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黄芩汤体外诱导人结肠癌SW620细胞凋亡及其对凋亡相关因子表达的影响 被引量:14
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作者 迟宏罡 赵兵 +5 位作者 郑学宝 戴世学 李涛 于丰彦 何志巍 邹颖 《世界科学技术-中医药现代化》 2015年第1期56-60,共5页
目的:研究黄芩汤对人结肠癌SW620细胞凋亡的作用及其机制。方法:CCK-8和MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot方法检测Bcl-2、Bax蛋白表达;酶标免疫测定Caspase-3和Caspase-8的相对活性。结果:与对照组相比,不同浓度... 目的:研究黄芩汤对人结肠癌SW620细胞凋亡的作用及其机制。方法:CCK-8和MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot方法检测Bcl-2、Bax蛋白表达;酶标免疫测定Caspase-3和Caspase-8的相对活性。结果:与对照组相比,不同浓度黄芩汤处理的细胞增殖抑制率显著增加(P<0.05或P<0.01),细胞凋亡率升高(P<0.05或P<0.01),抑制细胞凋亡蛋白Bcl-2表达降低而促细胞凋亡蛋白Bax表达明显增高(P<0.05或P<0.01),Caspase-3和Caspase-8活性增强(P<0.05或P<0.01),并呈量效依赖关系。结论:黄芩汤能够有效的促进结肠癌SW620细胞凋亡,其机制可能与抑制Bcl-2表达而促进Bax表达并增强Caspase的活性有关。 展开更多
关键词 黄芩汤 肠癌 人结肠癌sw620细胞凋亡 相关因子
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二萜类化合物excisanin A诱导人结肠癌SW620细胞凋亡及机制研究 被引量:11
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作者 邓蓉 朱孝峰 +6 位作者 周军民 高幼衡 冯公侃 梅玉屏 王一 谢冰芬 刘宗潮 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期273-277,共5页
目的本文研究大萼香茶菜有效单体exc isan in A诱导人结肠癌SW 620细胞株凋亡及其分子机制。方法MTT法检测细胞增殖抑制作用,AnnexinV/PI双染法检测细胞早期凋亡率,W estern b lot法检测exc isan in A对PARP、caspase-3、caspase-9剪切... 目的本文研究大萼香茶菜有效单体exc isan in A诱导人结肠癌SW 620细胞株凋亡及其分子机制。方法MTT法检测细胞增殖抑制作用,AnnexinV/PI双染法检测细胞早期凋亡率,W estern b lot法检测exc isan in A对PARP、caspase-3、caspase-9剪切片断的影响,及对MAPKs通路相关蛋白,包括p-ERK、ERK、p-JNK、JNK、p-p38、p38、c-Jun表达的影响。结果Excisanin A对结肠癌SW620细胞株生长具有明显的抑制作用,并呈浓度依赖性,其IC50值为8.22μmol.L-1。用8.71μmol.L-1excisanin A处理SW620细胞12、24、36 h,AnnexinV/PI双染检测细胞的早期凋亡,其凋亡率分别为17.2%、20.5%、13.8%,而对照组细胞的凋亡率仅为1.9%(P<0.05)。不同浓度的excisanin A作用于SW620细胞48h后,Western blot法检测发现PARP、caspase-3,caspase-9 3种蛋白均出现断裂片断,并随着浓度的增加断裂更明显。进一步研究发现,excisanin A处理SW620细胞后,JNK、p38的磷酸化水平明显升高,c-Jun的表达亦增高。结论Excisa-nin A具有明显的细胞毒作用,能诱导SW620细胞凋亡,JNK和p38途径的激活可能是其诱导凋亡的分子机制之一。 展开更多
关键词 excisanin A sw620细胞 细胞 信号转导
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延龄草苷通过降低SCD1表达促进结直肠癌细胞凋亡
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作者 万星 张芳 +2 位作者 李奉 李志贵 周黎明 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第1期97-103,共7页
目的:探讨硬脂酰辅酶A去饱和酶1(stearoyl-CoA desaturase 1,SCD1)在结直肠癌中的临床意义及延龄草苷影响结直肠癌细胞增殖的作用及机制。方法:采用qPCR和Western blot检测SCD1在临床患者结直肠癌组织中的表达,并分析其与临床特征的关系... 目的:探讨硬脂酰辅酶A去饱和酶1(stearoyl-CoA desaturase 1,SCD1)在结直肠癌中的临床意义及延龄草苷影响结直肠癌细胞增殖的作用及机制。方法:采用qPCR和Western blot检测SCD1在临床患者结直肠癌组织中的表达,并分析其与临床特征的关系;CCK-8检测不同浓度延龄草苷对SW620和HCT116细胞活力的影响;细胞集落形成实验分析不同浓度延龄草苷对上述细胞增殖能力的影响;qPCR和Western blot检测其对凋亡基因以及SCD1的影响;分子对接技术分析延龄草苷与SCD1的结合部位及结合能。结果:SCD1的mRNA和蛋白在结直肠癌中的表达较癌旁组织增高,mRNA高表达的阳性率为88%,且其表达与结直肠癌种类和临床分期相关:与结肠癌相比,SCD1在直肠癌中具有更高的表达量,且随着临床分期加重,SCD1的表达随之升高;不同浓度延龄草苷一方面量效依赖地降低SW620和HCT116细胞的活力、抑制细胞集落形成,增加促凋亡蛋白caspase-3和Bax的mRNA和蛋白表达,降低抗凋亡蛋白Bcl-2的mRNA和蛋白表达,另一方面通过氢键和共轭键与SCD1结合降低其mRNA和蛋白表达,该结合能高达−7.7 kcal/mol。结论:SCD1是与结直肠癌种类和临床分期密切相关的蛋白;延龄草苷降低结直肠癌细胞活力、抑制增殖的机制可能是与SCD1结合降低其表达从而促进细胞凋亡相关。 展开更多
