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牛传染性鼻气管炎病毒ERA-LFD检测方法的建立与应用
1
作者 郭衍冰 侯绪森 +8 位作者 孙兴忠 王军富 王改丽 郝良玉 董航 王雪磊 刘杰 王楠 曹利利 《动物医学进展》 北大核心 2025年第2期79-85,共7页
为建立可视化检测牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)的酶促恒温扩增-侧向流动试纸(ERA-LFD)方法,根据IBRV gB基因的保守区域设计并筛选最佳引物和探针,通过优化反应条件建立IBRV ERA-LFD方法,并对其特异性、敏感性、重复性和符合性进行评估。... 为建立可视化检测牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)的酶促恒温扩增-侧向流动试纸(ERA-LFD)方法,根据IBRV gB基因的保守区域设计并筛选最佳引物和探针,通过优化反应条件建立IBRV ERA-LFD方法,并对其特异性、敏感性、重复性和符合性进行评估。结果显示,采用建立的方法检测牛呼吸道合胞体病毒、牛病毒性腹泻病毒、牛冠状病毒、多杀性巴氏杆菌、弓形虫均无交叉反应,特异性强;建立方法最低检出IBRV阳性质粒的量为1.63×10^(1) copies/μL,比PCR方法高100倍,敏感性高;对相同样品进行批间和批内检测,结果均一致,重复性好;ERA-LFD与PCR方法检出的符合率为96%,且测序证实ERA-LFD检测结果无误。IBRV ERA-LFD的临床样本检测结果显示阳性率为2.08%,与PCR方法的结果相一致,说明IBRV ERA-LFD方法适于临床样品检测,为IBRV的临床快速检测和流行病学调查提供了工具。 展开更多
关键词 牛传染性鼻气管炎病毒 酶促恒温扩增 侧向流动试纸 检测方法
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牛传染性鼻气管炎病毒gE和gB基因荧光定量PCR检测方法的建立
2
作者 王慧荣 刘艺 +4 位作者 刘文俊 杨丽华 董春光 韩文儒 武守艳 《动物医学进展》 北大核心 2025年第5期74-79,共6页
为了检测牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV),根据IBRV gE和gB基因保守序列分别设计一对特异性引物,构建重组质粒作为标准品,经优化反应体系和反应条件建立了IBRV gE和gB基因的SYBR GreenⅡ荧光定量PCR检测方法。以建立的荧光定量PCR方法检测... 为了检测牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV),根据IBRV gE和gB基因保守序列分别设计一对特异性引物,构建重组质粒作为标准品,经优化反应体系和反应条件建立了IBRV gE和gB基因的SYBR GreenⅡ荧光定量PCR检测方法。以建立的荧光定量PCR方法检测重组质粒标准品pUC57-gE、pUC57-gB,结果显示浓度在10^(8)~10^(4)拷贝/μL时与Ct值有良好的线性关系,线性相关系数R2分别为0.997、0.996;该方法对重组质粒标准品pUC57-gE、pUC57-gB的最低检测限分别为4.74×10^(2)拷贝/μL、2.60×10^(2)拷贝/μL,敏感性较高;利用该方法检测IBRV、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、伪狂犬病病毒(PRV)、牛冠状病毒(BCoV)、巴氏杆菌、大肠埃希氏菌,只有IBRV检测为阳性,说明该方法特异性强;重复性试验结果显示批内、批间变异系数均低于1.5%,稳定性高。利用该方法和荧光定量PCR试剂盒分别对58份牛鼻拭子样品进行检测,结果显示两种方法符合率达98.3%。该方法具有强稳定性和高敏感性的特点,能为IBRV的检测和鉴别IBRV野毒株与gE基因缺失苗株提供技术支撑。 展开更多
