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鼻咽癌侯选抑瘤基因BRD7原核表达载体的构建及其表达( 英文)
被引量：
6
1
作者
聂新民
张必成
+6 位作者
向娟娟
朱诗国
周鸣
董利
余鹰
李小玲
李桂源
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2002年第4期631-634,共4页
BRD7基因是一个鼻咽癌侯选抑瘤基因 ,为了构建BRD7基因的原核表达载体并使其在大肠杆菌得到表达 ,设计了带有SalⅠ ,NotⅠ酶切位点的引物 ,以已构建好的质粒 pGEM TEasy/BRD7为模板 ,用PCR扩增出BRD7基因的完整阅读框架 ,并用SalⅠ ,No...
BRD7基因是一个鼻咽癌侯选抑瘤基因 ,为了构建BRD7基因的原核表达载体并使其在大肠杆菌得到表达 ,设计了带有SalⅠ ,NotⅠ酶切位点的引物 ,以已构建好的质粒 pGEM TEasy/BRD7为模板 ,用PCR扩增出BRD7基因的完整阅读框架 ,并用SalⅠ ,NotⅠ酶切PCR产物和原核表达载体PGEX 4T 2 ,然后用T4DNA连接酶将其连接 ,得到重组表达质粒PGEX 4T 2 /BRD7,经双酶切鉴定和测序验证 ,表达载体构建正确 .重组表达质粒转化感受态大肠杆菌Jm10 5后用IPTG诱导 ,成功表达了一分子质量约为 90ku的融合蛋白 ;37℃诱导 4h后 ,SDS 聚丙烯酰胺凝胶 (PAGE)电泳后 ,经扫描分析该融合蛋白产量占菌体蛋白总量 2 8 4 8% ,蛋白质印迹 (Western blot)证实了该融合蛋白的表达获得成功 .这为BRD7基因的蛋白纯化及抗体制备 ,进一步开展其功能研究奠定了基础 .
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关键词
鼻咽癌
侯选抑瘤基因
BRD7
构建
表达
原核表达载体
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职称材料
题名
鼻咽癌侯选抑瘤基因BRD7原核表达载体的构建及其表达( 英文)
被引量：
6
1
作者
聂新民
张必成
向娟娟
朱诗国
周鸣
董利
余鹰
李小玲
李桂源
机构
中南大学湘雅医学院肿瘤研究所
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2002年第4期631-634,共4页
基金
国家高技术"863"计划资助项目 (10 2 10 0 1 0 5 )
国家重点基础研究发展规划项目 (973 ) (G19980 5 10 0 8)
+1 种基金
国家自然科学基金资助项目 (3 970 0 15 8
3 0 0 0 0 0 65 )~~
文摘
BRD7基因是一个鼻咽癌侯选抑瘤基因 ,为了构建BRD7基因的原核表达载体并使其在大肠杆菌得到表达 ,设计了带有SalⅠ ,NotⅠ酶切位点的引物 ,以已构建好的质粒 pGEM TEasy/BRD7为模板 ,用PCR扩增出BRD7基因的完整阅读框架 ,并用SalⅠ ,NotⅠ酶切PCR产物和原核表达载体PGEX 4T 2 ,然后用T4DNA连接酶将其连接 ,得到重组表达质粒PGEX 4T 2 /BRD7,经双酶切鉴定和测序验证 ,表达载体构建正确 .重组表达质粒转化感受态大肠杆菌Jm10 5后用IPTG诱导 ,成功表达了一分子质量约为 90ku的融合蛋白 ;37℃诱导 4h后 ,SDS 聚丙烯酰胺凝胶 (PAGE)电泳后 ,经扫描分析该融合蛋白产量占菌体蛋白总量 2 8 4 8% ,蛋白质印迹 (Western blot)证实了该融合蛋白的表达获得成功 .这为BRD7基因的蛋白纯化及抗体制备 ,进一步开展其功能研究奠定了基础 .
关键词
鼻咽癌
侯选抑瘤基因
BRD7
构建
表达
原核表达载体
Keywords
nasopharyngeal neoplasms, gene expression, BRD7 gene
分类号
R739.63 [医药卫生—肿瘤]
R394.8 [医药卫生—医学遗传学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鼻咽癌侯选抑瘤基因BRD7原核表达载体的构建及其表达( 英文)
聂新民
张必成
向娟娟
朱诗国
周鸣
董利
余鹰
李小玲
李桂源
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2002
6
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