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鸡传染性支气管炎病毒M41株全基因组序列测定及致病性分析
1
作者 赵靖玉 李丹 +4 位作者 张兵 张乾义 张锦华 宋亚芬 杨承槐 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第8期3967-3975,共9页
为系统评价传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)M41株传代过后是否生物特性会发生改变,我们将国家兽医微生物菌(毒)种保藏中心1979年从法国引进的IBV M41株(保藏编号CVCC AV1511,简写AV1511-1979)在SPF鸡上连续传代5次... 为系统评价传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)M41株传代过后是否生物特性会发生改变,我们将国家兽医微生物菌(毒)种保藏中心1979年从法国引进的IBV M41株(保藏编号CVCC AV1511,简写AV1511-1979)在SPF鸡上连续传代5次,评估其在基因组变异、排毒规律、组织嗜性等方面的差异。采用Illumina高通量测序方法测序传代前后基因组序列,并建立了IBV攻毒模型,使用RT-PCR、RT-qPCR、气管环纤毛摆动试验等方法从病毒含量、临床症状观察、组织嗜性等方面评价其传代前后差异情况。结果表明AV1511-1979株在SPF鸡上连续传代5代后全基因组未发生变异,但是与其他来源的Mass株在1a、5a、N蛋白区域差异较大;攻毒模型中试验鸡出现精神沉郁、张口呼吸和呼吸啰音等明显临床症状,剖检发现气管环纤毛摆动状况不佳或停止摆动;RT-qPCR结果显示病毒在感染鸡的气管、肺脏、肾脏、腺胃、十二指肠、盲肠扁桃体内均可复制,尤其在气管、肾脏、腺胃中病毒载量较高,传代前后的病毒载量在统计学上无显著差异。研究表明:IBV M41株AV1511-1979株在SPF鸡上传代5代内生物特性稳定,不发生改变,作为IBV灭活疫苗生产用种毒、IBV疫苗检验用标准强毒株,我们的工作为生产种毒代次控制、疫苗评价提供了参考。 展开更多
关键词 鸡传染性支气管炎病毒 M41株 SPF鸡 传代 生物特性
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传染性支气管炎病毒3b基因缺失嵌合活疫苗的安全性与免疫效力研究
2
作者 徐睿 李艳丽 +5 位作者 王倩倩 姜逸 马丽 温建新 李朝阳 周生 《中国家禽》 北大核心 2025年第9期58-65,共8页
为探讨以传染性支气管炎病毒(IBV)H120疫苗株基因组为骨架,辅助蛋白3b基因缺失后的重组嵌合病毒rH120-4/91S1和rH120-4/91S作为传染性支气管炎(IB)疫苗候选株的可行性,试验将嵌合病毒免疫雏鸡进行安全性评估,并通过攻毒保护试验进行有... 为探讨以传染性支气管炎病毒(IBV)H120疫苗株基因组为骨架,辅助蛋白3b基因缺失后的重组嵌合病毒rH120-4/91S1和rH120-4/91S作为传染性支气管炎(IB)疫苗候选株的可行性,试验将嵌合病毒免疫雏鸡进行安全性评估,并通过攻毒保护试验进行有效性评估,同时针对3b基因缺失区域建立能鉴别疫苗株与分离株的检测方法。结果显示:与4/91疫苗株相比,嵌合疫苗对气管纤毛的损伤程度显著降低,且主要经咽喉低水平排毒;所有免疫组对QX型强毒株J151和IBYZ的攻击均能提供有效保护,显著降低气管损伤及咽喉排毒(P≤0.01),但嵌合疫苗株在泄殖腔排毒控制上不及4/91疫苗株,后者在攻毒后3 d显著降低泄殖腔病毒载量,而嵌合疫苗效果不显著(P>0.05);采用针对3b基因缺失区域设计的特异性引物成功建立了区分疫苗株与分离株的RT-PCR检测方法,疫苗株扩增片段为325 bp,野毒株扩增片段约500 bp。研究表明,与4/91疫苗株相比,两株嵌合活疫苗具有更高的安全性及良好的免疫保护效果,并能通过RT-PCR方法将嵌合疫苗株与分离株进行快速区分,为研发安全有效的IB新型活疫苗提供了理论依据。 展开更多
关键词 传染性支气管炎病毒 H120疫苗株 4/91疫苗株 嵌合疫苗
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鸡传染性支气管炎病毒对呼吸系统和生殖系统的双重损害机制研究
3
作者 李文康 《北方牧业》 2025年第7期26-26,共1页
鸡传染性支气管炎病毒(IBV)是一种高度传染性的冠状病毒,广泛威胁养鸡业。其感染不仅导致呼吸系统损伤,还使鸡群易继发感染其他疾病。而某些毒株的组织嗜性强,可对生殖系统造成严重破坏,包括输卵管退化、卵泡发育异常和产蛋性能下降。... 鸡传染性支气管炎病毒(IBV)是一种高度传染性的冠状病毒,广泛威胁养鸡业。其感染不仅导致呼吸系统损伤,还使鸡群易继发感染其他疾病。而某些毒株的组织嗜性强,可对生殖系统造成严重破坏,包括输卵管退化、卵泡发育异常和产蛋性能下降。病毒的高变异性和复杂传播途径增加了防控难度,对疾病致病机制的研究有助于开发精准疫苗和制定有效防控策略,以降低其对养殖业的危害。 展开更多
