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重组人酸性成纤维细胞生长因子促进创伤愈合的研究 被引量：41
1
作者 李校堃 许华 +4 位作者 付小兵 郑青 黄亚东 赵文 吴晓萍 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期312-315,共4页
目的　研究重组人酸性成纤维细胞生长因子 (rh-a FGF)对兔创伤的促愈合作用。方法　采用兔背部刀割伤模型 ,将 rh-a FGF溶液隔日一次滴注于创面 ,用创面照像、透明膜描记称量法记录伤后第 4、8、1 2、1 6天创面面积 ,用注水法测量伤腔容... 目的　研究重组人酸性成纤维细胞生长因子 (rh-a FGF)对兔创伤的促愈合作用。方法　采用兔背部刀割伤模型 ,将 rh-a FGF溶液隔日一次滴注于创面 ,用创面照像、透明膜描记称量法记录伤后第 4、8、1 2、1 6天创面面积 ,用注水法测量伤腔容积 ,伤后第 8、1 6天取创面组织 ,观察创面的病理学变化 ,包括肉芽组织生长与再上皮化情况。结果　rh-a FGF可明显加速兔皮肤创伤的愈合 ,使创面面积明显缩小 (P<0 .0 5 ) ,使伤腔容积明显减少 (P<0 .0 5 )。组织学检查 :rh-a FGF组创面伤后 8天成纤维细胞生长活跃、数量多 ,其毛细血管胚芽与成纤维细胞数量显著多于对照组 ;伤后 1 6天 ,创面收缩与再上皮化明显 ,新生上皮向创面中心爬行较快。结论　 rh-a FGF对兔背部刀伤创面有明显的促修复作用。 展开更多
关键词 重组人酸性成纤维细胞生长因子 创伤 创面修复 动物实验
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重组人酸性成纤维细胞生长因子对创面愈合的作用 被引量：21
2
作者 刘炘 马嵘 +3 位作者 马珂 胡本容 向继洲 李亦武 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期87-90,共4页
目的:观察重组人酸性成纤维细胞生长因子(rhaFGF)对创面愈合的影响,探讨rhaFGF在组织修复中的作用机制。方法:利用大鼠创伤模型,采用HE染色观察不同时间点创面愈合情况;采用免疫组化方法检测伤后不同时间点创面愈合组织中半胱氨酸天冬... 目的:观察重组人酸性成纤维细胞生长因子(rhaFGF)对创面愈合的影响,探讨rhaFGF在组织修复中的作用机制。方法:利用大鼠创伤模型,采用HE染色观察不同时间点创面愈合情况;采用免疫组化方法检测伤后不同时间点创面愈合组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase-3)的表达情况;采用羟脯氨酸测试法检测伤口中胶原纤维的含量,并对照观察创面应用rhaFGF后以上各项指标的变化。结果:外用rhaFGF后创面组织中伤后第8天毛细血管胚芽与成纤维数量显著多于单纯创伤组,伤后第14天,经rhaFGF治疗的大鼠创面的再上皮化明显强于单纯创伤组。创面组织中caspase-3的表达量逐渐增加,外用rhaFGF后第14天和第21天的caspase-3表达量显著高于单纯创伤组。伤口中羟脯氨酸的含量逐渐增加,外用rhaFGF后第8天和第14天的羟脯氨酸含量显著高于单纯创伤组。结论:外用rhaFGF在创伤愈合的前期可以促进肉芽组织生长使得愈合周期缩短。在创伤愈合的后期可以直接或间接的促进成纤维细胞的凋亡,维持了细胞增殖与凋亡的平衡。 展开更多
关键词 重组人酸性成纤维细胞生长因子 创伤修复 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 胶原纤维
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人酸性成纤维细胞生长因子的高效表达 被引量：10
3
作者 李校堃 吴晓萍 +4 位作者 郑青 黄亚东 许华 姚成灿 赵文 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第12期61-64,共4页