关键词 牛传染性鼻气管炎病毒 荧光定量PCR gB和gE基因 检测
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牛传染性鼻气管炎的综合诊断
3
作者 孙超 《现代农村科技》 2025年第1期66-66,共1页
牛传染性鼻气管炎是一种在牛群中发病、传播的一种常见疾病,是通过牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)所引发的。牛传染性鼻气管炎病毒能够感染牛的呼吸系统、神经系统、生殖系统等,对牛的身体造成不可挽回的损失。一旦牛感染牛传染性鼻气管炎... 牛传染性鼻气管炎是一种在牛群中发病、传播的一种常见疾病,是通过牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)所引发的。牛传染性鼻气管炎病毒能够感染牛的呼吸系统、神经系统、生殖系统等,对牛的身体造成不可挽回的损失。一旦牛感染牛传染性鼻气管炎病毒,将会导致终生携带病毒,造成不可挽回的经济损失。 展开更多
关键词 牛传染性鼻气管炎 牛群 综合诊断 生殖系统 呼吸系统 常见疾病 神经系统 病毒
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大青叶水提物对牛传染性鼻气管炎病毒的体外增殖抑制活性评价
4
作者 冯琦 刘义钢 +8 位作者 何琴 李泽龙 马英才 易鹏飞 李娜 孙亚伟 陈如龙 姚刚 马雪连 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期5287-5298,共12页
旨在探究大青叶水提物对牛传染性鼻气管炎病毒(infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)体外增殖抑制活性,为临床治疗IBRV感染提供新的参考依据。通过细胞增殖检测试剂盒(CCK-8)和噻唑蓝(MTT)法,结合细胞病变(cytopathic effect,... 旨在探究大青叶水提物对牛传染性鼻气管炎病毒(infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)体外增殖抑制活性,为临床治疗IBRV感染提供新的参考依据。通过细胞增殖检测试剂盒(CCK-8)和噻唑蓝(MTT)法,结合细胞病变(cytopathic effect,CPE)法确定大青叶水提物对牛肾细胞(Madin-Darby bovine kidney cells,MDBK)的毒性作用,测得药物对细胞的最大安全浓度;将药物最大安全浓度以二倍稀释法稀释3个梯度,通过MTT法和CCK-8法检测大青叶水提物在不同给药方式下对IBRV的抑制活性;计算细胞存活率、药物有效抑制率、药物半数中毒浓度(50%cytotoxic concentration,CC50)和药物半数有效浓度(50%effective drug concentration,EC50),并以治疗指数(therapeutic index,TI)作为评价指标;通过病毒滴度、实时荧光定量PCR和免疫荧光染色法进一步确定大青叶水提物对IBRV增殖的抑制作用。结果表明,大青叶水提物对MDBK细胞的最大安全浓度为0.8μg·μL^(-1),半数中毒浓度(CC50)为1.937μg·μL^(-1),在最大安全浓度范围内药物浓度越高抑制效果越好;大青叶水提物在不同给药方式对IBRV均有抑制作用,中药和病毒预先作用、先接种病毒后加中药及先加中药后接种病毒三种给药方式的EC50分别为0.2928、0.3501、0.4161μg·μL^(-1),相应的TI分别为6.6154、5.5327、4.6551;通过病毒滴度、实时荧光定量PCR和免疫荧光染色发现,在中药和病毒预先混合作用下,病毒感染36 h药物对病毒抑制作用最显著。大青叶水提物有较好的抗IBRV活性,研究结果可为大青叶水提物在兽医临床应用和深入开发提供科学依据。 展开更多
关键词 大青叶水提物 牛传染性鼻气管炎病毒 体外抗病毒 实时荧光定量PCR 免疫荧光染色