关键词 鸡传染性支气管炎病毒 呼吸系统
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鸡传染性支气管炎发展现状与防治措施 被引量：6
4
作者 王国荣 李丰耘 王国成 《家禽科学》 2025年第2期91-93,共3页
鸡传染性支气管炎(IB)由传染性支气管炎病毒(IBV)引起,可导致鸡的生长性能变差及死亡率上升,是一种严重威胁家禽养殖业的疾病。IBV的遗传多样性和易变异性使得现有疫苗难以提供持久的防护。本文回顾了IBV的病原学历史,介绍了IB的病理变... 鸡传染性支气管炎(IB)由传染性支气管炎病毒(IBV)引起,可导致鸡的生长性能变差及死亡率上升,是一种严重威胁家禽养殖业的疾病。IBV的遗传多样性和易变异性使得现有疫苗难以提供持久的防护。本文回顾了IBV的病原学历史,介绍了IB的病理变化及出现呼吸型、生殖型、肾型等多种临床表现,且依靠临床诊断难以分辨,需要依赖于RT-PCR等分子生物学技术、血清学技术等实验室方法。可使用西药和中药缓解症状,采取提升免疫能力、改善饲养管理及疫苗接种等措施预防。综上所述,面对鸡传染性支气管炎的挑战,需加强IBV监控与饲养管理,确保及时诊断和治疗,以降低该病对养殖业的影响。 展开更多
关键词 鸡传染性支气管炎 鸡传染性支气管炎病毒 诊断 防治措施
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滑液囊支原体与鸡传染性支气管炎病毒共感染对SPF鸡的致病性研究 被引量：12
5
作者 王晨燕 邵国青 侯博 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期113-120,共8页
为比较滑液囊支原体(MS)和鸡传染性支气管炎病毒(IBV)共感染对SPF鸡的致病性,本研究将144只28日龄SPF鸡随机均分为阴性对照组、MS感染组、IBV-M41感染组、IBV-M41+MS共感染组、IBV-QX感染组、IBV-QX+MS共感染组共6组,采用50μL/只剂量... 为比较滑液囊支原体(MS)和鸡传染性支气管炎病毒(IBV)共感染对SPF鸡的致病性,本研究将144只28日龄SPF鸡随机均分为阴性对照组、MS感染组、IBV-M41感染组、IBV-M41+MS共感染组、IBV-QX感染组、IBV-QX+MS共感染组共6组,采用50μL/只剂量按相应分组点眼感染MS (106CCU50)、IBV(105EID50),阴性对照组以50μL/只点眼KM2培养基(左眼)和PBS (右眼)。感染后每天观察临床症状,在感染后7 d、14 d、21 d和28 d每组随机剖检6只鸡,观察气囊炎和气囊损伤评分,并采集气管进行病原再分离,其中MS经支原体液体培养基培养后进行PCR鉴定,IBV接种SPF鸡胚后进行RT-PCR鉴定。此外,各组鸡气管均经10%甲醛固定后进行粘膜厚度检测以及病理损伤评分。结果显示:除阴性对照组和MS感染组,其他组鸡在感染后4 d均出现一过性呼吸道症状。剖检结果显示MS感染组鸡在感染后21 d出现气囊炎,28 d仍可见气囊炎;而IBV-M41感染组和IBV-QX感染组鸡在感染后7 d或14 d出现气囊炎,且气囊炎的发生率均未超过50%。感染后14 d IBV-QX+MS共感染组鸡气囊炎发生率达100%(6/6),直至21 d并且大部分鸡气囊炎可持续至感染后28 d (5/6),而IBV-M41+MS共感染组鸡气囊炎仅可持续至感染后21 d,且气囊炎的发生率最高在感染后14 d (5/6)。IBV-QX+MS共感染组鸡平均气囊损伤评分在感染后14 d、21d和28 d均极显著高于单一感染组(P<0.001),而IBV-M41+MS共感染组鸡仅在感染后14 d极显著高于单一感染组(P<0.001)。病原再分离结果显示,各感染组鸡均在气管中再分离到MS(感染后28 d内)或IBV(感染后7 d内)。病理损伤检测结果显示,共感染组鸡较各单一感染组鸡气管粘膜增厚持续时间更长以及病理损伤更为严重。IBV-M41+MS共感染组鸡在感染后14 d平均气管粘膜厚度显著低于IBV-QX+MS共感染组(P<0.05),而在感染后21 d极显著低于IBV-QX+MS共感染组(P<0.001),其余各组鸡在感染后14 d和21 d均极显著低于IBV-QX+MS共感染组鸡(P<0.001)。IBV M41+MS共感染组鸡最早14 d出现气管病变,而IBV QX+MS共感染组鸡在共感染后7 d就可见气管病理损伤,且共感染组鸡的平均气管损伤评分均极显著高于单一MS或IBV感染组(P<0.01或P<0.001)。上述结果证实MS和IBV共感染较单一感染对28日龄SPF鸡的致病性更强,IBV M41或QX株与MS共感染对SPF鸡的致病性存在差异,本研究为临床IB和MS的防控提供科学参考依据。 展开更多
关键词 滑液囊支原体 鸡传染性支气管炎病毒 共感染 致病性