关键词 延龄草苷 肠癌 硬脂酰辅酶A去饱和酶1 细胞
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异莲心碱通过PI3K/Akt/mTOR信号通路影响结肠癌SW480细胞增殖、凋亡和自噬 被引量:2
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作者 王湘宁 张金华 +2 位作者 江娜 刘志平 徐莹 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期694-699,共6页
目的:探讨异莲心碱(Iso)通过PI3K/Akt/mTOR信号通路对结肠癌SW480细胞增殖、凋亡和自噬的影响。方法:用10、20和40μmol/L的Iso处理结肠癌SW480细胞,CCK-8法、流式细胞术和WB法分别检测Iso对细胞增殖活力、凋亡和自噬相关蛋白LC3Ⅰ、LC... 目的:探讨异莲心碱(Iso)通过PI3K/Akt/mTOR信号通路对结肠癌SW480细胞增殖、凋亡和自噬的影响。方法:用10、20和40μmol/L的Iso处理结肠癌SW480细胞,CCK-8法、流式细胞术和WB法分别检测Iso对细胞增殖活力、凋亡和自噬相关蛋白LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、p62表达的影响。然后,用20μmol/L的Iso和25μmol/L的PI3K激活剂740 Y-P分别处理SW480细胞,将细胞分为对照组、740 Y-P组、Iso组和Iso+740 Y-P组,流式细胞术、WB法检测Iso和740 Y-P对各组细胞凋亡及细胞中LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、p62、PI3K、p-PI3K、mTOR和p-mTOR蛋白表达的影响。结果:10、20和40μmol/L的Iso处理后,SW480细胞增殖活力均显著下降(均P<0.05),细胞凋亡率均显著升高(均P<0.05),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达均显著上调(均P<0.05),p26蛋白表达显著下调(P<0.05)。Iso和740 Y-P处理后,与对照组相比,740 Y-P组细胞凋亡率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达均显著下降(均P<0.05),p26、p-PI3K/PI3K和p-mTOR/mTOR表达均显著升高(均P<0.05);Iso组细胞凋亡率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达升高(均P<0.05),p26、p-PI3K/PI3K和p-mTOR/mTOR表达均显著下降(均P<0.05);与740 Y-P组相比,Iso+740 Y-P组细胞凋亡率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达升高(P<0.05),p26、p-PI3K/PI3K和p-mTOR/mTOR表达均显著下降(均P<0.05);与Iso组相比,Iso+740 Y-P组细胞凋亡率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达下降(均P<0.05),p26、p-PI3K/PI3K和p-mTOR/mTOR表达均显著升高(均P<0.05)。结论:Iso通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制结肠癌SW480细胞增殖并诱导细胞凋亡和自噬。 展开更多
关键词 异莲心碱 肠癌 sw480细胞 增殖 自噬 PI3K/Akt/mTOR信号通路
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细胞凋亡、焦亡与坏死性凋亡在结直肠癌治疗中的研究进展
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作者 喻士平 张楠 +4 位作者 孙唯义 郅强 沙俊生 陈舒 高楠 《世界科学技术-中医药现代化》 北大核心 2025年第3期633-642,共10页
结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)是一种在结肠或直肠内形成的恶性肿瘤,通常是由正常细胞在体内发生不受控制的生长和分裂所引起的。细胞凋亡(Cell apoptosis)、焦亡(Pyroptosis)和坏死性凋亡(Necroptosis)是结直肠癌中关键的细胞死亡... 结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)是一种在结肠或直肠内形成的恶性肿瘤,通常是由正常细胞在体内发生不受控制的生长和分裂所引起的。细胞凋亡(Cell apoptosis)、焦亡(Pyroptosis)和坏死性凋亡(Necroptosis)是结直肠癌中关键的细胞死亡途径。综合治疗策略包括细胞死亡诱导剂与化疗、免疫治疗以及靶向治疗的协同作用。中药作为辅助治疗手段在调节细胞死亡过程中发挥重要作用,中西医联合治疗在癌前病变、提高疗效、减少不良反应以及降低耐药性方面展现出显著效果。尽管细胞死亡机制的研究尚不充分,但强调中医药的独特特色,明确中药抗肿瘤机制,实现中西医结合治疗结直肠癌的现代科学国际化成为未来的研究方向。本文将从中西医结合的角度全面综述细胞凋亡、焦亡和坏死性凋亡的分子机制,以及在结直肠癌治疗中的调控作用。 展开更多
关键词 肠癌 中西医 细胞 坏死性 相互作用 临床治疗
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染色体不稳定相关基因GALNT7对结肠癌细胞HCT116增殖和凋亡的影响 被引量:1
6
作者 房晓 赵薇 +3 位作者 喻文颖 裴灵洁 钱文轩 赵雅 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第1期96-101,共6页
