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人类趋化素样因子超家族2参与小鼠精子形成 被引量:1
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作者 张晓威 殷华奇 +4 位作者 李清 赵永平 Kite Brandes 白文俊 徐涛 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期228-233,共6页
目的:探究人类趋化素样因子超家族2(CKLF-like MARVEL transmembrane domain-containing protein 2,CMTM2)在小鼠精子生成过程中的作用。方法:构建CMTM2基因敲除小鼠模型,利用Northern、RT-PCR及Western印迹检测野生型、杂合子及纯合子... 目的:探究人类趋化素样因子超家族2(CKLF-like MARVEL transmembrane domain-containing protein 2,CMTM2)在小鼠精子生成过程中的作用。方法:构建CMTM2基因敲除小鼠模型,利用Northern、RT-PCR及Western印迹检测野生型、杂合子及纯合子小鼠的CMTM2表达水平,统计小鼠生育幼崽数量及生育率,采集并分析精子活动度、形态及睾丸组织切片,检验血清睾酮及促卵泡激素(follicle-stimulating hormone,FSH)水平。结果:CMTM2在小鼠生精中呈现准确的调控式高度表达,基因敲除的成年小鼠和野生型成年小鼠在体重上差异没有统计学意义。纯合子的小鼠睾丸体积及重量小于野生型小鼠睾丸,野生型小鼠与CMTM2敲除小鼠的睾丸长径比较,差异有统计学意义[(11.32±1.21)mm vs.(8.29±1.92)mm,P<0.05],睾丸重量比较,差异有统计学意义[(101.63±2.33)mg vs.(85.22±2.84)mg,P<0.05]。与野生型小鼠相比,杂合子精子数量明显减少,纯合子小鼠精子发生停滞。在精子形态学方面,与野生型小鼠相比,杂合子小鼠有更多圆形精子,而纯合子则因精子发育停滞,多为圆形精子细胞。睾酮和FSH在3组间差异无统计学意义。纯合子雄性小鼠由于精子发生停滞而不育,纯合子小鼠缺失生精上皮层。结论:CMTM2在生精过程中发挥着不可或缺的作用,其参与精子发生的潜在机制有待于进一步实验研究以证实。 展开更多
关键词 人类趋化素样因子超家族2 精子 基因敲除小鼠模型 精子生成
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人类趋化素样因子超家族2在精索静脉曲张大鼠模型中的表达 被引量:2
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作者 张晓威 顿耀军 +5 位作者 唐旭 殷华奇 胡志平 赵永平 徐涛 李清 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期579-583,共5页
目的:通过建立精索静脉曲张大鼠模型,探讨人类趋化素样因子超家族2(chemokine like factor-like myelin and lymphocyte and related proteins for vesicle trafficking and membrane link transmembrane domain-containing protein ... 目的:通过建立精索静脉曲张大鼠模型,探讨人类趋化素样因子超家族2(chemokine like factor-like myelin and lymphocyte and related proteins for vesicle trafficking and membrane link transmembrane domain-containing protein 2, CMTM2)对精索静脉曲张大鼠生精过程的影响。方法:选取雄性 SD 大鼠40只(体重220~330 g,6~7周龄),将大鼠随机分为精索静脉曲张持续4、12周后处死取样组,和相应的接受假手术处理的对照组,每组均为10只大鼠。通过手术进行左肾静脉缩窄建立左侧精索静脉曲张的大鼠模型。将实验组和对照组大鼠于4周或12周后处死,取出左侧睾丸,游离附睾中精子,观察并计算精子密度与活力,测量生精小管外径、内径及上皮直径改变,并进行免疫组织化学分析以判断 CMTM2蛋白的表达状况。结果:与对照组相比,精索静脉曲张4周组中大鼠的精子密度[(63.9±7.1)×106/mL vs.(74.3±5.0)×106/mL]和活力[(58.7%±7.9%)vs.(66.1%±4.3%)]轻度下降(t =1.432,1.563;P =0.076,0.059),精索静脉曲张12周组中大鼠的精子密度[(40.5±7.2)×106/mL vs.(71.1±4.5)×106/mL]和活力[(35.2%±8.5%)vs.(63.4%±4.1%)]显著下降(t =3.754,3.933;P =0.004,0.002)。此外,CMTM2蛋白的表达水平在精索静脉曲张组也出现明显下降,对照组 CMTM2水平为精索静脉曲张12周组的(2.3±0.4)倍(t =1.978;P =0.039)。4周时,精索静脉曲张组生精小管外径出现轻度降低[(271.1±8.4)μm vs.(280.0±8.1)μm,t =1.361,P =0.132],而12周组则出现明显降低[(198.2±10.2)μm vs.(255.8±12.7)μm,t =2.125,P =0.003],此外,精索静脉曲张12周组的生精小管上皮直径出现明显下降[(54.1±1.5)μm vs.(75.5±4.1)μm,t =2.246,P =0.021]。结论:在精索静脉曲张大鼠模型中,精索静脉曲张与CMTM2蛋白水平降低相关,同时可导致睾丸生精小管直径变小及精子密度与质量受损。 展开更多
