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哺乳动物小卵泡卵母细胞体外成熟的研究进展
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作者 李有为 程亚倬 +2 位作者 商继勇 张廷龙 孙铭菊 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期1171-1182,共12页
体外成熟是哺乳动物胚胎工程获得成熟卵母细胞的主要途径,卵母细胞质量直接影响早期胚胎发育,妊娠的建立及维持,胎儿的发育等。哺乳动物卵巢表面数量众多的小卵泡可以作为胚胎工程卵母细胞的来源,但从哺乳动物卵巢获取的卵母细胞成熟差... 体外成熟是哺乳动物胚胎工程获得成熟卵母细胞的主要途径,卵母细胞质量直接影响早期胚胎发育,妊娠的建立及维持,胎儿的发育等。哺乳动物卵巢表面数量众多的小卵泡可以作为胚胎工程卵母细胞的来源,但从哺乳动物卵巢获取的卵母细胞成熟差异较大,存在处于发育各个时期的卵母细胞,小卵泡卵母细胞体外成熟质量差,发育能力不足。如何提高小卵泡卵母细胞体外成熟的发育能力以充分挖掘优良母畜的遗传资源,提高胚胎工程效率成为研究热点。基于此,文章概述哺乳动物小卵泡卵母细胞体外成熟的研究进展,比较大、小卵泡卵母细胞物质积累差异、卵泡的卵泡液成分及含量差异以及卵泡颗粒细胞和卵丘细胞的差异,分析哺乳动物小卵泡卵母细胞体外成熟质量差的原因,分析总结提高哺乳动物小卵泡体外成熟卵母细胞发育能力的措施,包括抑制核成熟、成熟前培养、颗粒细胞及卵丘细胞与卵母细胞共培养,期望能够为小卵泡卵母细胞发育调控机制的研究及发育能力的提高提供理论指导。 展开更多
关键词 哺乳动物 小卵泡 卵母细胞 成熟
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基于L5178Y细胞体外Pig-a基因突变试验方法的建立与初步探索 被引量:6
2
作者 王亚楠 文海若 王雪 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期220-228,共9页
利用小鼠淋巴瘤细胞L5178Y tk+/--3.7.2C和阴性化合物Glc、NaCl及阳性化合物EMS、ENU、4-NQO、B(a)P建立并验证基于哺乳动物细胞的体外Pig-a基因突变检测方法。计算细胞相对倍增速率评价细胞毒性,抗体标记突变型细胞确定流式检测模板,L5... 利用小鼠淋巴瘤细胞L5178Y tk+/--3.7.2C和阴性化合物Glc、NaCl及阳性化合物EMS、ENU、4-NQO、B(a)P建立并验证基于哺乳动物细胞的体外Pig-a基因突变检测方法。计算细胞相对倍增速率评价细胞毒性,抗体标记突变型细胞确定流式检测模板,L5178Y细胞经EMS处理后第4、8、12、16、20天检测Pig-a基因突变频率,确定最大突变频率发生时间点,免疫荧光技术检测CD90蛋白在细胞中的定位情况,采用PCR方法进行突变位点分析。结果表明(:1)Glc、NaCl、EMS、ENU、B(a)P、4-NQO所设浓度组RPD均大于50%。(2)Pig-a基因突变频率在给药后第8天出现峰值。Glc和NaCl致Pig-a基因突变频率均小于200×10-6,各浓度组与溶剂对照组间不存在显著性差异(P>0.05),EMS、ENU、B(a)P、4-NQO均可引起Pig-a基因突变频率增加,且与溶剂对照组相比存在显著性差异。(3)免疫荧光成像显示突变型细胞表面无CD90蛋白,野生型细胞正常表达CD45,CD90蛋白。(4)基因突变位点检测显示存在G→C、A→C、C→T三种突变类型。基于小鼠淋巴瘤L5178Y细胞分别在有无S9代谢活化条件下成功建立体外Pig-a基因突变的遗传毒性检测方法,旨为化合物体外遗传毒性评价或药物研发早期遗传毒性筛选提供新方法。 展开更多
关键词 Pig-a基因 L5178Y细胞 基因突变 流式细胞 免疫荧光 遗传毒性
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哺乳动物精原干细胞体外培养研究进展 被引量:6
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作者 成钢 冯书堂 +1 位作者 牟玉莲 岳文斌 《中国畜牧兽医》 CAS 2005年第10期20-22,共3页
作者综述了哺乳动物精原干细胞体外培养的研究现状、程序及方法,并从细胞化学、免疫组织化学等方面客观评定精原干细胞体外培养的形态、结构及特征,另外,还对其体外的纯化、鉴定、应用和未来的发展方向结合自己的试验体会作了逐一说明,... 作者综述了哺乳动物精原干细胞体外培养的研究现状、程序及方法,并从细胞化学、免疫组织化学等方面客观评定精原干细胞体外培养的形态、结构及特征,另外,还对其体外的纯化、鉴定、应用和未来的发展方向结合自己的试验体会作了逐一说明,旨在为其体外长期培养及建系提供条件。 展开更多
关键词 精原干细胞 培养 哺乳动物
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哺乳动物卵母细胞体外成熟培养的研究进展 被引量:16
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作者 熊炤成 苏雷 《中国畜牧兽医》 CAS 2007年第1期71-74,共4页