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鸡传染性支气管炎的防控
6
作者 王金会 《北方牧业》 2025年第8期32-32,共1页
鸡传染性支气管炎是由冠状病毒引发的一种急性、高度传染性的病毒性呼吸道疾病。此病对蛋鸡和种鸡的生长性能造成显著影响,导致生产效率下降,死亡率上升,是养鸡业中重要疾病之一。1鸡传染性支气管炎的基本特征1.1病原鸡传染性支气管炎... 鸡传染性支气管炎是由冠状病毒引发的一种急性、高度传染性的病毒性呼吸道疾病。此病对蛋鸡和种鸡的生长性能造成显著影响,导致生产效率下降,死亡率上升,是养鸡业中重要疾病之一。1鸡传染性支气管炎的基本特征1.1病原鸡传染性支气管炎病毒主要存在于染病鸡的呼吸道渗出物中。该病毒在鸡群中具有极高的传播速度,并且展现出强大的变异能力。多数情况下,病毒会导致病鸡的气管出现特异性病理变化,进而影响并波及鸡群的生殖道或肾脏,引发相应的病变,导致鸡的免疫功能下降,死亡率上升。 展开更多
关键词 生产效率 病原 鸡传染性支气管炎病毒 死亡率
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国家参考品鸡传染性支气管炎阳性血清(检验用)制备与检定
7
作者 赵海明 马通通 +2 位作者 张娜 崔松奇 黄丽英 《家禽科学》 2025年第6期14-19,共6页
本研究旨在制备抗鸡传染性支气管炎病毒的特异性阳性血清(以下简称IB阳性血清),用于鸡传染性支气管炎病毒活疫苗、毒种的鉴别检验和外源病毒检测,以及鸡新城疫、支气管炎二联活疫苗的效力检验。对4周龄SPF鸡(公鸡)进行3次免疫,首次用H12... 本研究旨在制备抗鸡传染性支气管炎病毒的特异性阳性血清(以下简称IB阳性血清),用于鸡传染性支气管炎病毒活疫苗、毒种的鉴别检验和外源病毒检测,以及鸡新城疫、支气管炎二联活疫苗的效力检验。对4周龄SPF鸡(公鸡)进行3次免疫,首次用H120株种毒滴鼻免疫,21d用含M41毒株的新支系列灭活苗进行二免,再过21d用相同灭活疫苗进行三免。三免后28d,采集所有鸡的心脏血,经静置自然分离、离心、过滤处理,收获的血清混合分装后冻干。对冻干血清进行无菌、支原体、外源病毒、中和效价等项目检验,结果显示冻干血清中和抗体效价为1:1 212(标准≥1:200);本次制备的IB阳性血清特异性高,细菌、支原体和外源病毒三项检验均符合《中华人民共和国兽药典》(2020年版三部)相关标准。本研究通过对免疫前隔离器消毒验证、环境消毒验证、动物筛选、人员进出控制、动物饲养密度调控等措施,确保了试验顺利完成,同时建立了血清制备和检定方法,为后续相关毒种的新兽药研发或产品检验等血清制备积累了方法。 展开更多
关键词 鸡传染性支气管炎病毒 特异性阳性血清 检验 中和效价 制备方法
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鸡传染性支气管炎的治疗技术措施
8
作者 陈继军 吴永进 郑周兴 《中国畜牧业》 2025年第2期110-112,共3页
鸡传染性支气管炎是一种急性、高度传染性的呼吸道传染病,属于冠状病毒。近年来,随着禽类养殖业的迅速发展,饲养密度不断提高,疫病发生率随之升高,引起了重大的经济损失。其主要表现为呼吸困难、咳嗽、喷嚏;受病毒感染的雏鸡可表现为食... 鸡传染性支气管炎是一种急性、高度传染性的呼吸道传染病,属于冠状病毒。近年来,随着禽类养殖业的迅速发展,饲养密度不断提高,疫病发生率随之升高,引起了重大的经济损失。其主要表现为呼吸困难、咳嗽、喷嚏;受病毒感染的雏鸡可表现为食欲下降,体重减轻,产蛋率降低。目前,虽然已有各种疫苗,但流感的迅速发展及疾病传播的复杂性给防治带来了极大的难度。因此,笔者深入分析了我国鸡传染性支气管炎的调查和防治方法,为我国鸡传染性支气管炎的防治提供参考。 展开更多
关键词 鸡传染性支气管炎 呼吸道传染病 高度传染性 饲养密度 疾病传播 呼吸困难 防治方法 病毒感染
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抗鸡传染性支气管炎病毒中药的筛选 被引量：5
9
作者 李俊贤 任涛 +3 位作者 杨剑 郭杨 文安林 欧德渊 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期1241-1249,共9页
【目的】对鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)进行抗病毒中药的筛选,并验证其治疗效果,为临床用药提供一定参考。【方法】采用鸡胚培养法,通过预防和治疗2个角度对24味单一中药、6种市售复方中药进行抗IBV的有效... 【目的】对鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)进行抗病毒中药的筛选,并验证其治疗效果,为临床用药提供一定参考。【方法】采用鸡胚培养法,通过预防和治疗2个角度对24味单一中药、6种市售复方中药进行抗IBV的有效成分或方剂筛选试验,即在SPF鸡胚中先注射中药2 h后再接种病毒和先接种病毒2 h后再注射中药。使用SPSS 20.0软件对鸡胚重量进行方差分析,利用实时荧光定量PCR法辅助判定治疗效果。【结果】对鸡胚净重进行方差分析显示,桔梗组与阳性对照组差异显著(P<0.05),与阴性对照组差异不显著(P>0.05),表明预防和治疗均有效果。实时荧光定量PCR检测鸡胚尿囊液病毒滴度结果显示,桔梗、鱼腥草、宣肺败毒方、绞股蓝、蒲公英、甘草对IBV增殖均有抑制作用,其中桔梗抑制效果最佳。【结论】桔梗对IBV有显著的预防及抑制效果,结果为深入研究桔梗作用机理提供了依据。 展开更多