关键词 趋化因子 精子发生 精索静脉曲张
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趋化素样因子超家族成员5研究进展 被引量:4
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作者 袁也晴 萧云备 +3 位作者 刘振华 张晓威 徐涛 王晓峰 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期625-628,共4页
趋化素样因子超家族(CMTM)是北京大学人类疾病基因研究中心在国际上首次报道的新基因家族,CMTM5是该家族成员,其基因编码产物具有潜在的四次跨膜蛋白结构,是一个新的肿瘤抑制基因。研究表明,CMTM5广泛表达于人类正常组织,在大多数肿瘤... 趋化素样因子超家族(CMTM)是北京大学人类疾病基因研究中心在国际上首次报道的新基因家族,CMTM5是该家族成员,其基因编码产物具有潜在的四次跨膜蛋白结构,是一个新的肿瘤抑制基因。研究表明,CMTM5广泛表达于人类正常组织,在大多数肿瘤细胞系和组织中表达明显下调或不表达,恢复其表达可抑制肿瘤细胞的增殖、黏附和迁移等生物行为。CMTM5抗肿瘤活性的机制尚不明确,可能参与了多个与癌症发生发展密切相关的信号通路。对CMTM5与肿瘤发生发展机制的进一步研究具有重要意义,其有望成为肿瘤基因治疗的新靶标。 展开更多
关键词 趋化因子超家族成员5 四次跨膜蛋白超家族 肿瘤抑制基因
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趋化素样因子超家族6在乳腺癌组织中的表达及其与临床病理特征和预后的关系 被引量:5
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作者 杨小骏 韦俐 +5 位作者 郑晓 徐斌 王琦 刘颖婷 张大川 蒋敬庭 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期391-395,共5页
目的:探讨趋化素样因子超家族6(chemokine-like factor-like MARVEL transmembrane domain-containing family member 6,CMTM6)在乳腺癌组织中的表达及其与患者临床病理特征和预后的相关性。方法:选用购自芯超公司的136例乳腺癌组织芯片... 目的:探讨趋化素样因子超家族6(chemokine-like factor-like MARVEL transmembrane domain-containing family member 6,CMTM6)在乳腺癌组织中的表达及其与患者临床病理特征和预后的相关性。方法:选用购自芯超公司的136例乳腺癌组织芯片,其中包括42例配对的癌及癌旁组织,用免疫组织化学染色法检测乳腺癌及癌旁组织中CMTM6的表达水平。用配对χ~2检验比较CMTM6在乳腺癌及癌旁组织中的表达差异,用χ~2检验分析乳腺癌组织中CMTM6表达水平与患者临床病理特征的关系,用Kaplan-Meier及Log rank分析CMTM6表达水平与患者生存期的关系,拟合Cox模型评价不同指标对患者预后的影响程度。结果:CMTM6在乳腺癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织(P<0.01)。CMTM6的表达与乳腺癌病理分型和HER2阳性相关(P<0.05)。CMTM6高表达组患者的生存期较CMTM6低表达组显著缩短(P<0.05)。乳腺癌病理分型(HR=10.374,95%CI:3.529~30.497,P<0.01)、TNM分期(HR=4.599,95%CI:1.784~11.856,P<0.01)、三阴性乳腺癌(HR=3.370,95%CI:1.055~10.761,P<0.05)和CMTM6高表达(HR=0.195,95%CI:0.073~0.518,P<0.01)均可作为评判乳腺癌患者预后的独立危险因素。结论:CMTM6在乳腺癌组织中高表达,其可作为乳腺癌患者预后评估的危险因素。 展开更多
关键词 乳腺癌 趋化因子超家族6 组织芯片 预后
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趋化素样因子超家族8研究进展 被引量:3
