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佛波酯对促进人绒毛膜癌AJR细胞侵入机制的研究 被引量:2
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作者 张曦倩 邢福祺 +3 位作者 李红 陈思梅 庞战军 黄敏珍 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第1期6-8,共3页
目的探讨佛波酯(PMA)是否通过改变细胞因子的生成而影响滋养细胞的侵袭性。方法用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测人绒毛膜癌JAR细胞与侵袭力调节有关的多种细胞因子基因表达的变化。结果JAR细胞表达肝细胞生长因子(HGF)、胰岛素样生长... 目的探讨佛波酯(PMA)是否通过改变细胞因子的生成而影响滋养细胞的侵袭性。方法用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测人绒毛膜癌JAR细胞与侵袭力调节有关的多种细胞因子基因表达的变化。结果JAR细胞表达肝细胞生长因子(HGF)、胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)、转化生长因子β(TGF-β)、白细胞介素1β(IL-1β)和血管内皮生长因子(VEGF),且VEGF的表达以VEGF121和VEGF165为主,而不表达IGF-Ⅰ。100 nmol/L PMA处理细胞24 h可显著上调IL-1β、HGF、IGF-II mRNA的表达,同时抑制TGF-β2、TGF-β3 mRNA的表达,而对TGF-β1、VEGF mRNA的表达未见有明显变化。结论HGF、IL-1β、IGF-Ⅱ对滋养细胞的侵入起促进作用,而TGF-β2、TGF-β3具有抑制效应。说明丝裂原PMA可能通过调节这几种细胞因子的自分泌机制,从而增强JAR细胞的侵袭能力。 展开更多
关键词 佛波酯 人绒毛膜癌 AJR细胞 侵入机制 研究
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马鞭草C部位单体4′-甲醚-黄芩素对人绒毛膜癌细胞增殖的抑制作用 被引量:4
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作者 冯播 徐昌芬 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2008年第5期444-450,共7页
目的:探讨马鞭草有效成分所提取的单体4′-甲醚-黄芩素(4′-methylether-scutellarein,4-MS)对人绒毛膜癌JAR细胞的增殖抑制作用及其相关机制。方法:JAR细胞传代后加入不同浓度4-MS作用一定时间,应用MTT法检测对细胞增殖的抑制作用,流... 目的:探讨马鞭草有效成分所提取的单体4′-甲醚-黄芩素(4′-methylether-scutellarein,4-MS)对人绒毛膜癌JAR细胞的增殖抑制作用及其相关机制。方法:JAR细胞传代后加入不同浓度4-MS作用一定时间,应用MTT法检测对细胞增殖的抑制作用,流式细胞术测定细胞凋亡率及细胞周期变化,AO/EB双染法区分早、晚期凋亡细胞和坏死细胞,RT-PCR技术分析4-MS对人绒毛膜癌JAR细胞凋亡相关基因Caspase3、p38MAPK及Survivin表达的影响,并进一步用Western blotting测定Caspase3、p38MAPK及Survivin在用药前后蛋白水平的表达差异。结果:不同质量浓度(10、20、40mg/L)的4-MS对JAR细胞均有增殖抑制作用,并随药物浓度和作用时间的增加而不断增强(P<0.05,P<0.01);流式细胞术显示,随着药物浓度的增加细胞凋亡率亦逐渐升高,G2/M期细胞所占比例增大(P<0.05);AO/EB双染后发现,随着4-MS剂量的增加,晚期凋亡细胞逐渐增多;20和40mg/L的4-MS作用48h后,JAR细胞中p38MAPK及Caspase3mRNA表达下降,Survivin mRNA表达上升,与对照组相比均有统计学意义(P<0.05);Western blotting证实,20mg/L和40mg/L4-MS作用48h后Survivin蛋白表达量显著下降,p38磷酸化水平升高,Caspase3被明显激活。结论:4-MS能抑制人绒毛膜癌JAR细胞的增殖并诱导凋亡,可能与其阻滞细胞生长于G/M期、抑制Survivin抗凋亡活性,直接激活p38MAPK信号通路和Caspase3活化有关。 展开更多
关键词 4′-甲醚-黄芩素(4-MS) 人绒毛膜癌JAR细胞 CASPASE3 SURVIVIN P38MAPK信号通路
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蛋白激酶C在人绒毛膜癌JAR细胞中作用的研究