构建能高效表达人酸性成纤维细胞生长因子 (haFGF)的基因工程菌 ,优化产物分离纯化条件 ,并对纯化产物进行理化性质鉴定 .采用PCR方法扩增haFGFcDNA ,将该cDNA片段插入表达载体 pET3c的表达框架中 ,筛选得到了重组质粒pET3c_haFGF ,转... 构建能高效表达人酸性成纤维细胞生长因子 (haFGF)的基因工程菌 ,优化产物分离纯化条件 ,并对纯化产物进行理化性质鉴定 .采用PCR方法扩增haFGFcDNA ,将该cDNA片段插入表达载体 pET3c的表达框架中 ,筛选得到了重组质粒pET3c_haFGF ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,构建了表达菌株BL2 1(DE3) / pET3c_haFGF .IPTG诱导表达 ,通过离子交换、肝素亲和两步层析的方法分离纯化产物 .用MTT法测定产物的活性 .haFGF的表达量约为 2 0 % .经过两步层析纯化 ,获得了电泳纯的haFGF样品 .纯化haFGF样品的比活性为ED50 小于 4 .0ng/mL .BL2 1(DE3) / pET3c表达系统能高效表达haFGF ,经过纯化得到了理化性质及生物活性与天然haFGF对照品一致的重组人酸性成纤维细胞生长因子 . 展开更多
关键词 人酸性成纤维细胞生长因子 诱导表达 分离纯化 基因工程 氨基酸残基 理化性质 生物活性
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非促有丝分裂型人酸性成纤维细胞生长因子的受体结合特性及对MAPK信号通路的影响 被引量：18
4
作者 汪小凤 郑青 +6 位作者 蔡绍晖 吴晓萍 许华 赵文 苏志坚 李校堃 张敏 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期179-182,共4页
目的:研究非促分裂人酸性成纤维细胞生长因子(non- mitogenetichumanacidicfibroblastgrowthfac tor,nm haFGF)促细胞增殖活性的变化及其作用机制。方法:采用MTT法测定人酸性成纤维细胞生长因子(haFGF)和nm- haFGF对NIH3T3细胞株的增殖... 目的:研究非促分裂人酸性成纤维细胞生长因子(non- mitogenetichumanacidicfibroblastgrowthfac tor,nm haFGF)促细胞增殖活性的变化及其作用机制。方法:采用MTT法测定人酸性成纤维细胞生长因子(haFGF)和nm- haFGF对NIH3T3细胞株的增殖活性;采用受体放射性配基结合法,测定haFGF和nm- haFGF与其受体结合的亲和力及受体总结合位点数RT ;利用Western印迹检测haFGF和nm- haFGF分别作用于NIH3T3细胞后MAPK信号通路中ERK信号分子的表达。结果:与haFGF比较,nm- haFGF对NIH3T3细胞的促增殖活性降低,nm -haFGF与NIH3T3细胞胞膜上aFGF受体结合的亲和力下降,但与受体结合的总位点数不变。Western半定量检测结果显示,nm -haFGF组信号蛋白ERK的表达水平明显低于haFGF组。结论:nm -haFGF与受体结合能力下降,下调MAPK信号通路是导致nm haFGF的促分裂活性降低的主要原因之一。 展开更多
关键词 非促分裂人酸性成纤维细胞生长因子 受体 信号通路
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重组人酸性成纤维细胞生长因子促进大鼠烫伤愈合的研究 被引量：17
5
作者 许华 郑青 +3 位作者 姚成灿 杨晓明 王艳萍 李校 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 2003年第2期7-11,共5页
　目的:研究重组人酸性成纤维细胞生长因子(rh-aFGF)促进大鼠烫伤创面愈合的作用。方法:采用大鼠背部深II度烫伤模型,将3种不同浓度的rh-aFGF溶液隔日一次滴注于创面,观察伤后不同时间的创面面积变化和病理组织学改变。结果:rh-aFGF可... 　目的:研究重组人酸性成纤维细胞生长因子(rh-aFGF)促进大鼠烫伤创面愈合的作用。方法:采用大鼠背部深II度烫伤模型,将3种不同浓度的rh-aFGF溶液隔日一次滴注于创面,观察伤后不同时间的创面面积变化和病理组织学改变。结果:rh-aFGF可明显加速大鼠皮肤创伤的愈合,使创面面积明显缩小(P<0 05)。病理组织学检查发现,rh-aFGF组创面伤后7d成纤维细胞生长活跃、数量多,其毛细血管胚芽与成纤维细胞数量显著多于溶媒对照组;伤后14d,创面收缩与再上皮化明显,新生上皮向创面中心爬行较快。结论:外用rh-aFGF对大鼠深II度烫伤创面有明显的促愈合作用。 展开更多