目的探究染色体不稳定(CIN)相关基因多肽N-乙酰半乳糖氨基转移酶7(GALNT7)对结肠癌细胞HCT116增殖和凋亡的影响。方法采用慢病毒感染构建敲低GALNT7的HCT116细胞系,通过染色体滴定验证GALNT7与CIN的相关性,运用活细胞计数检测GALNT7对... 目的探究染色体不稳定(CIN)相关基因多肽N-乙酰半乳糖氨基转移酶7(GALNT7)对结肠癌细胞HCT116增殖和凋亡的影响。方法采用慢病毒感染构建敲低GALNT7的HCT116细胞系,通过染色体滴定验证GALNT7与CIN的相关性,运用活细胞计数检测GALNT7对细胞增殖的影响,采用流式细胞术和Western blot检测GALNT7对细胞周期的影响,采用Caspase-3酶活性测定和Western blot检测GALNT7对细胞凋亡的影响。结果敲低GALNT7后HCT116细胞染色体核型分布更为分散,CIN程度增高,细胞增殖速度减慢;敲低GALNT7后HCT116细胞发生细胞周期阻滞,并且细胞内P21蛋白上调,CDK6蛋白下调;敲低GALNT7后HCT116细胞Caspase-3酶活性上升,切割型PARP1蛋白和PUMA蛋白表达量升高,BCL-2蛋白表达量下降。结论GALNT7基因可能通过抑制CIN产生促进结肠癌细胞增殖并抑制其凋亡。 展开更多
关键词 染色体不稳定 肠癌 GALNT7 细胞增殖 细胞周期 细胞
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重楼活性单体PP-26抑制结肠癌SW620细胞增殖并诱导细胞凋亡 被引量:11
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作者 陈家劲 王娟娟 +4 位作者 张鹏 王莉 王国才 蒋建伟 王跃春 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期124-130,共7页
目的:探讨重楼活性单体PP-26对人结肠癌SW620细胞增殖抑制作用及其机制.方法:采用噻唑蓝(MTT)法和克隆形成抑制实验观察不同浓度的重楼单体PP-26对人结肠癌SW620细胞增殖抑制作用;PI单染及Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞周期... 目的:探讨重楼活性单体PP-26对人结肠癌SW620细胞增殖抑制作用及其机制.方法:采用噻唑蓝(MTT)法和克隆形成抑制实验观察不同浓度的重楼单体PP-26对人结肠癌SW620细胞增殖抑制作用;PI单染及Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞周期变化及细胞凋亡水平;Western blotting检测PP-26对细胞周期、细胞凋亡相关蛋白以及Akt和ERK蛋白的表达.结果:与正常肝LO2细胞相比,重楼单体PP-26能显著抑制SW620细胞的生长,作用呈剂量-效应关系;随着PP-26浓度的增加,细胞克隆形成逐渐减少,与细胞对照组相比有显著差异;不同浓度PP-26作用后,细胞阻滞于G1期;PP-26作用细胞24 h后,CDK4、CDK6表达下降,P15、cyclin D1表达增加;不同浓度PP-26作用后,细胞晚期凋亡率增加,随浓度增加有上升趋势;PP-26作用细胞24 h后,线粒体相关凋亡信号通路蛋白Caspase-9、Caspase-3表达下降,PARP切割条带增加,细胞促凋亡蛋白Bax的表达增加,抗凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-x L减少,p-Akt和p-ERK蛋白表达均下降.结论:重楼活性单体PP-26通过上调p15促进结肠癌SW620细胞阻滞于G1期,通过抑制P13K/Akt信号通路及ERK信号通路,活化线粒体凋亡通路,诱导细胞凋亡. 展开更多
关键词 重楼 肠癌 sw620 细胞
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茯苓酸调控PI3K/AKT/mTOR通路介导葡萄糖代谢促进结直肠癌细胞凋亡的机制研究 被引量:7
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作者 张树瑛 石齐 +1 位作者 殷晓聆 侯风刚 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2024年第9期65-69,I0008,I0009,共7页
目的 研究茯苓酸对结直肠癌细胞葡萄糖代谢及细胞凋亡的调控作用。方法 通过细胞活性测定(Cell Counting Kit-8,CCK8)、克隆形成等实验检测茯苓酸对结直肠癌细胞增殖与细胞活性的影响;采用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞凋亡实验检测茯... 目的 研究茯苓酸对结直肠癌细胞葡萄糖代谢及细胞凋亡的调控作用。方法 通过细胞活性测定(Cell Counting Kit-8,CCK8)、克隆形成等实验检测茯苓酸对结直肠癌细胞增殖与细胞活性的影响;采用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞凋亡实验检测茯苓酸对结直肠癌细胞凋亡的影响;使用细胞氧气消耗率和细胞外酸化率测定仪器及细胞葡萄糖代谢水平测定试剂盒检测茯苓酸对结直肠癌细胞葡萄糖代谢的影响;通过蛋白免疫印迹(Western blotting, WB)实验验证凋亡、糖酵解、磷脂酰肌醇3-激酶(Phosphatidylinositol3-kinase, PI3K)/丝氨酸、苏氨酸蛋白激酶(AKT Serine/Threonine Kinase 1,AKT)/雷帕霉素靶蛋白(Mammalian Target of Rapamycin, mTOR)通路相关蛋白表达情况。结果 茯苓酸能够有效抑制结直肠癌细胞增殖与细胞活性,并能够通过抑制其糖酵解水平促进其细胞凋亡,同时显著抑制PI3K/AKT/mTOR通路相关蛋白表达水平。结论 茯苓酸可通过调控PI3K/AKT/mTOR通路介导葡萄糖代谢促进CRC细胞凋亡,可作为未来结直肠癌代谢靶向治疗的潜在药物。 展开更多
关键词 茯苓酸 肠癌 糖酵解 细胞 PI3K/AKT/mTOR信号通路
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萝卜硫素对结直肠癌SW620细胞增殖、凋亡及迁移的影响 被引量:8
