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重组人凋亡诱导因子基因的构建、表达及其对HeLa细胞的促凋亡作用 被引量:10
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作者 于翠娟 孟艳玲 +5 位作者 桂俊豪 赵晶 金明 王智 王成济 杨安钢 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第6期915-921,共7页
凋亡诱导因子 (apoptosis inducingfactor ,AIF)定位于细胞的线粒体膜间隙 .当凋亡信号刺激时 ,AIF分子从线粒体释放到胞浆 ,然后转位到细胞核内 ,引起染色体核周边凝集和DNA呈大片段断裂 (~ 5 0kb) .用RT PCR法分段克隆得到人全长AIF... 凋亡诱导因子 (apoptosis inducingfactor ,AIF)定位于细胞的线粒体膜间隙 .当凋亡信号刺激时 ,AIF分子从线粒体释放到胞浆 ,然后转位到细胞核内 ,引起染色体核周边凝集和DNA呈大片段断裂 (~ 5 0kb) .用RT PCR法分段克隆得到人全长AIF基因 ,经改造截去其N端线粒体定位信号编码序列 ,代之以不同长度的绿脓杆菌外毒素 (PE)转膜结构域序列 .把这些重组基因克隆入 pIRES2 EGFP真核表达载体 ,脂质体法转染HeLa细胞 ,通过荧光显微镜观察、共聚焦显微镜观察、电镜观察等方法检测了多种重组人AIF基因的表达及其对细胞生长的影响 .证明了重组人AIF基因的表达可引起HeLa细胞死亡 。 展开更多
关键词 重组人诱导因子基因 表达 HELA细胞 促凋亡作用 融合蛋白
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甲异靛联合imatinib对CML K562细胞的促凋亡作用 被引量:4
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作者 吴英理 印彤 +2 位作者 孙云 邬维礼 孙关林 《上海第二医科大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第5期433-436,共4页
目的研究甲异靛联合imatinib促进K562细胞凋亡的作用。方法K562细胞经imatinib或/和甲异靛处理48h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡相关指标(线粒体跨膜电位和AnnexinV/PI)的改变,ELISA方法检测caspase3活性改变,Westernblot检测凋亡相关... 目的研究甲异靛联合imatinib促进K562细胞凋亡的作用。方法K562细胞经imatinib或/和甲异靛处理48h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡相关指标(线粒体跨膜电位和AnnexinV/PI)的改变,ELISA方法检测caspase3活性改变,Westernblot检测凋亡相关蛋白(cytC,cIAP1,procaspase3和PARP)的改变。结果与单用组相比,20μmol/L甲异靛与0.3μmol/Limatinib联合应用后,线粒体跨膜电位下降细胞比例明显升高,cytC释放入胞浆,caspase3酶原形式procaspase3减少,caspase3活性升高,其底物PARP被降解,AnnexinV水平升高。结论甲异靛与imatinib合用可协同促进K562细胞凋亡。 展开更多
关键词 IMATINIB 甲异靛 促凋亡作用 K562细胞 caspase Annexin CML 线粒体跨膜电位 流式细胞术检测 ELISA方法 Western mol/L 相关蛋白 BLOT检测 C-IAP1 跨膜电位下降 活性改变 PARP 关指标 应用后 升高 cyt
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