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作者 高等会 胡浩 +4 位作者 方志伟 霍飞 王焕瑞 许克新 王晓峰 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期746-749,共4页
趋化素样因子超家族(CMTM)是北京大学人类疾病基因研究中心在国际上首次报道的新基因家族,CMTM8是该家族成员,其基因编码产物具有潜在的4次跨膜蛋白结构,是一个新的肿瘤抑制基因。CMTM8在多数肿瘤细胞系和组织中表达明显下调或不表达,... 趋化素样因子超家族(CMTM)是北京大学人类疾病基因研究中心在国际上首次报道的新基因家族,CMTM8是该家族成员,其基因编码产物具有潜在的4次跨膜蛋白结构,是一个新的肿瘤抑制基因。CMTM8在多数肿瘤细胞系和组织中表达明显下调或不表达,过表达可抑制肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭功能。CMTM8抗肿瘤的机制尚未完全明确,可能参与多个与癌症发生发展密切相关的信号通路。对CMTM8与肿瘤发生发展机制的进一步研究具有重要意义,其有望成为肿瘤基因治疗的新靶标。 展开更多
关键词 趋化因子超家族8 4次跨膜蛋白超家族 肿瘤抑制基因
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趋化素样因子超家族成员3研究进展 被引量:2
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作者 胡风战 盛正祚 +1 位作者 秦彩朋 徐涛 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期360-363,共4页
人趋化素样因子超家族成员3(CKLFSF3/CMTM3)是一种新发现的肿瘤抑制基因,在进化过程中高度保守,广泛表达于人类正常组织,尤其在睾丸、脾、白细胞中高度表达,但在大多数肿瘤细胞系和组织中表达下调或不表达,恢复其表达可抑制肿瘤细胞的... 人趋化素样因子超家族成员3(CKLFSF3/CMTM3)是一种新发现的肿瘤抑制基因,在进化过程中高度保守,广泛表达于人类正常组织,尤其在睾丸、脾、白细胞中高度表达,但在大多数肿瘤细胞系和组织中表达下调或不表达,恢复其表达可抑制肿瘤细胞的增殖、黏附和迁移等生物学行为。CKLFSF3/CMTM3的抗肿瘤机制目前尚不明确,研究显示其在肿瘤发生发展过程中与机体免疫系统密切相关,并与性别相关。本文总结了CKLFSF/CMTM家族成员、肿瘤抑制基因CKLFSF3/CMTM3的结构功能特点及进展。 展开更多
关键词 趋化因子超家族成员3 肿瘤抑制基因 MARVEL
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趋化素样因子超家族成员在肿瘤中的研究进展 被引量:3
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作者 谢刚 成婧 张俊萍 《中国肺癌杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期46-51,共6页
趋化素样因子超家族成员(chemokine-like factor-like MARVEL transmembrane domain containing member/chemokine-like factor superfamily member,CMTM/CKLFSF)是连接趋化因子和跨膜超家族的一组新的蛋白家族,包括CKLF和CMTM1-CMTM8。... 趋化素样因子超家族成员(chemokine-like factor-like MARVEL transmembrane domain containing member/chemokine-like factor superfamily member,CMTM/CKLFSF)是连接趋化因子和跨膜超家族的一组新的蛋白家族,包括CKLF和CMTM1-CMTM8。CMTM除了具有广泛的趋化活性外,还与造血系统、免疫系统以及肿瘤的发生、发展和转移密切相关。CMTM蛋白参与癌症发展中的关键生物学过程,包括生长因子受体的激活和循环、细胞的增殖与转移以及肿瘤免疫微环境的调节。随着研究发现CMTM4、CMTM6可作为程序性死亡配体1(programmed cell death ligand 1,PD-L1)的调控器,关于CMTM与肿瘤之间的关系重新成为研究热点。本文对CMTM家族成员在癌症中作用进行综述,特别是在肿瘤生长、转移和免疫逃逸中的研究进展,并总结CMTM与非小细胞肺癌之间关系的最新研究结果,探讨CMTM作为新型药物靶点或生物标志物的潜在临床价值。 展开更多
关键词 趋化因子 CKLF CMTM 肿瘤 生物标志物
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趋化素样因子(CKLF1)对骨髓细胞增殖活性的研究 被引量:42
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作者 韩文玲 芮珉 +5 位作者 张颖妹 陈英玉 钟英成 狄春辉 宋泉声 马大龙 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期119-122,共4页