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作者 罗真真 张震 +3 位作者 乔亚敏 陈新峰 黄岚 张毅 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2017年第3期281-284,共4页
目的:观察萝卜硫素(SFN)对结直肠癌SW620细胞增殖、凋亡及迁移的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:采用CCK-8法检测0、5、10、15、20μmol/L SFN处理48、72 h对SW620细胞增殖能力的影响,采用流式细胞术检测0、5、10、15、20μmol/L SF... 目的:观察萝卜硫素(SFN)对结直肠癌SW620细胞增殖、凋亡及迁移的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:采用CCK-8法检测0、5、10、15、20μmol/L SFN处理48、72 h对SW620细胞增殖能力的影响,采用流式细胞术检测0、5、10、15、20μmol/L SFN处理24、48 h对SW620细胞凋亡的影响,采用细胞划痕实验观察20μmol/L SFN处理24 h对SW620细胞迁移的影响,并采用Western blot法检测细胞中STAT3、NF-κB、p-STAT3、p-NF-κB及MMP-2、MMP-9蛋白的表达。结果:随着SFN浓度的升高,SW620细胞增殖受到抑制,细胞凋亡率升高(P<0.05)。同时20μmol/L SFN可明显减弱SW620细胞的迁移能力,降低p-STAT3、p-NF-κB与MMP-2及MMP-9蛋白的表达(P<0.05)。结论:SFN抑制SW620细胞增殖、促进其凋亡的机制可能与降低p-STAT3、p-NF-κB的表达有关,抑制侵袭及转移的机制可能与其降低MMP-2及MMP-9蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 萝卜硫素 肠癌 sw620细胞 STAT3 NF-ΚB MMP
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5-氟尿嘧啶诱导结肠癌细胞系SW620凋亡的傅里叶变换红外光谱研究 被引量:2
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作者 刘栋 孙学军 +8 位作者 张超 贺赛 杜俊凯 霍雄伟 郑见宝 张仕运 张元福 徐怡庄 吴瑾光 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2013年第12期3169-3174,共6页
探索红外光谱监测肿瘤细胞凋亡的可行性及初步分析。采用结肠癌细胞系SW620作为诱导细胞模型,MTT法确定最优5-FU诱导浓度,无血清饥饿培养协同细胞周期阻滞在G1和S期,傅里叶显微红外光谱仪(FTIR)联合流式细胞仪(FCM)对SW 620细胞和凋亡的... 探索红外光谱监测肿瘤细胞凋亡的可行性及初步分析。采用结肠癌细胞系SW620作为诱导细胞模型,MTT法确定最优5-FU诱导浓度,无血清饥饿培养协同细胞周期阻滞在G1和S期,傅里叶显微红外光谱仪(FTIR)联合流式细胞仪(FCM)对SW 620细胞和凋亡的SW 620细胞12 h、早期凋亡(24 h)和晚期凋亡(48 h)的峰位、相对峰强等指标进行比较分析。光谱分析结果显示SW 620对比凋亡细胞有以下特征:(1)与脂类相关谱带1 740 cm^(-1)相对峰强比I_(1740)/I_(1460)明显降低(p<0.05),表明凋亡细胞中脂类相对含量增多。(2)与氨基酸残基相关谱带1 410 cm^(-1),I_(1460)/I_(1460)在凋亡早期和晚期明显升高(p<0.05),与丝、苏氨基酸相关谱带1 120 cm^(-1)向高波数移动,I_(1120)/I_(1460)明显升高(P<0.05),表明凋亡细胞中DNA双螺旋解链,氨基酸残基增多。(3)DNA的反对称伸缩1 240 cm^(-1)向高波数移动,表明凋亡细胞中核酸分子构象发生改变。(4)与核酸多糖1 040 cm^(-1)相关谱带在凋亡的24和48 h出现,向高波数移动,I_(1040)/I_(1460)在凋亡晚期降低(P<0.05)。初步研究结果表明傅里叶变换红外光谱分析可能成为实时无创监测肿瘤化疗的有效方法。 展开更多
关键词 肠癌 细胞周期 细胞 红外光谱 化疗
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β-DG过表达对结肠癌细胞系SW620细胞凋亡的影响
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作者 钱成 徐涛 潘林鑫 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第10期1491-1496,共6页
目的研究β-肌营养不良蛋白聚糖(β-DG)在HT29、HCT116、SW480、SW620等4种常见的结肠癌细胞系中的表达情况,及其过表达后对SW620结肠癌细胞凋亡及相关蛋白表达变化的影响。方法培养结肠癌细胞系,提取总蛋白进行免疫印迹,检测各细胞中... 目的研究β-肌营养不良蛋白聚糖(β-DG)在HT29、HCT116、SW480、SW620等4种常见的结肠癌细胞系中的表达情况,及其过表达后对SW620结肠癌细胞凋亡及相关蛋白表达变化的影响。方法培养结肠癌细胞系,提取总蛋白进行免疫印迹,检测各细胞中内源性β-DG蛋白的表达情况;构建pcDGFP-β-DG真核表达质粒,瞬时转染至SW620细胞中,提取总蛋白进行免疫印迹或直接进行免疫荧光制片,检测β-DG的过表达和细胞定位情况;过表达β-DG后,利用流式细胞术检测SW620细胞凋亡的变化情况,并进一步检测细胞凋亡标志蛋白聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶(PARP)的表达变化情况。结果与人胚肾上皮细胞(HEK 293T)相比,结肠癌细胞系中内源性β-DG(43 ku)的表达量均有所降低,以SW620细胞下降更为明显,且都检测到了不同表达程度的β-DG水解片段(31 ku)。成功构建pcDGFP-β-DG真核表达质粒,在SW620细胞中能够有效表达,且主要定位在细胞质中靠近核膜的位置。过表达β-DG后,SW620细胞的凋亡率为0.167±0.014,高于空白组(0.075±0.027)和对照组(0.084±0.023),差异有统计学意义(P<0.05),且过表达β-DG后,完整型PARP(113 ku)的蛋白含量有所降低,而裂解型PARP(89 ku)的蛋白含量有所增高。结论β-DG在结肠癌细胞系中异常表达,主要表现在其异常的水解断裂。过表达β-DG能够促进SW620细胞凋亡及相关凋亡蛋白的表达,为进一步了解β-DG功能,及其与结肠癌之间的关系提供了细胞学基础。 展开更多