卵母细胞体外成熟培养技术是现代生物技术中的重要内容之一。作者就卵母细胞体外成熟的调节机制、成熟过程中的形态学变化、影响成熟的主要因素以及存在的问题等作一综述。
关键词 哺乳动物 卵母细胞 成熟 培养
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体外培养的哺乳动物细胞的葡萄糖和谷氨酰胺代谢 被引量:10
5
作者 高红亮 丛威 欧阳藩 《生物技术通报》 CAS CSCD 2000年第2期17-22,共6页
综述体外培养哺乳动物细胞的葡萄糖和谷氨酰胺代谢。大部分的葡萄糖通过糖酵解途径为细胞提供中间代谢物质和能量 ,最终生成乳酸 ,只有很少部分进入TCA循环和磷酸戊糖途径。谷氨酰胺通过谷氨酰胺酶生成谷氨酸 ,并进一步通过谷氨酸脱氢... 综述体外培养哺乳动物细胞的葡萄糖和谷氨酰胺代谢。大部分的葡萄糖通过糖酵解途径为细胞提供中间代谢物质和能量 ,最终生成乳酸 ,只有很少部分进入TCA循环和磷酸戊糖途径。谷氨酰胺通过谷氨酰胺酶生成谷氨酸 ,并进一步通过谷氨酸脱氢酶或转氨酶生成α -酮戊二酸进入TCA循环 ,为细胞提供中间代谢物质和能量。糖酵解和谷氨酰胺代谢 (glutaminolysis)受葡萄糖和谷氨酰胺的影响而相互调节。 展开更多
关键词 哺乳动物细胞 葡萄糖代谢 谷氨酰胺代谢 培养
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哺乳动物卵母细胞、胚胎体外培养营养研究进展 被引量:6
6
作者 周汉林 李琼 夏万良 《中国草食动物》 2005年第1期51-53,45,共4页
文章概述了哺乳动物卵母细胞、胚胎体外培养营养研究进展 ,包括血清及血清蛋白、共培养体系、生长因子、碳水化合物和氨基酸、无机盐离子等方面的研究。
关键词 卵母细胞 胚胎 培养 营养 哺乳动物 胚胎工程
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哺乳动物腔前卵泡卵母细胞的体外培养 被引量:3
7
作者 丁利军 陈秀萍 +1 位作者 李峰 丁家桐 《黑龙江动物繁殖》 2003年第4期10-15,共6页
阐明哺乳动物卵泡体内发生的一般模式,回顾腔前卵泡体外培养的研究历史,着重论述腔前卵泡的获取及鉴定标准,常用的培养体系和影响腔前卵泡体外发育的多种因素。
关键词 哺乳动物 腔前卵泡 卵母细胞 培养
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影响哺乳动物卵母细胞体外成熟的因素 被引量:1
8
作者 姬云涛 曹斌云 屈长青 《甘肃畜牧兽医》 2003年第2期37-39,共3页
关键词 哺乳动物 卵母细胞 成熟 影响因素 激素 培养基 授精
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哺乳动物卵母细胞体外核质成熟的影响因素分析 被引量:2
9
作者 赵鹏 史远刚 《上海畜牧兽医通讯》 2005年第2期46-49,共4页
卵母细胞体外成熟是体外受精技术中的关键步骤之一,如何提高体外卵母细胞成熟的质量是目前学者们所研究的热点。本文以牛为例,从细胞学角度简述卵母细胞核质成熟的机理、卵母细胞收集过程中的影响因素以及卵母细胞体外培养条件这三个方... 卵母细胞体外成熟是体外受精技术中的关键步骤之一,如何提高体外卵母细胞成熟的质量是目前学者们所研究的热点。本文以牛为例,从细胞学角度简述卵母细胞核质成熟的机理、卵母细胞收集过程中的影响因素以及卵母细胞体外培养条件这三个方面对卵母细胞核质成熟的影响因素作一概述。 展开更多
关键词 核质成熟 影响因素分析 哺乳动物 受精技术 卵母细胞成熟 培养条件 关键步骤 成熟 细胞
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影响哺乳动物卵母细胞体外成熟的因素 被引量:3
10
作者 张云生 石国庆 《贵州畜牧兽医》 2005年第2期11-12,共2页
关键词 卵母细胞 成熟 哺乳动物 蛋白质合成 胚胎发育 热点问题 成熟技术 分裂过程 mRNA 快速生长 RRNA 细胞 营养物质 直接影响 国内 细胞 受精
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影响哺乳动物卵母细胞体外成熟的主要因素 被引量:1
11
作者 师如意 张拴林 《上海畜牧兽医通讯》 2006年第6期58-59,共2页
关键词 卵母细胞成熟 哺乳动物 卵母细胞成熟 类固醇激素 促性腺激素 受精 培养技术 模拟
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影响哺乳动物卵母细胞体外成熟的主要因素
12
作者 师如意 张拴林 《广西畜牧兽医》 2007年第2期92-94,共3页
关键词 卵母细胞成熟 卵母细胞成熟率 哺乳动物 成熟率
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哺乳动物小腔卵泡卵母细胞体外成熟的研究进展 被引量:1
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作者 郑培栋 王新庄 夏霞 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期237-241,共5页
介绍了哺乳动物小腔卵泡卵母细胞体外成熟的研究现状,对小腔卵泡卵母细胞体外成熟的采集方法、培养时间、血清、激素等影响因素进行了分析,指出了存在的问题及解决办法.