关键词 重组人酸性成纤维细胞生长因子 烫伤愈合 大鼠
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重组人酸性成纤维细胞生长因子皮肤用药的长期毒性研究 被引量：12
6
作者 许华 李校堃 +6 位作者 郑青 杨晓明 黄亚东 赵文 姚成灿 吴晓萍 黄芝瑛 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期46-50,共5页
目的 :研究重组人酸性成纤维细胞生长因子 (rhaFGF)皮肤用药的长期毒性。方法 :对新西兰兔破损皮肤连续给药 2 8d ,剂量分别为 3 60 0 ,180 0 ,90 0U/cm2 ,观察rhaFGF用药期间和停药后对动物血液学、血液生化学、组织学等方面的影响。结... 目的 :研究重组人酸性成纤维细胞生长因子 (rhaFGF)皮肤用药的长期毒性。方法 :对新西兰兔破损皮肤连续给药 2 8d ,剂量分别为 3 60 0 ,180 0 ,90 0U/cm2 ,观察rhaFGF用药期间和停药后对动物血液学、血液生化学、组织学等方面的影响。结果 :rhaFGF的无毒剂量为 90 0U/cm2 ;rhaFGF180 0U/cm2 用药可见个别动物出现淋巴结、脾白髓、圆小囊固有层及胸腺滤泡增生 ;3 60 0U/cm2 用药可见半数以上动物淋巴结出现淋巴等器官滤泡增生 ,偶见大脑血管周围出现少量淋巴细胞浸润 ,个别动物睾丸生精小管精子细胞数量增加。停药 2周 ,上述病理改变减轻。未观察到rhaFGF的延迟性毒性反应。结论 :rhaFGF在有效剂量及大于有效 展开更多
关键词 重组人酸性成纤维细胞生长因子 皮肤用药 长期毒性
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重组人酸性成纤维细胞生长因子促进烧伤与创伤愈合作用研究 被引量：22
7
作者 李亦武 李贵玲 +3 位作者 李玥 向继洲 刘咏梅 付小兵 《医药导报》 CAS 2005年第11期978-980,共3页
目的观察重组人酸性成纤维细胞生长因子(rhaFGF)对小型猪创伤修复和家兔烫伤创面修复的促进作用。方法建立小型猪创伤模型,其中3组分别按90,60,30 AU.(cm2)-1的剂量给予人碱性成纤维细胞生长因子(haFGF),阳性对照组按60 AU.(cm2)-1的剂... 目的观察重组人酸性成纤维细胞生长因子(rhaFGF)对小型猪创伤修复和家兔烫伤创面修复的促进作用。方法建立小型猪创伤模型,其中3组分别按90,60,30 AU.(cm2)-1的剂量给予人碱性成纤维细胞生长因子(haFGF),阳性对照组按60 AU.(cm2)-1的剂量给予rhbFGF,阴性对照组给予等量基质,空白对照组不给予任何药物,采用创面照像和透明膜描记称量法记录伤后第4,8,14天创面面积,用注水法测量伤腔容积。观察伤后第8天和第14天创面肉芽组织生长与再上皮化变化,评价修复效果。另建立家兔烫伤创面模型,分组与给药方法同上。观察伤后3,7,14,21 d创面面积,以及伤后14,21 d创面肉芽组织生长与再上皮化变化情况,评价修复效果。结果各组小猪创面面积随伤后时间的延长逐渐缩小,其中rhaFGF 90 AU.(cm2)-1组和hbFGF 60 AU.(cm2)-1组小猪的疗效更显著。各组小猪创面伤腔容积随伤后时间的延长而逐渐缩小,其中rhaFGF 90 AU.(cm2)-1组和hbFGF 60 AU.(cm2)-1组更为明显(P<0.05)。组织学检查,可见经rhaFGF和rhbFGF治疗8 d后小猪的创面成纤维细胞生长活跃,数量多,毛细血管胚芽与成纤维细胞数量显著多于对照组。伤后第14天,各组家兔创面均已愈合,但各rhaFGF治疗组和阳性对照组家兔的创面表皮层较厚。各组家兔烫伤创面面积随伤后时间的延长而逐渐缩小,其中以rhaFGF 90 AU.(cm2)-1组和hbFGF 60AU.(cm2)-1组的效果更明显。组织学检查,可见rhaFGF 90 AU.(cm2)-1组家兔的创面在伤后14 d大部分已被新生表皮覆盖,表面附着少量坏死组织,创面基本愈合。结论rhaFGF对小型猪背部刀伤创面有促修复作用,可促进创面肉芽组织生长、毛细血管胚芽形成与再上皮化。rhaFGF对家兔背部烫伤创面有促修复作用,可促进创面肉芽组织生长,还可以促进坏死组织脱落与再上皮化。 展开更多