关键词 肠癌 β-肌营养不良蛋白聚糖 过表达 细胞
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RNA干扰STAT3基因对结肠癌细胞sw620凋亡的影响 被引量:4
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作者 施露 张献全 +2 位作者 蒋国燕 李华 达利隽 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期412-414,共3页
目的 :构建针对信号转导和转录活化因子3(signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)的小RNA干扰表达质粒,利用该质粒特异性抑制人结肠癌sw620细胞中STAT3基因的表达,观察RNA干扰STAT3基因对人结肠癌细胞sw620凋亡... 目的 :构建针对信号转导和转录活化因子3(signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)的小RNA干扰表达质粒,利用该质粒特异性抑制人结肠癌sw620细胞中STAT3基因的表达,观察RNA干扰STAT3基因对人结肠癌细胞sw620凋亡的影响。方法:将针对STAT3基因的干扰短发卡RNA(short hairpin RNA,shRNA)克隆到pGenesil-1质粒表达载体中,命名为p-shSTAT3。质粒转染sw620细胞48 h后,利用RT-PCR(reverse transcription PCR)和Western blot技术检测STAT3基因mRNA和蛋白水平上的表达情况。利用Hochest 33258染色对转染后sw620细胞的凋亡情况进行检测;利用Western blot技术对STAT3基因调控相关的凋亡信号通路中的p53、Caspase 3、Bax、Bcl-XL和Bcl-2蛋白的表达情况进行检测。结果:转染STAT3干扰质粒能在细胞水平上有效抑制sw620细胞中STAT3基因mRNA和蛋白水平上的表达(P=0.000)。Hochest 33258染色表明在sw620细胞中干扰掉STAT3基因的表达能促进细胞凋亡的发生(P=0.000),乱序对照对细胞无明显的凋亡促进作用(P=0.218)。对作用机理进行研究后发现,在sw620细胞中干扰掉STAT3基因能促进p53、Caspase 3和Bax 3个凋亡诱导蛋白的表达;同时下调Bcl-XL和Bcl-2 2个凋亡抑制蛋白的表达。结论:利用RNA干扰技术干扰掉sw620细胞中STAT3基因的表达能促进sw620细胞凋亡,为结肠癌治疗提供新的研究思路和作用靶点。 展开更多
关键词 信号转导和转录活化因子3 RNA干扰 肠癌 人结肠癌细胞sw620
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桑椹汁对结肠癌细胞株SW620增殖和凋亡的影响 被引量:2
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作者 吕欢 闻燕 +3 位作者 王俊 许晓风 吴宇 江明珠 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期394-399,共6页
为证实桑椹的抗肿瘤功能,以不同浓度桑椹汁处理结肠癌细胞株SW620,应用MTT法对比绘制生长曲线,调查SW620细胞的增殖情况,通过荧光定量PCR、SDS-PAGE检测SW620细胞凋亡相关基因p53的转录及蛋白质表达变化,分析桑椹汁对SW620细胞增殖、凋... 为证实桑椹的抗肿瘤功能,以不同浓度桑椹汁处理结肠癌细胞株SW620,应用MTT法对比绘制生长曲线,调查SW620细胞的增殖情况,通过荧光定量PCR、SDS-PAGE检测SW620细胞凋亡相关基因p53的转录及蛋白质表达变化,分析桑椹汁对SW620细胞增殖、凋亡的影响机制。结果显示,桑椹汁对SW620细胞增殖的抑制作用随着桑椹汁浓度的升高而明显增强,以花青素质量浓度为6.267 3×10-3mg/mL的桑椹汁处理24 h后SW620细胞发生了以下变化:细胞的生长明显受到抑制,细胞脱落、变形与贴壁性下降,出现凋亡现象;细胞基因组DNA发生较明显的降解;荧光定量PCR检测细胞中p53基因的转录水平较对照组增加约6.5倍,SDS-PAGE检测p53蛋白的表达量也明显高于对照组。研究结果表明,桑椹汁对结肠癌细胞株SW620的增殖有抑制作用,其抑制机制可能是通过其活性物质诱导SW620细胞中p53基因上调表达导致细胞凋亡。 展开更多
关键词 桑椹汁 肠癌细胞sw620 增殖 P53基因 荧光定量PCR
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地榆槐花汤通过调控p38 MAPK/p53通路对人结直肠癌HCT116细胞增殖和凋亡的影响 被引量:3
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作者 于春雪 陈楠 +4 位作者 丛珊 禹晶 王静 毛颖 梁雪琦 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2024年第2期294-301,共8页