关键词 鸡传染性支气管炎病毒(ibv) 鸡胚 中药 筛选
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鸡传染性支气管炎病毒组织和细胞嗜性分子机制研究进展 被引量：2
10
作者 李淑芸 李通 +6 位作者 方和俊 叶彩燕 黄毅 尹皑 崔敏 夏静 黄勇 《动物医学进展》 北大核心 2024年第11期88-93,共6页
鸡传染性支气管炎病毒(IBV)引起鸡的传染性支气管炎(IB)可导致鸡呼吸系统、泌尿系统、生殖系统、消化系统的组织病变,不同IBV毒株的组织嗜性及相应细胞嗜性存在差异。病毒基因组上关键基因或位点通过影响病毒复制周期完整性决定组织嗜... 鸡传染性支气管炎病毒(IBV)引起鸡的传染性支气管炎(IB)可导致鸡呼吸系统、泌尿系统、生殖系统、消化系统的组织病变,不同IBV毒株的组织嗜性及相应细胞嗜性存在差异。病毒基因组上关键基因或位点通过影响病毒复制周期完整性决定组织嗜性或宿主嗜性,位于IBV S1和S2亚基上的单个或多个位点均能决定其组织嗜性和细胞嗜性,但需要进一步探究这些关键位点改变病毒与宿主互作过程的机制;其他基因对IBV组织和细胞嗜性的影响亟待研究。论文就近年来影响IBV组织和细胞嗜性差异的相关分子机制研究进展进行综述,旨在为IBV致病机制、重组疫苗、抗病毒药物等的进一步研究提供参考。 展开更多
关键词 传染性支气管炎病毒 S1亚基 S2亚基 组织嗜性 细胞嗜性
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口服维生素E对无特定病原体鸡抗肾型传染性支气管炎病毒感染作用的免疫学机制 被引量：1
11
作者 王兵 侯雨彤 +4 位作者 张莉莉 张晓娜 韩宗玺 李慧昕 马得莹 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期7467-7480,共14页
本试验旨在研究口服维生素E(VE)对无特定病原体(SPF)鸡抗肾型传染性支气管炎病毒(IBV)感染作用的免疫学机制。选用40只1日龄SPF白来航雏鸡,随机分为2组,每组20只。1~21日龄,试验组口服100 IU/kg VE(溶于10μL豆油中),对照组口服等量不添... 本试验旨在研究口服维生素E(VE)对无特定病原体(SPF)鸡抗肾型传染性支气管炎病毒(IBV)感染作用的免疫学机制。选用40只1日龄SPF白来航雏鸡,随机分为2组,每组20只。1~21日龄,试验组口服100 IU/kg VE(溶于10μL豆油中),对照组口服等量不添加VE的豆油。21日龄时停止口服,全部鸡只通过滴鼻点眼途径人工接肾型IBV强毒株0.1 mL/只,试验期24 d。结果表明:1)口服VE对SPF鸡的生长性能均无显著影响(P>0.05)。2)接种IBV后,2组SPF鸡均出现典型病症,在2 dpi(感染后天数)时,试验组的脾脏和法氏囊中病毒载量显著低于对照组(P<0.05)。3)与对照组相比,试验组的肺脏、脾脏和盲肠扁桃体中(2 dpi)髓样分化因子88(MyD88)的mRNA相对表达量显著降低(P<0.05),肺脏和脾脏中(5 dpi)MyD 88的mRNA相对表达量显著升高(P<0.05),盲肠扁桃体中(5 dpi)P65蛋白(P 65)的mRNA相对表达量显著降低(P<0.05)。4)口服VE对人工感染IBV的SPF鸡组织中鸡β防御素基因的mRNA相对表达量呈多种调控作用,无明显的规律。5)与对照组相比,试验组的脾脏中(2 dpi)和盲肠扁桃体中(5 dpi)CD8阳性细胞(CD8^(+))的mRNA相对表达量显著降低(P<0.05)。综上所述,口服VE对SPF鸡生长性能无影响,但可抑制IBV在机体部分组织中的复制,调控免疫相关因子基因在组织中的表达,在鸡体内抗IBV感染作用中起积极作用。 展开更多
关键词 维生素E 肾型传染性支气管炎病毒 无特定病原体鸡 病毒载量 免疫功能
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植物精油对传染性支气管炎病毒人工感染雏鸡的防治效果 被引量：1
12
作者 林家杰 林子学 +6 位作者 王立佳 王国威 黄燕萍 张愉 张桃妮 晋英浩 磨美兰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期4605-4619,共15页