关键词 重组人酸性成纤维细胞生长因子 创伤修复 烫伤愈合
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抗菌肽和人酸性成纤维细胞生长因子融合蛋白在毕赤酵母中的表达及其活性鉴定 被引量：5
8
作者 苏志坚 吴晓萍 +4 位作者 郑青 黄亚东 庞实锋 冯雅 李校堃 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期63-68,共6页
目的 :构建和表达一种抗菌肽和人酸性成纤维细胞生长因子的融合蛋白 ,在创伤皮肤表面应用时能裂解成有功能的抗菌肽和人酸性成纤维细胞生长因子 ,预防伤口感染和促进皮肤修复。方法 :利用PCR技术分别扩增出带有凝血酶切割位点的天蚕素... 目的 :构建和表达一种抗菌肽和人酸性成纤维细胞生长因子的融合蛋白 ,在创伤皮肤表面应用时能裂解成有功能的抗菌肽和人酸性成纤维细胞生长因子 ,预防伤口感染和促进皮肤修复。方法 :利用PCR技术分别扩增出带有凝血酶切割位点的天蚕素杂合肽基因和人酸性成纤维细胞生长因子基因。再将两者作为模板 ,用PCR方法扩增出编码融合蛋白的DNA。将该DNA片段插入到载体pPICZαA中 ,并利用电转法将质粒转入毕赤酵母smd116 8中 ,Zeocin抗性筛选重组转化子。甲醇诱导 96h ,SDS PAGE电泳检测融合蛋白的表达 ,并用Western blot杂交检测融合蛋白的免疫原性。利用肝素亲和层析纯化融合蛋白 ,同时检测融合蛋白的抑菌和促3T3Bal/b细胞分裂活性。结果 :筛选出能表达相对分子质量约为 19kD融合蛋白的重组转化株 ,SDS PAGE电泳检测显示甲醇诱导 96h后 ,融合蛋白表达量达到最高 ,且能与人酸性成纤维细胞生长因子抗体产生免疫反应。融合蛋白没有抑菌活性 ,而裂解产物则具有抑菌活性。此外 ,融合蛋白的促细胞分裂活性与野生型人酸性成纤维细胞生长因子相比没有明显的降低。结论 :获得含凝血酶切割位点的抗菌肽和人酸性成纤维细胞生长因子的融合蛋白 ,并在毕赤酵母中实现了表达。融合蛋白的裂解产物具有抑菌活性。 展开更多
关键词 抗菌肽 人酸性成纤维细胞生长因子 融合蛋白 毕赤酵母 构建 表达
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重组人酸性成纤维细胞生长因子治疗乳腺癌根治术后皮瓣坏死的临床观察 被引量：7
9
作者 马宇光 武力 +1 位作者 王红磊 马大昌 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2009年第4期436-438,共3页
关键词 重组人酸性成纤维细胞生长因子 术后皮瓣坏死 临床观察 根治术后 综合治疗 乳腺癌 成纤维细胞因子 生物活性蛋白质
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人工真皮联合重组人酸性成纤维细胞生长因子在指端皮肤缺损的临床应用 被引量：6
10
作者 吴磊 祁义民 +3 位作者 杨蓊勃 刘康 杨大伟 隋吉生 《医学研究与战创伤救治》 CAS 北大核心 2023年第1期45-49,共5页