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承德地区规模化肉牛场牛传染性鼻气管炎流行病学调查 被引量：1
5
作者 郭磊 张召兴 黄雷 《现代畜牧科技》 2024年第12期26-28,共3页
为了解承德地区规模化肉牛养殖场中犊牛、青年牛、后备牛及成年牛等不同阶段肉牛的传染性鼻气管炎(IBR)的流行情况,该研究于2023年1月—2024年3月期间采集承德地区规模化肉牛养殖场中疑似患IBR不同阶段肉牛病料组织(鼻拭子、咽拭子和血... 为了解承德地区规模化肉牛养殖场中犊牛、青年牛、后备牛及成年牛等不同阶段肉牛的传染性鼻气管炎(IBR)的流行情况,该研究于2023年1月—2024年3月期间采集承德地区规模化肉牛养殖场中疑似患IBR不同阶段肉牛病料组织(鼻拭子、咽拭子和血液)样本共计1 127份,采用PCR检测试剂盒分别对采集的病料组织样本进行IBR病毒检测,分析其感染情况。结果显示,从采集的1 127份不同阶段肉牛病料组织样本中IBR总阳性率为14.6%,犊牛、青年牛、后备牛和成年牛的IBR阳性率分别为23.7%、17.8%、8.3%和7.1%,其中犊牛和青年牛的IBR阳性率高于后备牛和成年牛,不同阶段牛的IBR主要分布于鼻拭子和咽拭子样品中。为该地区规模化肉牛养殖场中不同阶段肉牛的IBR流行病学调查与综合防控提供参考依据。 展开更多
关键词 牛传染性鼻气管炎 PCR 流行病学
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牛传染性鼻气管炎的诊断与防控措施 被引量：1
6
作者 马晓鹏 《北方牧业》 2024年第18期37-37,共1页
1牛传染性鼻气管炎诊断1.1临床症状牛传染性鼻气管炎作为一种急性呼吸道传染病,通常会表现出典型呼吸系统症状,患牛体温可能超过正常值1~2℃或更高。伴有流涕、咳嗽和呼吸困难,食欲减退、嗜卧。部分个体还会并发其他并发症,表现为眼睛... 1牛传染性鼻气管炎诊断1.1临床症状牛传染性鼻气管炎作为一种急性呼吸道传染病,通常会表现出典型呼吸系统症状,患牛体温可能超过正常值1~2℃或更高。伴有流涕、咳嗽和呼吸困难,食欲减退、嗜卧。部分个体还会并发其他并发症,表现为眼睛充血、肿胀或关节肿胀、跛行等临床征象。不同患牛症状表现可能存在一定差异,这与病毒毒株、患牛年龄、免疫状态和营养水平等多种因素有关。 展开更多
关键词 食欲减退 牛传染性鼻气管炎 病毒毒株 呼吸困难 症状表现 呼吸系统症状 急性呼吸道传染病 临床征象
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牛传染性鼻气管炎诊断方法 被引量：1
7
作者 李权伟 刘近 刘武斌 《北方牧业》 2024年第21期28-28,共1页
牛传染性鼻气管炎(infectious bovine rhinotracheitis,IBR)是由牛传染性鼻气管炎病毒(又名牛疱疹病毒1型,BHV-1)引起的急性、高度传染性疾病,感染牛后可在三叉神经形成潜伏感染和持续性感染,病牛终生带毒,对全球畜牧业造成了较大的经... 牛传染性鼻气管炎(infectious bovine rhinotracheitis,IBR)是由牛传染性鼻气管炎病毒(又名牛疱疹病毒1型,BHV-1)引起的急性、高度传染性疾病,感染牛后可在三叉神经形成潜伏感染和持续性感染,病牛终生带毒,对全球畜牧业造成了较大的经济损失。早期准确的诊断对于控制疫情至关重要。传统诊断方法,如临床诊断和病理学检测,依赖于兽医的经验和技术,虽直观但敏感性和特异性有限。随着分子生物学技术的发展,实时荧光PCR技术被广泛应用,极大提升了诊断的速度和准确性。血清学诊断方法,如酶联免疫吸附试验,也在流行病学监测中发挥了重要作用。本文将概述这些诊断方法,并讨论在牛传染性鼻气管炎诊断中的应用价值。 展开更多
关键词 牛传染性鼻气管炎 酶联免疫吸附试验 流行病学监测 持续性感染 血清学诊断方法 病牛 潜伏感染
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进口奶牛牛传染性鼻气管炎病毒的分离与鉴定 被引量：9
8
