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siRNA沉默G6PD表达对人皮肤黑色素瘤细胞生长及凋亡的影响
被引量：
7
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作者
朱月春
吕会茹
+1 位作者
李丹怡
童淑芬
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2008年第3期327-334,共8页
研究表明,葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)与肿瘤的发生、发展、临床表型及治疗和预后有关.为阐明G6PD与肿瘤的关系及其机理,针对人G6PD基因设计3条siRNA和一条无关序列,再据每一序列,合成两条互补并含siRNA正反义链的DNA,退火后与含GFP的载...
研究表明,葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)与肿瘤的发生、发展、临床表型及治疗和预后有关.为阐明G6PD与肿瘤的关系及其机理,针对人G6PD基因设计3条siRNA和一条无关序列,再据每一序列,合成两条互补并含siRNA正反义链的DNA,退火后与含GFP的载体pRNAT-U6.2/Lenti连接,转染人皮肤黑色素瘤A375细胞,Real-timePCR筛选有效的一条siRNA,经病毒颗粒包装和病毒生产并感染A375细胞,G418筛选后,挑取单个阳性克隆放大培养,Western blotting检测siRNA干扰G6PD效率为88.83%,构建成G6PD缺陷型A375稳转细胞(A375-G6PD!).与野生型A375细胞(A375-WT)比较,A375-G6PD!的G6PD活性仅为21.53%,细胞倍增时间延长,增殖被抑制,克隆形成率降低25%(P<0.05),凋亡细胞数增加2.86倍(P<0.01),SPF增加33.8%(P<0.05),PI增加59.7%(P<0.01),G0/G1期下降27.7%(P<0.01),凋亡相关蛋白P53下降54.7%(P<0.01)、Caspase-3增加2.2倍(P<0.01)和Bcl-2降低21.7%(P>0.05),提示,G6PD缺陷可能通过下调P53蛋白表达和上调Caspase-3的表达,抑制G2/M期向G0/G1期转换的进程,促进A375的凋亡,机理有待于进一步探讨.
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关键词
SIRNA干扰
葡萄糖-6-磷酸脱氢酶
人皮肤黑色素瘤
稳转细胞株
细胞周期
P53
Caspase-3
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职称材料
题名
siRNA沉默G6PD表达对人皮肤黑色素瘤细胞生长及凋亡的影响
被引量：
7
1
作者
朱月春
吕会茹
李丹怡
童淑芬
机构
昆明医学院生物化学教研室
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2008年第3期327-334,共8页
基金
国家自然科学基金资助项目(30460049)~~
文摘
研究表明,葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)与肿瘤的发生、发展、临床表型及治疗和预后有关.为阐明G6PD与肿瘤的关系及其机理,针对人G6PD基因设计3条siRNA和一条无关序列,再据每一序列,合成两条互补并含siRNA正反义链的DNA,退火后与含GFP的载体pRNAT-U6.2/Lenti连接,转染人皮肤黑色素瘤A375细胞,Real-timePCR筛选有效的一条siRNA,经病毒颗粒包装和病毒生产并感染A375细胞,G418筛选后,挑取单个阳性克隆放大培养,Western blotting检测siRNA干扰G6PD效率为88.83%,构建成G6PD缺陷型A375稳转细胞(A375-G6PD!).与野生型A375细胞(A375-WT)比较,A375-G6PD!的G6PD活性仅为21.53%,细胞倍增时间延长,增殖被抑制,克隆形成率降低25%(P<0.05),凋亡细胞数增加2.86倍(P<0.01),SPF增加33.8%(P<0.05),PI增加59.7%(P<0.01),G0/G1期下降27.7%(P<0.01),凋亡相关蛋白P53下降54.7%(P<0.01)、Caspase-3增加2.2倍(P<0.01)和Bcl-2降低21.7%(P>0.05),提示,G6PD缺陷可能通过下调P53蛋白表达和上调Caspase-3的表达,抑制G2/M期向G0/G1期转换的进程,促进A375的凋亡,机理有待于进一步探讨.
关键词
SIRNA干扰
葡萄糖-6-磷酸脱氢酶
人皮肤黑色素瘤
稳转细胞株
细胞周期
P53
Caspase-3
Keywords
siRNA interference, glucose-6-phosphate dehydrogenase, human skin melanoma, stable cell strain,cell cycle, P53, Caspase-3
分类号
R73 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
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1
siRNA沉默G6PD表达对人皮肤黑色素瘤细胞生长及凋亡的影响
朱月春
吕会茹
李丹怡
童淑芬
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2008
7
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参考文献
引证文献
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