目的 研究趋化素样因子 1(CKLF1)对造血功能的调节作用。方法 利用 MTT法,检测 CKLF1真核细胞表达载体转染上清在液体培养基中,对人低密度骨髓细胞和小鼠骨髓细胞的增殖调控作用;并在半固体培养基中,观察其对人低密度骨髓细胞集落... 目的 研究趋化素样因子 1(CKLF1)对造血功能的调节作用。方法 利用 MTT法,检测 CKLF1真核细胞表达载体转染上清在液体培养基中,对人低密度骨髓细胞和小鼠骨髓细胞的增殖调控作用;并在半固体培养基中,观察其对人低密度骨髓细胞集落形成的刺激作用。结果 COS-7细胞表达的 CKLF1能明显促进人和小鼠骨髓细胞的增殖,并能促进人骨髓细胞的集落形成,与 GM-CSF有协同刺激作用。结论 CKLF1能促进人和小鼠骨髓造血干 展开更多
关键词 趋化因子1 造血干细胞 集落形成 骨髓细胞增殖
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大鼠趋化素样因子2 mRNA在心肌梗死大鼠心脏中的表达 被引量:14
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作者 龚艳君 洪涛 +4 位作者 蒋捷 于雪 卜定方 霍勇 高炜 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期438-440,共3页
目的 :观察大鼠趋化素样因子 2 (rCKLF2 )的mRNA在心肌梗死后大鼠心脏组织的表达。方法 :构建大鼠心肌梗死模型 ,分别于心肌梗死后 1d、3d、1周、2周、3周 (每个时间点各 5例 ) ,取心肌梗死周边区心肌组织 ,提取组织总RNA ,逆转录后行... 目的 :观察大鼠趋化素样因子 2 (rCKLF2 )的mRNA在心肌梗死后大鼠心脏组织的表达。方法 :构建大鼠心肌梗死模型 ,分别于心肌梗死后 1d、3d、1周、2周、3周 (每个时间点各 5例 ) ,取心肌梗死周边区心肌组织 ,提取组织总RNA ,逆转录后行竞争性PCR ,了解rCKLF2mRNA的表达情况。结果 :rCKLF2mRNA在梗死心肌周边区的表达于术后上调 ,并呈动态变化 ,1周达峰值 ,为正常的 6 .7倍。结论 展开更多
关键词 大鼠 趋化因子 2mRNA 心肌梗死 心脏 表达 聚合酶链反应
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趋化素样因子-1在狼疮性肾炎患者肾组织中的表达 被引量:6
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作者 季迎 张浩 +3 位作者 袁洪 阳国平 张柯 谢丽华 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期490-493,共4页
目的:探讨趋化素样因子-1(chemokine like factor-1,CKLF-1)在狼疮性肾炎的发生、发展过程中的作用。方法:对34例确诊为狼疮性肾炎以及10例对照组患者的肾组织进行免疫组织化学染色,在光镜下观察肾小球CKLF-1阳性细胞率和CKLF-1阳性肾... 目的:探讨趋化素样因子-1(chemokine like factor-1,CKLF-1)在狼疮性肾炎的发生、发展过程中的作用。方法:对34例确诊为狼疮性肾炎以及10例对照组患者的肾组织进行免疫组织化学染色,在光镜下观察肾小球CKLF-1阳性细胞率和CKLF-1阳性肾小管百分率及反应强度。结果:狼疮性肾炎患者的肾小球CKLF-1阳性细胞率和CKLF-1阳性肾小管百分率分别为10.4%±1.5%和48.9%±4.3%,与对照组患者4.6%±1.1%和4.3%±0.9%比较均有统计学差异(P<0.01)。CKLF-1在狼疮性肾炎患者的肾小球阳性细胞率和阳性肾小管百分率与狼疮性肾炎活动指数间均存在显著相关性,相关系数分别为0.74和0.53(P<0.05)。结论:CKLF-1参与了狼疮性肾炎的发生、发展过程。 展开更多
关键词 系统性红斑狼疮 狼疮性肾炎 趋化因子 趋化因子-1
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趋化素样因子2 mRNA在心肌肥厚大鼠心肌中的表达 被引量:6
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作者 任鸿坤 洪涛 +4 位作者 蒋捷 龚艳君 王志坚 卜定方 周爱儒 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期399-402,共4页
目的 :检测趋化素样因子 2 (chemokine likefactor 2 ,CKLF2 )mRNA在心肌肥厚大鼠心肌中的表达。方法 :实验组以手术缩窄大鼠腹主动脉致心肌肥厚 ,对照为假手术组 ;应用竞争PCR方法检测两组左心室CKLF2mRNA表达差异。结果 :与假手术组相... 目的 :检测趋化素样因子 2 (chemokine likefactor 2 ,CKLF2 )mRNA在心肌肥厚大鼠心肌中的表达。方法 :实验组以手术缩窄大鼠腹主动脉致心肌肥厚 ,对照为假手术组 ;应用竞争PCR方法检测两组左心室CKLF2mRNA表达差异。结果 :与假手术组相比 ,手术组术后早期 (第 1 7天 )心肌中CKLF2mRNA表达增高 ,第 4 5天时降到假手术组水平。结论 展开更多