作者 孔繁德 徐淑菲 +6 位作者 周斌华 陈信忠 谢明星 龚艳清 王景明 郑征 陆承平 《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2006年第4期29-30,共2页
关键词 传染性鼻气管炎病毒 进口奶牛 牛传染性鼻气管炎 鉴定 分离 病毒性传染病 典型症状 病毒感染 临床症状 牛疱疹病毒
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牛传染性鼻气管炎诊断方法研究进展 被引量：17
9
作者 徐晓琴 冷雪 +1 位作者 李真光 武华 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第1期81-86,共6页
进行牛传染性鼻气管炎分子流行病学调查时,首先通过临床症状观察进行初诊,然后再进行实验室确诊。目前实验室诊断主要包括病原学诊断和血清学诊断。病原学诊断方法包括包涵体检查、病毒分离和病毒核酸检测;血清学诊断方法包括中和试验... 进行牛传染性鼻气管炎分子流行病学调查时,首先通过临床症状观察进行初诊,然后再进行实验室确诊。目前实验室诊断主要包括病原学诊断和血清学诊断。病原学诊断方法包括包涵体检查、病毒分离和病毒核酸检测;血清学诊断方法包括中和试验、琼脂扩散试验、间接血凝试验、酶联免疫吸附试验和变态反应。有时还要进行鉴别诊断,鉴别诊断主要有单克隆抗体法、鉴别PCR等。牛传染性鼻气管炎在世界范围内流行,给全球的养牛业造成了很大的影响。论文综述了牛传染性鼻气管炎诊断方法研究进展,为预防和消除该病提供参考。 展开更多
关键词 牛传染性鼻气管炎 牛传染性鼻气管炎病毒 诊断方法
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云南省2022年牛传染性鼻气管炎病原学监测及遗传进化分析
10
作者 张懿 赵屹钦 +3 位作者 何依蓉 张然 赵珍 周源依 《中南农业科技》 2024年第2期43-45,50,共4页
为了解牛传染性鼻气管炎在云南省牛群中的流行、分布情况,保障肉牛产业健康发展,根据2022年云南省主要动物疫病监测流调方案,利用定额抽样的方法分4个季度采集牛口鼻肛棉拭子及脾肺淋巴组织样品共计2 901份,进行qPCR病原学监测并对部分... 为了解牛传染性鼻气管炎在云南省牛群中的流行、分布情况,保障肉牛产业健康发展,根据2022年云南省主要动物疫病监测流调方案,利用定额抽样的方法分4个季度采集牛口鼻肛棉拭子及脾肺淋巴组织样品共计2 901份,进行qPCR病原学监测并对部分阳性样品gC基因进行遗传进化分析。病原学监测结果表明,2022年云南省检出牛传染性鼻气管炎阳性样品16份,样品阳性率0.55%,场点阳性率2.73%,其中规模场阳性率高于散养户;不同地区牛传染性鼻气管炎感染程度不同,除滇东北地区外均有感染,最高县(区)阳性率为11.11%;牛传染性鼻气管炎病毒在云南省活跃时间较长,除第1季度外,其余时间均监测到阳性牛只。遗传分析结果表明,所选3株阳性毒株间gC基因核苷酸同源性为97.3%~100.0%,且在BoHV-1.1和BoHV-1.2亚型上均有分布,其中YNKM22株属于BoHV-1.1亚型,与BoHV-1.1亚型参考株的gC基因核苷酸同源性为98.2%;YNPE-NG2、YNPE-NG3属于BoHV-1.2亚型,与BoHV-1.2亚型参考株B589的gC基因核苷酸同源性为99.6%。 展开更多
关键词 牛传染性鼻气管炎 牛疱疹病毒Ⅰ型(BoHV-Ⅰ) 病原学监测 遗传进化分析 云南省
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牛传染性鼻气管炎病毒病的病原学及诊断 被引量：5
11
作者 王丽荣 董永军 姚四新 《动物科学与动物医学》 2004年第3期60-61,共2页
关键词 牛 传染性鼻气管炎病毒病 传染性鼻气管炎病毒 诊断
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牛传染性鼻气管炎的诊断与防治 被引量：1
12