目的皮耐克联合重组人酸性成纤维细胞生长因子(rhaFGF)治疗指端皮肤缺损的报道较少。文中旨在探讨人工真皮联合rhaFGF与单独应用人工真皮治疗指端皮肤缺损的临床效果。方法回顾性分析自2018年8月至2020年2月南京市第一医院骨科41例指端... 目的皮耐克联合重组人酸性成纤维细胞生长因子(rhaFGF)治疗指端皮肤缺损的报道较少。文中旨在探讨人工真皮联合rhaFGF与单独应用人工真皮治疗指端皮肤缺损的临床效果。方法回顾性分析自2018年8月至2020年2月南京市第一医院骨科41例指端皮肤缺损患者的临床资料。按照手术方式的不同,分为联合组(人工真皮联合rhaFGF组,n=21)和单独组(单独人工真皮移植,n=20)。通过创面愈合时间、疤痕形成情况、指端感觉恢复、指端功能恢复情况来评价两组疗效。结果两组在皮温、疼痛、活动功能、痛温觉恢复方面比较,差异无统计学意义(P>0.05),而在瘢痕形成、创面愈合时间、色泽和弹性方面比较,联合组优于单独组(P<0.05)。色泽、弹性方面比较,联合组优于单独组(P<0.05)。结论rhaFGF有助于促进创面愈合,联合人工真皮治疗指端皮肤缺损的临床效果较好,值得临床推荐使用。 展开更多
关键词 人工真皮 重组人酸性成纤维细胞生长因子 创面修复 指端皮肤缺损
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重组人酸性成纤维细胞生长因子促进家兔体表溃疡愈合作用研究 被引量：9
11
作者 马珂 李强 +3 位作者 刘炘 胡本容 向继洲 李亦武 《医药导报》 CAS 2008年第2期126-128,共3页
目的观察重组人酸性成纤维细胞生长因子(rhaFGF)对家兔体表溃疡愈合的促进作用。方法建立家兔的体表溃疡模型,其中2组分别按90,60 AU.(cm2)-1的剂量给予rhaFGF,阳性对照组按60 AU.(cm2)-1的剂量给予重组牛碱性成纤维细胞生长因子(rb-bFG... 目的观察重组人酸性成纤维细胞生长因子(rhaFGF)对家兔体表溃疡愈合的促进作用。方法建立家兔的体表溃疡模型,其中2组分别按90,60 AU.(cm2)-1的剂量给予rhaFGF,阳性对照组按60 AU.(cm2)-1的剂量给予重组牛碱性成纤维细胞生长因子(rb-bFGF),阴性对照组给予与第二组等量的溶媒。采用创面照相、透明膜描记称量法记录溃疡形成后第1,4,8天溃疡面面积,比较面积收缩量;用注水法测量伤腔容积,比较容积缩小量。溃疡形成后第8和第14天取创面组织,经10%甲醛溶液固定后制片,常规染色,重点观察创面肉芽组织生长情况,包括毛细血管生长、胶原沉积与再上皮化变化,以评价修复效果。结果各组家兔溃疡面面积随时间的延长而逐渐缩小,其中rhaFGF 60AU.(cm2)-1组和rb-bFGF60 AU.(cm2)-1组疗效更显著(均P<0.05)。各组家兔伤腔容积随伤后时间的延长而逐渐缩小,其中rhaFGF 60 AU.(cm2)-1组和rb-bFGF 60 AU.(cm2)-1组更为明显(均P<0.01)。组织学检查,可见rhaFGF60 AU.(cm2)-1组和rb-bFGF60 AU.(cm2)-1组治疗8 d后家兔的溃疡面成纤维细胞生长活跃,数量多,毛细血管胚芽与成纤维细胞数量显著多于阴性对照组;第14天,rhaFGF60 AU.(cm2)-1组和rb-bFGF60 AU.(cm2)-1组家兔溃疡面创面收缩和再上皮化明显,且优于阴性对照组。结论rhaFGF对家兔体表溃疡有促进愈合作用,可促进创面肉芽组织生长、毛细血管胚芽形成与再上皮化。 展开更多
关键词 重组人酸性成纤维细胞生长因子 体表溃疡 愈合 家兔
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重组人酸性成纤维细胞生长因子的生殖毒性 被引量：3
12
作者 姚成灿 许华 +4 位作者 郑青 赵文 吴晓萍 黄亚东 李校堃 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期461-463,共3页
目的:研究重组人酸性成纤维细胞生长因子(rhaFGF)在破损皮肤表面给药时的生殖毒性。方法:从SD大鼠怀孕第6天起对破损皮肤连续给药10 d,剂量分别为3 600 U/cm2,1 800 U/cm2,900 U/cm2,观察rhaFGF对大鼠的生育能力、胎鼠的生长发育及骨骼... 目的:研究重组人酸性成纤维细胞生长因子(rhaFGF)在破损皮肤表面给药时的生殖毒性。方法:从SD大鼠怀孕第6天起对破损皮肤连续给药10 d,剂量分别为3 600 U/cm2,1 800 U/cm2,900 U/cm2,观察rhaFGF对大鼠的生育能力、胎鼠的生长发育及骨骼发育的影响。结果:大鼠破损皮肤外用相当于有效剂量603、0和15倍的rhaFGF对母体的毒性、胚胎毒性和致畸作用均无明显的影响。结论:在相当于有效剂量60倍的剂量下使用rhaFGF对母体和胎儿是安全的。 展开更多