目的探讨地榆槐花汤对人结直肠癌HCT116细胞增殖和凋亡的影响及机制。方法将HCT116细胞分为空白对照组(空白血清)、阳性对照组(奥沙利铂含药血清)、地榆槐花汤低、中、高剂量组(10%、15%、20%地榆槐花汤含药血清),给予相应含药血清干预,... 目的探讨地榆槐花汤对人结直肠癌HCT116细胞增殖和凋亡的影响及机制。方法将HCT116细胞分为空白对照组(空白血清)、阳性对照组(奥沙利铂含药血清)、地榆槐花汤低、中、高剂量组(10%、15%、20%地榆槐花汤含药血清),给予相应含药血清干预,MTT检测细胞增殖活性;平板克隆形成实验检测各组细胞克隆形成能力;Annexin V-FITC/PI法检测细胞的凋亡水平;Hoechst 33258染色观察细胞形态变化;Western blot检测细胞中Bax、Bcl-2、Cleaved caspase-3、p38MAPK、p-p38MAPK(Thr180/Tyr182)、MDM2和p53等蛋白表达水平。进一步将HCT116细胞分为空白对照组(空白血清)、地榆槐花汤组(20%地榆槐花汤含药血清)、p38MAPK抑制剂TAK-715组(10 mmol·L^(-1) TAK-715)和联合组(20%地榆槐花汤含药血清+10 mmol·L^(-1) TAK-715),采用20%地榆槐花汤含药血清和10 mmol·L^(-1) TAK-715进行干预,MTT检测各组细胞增殖活性;AnnexinV-FITC/PI法检测细胞凋亡水平;Westernblot检测细胞中p38MAPK、pp38MAPK、MDM2、p53等蛋白表达水平。结果与空白对照组相比,地榆槐花汤中、高剂量组及阳性对照组HCT116细胞的增殖活性和克隆形成能力显著降低(P<0.01),细胞核呈皱缩、碎块状变化,细胞凋亡水平显著增加(P<0.01),Bax/Bcl-2、Cleaved caspase-3、p-p38MAPK/p38MAPK和p53等蛋白表达水平显著上调(P<0.05),MDM2蛋白表达水平显著下调(P<0.01)。然而,联合TAK-715处理可明显降低地榆槐花汤对HCT116细胞增殖的抑制作用和凋亡的诱导作用(P<0.05)。结论地榆槐花汤可通过调控p38 MAPK/p53通路抑制HCT116细胞的增殖,并诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 地榆槐花汤 肠癌 细胞增殖 细胞 p38 MAPK/p53通路
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沉默胶质瘤相关癌基因同源物2基因对结肠癌细胞系SW620增殖和凋亡的影响 被引量:3
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作者 康清杰 向征 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期785-790,共6页
背景与目的:胶质瘤相关癌基因同源物2(glioma-associated oncogene homolog 2,Gli2)是Hedgehog信号通路重要的转录因子,它不仅与正常细胞的生长密切相关,而且在多种肿瘤细胞中异常激活。探讨Gli2对结肠癌细胞系SW620增殖和凋亡的影响及... 背景与目的:胶质瘤相关癌基因同源物2(glioma-associated oncogene homolog 2,Gli2)是Hedgehog信号通路重要的转录因子,它不仅与正常细胞的生长密切相关,而且在多种肿瘤细胞中异常激活。探讨Gli2对结肠癌细胞系SW620增殖和凋亡的影响及其可能机制。方法:以Gli2干扰慢病毒载体感染SW620细胞,实验设干扰组、空病毒载体组和对照组,采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)和蛋白[质]印迹法(Western blot)检测细胞中Gli2 mRNA表达和蛋白水平,采用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)、集落形成实验和倍增时间检测细胞的增殖情况,流式细胞术(flow cytometry)检测各组细胞周期和凋亡情况,Western blot法检测细胞中ERK1/2、p-ERK1/2、Bcl-2、Bax和cyclin D1蛋白水平。结果:SW620细胞转染慢病毒载体72 h后,可见明显的荧光表达;与空病毒载体组和对照组相比,干扰组细胞的Gli2基因表达被有效抑制(P<0.05);细胞增殖能力明显降低(P<0.05);细胞周期阻滞,G1期细胞比例增高(P<0.05);细胞凋亡率明显增加(P<0.05);p-ERK1/2、Bcl-2和cyclin D1的蛋白表达量降低(P<0.05),Bax表达增加(P<0.05)。结论:沉默Gli2可以明显抑制结肠癌细胞系SW620的增殖,促进细胞凋亡,其机制可能与p-ERK1/2、Bcl-2和cyclin D1表达的下调和Bax表达上调相关。 展开更多
关键词 肠癌 GLI2 sw620 增殖
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王浆酸对人结肠癌SW620细胞增殖的抑制作用及其网络药理学分析 被引量:1
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作者 刘雅鑫 刘健 +7 位作者 李祯 曹占鸿 白浩楠 安昱 房星宇 杨擎 李辉 李娜 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期150-160,共11页
目的:基于网络药理学探讨王浆酸(10-HDA)对人结肠癌SW620细胞增殖和迁移的影响,阐明其相关分子机制。方法:利用中药系统药理学(TMSCP)数据库和中医药综合数据库(TCMID)以关键词“蜂王浆”进行检索得到10-HDA等活性成分及对应靶点,采用Sw... 目的:基于网络药理学探讨王浆酸(10-HDA)对人结肠癌SW620细胞增殖和迁移的影响,阐明其相关分子机制。方法:利用中药系统药理学(TMSCP)数据库和中医药综合数据库(TCMID)以关键词“蜂王浆”进行检索得到10-HDA等活性成分及对应靶点,采用Swiss Target Prediction数据库预测小分子靶点。采用Gene Cards数据库和在线人类孟德尔遗传(OMIM)数据库以关键词“Colon Cancer”获得靶点,利用String数据库和Cytoscape 3.8.0软件构建蛋白-蛋白互作(PPI)网络,筛选核心靶点;利用Metascape数据库对基因本体(GO)功能富集和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路进行富集分析,筛选特有成分10-HDA进行体外活性实验。将生长状态良好的人结肠癌SW620细胞分为对照组和不同剂量(1、5、10、15和20 mmol·L^(-1))10-HDA组,采用MTT法检测各组细胞活性并计算细胞存活率。