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作者 罗莉 徐昌芬 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期128-131,共4页
目的:研究蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)对人绒毛膜癌JAR细胞分泌人绒毛膜促性腺激素(hCG)的影响,进一步探讨PKC在调控JAR细胞hCG分泌中的作用。方法:不同浓度的PKC激动剂phorbol 12-myristrate 13-acelate(PMA)急性和慢性刺激、PKC... 目的:研究蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)对人绒毛膜癌JAR细胞分泌人绒毛膜促性腺激素(hCG)的影响,进一步探讨PKC在调控JAR细胞hCG分泌中的作用。方法:不同浓度的PKC激动剂phorbol 12-myristrate 13-acelate(PMA)急性和慢性刺激、PKC抑制剂chelerythrine chlorine(CHEL)分别作用JAR细胞,用ELASA法测定hCG分泌量变化,以及蛋白印迹(Western blot)法测定细胞内磷酸化丝裂原激活的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)的改变。结果:不同浓度PMA急性刺激时,抑制JAR细胞hCG分泌,在200 nmol/L时,其抑制作用最强;不同浓度PMA慢性刺激时,JAR细胞hCG分泌量增加,在200 nmol/L时,其作用最强。CHEL作用JAR细胞时,hCG分泌量升高,在600 nmol/L时,其作用最强。对照组及各实验组都有活性的MAPK的表达,与对照组相比,PMA慢性刺激组、CHEL组MAPK磷酸化水平升高;PMA急性刺激组MAPK磷酸化水平降低。结论:PKC参与调节JAR细胞hCG的分泌,活性升高时,下调MAPK磷酸化,使JAR细胞hCG分泌减少,而活性降低时,增强MAPK磷酸化,JAR细胞hCG分泌量增加。MAPK通路激活是PKC介导的JAR细胞分泌hCG的重要机制。 展开更多
关键词 蛋白激酶C 人绒毛促性腺激素 人绒毛膜癌JAR细胞 蛋白激酶
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Caveolin-1与绒毛膜癌侵袭力之间的关系 被引量:4
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作者 刘惠宁 蔡净亭 +2 位作者 林秋华 何可人 余蓉 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期331-337,共7页
目的:探讨小窝蛋白-1(caveolin-1,CAV-1)的表达与绒毛膜癌高侵袭力之间的相关性,并了解RNA干扰沉默CAV-1基因对高侵袭力绒毛膜癌JEG-3细胞侵袭力的抑制作用。方法:(1)应用Matrigel体外侵袭试验和噻唑盐比色实验[3-(4,5)-dimethylthiahia... 目的:探讨小窝蛋白-1(caveolin-1,CAV-1)的表达与绒毛膜癌高侵袭力之间的相关性,并了解RNA干扰沉默CAV-1基因对高侵袭力绒毛膜癌JEG-3细胞侵袭力的抑制作用。方法:(1)应用Matrigel体外侵袭试验和噻唑盐比色实验[3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumro-mide,MTT]检测绒毛膜癌JEG-3细胞和JAR细胞之间侵袭能力和增殖能力的差异;(2)应用半定量逆转录聚合酶链反应(reverse transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)方法检测CAV-1mRNA在人正常早孕绒毛组织、不同侵袭力人绒毛膜癌细胞株JEG-3及JAR表达的差异;(3)将CAV-1小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染至高侵袭力绒毛膜癌JEG-3细胞后,采用RT-PCR检测转染后JEG-3细胞CAV-1mRNA表达的变化,并应用Matrigel体外侵袭试验和MTT法检测JEG-3细胞侵袭和增殖能力的变化。结果:(1)JEG-3细胞的侵袭能力显著高于JAR细胞(P<0.05),但JEG-3和JAR细胞之间增殖能力的差异无统计学意义(P>0.05);(2)RT-PCR结果显示在人正常早孕绒毛组织、高侵袭性JEG-3细胞以及低侵袭性JAR细胞中均可检测到CAV-1mRNA,将上述三者中CAV-1mRNA的表达量进行两两比较,发现人绒毛膜癌细胞株中CAV-1mRNA的表达明显高于人正常早孕绒毛组织,而具有高侵袭性JEG-3细胞中CAV-1mRNA的表达明显高于JAR细胞,差异具有统计学意义(P<0.05),相关性分析显示CAV-1表达水平与绒毛膜癌细胞侵袭力呈正相关(r=0.86,P<0.05);(3)CAV-1 siRNA可有效抑制CAV-1mRNA的表达,并削弱绒毛膜癌细胞的侵袭和增殖能力。结论:CAV-1基因表达可显著增强绒毛膜癌细胞的侵袭潜能,CAV-1 siRNA可抑制绒毛膜癌细胞的侵袭和增殖能力。 展开更多