关键词 重组人酸性成纤维细胞生长因子 生殖毒性 皮肤用药
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人酸性成纤维细胞生长因子的研究进展 被引量：13
13
作者 谭亚清 刘德虎 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期22-27,共6页
成纤维细胞生长因子是一个大的蛋白质家族,人酸性成纤维细胞生长因子(human acidic fibroblast growth factor,haFGF)是其中的重要一员,具有广泛的生物学活性和潜在的临床应用价值。概述haFGF的结构、功能及其在基因工程方面的研究进展... 成纤维细胞生长因子是一个大的蛋白质家族,人酸性成纤维细胞生长因子(human acidic fibroblast growth factor,haFGF)是其中的重要一员,具有广泛的生物学活性和潜在的临床应用价值。概述haFGF的结构、功能及其在基因工程方面的研究进展,并对haFGF在临床应用中可能存在的问题进行简单的探讨。 展开更多
关键词 人酸性成纤维细胞生长因子 理化结构 生物学功能 临床应用 基因工程
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用农杆菌真空渗透法在烟草中瞬时表达人酸性成纤维细胞生长因子 被引量：2
14
作者 李玉玺 刘晶莹 +4 位作者 伏秀清 杨涛 肖乃仲 朱筱娟 王兴智 《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期430-434,共5页
利用农杆菌真空渗透法在烟草中瞬时表达了人酸性成纤维细胞生长因子（haFGF）基因,并对影响表达量的几个因素进行了研究。结果表明,在真空渗透后4天,外源基因获得最高水平的表达,烟草Nicotiana benthamiana（N.b）的表达量明显低于烟草... 利用农杆菌真空渗透法在烟草中瞬时表达了人酸性成纤维细胞生长因子（haFGF）基因,并对影响表达量的几个因素进行了研究。结果表明,在真空渗透后4天,外源基因获得最高水平的表达,烟草Nicotiana benthamiana（N.b）的表达量明显低于烟草N.H（转基因沉默抑制子Hc-pro的N.b植株）。pM390-haFGF、pM390-haFGF/KDEL、pM390-SP/haFGF/KDEL三种表达框架被用来表达人酸性成纤维细胞生长因子,结果表明框架pM390-haFGF/KDEL的表达效果最好,受伤叶片和Valentine的培养方法要比完整叶片和Kapila的培养方法的表达量高。 展开更多
关键词 人酸性成纤维细胞生长因子(haFGF) 内质网滞留信号(KDEL) 信号肽 真空渗透
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人酸性成纤维细胞生长因子突变体表达与修饰 被引量：1
15
作者 郑青 苏志坚 +6 位作者 吴晓萍 许华 黄志锋 赵文 姚成灿 黄亚东 李校堃 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第1期88-91,98,共5页
采用聚合酶链式反应 (PCR)法将人酸性成纤维细胞生长因子 (haFGF)基因中编码第 98位和第 132位半胱氨酸 (Cys)的密码子突变为编码丝氨酸 (Ser)的密码子 ,构建重组质粒pET3c haFGFSer98,132 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,表达率达到 2 3 4 8... 采用聚合酶链式反应 (PCR)法将人酸性成纤维细胞生长因子 (haFGF)基因中编码第 98位和第 132位半胱氨酸 (Cys)的密码子突变为编码丝氨酸 (Ser)的密码子 ,构建重组质粒pET3c haFGFSer98,132 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,表达率达到 2 3 4 8% .用MTT法测定产物的活性 ,发现haFGFSer98,132 突变体的比活与天然haFGF相似 .采用单甲氧基聚乙二醇 (mPEG) 5 0 0 0 -马来酸酰亚胺酯定点修饰第 31位Cys ,修饰率达到 30 %以上 ,修饰产物的比活性保留 5 5 5 3% . 展开更多