作者 王玉锋 《南方农业》 2017年第26期74-75,共2页
综述了牛传染性鼻气管炎的病原学、临床症状、流行病学、病理变化,总结了牛传染性鼻气管炎的诊断方法,并结合目前养牛业生产实际提出了本病的防治对策。
关键词 牛传染性鼻气管炎 牛传染性鼻气管炎病毒 诊断 防治
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牛传染性鼻气管炎诊断及防治研究进展
13
作者 邓艳 魏冬霞 姚美兰 《中国动物保健》 2005年第6期21-22,共2页
关键词 牛传染性鼻气管炎 研究进展 防治 诊断 传染性鼻气管炎病毒 接触性传染病 呼吸道炎症 呼吸困难 脑膜脑炎 经济损失 流行病学 阴道炎 结膜炎 乳房炎 养牛业 病原学 高热 鼻炎 皮炎 阴茎 流产 肠炎
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牛传染性鼻气管炎病毒gC蛋白单克隆抗体的制备与初步应用 被引量：14
14
作者 马辉 边传周 +3 位作者 王永芬 王鲜萍 郑宝亮 赵绪永 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1637-1644,共8页
为制备牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)gC蛋白的特异性单克隆抗体,并分析其免疫学特性,以原核表达并纯化的重组gC蛋白为免疫原注射免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞融合。建立间接ELISA方法筛选分泌gC蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,获得... 为制备牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)gC蛋白的特异性单克隆抗体,并分析其免疫学特性,以原核表达并纯化的重组gC蛋白为免疫原注射免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞融合。建立间接ELISA方法筛选分泌gC蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,获得1株能稳定分泌gC蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为3D6。3D6的亚类为IgG1型,轻链为κ链;上清、腹水抗体效价分别为6.4×103、1.28×105;Western blot和间接免疫荧光试验表明该单克隆抗体能识别牛gC蛋白。利用3D6细胞株分泌的单克隆抗体建立了检测IBRV的双抗体夹心ELISA方法,结果证明,该方法特异性和敏感性良好,为快速诊断IBRV和研究gC蛋白功能奠定了基础。 展开更多
关键词 牛传染性鼻气管炎病毒 gC蛋白 单克隆抗体 ELISA
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牛传染性鼻气管炎病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立 被引量：17
15
作者 唐泰山 邓碧华 +2 位作者 王凯民 张常印 雷治海 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第4期14-16,共3页
根据牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)保守基因gB和gE序列,分别设计两对引物及其相应的TaqMan探针,建立、优化反应体系后,利用10倍稀释的病毒进行扩增以检测其灵敏度,同时对伪狂犬病病毒(PRV)、马立克病病毒(MDV)、鸭瘟病毒(DPV)进行特异性... 根据牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)保守基因gB和gE序列,分别设计两对引物及其相应的TaqMan探针,建立、优化反应体系后,利用10倍稀释的病毒进行扩增以检测其灵敏度,同时对伪狂犬病病毒(PRV)、马立克病病毒(MDV)、鸭瘟病毒(DPV)进行特异性检测。结果显示,建立的扩增gB和gE基因的荧光PCR可用于检测IBRV,其灵敏度为0.02 TCID50,而与PRV等非IBRV无交叉反应。本研究所建立的荧光PCR具有快速、灵敏、准确、低污染等优点,可用于IBRV的检测。 展开更多