关键词 趋化因子2 CKLF2 MRNA 心肌肥厚 大鼠 心肌 基因表达 心血管疾病
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趋化素样因子1(CKLF1)对关节软骨细胞增殖及代谢的影响 被引量:6
12
作者 程爱新 韩文玲 +1 位作者 马大龙 娄思权 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期399-401,共3页
目的 :研究趋化素样因子 1(CKLF1)对兔关节软骨细胞增殖及代谢的调节作用。方法 :采用体外细胞培养技术及同位素参入法 ,检测CKLF1真核表达载体转染 2 93T细胞所得条件培养基对软骨细胞DNA、胶原及蛋白多糖合成能力的影响。结果 :在含 5... 目的 :研究趋化素样因子 1(CKLF1)对兔关节软骨细胞增殖及代谢的调节作用。方法 :采用体外细胞培养技术及同位素参入法 ,检测CKLF1真核表达载体转染 2 93T细胞所得条件培养基对软骨细胞DNA、胶原及蛋白多糖合成能力的影响。结果 :在含 5 % (体积分数 )胎牛血清 (FCS)的DMEM培养条件下 ,转染后 2 93T细胞表达的CKLF1可抑制兔关节软骨细胞DNA、胶原及蛋白多糖的合成 ,并可促进诱导性一氧化氮合酶 (iNOS)的转录。结论 :CKLF1可能通过提高iNOS的表达抑制关节软骨细胞增殖、胶原及蛋白多糖的合成。 展开更多
关键词 趋化因子1 CKLF1 关节软骨细胞增殖 代谢 细胞培养
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神经生长因子抗体对哮喘模型大鼠肺中趋化素样因子1表达的影响 被引量:5
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作者 孔令雷 胡金凤 陈乃宏 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期757-760,共4页
目的观察神经生长因子(NGF)抗体对OVA诱导的哮喘模型大鼠肺中趋化因子CKLF1的表达变化。方法采用OVA诱导的大鼠哮喘模型,通过腹腔给予NGF(8 ng.kg-1)及NGF抗体(0.1 mg.L-1),采用Western blot、ELISA和免疫组化观察CKLF1在支气管肺泡灌洗... 目的观察神经生长因子(NGF)抗体对OVA诱导的哮喘模型大鼠肺中趋化因子CKLF1的表达变化。方法采用OVA诱导的大鼠哮喘模型,通过腹腔给予NGF(8 ng.kg-1)及NGF抗体(0.1 mg.L-1),采用Western blot、ELISA和免疫组化观察CKLF1在支气管肺泡灌洗液(BALF)及肺组织中的表达变化。结果 CKLF1在OVA诱导的哮喘模型大鼠肺组织中的蛋白表达升高(P<0.05);NGF抗体能够降低CKLF1的表达;CKLF1在哮喘大鼠BALF中的含量升高(P<0.05),NGF抗体能够降低BALF中CKLF1的含量(P<0.05);NGF对肺组织及BALF中CKLF1的表达没有明显的影响。结论 NGF抗体能够抑制哮喘模型大鼠肺组织及支气管肺泡灌洗液中CKLF1的表达和释放,改善哮喘症状。 展开更多
关键词 趋化因子1 神经生长因子 哮喘 OVA 支气管肺泡灌洗液 表达定位
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抗人趋化素样因子1羧基端多肽抗体的制备、鉴定及组织芯片分析 被引量:2
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作者 石爽 张颖妹 +7 位作者 邱晓彦 朱晓辉 刘雅楠 甘启霓 杨田 宋泉声 马大龙 韩文玲 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期496-499,i001,共5页
目的制备及鉴定抗人趋化素样因子1(CKLF1)多克隆抗体,为CKLF1表达和功能研究提供基础。方法利用生物信息学方法分析CKLF1蛋白序列,设计、合成CKLF1羧基端多肽,与钥孔戚血蓝素穴KLH雪偶联,免疫新西兰白兔获得多克隆抗体。经ELISA法测定... 目的制备及鉴定抗人趋化素样因子1(CKLF1)多克隆抗体,为CKLF1表达和功能研究提供基础。方法利用生物信息学方法分析CKLF1蛋白序列,设计、合成CKLF1羧基端多肽,与钥孔戚血蓝素穴KLH雪偶联,免疫新西兰白兔获得多克隆抗体。经ELISA法测定抗体效价,Western-blot鉴定抗体与原核细胞体外翻译和果蝇S2细胞稳定转染表达的CKLF1反应,组织芯片检测该抗体与内源性表达的CKLFs结合。结果抗CKLF1C端多肽抗体的效价为10-4,能识别在原核细胞体外翻译系统和真核细胞中表达的CKLF1蛋白,也可与多种组织中天然表达的CKLFs发生特异性反应熏在正常支气管软骨、胃粘膜和平滑肌中呈阳性表达,在正常直肠和高分化直肠癌的腺上皮中呈强阳性表达,而在低分化的直肠癌中为阴性。结论抗CKLF1多克隆抗体效价高,亲和力强,可用于CKLF1的检测和研究。 展开更多