旨在探讨植物精油(商品名:舒柠500)对禽传染性支气管炎病毒(IBV)人工感染雏鸡的防治效果。将260羽1日龄健康非免疫雏鸡分成空白组、模型对照组(A、B、C)、预防组(A、B、C)、治疗组(A、B、C)和阳性药物组(A、B、C)共13组,每组20只。除空... 旨在探讨植物精油(商品名:舒柠500)对禽传染性支气管炎病毒(IBV)人工感染雏鸡的防治效果。将260羽1日龄健康非免疫雏鸡分成空白组、模型对照组(A、B、C)、预防组(A、B、C)、治疗组(A、B、C)和阳性药物组(A、B、C)共13组,每组20只。除空白组外,其余各A组雏鸡均在8日龄单感染IBV毒株GX-QZ20181028(LX4型),各B组雏鸡均在8日龄单感染IBV毒株GX-NN20200723(Taiwan型),各C组雏鸡均在8日龄共感染IBV毒株GX-QZ20181028(LX4型)和GX-NN20200723(Taiwan型)。预防组在3日龄(感染前5 d)饮水给药(植物精油,1 mL·L^(-1)水);治疗组(植物精油1 mL·L^(-1)水)和阳性药物组(双黄连口服液,0.7 mL·L^(-1)水)均在感染后半数以上的雏鸡表现临床症状时给药治疗,连续给药5 d。在雏鸡8、9、13、14、15、16、17、18、19、20日龄时,评定临床症状计分与疗效;在雏鸡19、22日龄时,观察病理组织学病变、测定免疫器官指数并检测气管和肾脏病毒载量;在雏鸡8、9、15、17、19、22日龄时,对IBV特异性抗体和血清中细胞因子IFN-γ、IL-4和IL-6进行检测。结果显示,预防组A、B和C的保护率分别为75.00%、85.00%和70.00%;治疗组A、B、C的有效率分别为92.31%、78.57%、77.78%。模型对照组雏鸡可见大量气管黏膜上皮细胞纤毛减少或消失,并发生变性坏死,肾间质淋巴细胞浸润,其余组均无明显病变。预防组、治疗组和阳性药物组气管和肾组织病毒载量均显著低于模型对照组(P<0.05)。模型对照组胸腺与法氏囊指数显著低于其余各组(P<0.05)。17日龄(给药后第5天),预防组、治疗组、阳性药物组抗体水平上升,至22日龄(停药后第5天),抗体水平显著高于模型对照组(P<0.05)。13至22日龄(给药前至停药后第5天),模型对照组的IL-4、IFN-γ含量均显著低于其余各组(P<0.05),但IL-6含量显著高于其余各组(P<0.05)。综上,在本试验条件下,植物精油对IBV单感染和共感染雏鸡均有较好的防治作用,其防治作用主要通过抑制病毒复制、促进免疫器官发育和抗体生成、调节细胞因子来实现。本研究为禽传染性支气管炎(IB)防治提供新思路,也为其它动物冠状病毒病有效防治提供了参考。 展开更多
关键词 传染性支气管炎病毒 精油 预防 治疗
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2021年华东地区鸡传染性支气管炎病毒分离、鉴定及S1基因遗传特征分析
13
作者 蓝胜芝 侯博 +1 位作者 邵国青 王晨燕 《中国动物传染病学报》 北大核心 2024年第6期169-175,共7页
本研究在2021年从华东地区肉鸡或蛋鸡群中采集了187份具有呼吸道症状的患病鸡气管、肺脏和肾脏混合样本,通过鸡胚分离、RT-PCR和基因测序等方法分离鉴定出IBV,并对其S1基因测序,通过构建系统进化树进行遗传进化分析。结果显示:187份临... 本研究在2021年从华东地区肉鸡或蛋鸡群中采集了187份具有呼吸道症状的患病鸡气管、肺脏和肾脏混合样本,通过鸡胚分离、RT-PCR和基因测序等方法分离鉴定出IBV,并对其S1基因测序,通过构建系统进化树进行遗传进化分析。结果显示:187份临床病料中检测出79份阳性样品,将其接种SPF鸡胚共分离鉴定出39株IBV,S1进化树分析结果表明主要流行的基因型为GⅠ-19、GⅠ-13、tl/CH/LDT3/03型和GⅥ,其中GⅠ-19为优势基因型,其次是GⅠ-13。本研究初步明确了华东地区2021年IBV分离株的遗传进化特点,对IBV临床防控具有重要的参考意义。 展开更多
关键词 传染性支气管炎病毒(ibv) 分离 S1基因 进化树分析
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三株鸡传染性支气管炎病毒优势流行毒株全基因组分析及其致病性 被引量：1
14
作者 熊挺 何献铭 +6 位作者 赵希雅 庄婷婷 黄美珍 梁世金 余传照 梁雪静 陈瑞爱 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期2109-2122,共14页