关键词 哺乳动物 小腔卵泡 卵母细胞 成熟
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哺乳动物卵母细胞体外成熟的研究进展 被引量:3
14
作者 刘晓宁 高炬 《黑龙江动物繁殖》 2010年第6期10-11,15,共3页
1卵母细胞体外成熟的研究现状 1935年,Pincus等将从兔卵泡中分离出来的卵母细胞经体外培养,使其继续进行减数分裂,从而达到完全成熟。此后,卵母细胞的体外成熟培养得到了迅速发展。
关键词 卵母细胞成熟 哺乳动物 成熟培养 培养 减数分裂 卵泡
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哺乳动物胚胎体外共培养系统研究进展 被引量:2
15
作者 曾长军 郑鸿培 《四川畜牧兽医》 2000年第B07期107-109,共3页
该文较全面地概括了哺乳动物胚胎体外共培养系统的发展和现状 ,从共培养系统的体细胞类型以及胚胎发育的阶段等方面阐述了影响体外共培养效果的因素 。
关键词 哺乳动物 早期胚胎 共培养系统 细胞类型 胚胎发育阶段
全文增补中
哺乳动物小腔卵泡的体外发育
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作者 杜莹莹 黎宗强 +5 位作者 卢晟盛 姚玲 李婵 赵广伟 李春艳 李晓剑 《广西畜牧兽医》 2009年第6期380-381,共2页
关键词 小腔卵泡 发育 哺乳动物 卵母细胞成熟 胚胎工程技术 卵泡卵母细胞 辅助生殖 胚胎数量
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重组质粒pcDNA3/sIL-1R(I)在哺乳动物细胞中的表达 被引量:9
17
作者 徐艳 李鹏 +2 位作者 张蕴惠 章锦才 王大章 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期467-470,共4页
目的 检测重组质粒pcDNA3 sIL_1R(I)在哺乳动物细胞系COS_1和CHO细胞中的表达。方法 采用脂质体介导基因转染技术 ,将已构建的pcDNA3 sIL_1R(I)质粒DNA导入体外培养的哺乳动物细胞系COS_1和CHO细胞中。加入G4 18对转染的细胞加压筛选 ... 目的 检测重组质粒pcDNA3 sIL_1R(I)在哺乳动物细胞系COS_1和CHO细胞中的表达。方法 采用脂质体介导基因转染技术 ,将已构建的pcDNA3 sIL_1R(I)质粒DNA导入体外培养的哺乳动物细胞系COS_1和CHO细胞中。加入G4 18对转染的细胞加压筛选 ,获得稳定转染的细胞。酶联免疫吸附实验 (ELISA)对重组质粒在COS_1和CHO细胞表达产物的含量进行检测。结果 G4 18筛选获得稳定转染的COS_1和CHO细胞 ,对照组加压后第10~ 2 0天细胞全部死亡。转染组第 15~ 2 3天汇片达 80 %左右。转染组细胞培养液和冻融液中sIL_1R表达量均显著高于对照组 (P <0 0 5 )。结论 以sIL_1R胞外成熟肽编码区基因作为目的基因构建的重组质粒pcDNA3 sIL_1R(I)在哺乳动物细胞系中具有表达功能。 展开更多
关键词 哺乳动物细胞 表达 人可溶性白细胞介素-1受 基因治疗 转染
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苦马豆素对人食道癌Eca-109细胞体外生长的抑制试验 被引量:19
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作者 陈绍淑 赵宝玉 +4 位作者 莫重辉 童德文 王立红 王凯 曹光荣 《动物医学进展》 CSCD 2003年第3期91-92,共2页