关键词 人绒毛膜癌 CAVEOLIN-1 RNA干扰 SIRNA 侵袭
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促性腺激素释放激素(GnRH)对人绒毛膜上皮癌细胞系JEG-3侵润性的调节
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作者 刘璟 王雁玲 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第3期378-384,共7页
促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)是生殖过程中起重要调节作用的激素.近年来的研究发现,Ⅰ型GnRH(GnRHⅠ)和Ⅱ型GnRH(GnRHⅡ)在胎盘和胎盘来源的滋养层细胞中发挥生理功能.利用人滋养层细胞模型人绒毛膜上皮癌... 促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)是生殖过程中起重要调节作用的激素.近年来的研究发现,Ⅰ型GnRH(GnRHⅠ)和Ⅱ型GnRH(GnRHⅡ)在胎盘和胎盘来源的滋养层细胞中发挥生理功能.利用人滋养层细胞模型人绒毛膜上皮癌细胞系(JEG-3)细胞,探讨GnRHⅠ和GnRHⅡ对人滋养层细胞侵润的调节作用.荧光实时定量PCR证实,GnRHⅠ和GnRHⅡ可调节JEG-3细胞中经典GnRH受体(GnRHRⅠ)的表达.RNA干扰实验显示,特异性针对GnRHRⅠ的siRNA可显著阻断GnRHⅠ对JEG-3细胞的促侵润作用,但不能影响GnRHⅡ的促细胞侵润功能,提示GnRHⅡ可能通过经典GnRH受体以外的其他受体介导,以发挥促进滋养层细胞侵润的功能.对信号通路的进一步研究表明,GnRHⅠ和GnRHⅡ通过ERK和JNK激酶级联促进基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达,以调节细胞的侵润. 展开更多
关键词 促性腺激素释放激素 人绒毛上皮细胞系(JEG-3细胞) 细胞侵润 ERK JNK
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β-桐酸对人绒毛膜上皮癌JEG-3细胞凋亡的影响
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作者 赵婉茹 谢煜萍 +1 位作者 王际辉 王晗 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2020年第22期310-315,共6页
目的:研究β-桐酸对人绒毛膜上皮癌JEG-3细胞凋亡的影响,初步探讨其作用机制。方法:以不同浓度的β-桐酸处理体外培养的绒癌JEG-3细胞,应用MTT实验检测细胞相对活力;应用乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放法检测β-桐酸对JEG-... 目的:研究β-桐酸对人绒毛膜上皮癌JEG-3细胞凋亡的影响,初步探讨其作用机制。方法:以不同浓度的β-桐酸处理体外培养的绒癌JEG-3细胞,应用MTT实验检测细胞相对活力;应用乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放法检测β-桐酸对JEG-3细胞的毒性作用;通过流式细胞术和蛋白免疫印迹法分析细胞凋亡的变化;活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平通过对2',7'-二氯荧光素(2',7'-dichlorofluorescein,DCF)荧光强度的检测确定;应用ROS抑制剂N-乙酰-L-半胱氨酸(N-Acetyl-L-Cysteine,NAC)分析ROS在β-桐酸对JEG-3细胞活力影响中的作用。结果:β-桐酸对JEG-3细胞活力有明显的抑制作用,且呈剂量和时间依赖性(P<0.05);β-桐酸显著促进LDH的释放和JEG-3细胞的凋亡(P<0.05),凋亡相关蛋白Caspase-3的表达水平与Bax/Bcl-2的表达比例均上调,进一步证明β-桐酸能够诱导JEG-3细胞凋亡;β-桐酸处理后,JEG-3细胞内ROS的含量上升,NAC能够显著拮抗β-桐酸对JEG-3细胞活力的抑制作用(P<0.05)。结论:β-桐酸能够诱导JEG-3细胞的凋亡,其作用可能与ROS的产生有关。 展开更多
关键词 β-桐酸 人绒毛上皮 细胞凋亡 活性氧
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