关键词 牛传染性鼻气管炎病毒 实时荧光定量PCR 特异性 灵敏度
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我国部分地区牛传染性鼻气管炎血清学调查与分析 被引量：14
16
作者 曲萍 宋晓晖 +6 位作者 董浩 胡冬梅 赵柏林 孙雨 张倩 王晓英 杨林 《动物医学进展》 北大核心 2018年第3期132-135,共4页
为了解我国牛传染性鼻气管炎的感染情况及流行趋势,对2014年-2016年采集于11个牧区半牧区省份的9 668份牛血清样品进行了牛传染性鼻气管炎病毒抗体检测。结果显示,牛传染性鼻气管炎病毒抗体的个体平均阳性率为52.77%,群体阳性率连续3年... 为了解我国牛传染性鼻气管炎的感染情况及流行趋势,对2014年-2016年采集于11个牧区半牧区省份的9 668份牛血清样品进行了牛传染性鼻气管炎病毒抗体检测。结果显示,牛传染性鼻气管炎病毒抗体的个体平均阳性率为52.77%,群体阳性率连续3年均在80%以上,说明感染现象较为普遍。乳用牛的感染情况较肉用牛和乳肉兼用牛严重。同时,发现生产实际中牛传染性鼻气管炎与牛病毒性腹泻混合感染情况普遍。此次摸底调查掌握了我国牛传染性鼻气管炎感染情况,为制定科学防控政策提供了参考依据。 展开更多
关键词 牛传染性鼻气管炎 血清学 调查 分析
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牛传染性鼻气管炎疫苗研究进展 被引量：14
17
作者 刘瑞宁 邓明亮 +2 位作者 刘玉辉 陈颖钰 郭爱珍 《动物医学进展》 北大核心 2016年第2期85-90,共6页
牛传染性鼻气管炎(IBR)是由牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)感染家养牛引起的一种热性接触性传染病。由于缺乏有效的治疗性药物,因此疫苗免疫仍然是防控该病的关键措施。针对该病常用的疫苗主要有灭活疫苗和活疫苗,而基因缺失活疫苗由于具... 牛传染性鼻气管炎(IBR)是由牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)感染家养牛引起的一种热性接触性传染病。由于缺乏有效的治疗性药物,因此疫苗免疫仍然是防控该病的关键措施。针对该病常用的疫苗主要有灭活疫苗和活疫苗,而基因缺失活疫苗由于具有免疫标识,已成为新型疫苗研发的主流方向。一些发达国家已利用基因缺失标记疫苗,如IBRV gE缺失疫苗,进行免疫根除计划并净化了该病。然而,由于现存的疫苗仍存在免疫抑制与潜伏感染等问题,亟需研制更有效的标记疫苗。论文就牛传染性鼻气管炎病毒的病原学特征、免疫抑制及疫苗研发进展进行综述,以期为IBR有效疫苗的研发及其在防控上的应用提供参考。 展开更多
关键词 牛传染性鼻气管炎 牛疱疹病毒Ⅰ型 疫苗 流行 防控
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抗猫传染性鼻气管炎病毒药物的体外筛选 被引量：10
18
作者 刘健 杨显超 +6 位作者 李凯航 李鑫 徐锋 杨德全 葛杰 鞠厚斌 周锦萍 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第11期3385-3390,共6页