探讨苦马豆素 (SW)对人食道癌 Eca-10 9细胞生长的抑制作用 ,以揭示 SW治疗食道癌的作用机制。选用不同剂量的 SW与食道癌Eca- 10 9细胞共同培养不同时间后 ,用 MTT法观察 SW对食道癌 Eca- 10 9细胞生长的抑制作用 ;细胞 DNA经特异性荧... 探讨苦马豆素 (SW)对人食道癌 Eca-10 9细胞生长的抑制作用 ,以揭示 SW治疗食道癌的作用机制。选用不同剂量的 SW与食道癌Eca- 10 9细胞共同培养不同时间后 ,用 MTT法观察 SW对食道癌 Eca- 10 9细胞生长的抑制作用 ;细胞 DNA经特异性荧光染色后 ,用流式细胞仪分析细胞周期变化。结果 :SW对食道癌Eca- 10 9细胞生长的半数抑制浓度 IC50 <2 .5μg/ m L;细胞周期分析 ,Eca- 10 9细胞 G1期细胞增多 ,S期细胞减少。结果表明 :SW可通过抑制人食道癌 Eca- 10 9细胞系生长达到抑制肿瘤的目的。 展开更多
关键词 苦马豆素 人食道癌 ECA-109细胞 生长 抑制试验
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人胃癌原代细胞短期培养与纯化培养体外药敏试验 被引量:6
19
作者 许洪伟 秦成勇 +4 位作者 朱菊人 刘吉勇 王春霞 劳萍 张春清 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2003年第3期243-246,共4页
目的 :评价人胃癌原代细胞短期培养 (混杂非肿瘤细胞 )与纯化培养MTT法体外药敏试验的可行性、各自的优势与缺陷。方法 :采用短期培养MTT比色法测定 7种化疗药物敏感性。另经反复贴壁、胶原酶消化排除、胰蛋白酶消化选择或自然纯化法获... 目的 :评价人胃癌原代细胞短期培养 (混杂非肿瘤细胞 )与纯化培养MTT法体外药敏试验的可行性、各自的优势与缺陷。方法 :采用短期培养MTT比色法测定 7种化疗药物敏感性。另经反复贴壁、胶原酶消化排除、胰蛋白酶消化选择或自然纯化法获得纯的原代肿瘤细胞 ,再行MTT法。测定两种方法细胞数与A(光密度 )值的相关性、药物抑制率及两种方法药敏结果的灵敏性。结果 :短期法MTT药敏试验成功率 81 4% (48/59) ;纯化培养为 50 8% (30 /59) ;两种方法细胞数与A值均呈直线相关 (P均 <0 0 1 ) ,药敏结果具有可比性 ;两种方法 7种药物敏感性顺序一致 ,但纯化法显示 7种化疗药物的抑制率有 6种均高于短期法 ,表明纯化法较敏感 ;纯化培养所需时间平均 (2 0 2± 9 5)天。结论 :人胃癌原代细胞短期培养MTT比色法快捷、简便 ,能够反映化疗药敏结果的基本趋势及个体化差异 ,但灵敏性略低。纯化培养后药敏试验结果更理想 。 展开更多
关键词 胃癌 原代细胞 培养 纯化 药敏试验
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流式细胞术应用于金黄色葡萄球菌体外药敏试验的初步研究 被引量:9
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作者 夏晓华 陆淼泉 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2003年第4期50-53,共4页
目的 建立金黄色葡萄球菌体外流式细胞荧光法药敏试验新方法。方法 选用碘化丙啶作为荧光染料 ,用流式细胞术检测 2株标准株和 5 6株金黄色葡萄球菌临床菌株对苯唑西林的敏感性。根据细菌培养物在不同浓度药物作用后所检测到的荧光强... 目的 建立金黄色葡萄球菌体外流式细胞荧光法药敏试验新方法。方法 选用碘化丙啶作为荧光染料 ,用流式细胞术检测 2株标准株和 5 6株金黄色葡萄球菌临床菌株对苯唑西林的敏感性。根据细菌培养物在不同浓度药物作用后所检测到的荧光强度来判断细菌存活率 ,从而推断MIC值。并与微量稀释法和VITEK仪检测结果进行比较。结果  5 8株金黄色葡萄球菌的流式细胞荧光法药敏试验结果与VITEK仪和微量稀释法结果完全一致。结论 所建立的金葡菌流式细胞荧光法药敏试验 ,具有快速、准确、客观等优点。 展开更多
关键词 流式细胞 金黄色葡萄球菌 药敏试验 苯唑西林
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