为调查研究禽传染性支气管炎病毒(IBV)的流行及优势毒株致病特性,本研究对实验室分离的IBV毒株进行了遗传演化研究和致病性研究,旨在了解我国当下IBV流行毒株基因型、生物学特性以及为新疫苗的研制提供借鉴参考。首先对56株IBV分离毒株S... 为调查研究禽传染性支气管炎病毒(IBV)的流行及优势毒株致病特性,本研究对实验室分离的IBV毒株进行了遗传演化研究和致病性研究,旨在了解我国当下IBV流行毒株基因型、生物学特性以及为新疫苗的研制提供借鉴参考。首先对56株IBV分离毒株S1全长核苷酸序列进行遗传演化分析,从中挑选了MH20、KC和JS96 3株优势基因型毒株进行全基因组测序分析,然后选取毒力较强的JS96毒株进行了SPF鸡致病性试验。结果表明:遗传演化分析结果显示GI-19是我国主要流行毒株,占比约53.57%,同时变异毒不断涌现,GVI(新基因型)明显的流行增多。3株优势基因型分离毒株的全长基因组与QX-like毒株相似性最高,达到97%以上,但与国内外疫苗株、经典毒株的相似性低,仅为77%左右。抗原表位分析同样表明了分离株与疫苗毒株、经典毒株的B细胞抗原表位数量和序列都存在差异。3株分离毒株均可导致SPF鸡胚矮化和致死,其中JS96对1日龄SPF鸡的致病率高于15日龄SPF鸡,1日龄SPF鸡100%死亡率,15日龄SPF鸡出现生长显著迟缓和个别鸡症状明显,发病鸡剖检均可见“花斑肾”。本研究表明,QX-like基因型IBV毒株是现下IBV的主要流行毒株,对低日龄鸡致病性强,易发生基因重组,与疫苗毒株、经典毒株S蛋白相似性低,适配性较差,急需选择合适疫苗及研发新型疫苗,才能控制当下IBV疫病流行,减少养禽业的损失。 展开更多
关键词 禽传染性支气管炎病毒 基因测序 演化与相似性分析 致病性
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禽传染性支气管炎病毒感染性克隆的快速构建及应用 被引量：1
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作者 卢渊录 曾亦然 +9 位作者 罗皓炜 乔炳晨 孟琪 刘志远 王蔚怡 陈纳 赵令才 孟宪臣 张海涛 平继辉 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期333-341,349,共10页
为构建高效且易于操作传染性支气管炎病毒(IBV)基因组的反向遗传学平台,本研究将IBV H120株全基因组经RT-PCR分段扩增,并在其基因组的5'端引入人巨细胞病毒(CMV)启动子序列以及3'端引入丁型肝炎病毒核酶序列(HDVRz)和牛生长激素... 为构建高效且易于操作传染性支气管炎病毒(IBV)基因组的反向遗传学平台,本研究将IBV H120株全基因组经RT-PCR分段扩增,并在其基因组的5'端引入人巨细胞病毒(CMV)启动子序列以及3'端引入丁型肝炎病毒核酶序列(HDVRz)和牛生长激素(BGH)多聚腺苷酸化信号序列(后续称HB序列),获得H120株基因组的9个片段(CMV-F1、F2、F3、F4、F5、F6、F7、F8和F9-HB);其中片段F7通过引物引入沉默突变C20356T作为遗传标记。采用转化偶联重组(TAR)克隆技术将9个DNA片段与线性质粒p YES1L转化酿酒酵母细胞,快速构建H120株基因组全长cDNA克隆,经连接PCR(Junction-PCR)筛选及测序鉴定获得感染性克隆质粒p YES1L-H120。为了提高病毒拯救效率,同时构建表达IBV N蛋白的辅助质粒pcDNA3.1-N+3'UTR。将p YES1L-H120与pcDNA3.1-N+3'UTR共转染BHK-21细胞,48 h后收获细胞,接种9日龄SPF鸡胚盲传3代,经胚体病变观察和测序显示获得IBV反向遗传重组病毒r H120株。为了以IBV为载体表达外源基因,本研究将病毒基因组的5a基因替换为eGFP基因,采用TAR克隆技术构建以IBV为载体表达外源e GFP基因的cDNA克隆pYES1L-H120-Δ5a-eGFP,与辅助质粒共转染BHK-21细胞,随后接种SPF鸡胚拯救嵌合病毒r H120-Δ5a-eGFP,并采用PCR和测序鉴定该重组病毒正确构建。结果显示,采用TAR克隆技术能够在短时间内获得IBV反向遗传重组病毒且快速操作病毒基因组获得以IBV为载体稳定表达外源基因的嵌合病毒。本研究首次建立了基于TAR克隆技术的IBV反向遗传操作平台,为研究病毒的生物学特性、载体疫苗的开发和抗病毒药物的筛选提供高效便捷的工具。 展开更多
关键词 传染性支气管炎病毒 反向遗传学 酿酒酵母 转化偶联重组技术 外源基因
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传染性支气管炎病毒N蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备与鉴定
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作者 刘清艳 王欢 +3 位作者 丁铲 钱琨 廖瑛 方守国 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第4期179-187,共9页