试验旨在检测抗病毒药物对猫传染性鼻气管炎病毒的有效性。利用F81细胞建立抗猫传染性鼻气管炎病毒药物的体外筛选模型,采用MTT法检测,计算病毒的抑制率。结果显示,阿昔洛韦、利巴韦林、L-赖氨酸、板蓝根和黄芪多糖的半数有效浓度(IC50... 试验旨在检测抗病毒药物对猫传染性鼻气管炎病毒的有效性。利用F81细胞建立抗猫传染性鼻气管炎病毒药物的体外筛选模型,采用MTT法检测,计算病毒的抑制率。结果显示,阿昔洛韦、利巴韦林、L-赖氨酸、板蓝根和黄芪多糖的半数有效浓度(IC50)分别为9.5、3.3、3.4、161.0和4.7μg/mL,聚肌胞IC_50为6.0mg/mL,治疗指数TI分别为76.8、39.3、2 588.0、4.5、78.7和5.8。结果表明,L-赖氨酸和黄芪多糖为高效抗猫传染性鼻气管炎病毒药物。 展开更多
关键词 猫传染性鼻气管炎病毒 MTT 筛选 抗病毒药
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牛支原体、牛病毒性腹泻病毒和牛传染性鼻气管炎病毒三重二温式PCR检测方法的建立及应用 被引量：10
19
作者 范晴 谢芝勋 +10 位作者 谢志勤 谢丽基 黄莉 黄娇玲 张艳芳 曾婷婷 王盛 罗思思 邓显文 刘加波 庞耀珊 《动物医学进展》 北大核心 2018年第2期43-48,共6页
为建立一种可同时检测牛支原体(MB)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和牛传染性支气管炎病毒(IBRV)的三重二温式PCR检测方法。根据GenBank中MB、BVDV和IBRV的保守基因Uvrc基因、5′端非编码区(5′-UTR)和GB基因,分别设计了3对特异引物,将三温式... 为建立一种可同时检测牛支原体(MB)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和牛传染性支气管炎病毒(IBRV)的三重二温式PCR检测方法。根据GenBank中MB、BVDV和IBRV的保守基因Uvrc基因、5′端非编码区(5′-UTR)和GB基因,分别设计了3对特异引物,将三温式PCR扩增程序简化为两个温度梯度,优化反应条件建立了用于同时检测MB、BVDV以及IBRV 3种常见牛呼吸道传染病病原的三重二温式PCR。结果显示,该方法特异性好,只对MB、BVDV和IBRV模板进行扩增,扩增的目的片段长度分别为412、170、727bp,对其他牛病原体无特异性扩增;灵敏度高,最低能同时检测到10 000拷贝的目的核酸;干扰性小,能同时检测3个不同浓度的模板。研究所建立的MB、BVDV和IBRV三重二温式PCR检测方法,具有特异性好、灵敏度高、方便快速等优点,可用于临床鉴别诊断和流行病学调查,具有很高的临床应用价值。 展开更多
关键词 三重二温式PCR 牛支原体 牛病毒性腹泻病毒 传染性鼻气管炎病毒 检测
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牛传染性鼻气管炎活疫苗安全性和免疫保护效果研究 被引量：13
20
作者 冷雪 郭利 +1 位作者 张淑琴 武华 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第10期181-184,共4页
本试验使用牛传染性鼻气管炎弱毒活疫苗进行安全性和免疫保护效果研究,将该疫苗分别接种1月龄犊牛、6～8月龄牛及后备母牛,接种剂量为2mL(10头份),检验疫苗安全性。将疫苗接种6～8月龄牛,接种剂量为1mL(1头份),疫苗接种后28d使用检验用... 本试验使用牛传染性鼻气管炎弱毒活疫苗进行安全性和免疫保护效果研究,将该疫苗分别接种1月龄犊牛、6～8月龄牛及后备母牛,接种剂量为2mL(10头份),检验疫苗安全性。将疫苗接种6～8月龄牛,接种剂量为1mL(1头份),疫苗接种后28d使用检验用强毒进行攻毒,检验疫苗对攻击用强毒的保护效力。结果表明,不同月龄牛接种疫苗后体温正常,无任何临床可见异常,后备母牛接种疫苗后精神状态及食欲均良好,无流产、死胎及木乃伊胎出现。疫苗接种牛对强毒攻击可产生较好的抵抗力,攻毒保护率达5/5。研究结果表明,该疫苗对牛安全,且免疫保护效果良好。 展开更多
关键词 牛传染性鼻气管炎病毒 活疫苗 安全性 免疫原性
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