疫原性。[方法]PCR扩增获得rh GH基因,构建重组表达质粒rh GH1-p Opti VEC,并进行双酶切及测序鉴定。脂质体法转染CHO/DG44 dhfr-细胞,利用SDS-PAGE电泳及Western blot检测目的蛋白,并用氨甲喋呤(MTX)加压筛选阳性克隆。采用Co2+亲和层析法纯化rh GH。促去垂体家兔生长法检测rh GH体内活性,同时采用ELISA双抗夹心法检测重组蛋白诱生抗体滴度,分析其免疫原性。[结果]PCR扩增得到696 bp的rh GH序列,双酶切及测序结果显示构建的rh GH1-p Opti VEC质粒正确。转染细胞后,MTX加压使得蛋白表达量明显提高。纯化的rh GH能够促进去垂体家兔体重增加。诱生抗体滴度分析结果显示该蛋白具有与市售商品化蛋白相似的免疫原性。[结论]真核表达rh GH蛋白能够促进动物生长,可用于相关药物研究。 展开更多
关键词 重组人生长激素 真核表达 促生长活性 免疫原性
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N端延伸的人肠生长激素类似物基因的合成、克隆及融合表达 被引量:3
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作者 李泰明 胡卓逸 +3 位作者 刘景晶 马小驹 周慧 闵伟伟 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期373-377,共5页
目的:合成、克隆及融合表达N端延伸2个Pro,并由Gly取代N端第2个氨基酸Ala的人肠生长激素类似物PP-h[Gly2]GLP-2,初步测定其促肠生长的生物学活性。方法:合成长度分别为53,54及53个碱基的三段寡核苷酸,以中段寡核苷酸为模板,两端寡核苷... 目的:合成、克隆及融合表达N端延伸2个Pro,并由Gly取代N端第2个氨基酸Ala的人肠生长激素类似物PP-h[Gly2]GLP-2,初步测定其促肠生长的生物学活性。方法:合成长度分别为53,54及53个碱基的三段寡核苷酸,以中段寡核苷酸为模板,两端寡核苷酸为引物,经PCR合成PP-h[Gly2]GLP-2基因,克隆于pUC18载体。经测序正确后,将该基因与融合表达载体pED连接构建融合表达质粒pEDGLP-2,转化E.coliBL21(DE3),进行诱导表达,用SDS-PAGE分析。融合蛋白经分离纯化和酸切割后,分离获得PP-h[Gly2]GLP-2,用电喷雾质谱法测定其相对分子质量,并对雄性SD大鼠皮下给药14 d,初步测定其促肠生长活性。结果:诱导后融合蛋白表达量占菌体可溶性总蛋白的40%以上。电喷雾质谱法测得:经酸切割获得的PP-h[Gly2]GLP-2的相对分子质量为3 947.97 Da,与预测值3 947.38 Da基本一致。初步动物实验结果显示,0.5 mg/(kg.d)剂量组小肠增重百分比为41.65%,与PBS组相比具有显著差异。结论:制备获得的人肠生长激素类似物PP-h[Gly2]GLP-2,与设计的相对分子质量一致,有明显的促肠生长活性。 展开更多
关键词 人肠生长激素类似物 融合表达 生长活性
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