本研究以IBV Beaudette株基因组为模板获得N基因片段,构建重组原核表达质粒pET-32a-His-IBV-N,在大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达,纯化后获得带有His标签的N重组蛋白。将其与等体积的弗氏完全佐剂混匀乳化后免疫BALB/c小鼠3次,收集血清,得到... 本研究以IBV Beaudette株基因组为模板获得N基因片段,构建重组原核表达质粒pET-32a-His-IBV-N,在大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达,纯化后获得带有His标签的N重组蛋白。将其与等体积的弗氏完全佐剂混匀乳化后免疫BALB/c小鼠3次,收集血清,得到鼠源抗N蛋白多克隆抗体。利用间接免疫荧光试验和Western blot鉴定多克隆抗体的特异性。结果显示,N蛋白多克隆抗体能特异性识别转染表达的Flag-N蛋白和IBV感染表达的N蛋白,说明此抗体能识别N蛋白的线性表位和空间表位,可应用于Western blot和间接免疫荧光实验。本研究为进一步研究N蛋白的功能和IB的诊断提供了技术支撑。 展开更多
关键词 传染性支气管炎病毒 N蛋白 多克隆抗体
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一株GⅠ-19基因型禽传染性支气管炎病毒基因序列分析及致病性研究
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作者 武奇 徐梦成 +3 位作者 魏邓乐 张雪花 李丁 梅梅 《中国家禽》 北大核心 2024年第9期94-102,共9页
为了解传染性支气管炎病毒(IBV)的遗传变异及致病性,试验对江苏某鸡场发病鸡进行病原分离和鉴定,并对分离株S1基因进行同源性、遗传进化树、糖基化位点、S蛋白裂解位点和致病性分析。结果显示:从发病鸡肾脏组织中分离并鉴定到1株IBV,该... 为了解传染性支气管炎病毒(IBV)的遗传变异及致病性,试验对江苏某鸡场发病鸡进行病原分离和鉴定,并对分离株S1基因进行同源性、遗传进化树、糖基化位点、S蛋白裂解位点和致病性分析。结果显示:从发病鸡肾脏组织中分离并鉴定到1株IBV,该分离株经SPF鸡胚盲传5代后,可引起典型的侏儒胚特征病变,其S1基因大小为1620 bp,分离株被命名为CK/CH/WJ215;CK/CH/WJ215与GⅠ-19基因型毒株S1核苷酸序列相似性为94.3%,与流行优势基因型GⅠ-19属于同一分支;RDP4重组分析显示该分离株S1蛋白不存在重组事件;进一步糖基化位点分析表明,与常用疫苗株相比,CK/CH/WJ215 S1蛋白在第51、77、103、138、163、178、247、276、283、530位点出现变异,值得注意的是,与H120疫苗株和QXL87疫苗株相比,CK/CH/WJ215 S1蛋白分别在138和530位出现了新的糖基化位点;7日龄SPF鸡致病性试验显示,该分离株可导致SPF鸡100%(15/15)发病,66.7%(10/15)死亡,并且导致严重的肾脏病变;感染鸡从第2天开始持续排毒,直到第21天气管和泄殖腔排毒率仍为80%(4/5)和100%(5/5)。研究表明,从江苏某鸡场发病鸡群种分离的GⅠ-19基因型IBV对SPF雏鸡具有很强的致病性,结果为该地区传染性支气管炎流行病学及防控提供参考。 展开更多
关键词 传染性支气管炎病毒 GⅠ-19基因型 S1基因 致病性
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2株重组禽传染性支气管炎病毒的分离鉴定及基因组序列分析
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作者 李峰 谢宾 张帅 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期3958-3969,共12页
【目的】了解禽传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)的遗传变异情况。【方法】采集山东地区部分养殖场中疑似IBV感染鸡病料组织,接种SPF鸡胚进行病毒分离鉴定,利用二代测序技术进行全基因组测序鉴定,并基于全基因组序... 【目的】了解禽传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)的遗传变异情况。【方法】采集山东地区部分养殖场中疑似IBV感染鸡病料组织,接种SPF鸡胚进行病毒分离鉴定,利用二代测序技术进行全基因组测序鉴定,并基于全基因组序列进行遗传进化和关键氨基酸位点分析。【结果】感染鸡剖检可见气管环出血,管腔内有黄色或黑黄色栓塞物等。从病料中共分离获得2株IBV,分别命名为SDJN和SDLY。相似性分析结果显示,分离株SDJN和SDLY与GⅠ-19基因型参考毒株相似性较高,核苷酸序列相似性为96.0%~97.3%,氨基酸序列相似性为94.9%~100%。氨基酸序列分析结果显示,2株IBV分离株与其他毒株相比存在多个氨基酸变异位点。系统进化树结果显示,分离株SDJN和SDLY与IBV GⅠ-19基因型参考毒株位于同一分支。重组分析结果显示,分离株SDJN和SDLY为多种基因型毒株的重组毒株,均以ck/CH/LDL/091022株为主要亲本毒株。【结论】本研究从山东地区分离得到2株IBV,2株分离株与GⅠ-19基因型毒株密切相关,是一种新型重组IBV毒株。研究结果为进一步研究IBV流行与进化及禽传染性支气管炎的防控奠定基础。 展开更多