关键词 趋化因子1 抗多肽抗体 组织芯片
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趋化素样因子1对肾癌细胞ACHN生物活性的影响及其相关机制
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作者 宣成睿 塔拉 +1 位作者 王翠艳 徐晓艳 《科学技术与工程》 北大核心 2022年第34期15088-15094,共7页
多项研究发现,趋化素样因子1(chemokine-like factor 1,CKLF1)是人类多种肿瘤发生和进展的重要调节因子。然而,关于CKLF1对肾癌细胞生物活性的影响知之甚少。通过质粒转染实现CKLF1在肾癌细胞ACHN中过表达,探究CKLF1对肾癌细胞ACHN细胞... 多项研究发现,趋化素样因子1(chemokine-like factor 1,CKLF1)是人类多种肿瘤发生和进展的重要调节因子。然而,关于CKLF1对肾癌细胞生物活性的影响知之甚少。通过质粒转染实现CKLF1在肾癌细胞ACHN中过表达,探究CKLF1对肾癌细胞ACHN细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。将实验组pEGFP-N1-CKLF1和对照组pEGFP-N1真核细胞表达质粒分别转染肾癌ACHN细胞,实现趋化素样因子1在ACHN细胞中的过表达。利用荧光显微镜,镜下观察质粒转染效率。利用细胞计数试剂盒8(cell counting Kit-8,CCK8)观察肾癌细胞ACHN转染24、48、72 h后增殖情况;利用流式细胞术检测ACHN细胞转染24、48、72 h后细胞周期的变化情况;利用Hoechst33258染色法观察转染48 h后,ACHN细胞形态变化,利用流式细胞术检测各组细胞凋亡率。采用Western blot法检测CKLF1过表达后,细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、Bcl-2样蛋白1(Bcl-2 like 1,Bcl-xL)、信号传导及转录激活因子3(signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)、磷酸化信号传导及转录激活因子3(phosphorylation signal transducers and activators of transcription 3,P-STAT3)表达情况。研究结果显示:荧光显微镜下90%以上的细胞有绿色荧光蛋白表达,证明转染效率良好。CCK8检测结果显示:转染48、72 h后,实验组肾癌细胞ACHN的增殖情况均明显高于对照组,差异有显著性意义48 h(P<0.05),72 h(P<0.05);流式细胞术检测结果显示:实验组增值指数PI明显高于对照组,差异有显著性意义24 h(P<0.01),48 h(P<0.01),72 h(P<0.01)。荧光显微镜下Hoechst染色结果显示:与对照组相比较,实验组凋亡小体数量较少。流式细胞术检测结果显示,与对照组相比较,转染后48 h后实验组细胞凋亡率明显降低(P<0.05)。Western blot结果:与对照组相比较,周期相关蛋白Cyclin D1表达明显高于对照组,差异有显著性意义(P<0.05);实验组凋亡相关蛋白Bcl-xL表达量明显高于对照组(P<0.05);实验组JAK激酶(Janus kinase,JAK/STAT3,JAK-STAT3)信号通路蛋白P-STAT3明显高于对照组(P<0.05)。趋化素样因子1过表达可促进肾癌细胞ACHN的增殖、抑制其凋亡,其发生机制可能与JAK-STAT3信号通路有关。CKLF1可能是肾透明细胞癌的新的治疗靶点。 展开更多
关键词 肾癌 趋化因子1 凋亡
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肾透明细胞癌组织和细胞系趋化素样因子1的表达及其临床意义 被引量:4
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作者 塔拉 宣成睿 《科学技术与工程》 北大核心 2021年第28期12066-12071,共6页
趋化素样因子1(chemokine-like factor 1,CKLF1)在多种恶性肿瘤中发挥了不同的生物学作用,为探讨CKLF1在肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)组织及细胞系中表达水平并分析其临床意义。利用免疫组化法、蛋白质印迹和... 趋化素样因子1(chemokine-like factor 1,CKLF1)在多种恶性肿瘤中发挥了不同的生物学作用,为探讨CKLF1在肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)组织及细胞系中表达水平并分析其临床意义。利用免疫组化法、蛋白质印迹和实时定量PCR法,检测CKLF1在肾透明细胞癌组织和肾癌细胞系中的表达水平,并分析肾透明细胞癌组织中CKLF1表达水平与临床病理Fuhrman分级之间的相关性。免疫组化结果显示:CKLF1在肾透明细胞癌组织和癌旁组织中的表达,差异有显著性(P<0.05);CKLF1表达水平的高低在临床病理各分级之间无明显差异(P>0.05)。Western blot结果显示:CKLF1蛋白在3种细胞系ACHN、Caki、HKC中的表达差异有统计学意义(P<0.05);qRT-PCR结果显示,CKLF1 mRNA在3种细胞系ACHN、Caki、HKC中的表达差异有统计学意义(P<0.05)。CKLF1的表达在肾透明细胞癌组织中和肾癌细胞系ACHN、Caki中明显上调,CKLF1是一个潜在的肾透明细胞癌分子标志物。 展开更多