SW620细胞分为对照组、低剂量(5 mmol·L^(-1))10-HDA组、中剂量(10mmol·L^(-1))10-HDA组和高剂量(15mmol·L^(-1))10-HDA组,Hoechst33342染色法观察各组细胞形态表现,细胞划痕实验检测各组细胞划痕愈合率,流式细胞术检测各组不同细胞周期细胞百分率,生化法检测各组细胞中总抗氧化能力(T-AOC)和超氧化物歧化酶(SOD)活性,Western blotting法检测各组细胞中B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(Caspase-9)、糖原合成酶激酶3β(GSK3β)、β-连环蛋白(β-catenin)和细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)蛋白表达水平。结果:TCMSP数据库筛选得到蜂王浆6种活性成分,10-HDA治疗结肠癌核心靶点28个。GO功能富集分析主要涉及细胞增殖和细胞凋亡等信号通路;KEGG信号通路富集分析涉及细胞周期、前列腺癌、细胞衰老和p53等信号通路,GSK3β/β-catenin信号通路与细胞周期有密切关联。与对照组比较,5、10、15和20 mmol·L^(-1)10-HDA组细胞存活率呈剂量依赖性降低(P<0.05或P<0.01)。与对照组比较,不同剂量10-HDA组细胞中凋亡细胞数明显增多,细胞划痕愈合率明显降低(P<0.05或P<0.01),中和高剂量10-HDA组细胞中S期细胞百分率明显升高(P<0.05或P<0.01),不同剂量10-HDA组细胞中T-AOC和SOD活性明显降低(P<0.05或P<0.01)。与对照组比较,低剂量10-HDA组细胞中Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.01),GSK3β蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与对照组比较,中和高剂量10-HDA组细胞中Bax、Caspase-3、Caspase-9和GSK3β蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01),Bcl-2、β-catenin和Cyclin D1蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。结论:10-HDA可明显抑制结肠癌细胞增殖和迁移,并可促进结肠癌细胞的凋亡和氧化水平,其作用机制可能与激活GSK3β/β-catenin信号通路有关。 展开更多
关键词 王浆酸 肠肿瘤 sw620细胞 细胞 糖原合成酶激酶3Β Β-连环蛋白
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紫檀芪调控核转录因子E2相关因子2对体外结肠癌细胞凋亡的影响 被引量:1
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作者 石学汇 范崇熙 +6 位作者 杨全龙 王晓莹 赵东林 李曼华 武雪亮 樊建春 宁守斌 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期482-489,共8页
目的探讨紫檀芪对人结肠癌细胞LoVo的作用,并研究核转录因子E2相关因子2(Nrf2)在紫檀芪作用LoVo细胞过程中的调控机制。方法应用不同浓度的紫檀芪(5、10、20、40、60、80、100μmol/L)处理LoVo细胞。CCK-8检测细胞活力,划痕实验检测细... 目的探讨紫檀芪对人结肠癌细胞LoVo的作用,并研究核转录因子E2相关因子2(Nrf2)在紫檀芪作用LoVo细胞过程中的调控机制。方法应用不同浓度的紫檀芪(5、10、20、40、60、80、100μmol/L)处理LoVo细胞。CCK-8检测细胞活力,划痕实验检测细胞迁移,Transwell实验检测细胞侵袭,TUNEL染色检测细胞凋亡,JC-1检测线粒体膜电位水平,2’,7’-二氯荧光素二乙酸酯检测活性氧水平,Western blot检测细胞内Nrf2、磷酸化的Nrf2、血红素加氧酶-1及凋亡蛋白(Bcl2、Bax)的蛋白表达。此外,联合应用Nrf2特异性激动剂萝卜硫素后,重复检测细胞活力、细胞凋亡率及Nrf2的蛋白表达。结果与对照组相比,40、60、80、100μmol/L紫檀芪均可显著降低细胞活性(P=0.014,P<0.001,P<0.001,P<0.001)。5、10、20μmol/L紫檀芪对LoVo细胞活性无影响,但可显著抑制细胞迁移(P=0.008,P<0.001,P<0.001)和侵袭(P均<0.001)。TUNEL染色、JC-1、2’,7’-二氯荧光素二乙酸酯染色结果显示40、60、80μmol/L紫檀芪增加LoVo细胞凋亡(P=0.014,P<0.001,P<0.001),使线粒体膜电位去极化(P=0.026,P<0.001,P<0.001)并增加细胞内活性氧聚积(P均<0.001)。40、60、80μmol/L紫檀芪下调了LoVo细胞中磷酸化的Nrf2(P=0.030,P<0.001,P<0.001)、血红素加氧酶-1(P=0.015,P<0.001,P<0.001)、Bcl2(P=0.039,P<0.001,P<0.001)的蛋白表达;60、80μmol/L紫檀芪降低了Nrf2的蛋白表达(P=0.001,P<0.001),增加了Bax的蛋白表达(P均<0.001)。应用萝卜硫素联合处理后,紫檀芪抑制细胞活性(P<0.001)、增加细胞凋亡(P<0.001)及下调Nrf2表达(P=0.022)的作用明显减弱。结论紫檀芪是一种有效抑制结肠癌细胞的化合物,其抗癌机制与抑制Nrf2通路有关。 展开更多
关键词 紫檀芪 核转录因子E2相关因子2 肠癌 细胞 活性氧
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槐定碱对人结肠腺癌细胞株SW620增殖和凋亡的影响 被引量:28
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作者 梁磊 张绪慧 +2 位作者 王晓燕 陈艳 邓虹珠 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期782-787,共6页