关键词 人酸性成纤维细胞生长因子 定点突变 突变体
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重组人酸性成纤维细胞生长因子的分离纯化
16
作者 刘叶青 徐殿胜 +2 位作者 曹学君 桑玉英 张秀萍 《华东理工大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期361-363,378,共4页
采用肝素 - sepharose亲和层析和 Sephadex G- 1 0 0凝胶过滤层析法 ,从含 ha FGF基因重组体的大肠杆菌菌体中分离纯化得到人酸性成纤维细胞生长因子 ( rha FGF)。 SDS- PAGE,IEF电泳检测均为单一谱带 ,HPLC层析显示单一蛋白峰。 SDS- P... 采用肝素 - sepharose亲和层析和 Sephadex G- 1 0 0凝胶过滤层析法 ,从含 ha FGF基因重组体的大肠杆菌菌体中分离纯化得到人酸性成纤维细胞生长因子 ( rha FGF)。 SDS- PAGE,IEF电泳检测均为单一谱带 ,HPLC层析显示单一蛋白峰。 SDS- PAGE测定 rha FGF分子质量为 1 6.67ku,IEF测定等电点 p I为 4.8,并用 Edman降解法测定了 N-末端氨基酸序列。Balb/ c3T3细胞培养法测定纯化的 rha FGF生物活性 ED50 为 6μg/ L。 展开更多
关键词 人酸性成纤维细胞生长因子 肝素亲和层析 凝胶过滤 分离纯化 多肽类细胞生长因子 细胞分裂
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重组人酸性成纤维细胞生长因子的遗传毒性
17
作者 许华 姚成灿 +2 位作者 郑青 李校堃 向继洲 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期536-539,共4页
目的:了解重组人酸性成纤维细胞生长因子(rhaFGF)皮肤外用的遗传毒性。方法:用CHL细胞染色体畸变试验、小鼠骨髓PCE微核试验和Am es试验方法对rhaFGF进行遗传毒性研究。结果:rhaFGF各剂量组和阴性对照组在加或不加S9情况下,其CHL染色体... 目的:了解重组人酸性成纤维细胞生长因子(rhaFGF)皮肤外用的遗传毒性。方法:用CHL细胞染色体畸变试验、小鼠骨髓PCE微核试验和Am es试验方法对rhaFGF进行遗传毒性研究。结果:rhaFGF各剂量组和阴性对照组在加或不加S9情况下,其CHL染色体畸变率均<5%;各剂量组的骨髓细胞微核细胞率与阴性对照组比较均差异无显著性(P>0.05);rhaFGF各剂量组(0.5~5 000μg/皿)对TA97、TA98、TA100、TA102菌珠在加或不加S9混合液条件下均无致突变作用。结论:在所选试验和剂量范围内未见到rhaFGF具有遗传毒性。 展开更多
关键词 重组人酸性成纤维细胞生长因子 遗传毒性 创伤修复
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人酸性成纤维细胞生长因子基因重组腺病毒粘粒载体的构建
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作者 章斌 梅举 +1 位作者 张宝仁 顾俊彦 《实用医学杂志》 CAS 2002年第11期1150-1152,共3页
目的 :构建人酸性成纤维细胞生长因子 (aFGF)重组腺病毒粘粒载体。方法 :抽取人胎脑组织mRNA ,经RT PCR获取aFGF基因 ,测序后将其插入腺病毒粘粒载体pAxCAwt的SwaI位点。结果 :RT PCR合成的DNA片段经克隆、测序后证实为aFGF基因 ,酶切... 目的 :构建人酸性成纤维细胞生长因子 (aFGF)重组腺病毒粘粒载体。方法 :抽取人胎脑组织mRNA ,经RT PCR获取aFGF基因 ,测序后将其插入腺病毒粘粒载体pAxCAwt的SwaI位点。结果 :RT PCR合成的DNA片段经克隆、测序后证实为aFGF基因 ,酶切结果显示 ,aFGF腺病毒重组粘粒 (pAxCAwt aFGF)中aFGF的插入方向正确。结论 :构建的aFGF腺病毒重组粘粒 (pAxCAwt aFGF)可用于进一步的基因治疗的研究中 。 展开更多