关键词 肾透明细胞癌(ccRCC) 趋化因子1(CKLF1) 细胞因子 分子靶点
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北京大学人民医院对趋化素样因子1的研究取得重要阶段性成果
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《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期965-965,共1页
趋化素样因子1(Cklf1)是北京大学医学部免疫学系韩文玲教授利用抑制性消减杂交技术(SSH)在国际上首次克隆到的一个新的、有自主知识产权的细胞因子,初步研究认为它是一种具有广谱趋化活性的趋化因子,而正是趋化因子对炎性细胞的吸... 趋化素样因子1(Cklf1)是北京大学医学部免疫学系韩文玲教授利用抑制性消减杂交技术(SSH)在国际上首次克隆到的一个新的、有自主知识产权的细胞因子,初步研究认为它是一种具有广谱趋化活性的趋化因子,而正是趋化因子对炎性细胞的吸引和活化引起炎性细胞浸润, 展开更多
关键词 趋化因子1 北京大学人民医院 抑制性消减杂交技术 炎性细胞浸润 北京大学医学部 自主知识产权 趋化因子 细胞因子
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人类新细胞因子CKLFSF2羧基端蛋白在大肠杆菌中的表达纯化、抗体制备与鉴定 被引量:1
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作者 钟英成 石爽 +5 位作者 张颖妹 莫晓宁 刘大振 宋泉声 韩文玲 王应 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第1期93-99,共7页
哺乳动物细胞表达的人类新细胞因子——趋化素样因子超家族成员-2(CKLFSF2)存在分泌形式,位于CKLFSF2分子的羧基端,具有细胞趋化作用.为进一步研究CKLFSF2羧基端蛋白的结构和生物学功能及抗体制备,构建了GST-CKLFSF2C51原核表达质粒,经... 哺乳动物细胞表达的人类新细胞因子——趋化素样因子超家族成员-2(CKLFSF2)存在分泌形式,位于CKLFSF2分子的羧基端,具有细胞趋化作用.为进一步研究CKLFSF2羧基端蛋白的结构和生物学功能及抗体制备,构建了GST-CKLFSF2C51原核表达质粒,经原核表达、亲和层析、凝胶过滤,获得GST-CKLFSF2C51融合蛋白和CKLFSF2羧基端蛋白(CKLFSF2C51),纯度可达到95%以上.GST-CKLFSF2C51融合蛋白用于制备多克隆抗体,ELISA方法检测抗体效价阳性,蛋白质印迹检测CKLFSF2哺乳动物细胞超表达细胞裂解液,获得特异性条带与预期大小一致.CKLFSF2C51经N端测序,质谱鉴定与预期结果一致,该蛋白质具有对PC-3细胞趋化的活性,并且该活性可被制备的多克隆抗体中和.上述结果表明,原核CKLFSF2羧基端蛋白具有与CKLFSF2真核表达蛋白类似的细胞趋化活性,原核CKLFSF2羧基端蛋白制备的多克隆抗体可用于免疫组织化学、蛋白质印迹检测,并能中和CKLFSF2蛋白的趋化活性作用. 展开更多
关键词 趋化因子超家族成员-2 重组蛋白纯化 多克隆抗体 趋化 免疫组织化学 抗体中和作用
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CMTM家族成员在肿瘤细胞中的分子机制及潜在临床价值 被引量:3
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作者 姜辉 牟笑笑 杨晓云 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期28-34,共7页
恶性肿瘤已成为危害人类健康的重要杀手,针对肿瘤的研究也成为当今医学界的热点。含有MARVEL跨膜结构域的趋化素样因子基因家族(CKLF-like MARVEL transmembrane domain containing family of genes,CMTM family),原名人类趋化素样因子... 恶性肿瘤已成为危害人类健康的重要杀手,针对肿瘤的研究也成为当今医学界的热点。含有MARVEL跨膜结构域的趋化素样因子基因家族(CKLF-like MARVEL transmembrane domain containing family of genes,CMTM family),原名人类趋化素样因子超家族(chemokine-like factor super family,CKLFSF)是由我国学者首次发现的新的基因家族,有着广泛的生物学功能,与人体免疫、造血和生殖系统以及肿瘤具有密切关系。