目的考察槐定碱对人结肠癌SW620细胞的增殖影响及探讨其诱导凋亡作用。方法MTT法测定槐定碱对SW620细胞的半数抑制浓度;光学显微镜、荧光显微镜及电镜观察细胞凋亡形态变化;流式细胞仪分析细胞周期变化及细胞凋亡率。结果实验结果显示... 目的考察槐定碱对人结肠癌SW620细胞的增殖影响及探讨其诱导凋亡作用。方法MTT法测定槐定碱对SW620细胞的半数抑制浓度;光学显微镜、荧光显微镜及电镜观察细胞凋亡形态变化;流式细胞仪分析细胞周期变化及细胞凋亡率。结果实验结果显示槐定碱对体外培养的SW620细胞增殖具有明显抑制作用,并可诱导其发生凋亡,其作用呈剂量和时间依赖性,48hIC50=2.8mmol.L-1。凋亡细胞表现为细胞固缩、变圆、核染色质聚集或碎裂、胞质空泡化。DNA ladder结果显示有凋亡引起的"梯状"条带出现。流式细胞仪细胞周期分析结果表明,随着槐定碱作用时间的延长,G0-G1期细胞增多,同时S期细胞比例也相应增高。结论槐定碱对体外培养SW620细胞生长增殖有明显抑制作用,其作用机制与阻滞细胞周期的进程,诱导细胞凋亡相关。 展开更多
关键词 槐定碱 肠癌 细胞 sw620
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石刁柏汁对结肠癌细胞株SW620增殖和凋亡的影响
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作者 吕欢 闻燕 +2 位作者 许晓风 王俊 江明珠 《江苏农业科学》 北大核心 2013年第8期48-50,共3页
初步探究石刁柏汁对结肠癌细胞株SW620增殖和凋亡的影响及可能的机制。通过MTT法,对试验组与对照组的生长曲线进行对比,验证了不同浓度石刁柏汁对结肠癌细胞株SW620增殖的影响;同时对比观察石刁柏汁处理前后的细胞株SW620的细胞形态,通... 初步探究石刁柏汁对结肠癌细胞株SW620增殖和凋亡的影响及可能的机制。通过MTT法,对试验组与对照组的生长曲线进行对比,验证了不同浓度石刁柏汁对结肠癌细胞株SW620增殖的影响;同时对比观察石刁柏汁处理前后的细胞株SW620的细胞形态,通过Bcl-2基因的荧光定量PCR来检测石刁柏汁对结肠癌细胞株SW620细胞凋亡的影响。通过MTT法检测不同浓度石刁柏汁对结肠癌细胞株SW620增殖情况的影响结果表明,石刁柏汁对结肠癌细胞株SW620的抑制作用为剂量效应相关性,其对结肠癌细胞株SW620的抑制作用随着浓度的增加而增强;通过绘制对照组和试验组的结肠癌细胞株SW620的生长曲线并进行对比表明,在石刁柏汁刺激下的试验组结肠癌细胞株SW620的生长受到明显抑制;通过对比观察对照组和试验组结肠癌细胞株SW620的形态可以看出,试验组的细胞体积变小、细胞变形,出现了凋亡小体等细胞凋亡现象,表明在石刁柏汁刺激下的结肠癌细胞株SW620发生凋亡;通过荧光定量PCR法检测对照组及石刁柏汁刺激下的试验组中结肠癌细胞株SW620中凋亡相关的基因Bcl-2表明,Bcl-2基因在试验组中的表达量为其在未受石刁柏汁刺激的对照组中表达量的一半。研究初步说明了不同浓度石刁柏汁对结肠癌细胞株SW620的生长有抑制作用,并且随着浓度的增加,抑制能力增强,推测其抑制机制可能与细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 石刁柏汁 细胞 MTT 生长曲线 BCL-2 sw620
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RANBP9调控TGF⁃β诱导结肠癌Colo320细胞凋亡的机制研究
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作者 班汝波 杨婕琳 +2 位作者 王晓媛 武雪亮 路永刚 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第7期39-47,共9页
目的探讨Ran蛋白微管组织中心结合蛋白(RANBP9)靶向调控转化生长因子β1(transforming growth factor⁃β1,TGF⁃β1)的表达,及其对结直肠癌Colo320细胞凋亡的影响。方法分析TCGA数据库中625例结肠癌组织以及20例正常结肠组织中RANBP9的... 目的探讨Ran蛋白微管组织中心结合蛋白(RANBP9)靶向调控转化生长因子β1(transforming growth factor⁃β1,TGF⁃β1)的表达,及其对结直肠癌Colo320细胞凋亡的影响。方法分析TCGA数据库中625例结肠癌组织以及20例正常结肠组织中RANBP9的表达数据,KMPLOT分析RANBP9的表达与结肠癌患者生存期的关系。人类蛋白免疫组化数据库分析TGF⁃β1在正常结肠组织和结肠癌组织中的表达情况,使用UALCAN数据库分析TGF⁃β1的表达与结肠癌患者生存期的关系。双荧光素酶实验分析RANBP9和TGF⁃β1的关系。将pcDNA3.1⁃GFP⁃RANBP9和pcDNA3.1⁃GFP⁃RANBP9⁃NC分别转染至实验组和对照组细胞中,转染完成后细胞常规培养,另设立正常组细胞,不经过转染操作,常规培养;噻唑蓝(thiazolyl blue tetrazolium bromide,MTT)法检测各组细胞的生长活力,流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率,JC⁃1染色检测各组细胞的线粒体膜电位,Western blot检测各组细胞中RANBP9和TGF⁃β1的表达。结果RANBP9在结肠癌组织中的表达明显降低,与RANBP9表达低的患者相比,RANBP9高表达的结肠癌患者具有较高的生存期曲线,TGF⁃β1在结肠癌组织的表达明显升高,与TGF⁃β1表达高的患者相比,TGF⁃β1低表达的患者具有较高的生存期曲线,差异均具有统计意义(P<0.05)。在结肠癌中,RANBP9能靶向调控TGF⁃β1的表达。与正常组细胞相比,实验组细胞的生长活力、线粒体的膜电位、TGF⁃β1的表达明显下调,细胞的凋亡率和RANBP9的表达明显升高,差异均具有统计意义(P<0.05)。结论RANBP9能靶向调控TGF⁃β1的表达,促使结肠癌细胞Colo320的生长活力和线粒体膜电位下降,诱导其凋亡。 展开更多
关键词 Ran蛋白微管组织中心合蛋白 转化生长因子Β1 肠癌 细胞
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