关键词 人酸性成纤维细胞生长因子 AFGF 基因重组 腺病毒粘粒载体 基因治疗 心肌缺血 治疗性血管生长 冠心病 CHD
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重组人酸性成纤维细胞生长因子脂质体的制备及其物理稳定性评价 被引量：1
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作者 滕跃 田海山 +2 位作者 张睿 焦悦 李校堃 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期932-936,共5页
目的:确立重组人酸性成纤维细胞生长因子(rhaFGF)脂质体制备的最佳处方及工艺条件,研究其理化性质。方法:采用冻干再水化法,以磷脂与胆固醇质量之比、缓冲溶液pH值和均质时间为单因素,每个因素选取三水平进行实验,以药物包封率、物理稳... 目的:确立重组人酸性成纤维细胞生长因子(rhaFGF)脂质体制备的最佳处方及工艺条件,研究其理化性质。方法:采用冻干再水化法,以磷脂与胆固醇质量之比、缓冲溶液pH值和均质时间为单因素,每个因素选取三水平进行实验,以药物包封率、物理稳定性和生物活性作为评价指标,确立优化脂质体制备的最佳处方及工艺条件。结果:采用最佳处方工艺条件,即磷脂与胆固醇的比例为20∶1,磷酸盐缓冲液pH值为6.5,高压均质时间为20min制备的rhaFGF脂质体,经测定其包封率(En)达81.79%±2.51%,物理稳定性参数(KE)为1.050%±0.342%,生物学活性为(6.521 0±0.617 1)×105 U.mL-1,粒子大小较均匀,粒径大多分布在100nm左右。结论:通过优化工艺条件制备的rhaFGF脂质体包封率高,在4℃保存条件下,渗漏率低且具有很好的物理稳定性及生物学活性。 展开更多
关键词 重组人酸性成纤维细胞生长因子 脂质体 包封率 渗漏率
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机械磨削联合微针导入重组人酸性成纤维细胞生长因子和基因重组人表皮生长因子促进创面愈合的临床观察 被引量：12
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作者 马常明 蔡景龙 +2 位作者 牛扶幼 宗宪磊 陈莹 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第21期2421-2423,共3页
目的探讨机械磨削联合微针导入重组人酸性成纤维细胞生长因子(rhaFGF)和基因重组人表皮生长因子(rhEGF)促进创面愈合的临床效果。方法 2010年4月—2011年9月表浅瘢痕患者60例,随机分为试验组、对照组和空白对照组,每组20例。试验组采用... 目的探讨机械磨削联合微针导入重组人酸性成纤维细胞生长因子(rhaFGF)和基因重组人表皮生长因子(rhEGF)促进创面愈合的临床效果。方法 2010年4月—2011年9月表浅瘢痕患者60例,随机分为试验组、对照组和空白对照组,每组20例。试验组采用机械磨削联合微针导入rhaFGF和rhEGF,对照组采用机械磨削联合外涂rhaFGF及rhEGF,空白对照组采用机械磨削。研究三组创面愈合时间。结果试验组平均创面愈合时间(9.35±0.87)d,对照组(10.02±0.96)d,空白对照组(10.66±1.02)d,三组比较差异有统计学意义(P<0.05);其中试验组平均创面愈合时间较对照组和空白对照组均明显缩短,差异有统计学意义(P<0.05);对照组平均创面愈合时间较空白对照组明显缩短,差异有统计学意义(P<0.05)。结论机械磨削联合微针导入rhaFGF和rhEGF可促进创面愈合,缩短了创面愈合时间,提高了愈合质量。 展开更多
关键词 瘢痕 成纤维细胞生长因子 表皮生长因子
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