CMTM家族在多种常见肿瘤中表达失调,能够参与多种与癌症发生发展密切相关的信号通路,与肿瘤细胞生物学行为改变有着密切关系。CMTM家族成员在调控肿瘤细胞生物学功能的信号分子机制中具有重要作用,其能够调控肿瘤细胞的细胞周期与细胞凋亡进程、上皮-间充质转化进程和表皮生长因子受体相关的信号通路,并通过调节程序性死亡受体-配体1与肿瘤免疫微环境密切相关。本文综述了CMTM家族在肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡等生物过程中的信号分子机制,以及CMTM家族在卵巢癌、乳腺癌、肝癌、胃癌、结直肠癌、胰腺癌等多种常见恶性肿瘤中潜在的临床价值。目前,CMTM家族与肿瘤相关的详尽分子机制尚未完全明确。深入研究CMTM家族在肿瘤中表达、生物学作用以及调控机制将会为肿瘤的诊断、治疗以及预测预后等方面提供新的思路和靶点。 展开更多
关键词 人类趋化素样因子超家族 肿瘤 细胞信号通路 临床价值
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鳖甲煎丸通过CMTM6抑制Hep3B细胞的恶性生物学行为
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作者 李尹凡 徐隽婕 +6 位作者 兰涛 李玉凤 李鑫 张荣花 黄金平 朱丽华 章广玲 《西安交通大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第3期522-531,共10页
目的探讨鳖甲煎丸(Biejiajian Pill,BJJP)对肝癌Hep3B细胞恶性生物学行为的作用及调控机制。方法将72只健康SD大鼠随机分为空白对照(BC)组、低剂量(0.55 g/kg)、中剂量(1.10 g/kg)、高剂量(2.20 g/kg)BJJP实验组,制备含药血清。将Hep3B... 目的探讨鳖甲煎丸(Biejiajian Pill,BJJP)对肝癌Hep3B细胞恶性生物学行为的作用及调控机制。方法将72只健康SD大鼠随机分为空白对照(BC)组、低剂量(0.55 g/kg)、中剂量(1.10 g/kg)、高剂量(2.20 g/kg)BJJP实验组,制备含药血清。将Hep3B细胞分为BC组、正常大鼠血清处理(NC)组、低剂量BJJP(LBJJP)组、中剂量BJJP(MBJJP)组、高剂量BJJP(HBJJP)组;空载质粒(pcDNA3.1)组和趋化素样因子超家族成员6(CKLF-like MARVEL transmembrane domain containing 6,CMTM6)过表达(pcDNA3.1-CMTM6)组;以及NC+pcDNA3.1组、MBJJP+pcDNA3.1组、NC+pcDNA3.1-CMTM6组和MBJJP+pcDNA3.1-CMTM6组。CCK-8检测肝癌Hep3B细胞的增殖;Transwell实验检测肝癌Hep3B细胞的迁移和侵袭;Western blotting实验检测肝癌Hep3B细胞中增殖相关蛋白增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin和Vimentin)以及CMTM6蛋白的表达。结果与BC组相比,NC组Hep3B细胞增殖、迁移、侵袭能力以及PCNA、EMT相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin和Vimentin)、CMTM6蛋白的表达均无统计学差异(P>0.05)。与NC组相比,LBJJP、MBJJP和HBJJP含药血清均能抑制Hep3B细胞的增殖、迁移和侵袭数量,下调PCNA的蛋白表达,MBJJP和HBJJP均能上调E-cadherin的蛋白表达,下调N-cadherin、Vimentin和CMTM6的蛋白表达,差异均具有统计学意义(P<0.05)。与pcDNA3.1组相比,pcDNA3.1-CMTM6组Hep3B细胞增殖、迁移、侵袭受到抑制,E-cadherin的蛋白表达显著下调,而PCNA、N-cadherin和Vimentin蛋白表达显著上调,差异均具有统计学意义(P<0.05)。与NC+pcDNA3.1组相比,MBJJP+pcDNA3.1组Hep3B细胞增殖、迁移和侵袭能力降低,PCNA、Vimentin和N-cadherin蛋白表达降低,而E-cadherin蛋白表达升高;与NC+pcDNA3.1-CMTM6组相比,MBJJP+pcDNA3.1-CMTM6组Hep3B细胞的增殖、迁移和侵袭能力及PCNA、Vimentin、N-cadherin和E-cadherin蛋白表达得到了与上述相同的结果,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论BJJP可能通过调控CMTM6的表达抑制肝癌细胞Hep3B的增殖、迁移、侵袭及EMT等恶性生物学行为。 展开更多
关键词 鳖甲煎丸(BJJP) 肝细胞癌(HCC) 上皮-间充质转化(EMT) 趋化因子超家族成员6(CMTM6) 迁移 侵袭
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