关键词 禽传染性支气管炎病毒 分离 鉴定 全基因组 遗传进化分析
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Viperin通过胆固醇影响禽传染性支气管炎病毒复制
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作者 任丽娜 张愉 +4 位作者 张桃妮 卢彦澎 张冰莎 黄鉴妮 磨美兰 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第7期9-19,共11页
Viperin是一种干扰素诱导因子,具有广泛的抗病毒作用。为探究Viperin是否通过胆固醇发挥抗禽传染性支气管炎病毒(IBV)的作用,本试验通过消耗或添加细胞膜胆固醇,分析胆固醇对IBV复制的影响;并分别在细胞中过表达和干扰表达Viperin,评估V... Viperin是一种干扰素诱导因子,具有广泛的抗病毒作用。为探究Viperin是否通过胆固醇发挥抗禽传染性支气管炎病毒(IBV)的作用,本试验通过消耗或添加细胞膜胆固醇,分析胆固醇对IBV复制的影响;并分别在细胞中过表达和干扰表达Viperin,评估Viperin对细胞胆固醇含量和IBV复制的影响,并分析Viperin、胆固醇含量和IBV复制三者之间的关系。结果显示,在IBV感染后48 h,与IBV感染组相比较,使用5.0和10.0 mmol/L甲基-β-环糊精(MβCD)消耗细胞膜胆固醇后IBV复制被极显著抑制(P<0.001),添加5.0 mg/mL外源性胆固醇后IBV复制被极显著促进(P<0.001),消耗细胞膜胆固醇后再添加外源性胆固醇,IBV复制被抑制后恢复至接近正常水平(P>0.05);在IBV感染后24和48 h,与IBV感染组相比较,过表达Viperin可极显著降低细胞中胆固醇含量(P<0.001),并极显著抑制IBV复制(P<0.001);在IBV感染后6和48 h,与IBV感染组相比较,干扰表达Viperin可显著提高细胞中胆固醇含量(P<0.05或P<0.001);在IBV感染后24 h,与IBV感染组相比较,干扰表达Viperin可极显著促进IBV复制(P<0.001);在IBV感染后48 h,与IBV感染组相比较,过表达Viperin后再添加外源性胆固醇可恢复IBV复制(P>0.05)。结果表明,细胞膜中胆固醇水平与IBV复制密切相关,且Viperin可通过调节细胞胆固醇抑制IBV复制。本试验为寻找IBV新的抗病毒靶点提供理论依据和新思路。 展开更多
关键词 禽传染性支气管炎病毒 Viperin 胆固醇
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新城疫病毒、禽传染性支气管炎病毒与禽流感病毒三重RT-qPCR鉴别检测方法的建立与应用 被引量：1
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作者 连聪 向国庆 +9 位作者 潘浩华 罗胜军 吕殿红 宋帅 贾春玲 牛瑞辉 郭素茵 李汝洪 邹永基 温肖会 《广东畜牧兽医科技》 2024年第3期48-53,共6页
新城疫、禽传染性支气管炎与禽流感是可引起禽类呼吸道症状相似的三种急性传染病,且存在混合感染。为建立新城疫病毒、禽传染性支气管炎病毒与禽流感病毒三重RT-qPCR检测方法,该研究对比了GenBank登录的新城疫病毒(NDV)L基因、禽传染性... 新城疫、禽传染性支气管炎与禽流感是可引起禽类呼吸道症状相似的三种急性传染病,且存在混合感染。为建立新城疫病毒、禽传染性支气管炎病毒与禽流感病毒三重RT-qPCR检测方法,该研究对比了GenBank登录的新城疫病毒(NDV)L基因、禽传染性支气管炎病毒(IBV)1a基因和禽流感病毒(AIV)NP基因,经分析选取保守序列设计了三套引物与探针,通过优化检测方法的反应体系,成功建立了可同时检测NDV、IBV和AIV的三重RT-qPCR方法,并对其特异性、敏感性和重复性进行了评估。结果表明,该方法能够特异性检测出NDV、IBV和AIV,有较好的特异性;方法对三种病毒的最低检测限均为3.02×10^(2)copies/μL,有较高的敏感性;重复性实验结果显示批内与批间变异系数均不大于1.28%,有良好的重复性。使用本研究建立的方法对102份临床咽拭子进行检测,并与常规RT-PCR进行比较,总符合率为96.6%。本研究建立的三重RT-qPCR检测方法,特异性强,灵敏度高,可用于NDV、IBV、AIV三种病毒的检测。 展开更多
关键词 新城疫病毒 禽传染性支气管炎病毒 禽流感病毒 荧光RT-PCR
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