FGF18通过上调BMP2诱导人牙龈成纤维细胞向成骨样细胞分化

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作者 侯亚丽 刘慧娟 +4 位作者 张昊 孙婧媛 宋鹏 刘月瑶 李荷香 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第2期279-285,共7页

目的研究成纤维细胞生长因子18(FGF18)是否能诱导体外分离培养的人牙龈成纤维细胞(HGFs)向成骨样细胞分化,并探究其成骨机制。方法组织块法分离培养HGFs并鉴定。取第3代HGFs,分为实验组和对照组。实验组加入FGF18和L-DMEM、对照组加入L-... 目的研究成纤维细胞生长因子18(FGF18)是否能诱导体外分离培养的人牙龈成纤维细胞(HGFs)向成骨样细胞分化,并探究其成骨机制。方法组织块法分离培养HGFs并鉴定。取第3代HGFs,分为实验组和对照组。实验组加入FGF18和L-DMEM、对照组加入L-DMEM。噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度FGF18(0、0.01、0.02、0.04、0.06 mg/L)对HGFs增殖影响;碱性磷酸酶(ALP)和茜素红染色检测成骨能力和矿化能力;RT-PCR、免疫细胞化学染色及Western blot检测成骨相关基因、蛋白和BMP信号通路中BMP2基因和蛋白表达情况。结果与对照组比较,实验组培养3、5、7、9、11 d均可促进HGFs增殖(P<0.05);培养14、21 d ALP活性、矿物盐沉积均增高(P<0.05),ALP、OPN、OCN及BMP信号通路中BMP2 mRNA表达均明显增高(P<0.01)。培养21 d OPN、OCN及BMP2蛋白表达较培养14 d明显增高(P<0.01)。结论FGF18能促进HGFs增殖,诱导HGFs向功能性成骨样细胞分化,其成骨机制与上调BMP2有关。 展开更多

关键词 人牙龈成纤维细胞 FGF18 成骨 诱导 细胞分化 增殖

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3D打印钛合金表面氢化TiO_(2)纳米管对人牙龈成纤维细胞生物学行为影响的实验研究

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作者 郭雅彤 张正 +1 位作者 陈溯 张研 《口腔医学研究》 北大核心 2025年第7期607-614,共8页

目的:研究在3D打印钛合金(Ti 6Al 4V)表面制备氢化TiO_(2)纳米管,材料的表面性能及其对人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)生物学行为的影响。方法:应用选择性激光熔融技术(selective laser melting technology,SLM)制... 目的:研究在3D打印钛合金(Ti 6Al 4V)表面制备氢化TiO_(2)纳米管,材料的表面性能及其对人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)生物学行为的影响。方法:应用选择性激光熔融技术(selective laser melting technology,SLM)制备3D打印钛合金(3D-Ti),并进行电化学阳极氧化在其表面制备TiO_(2)纳米管得到3D-TNTs,对3D-TNTs进一步高温氢化处理,从而获取3D-H_(2)-TNTs。选取光滑的钛合金(MP-Ti)作为对照组,应用场发射扫描电镜(scanning electron microscopy,SEM)、接触角测量仪、表面粗糙度测量仪及原子力显微镜对MP-Ti、3D-Ti、3D-TNTs、3D-H_(2)-TNTs的表面形貌、亲水性、粗糙度进行测量及分析。在4组材料表面培养HGFs,应用SEM观察细胞黏附情况;应用荧光染色、细胞计数试剂盒检测细胞的早期黏附及增殖情况;应用荧光定量聚合酶链反应(fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)和酶联免疫吸附反应(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)分别检测细胞黏附相关基因及纤维连接蛋白(fibronectin,FN)的表达情况。结果:3D-Ti的微米钛球表面经过阳极氧化处理,得到了呈放射状、排列规则有序的纳米管结构,经过进一步氢化处理后,材料表面获得了接触角小于5°的超亲水特性。SEM可观察到在培养早期4 h内,HGFs在3D-H_(2)-TNTs表面的形态最为铺展,有更多更长的伪足,且细胞的黏附数量显著高于其他3组(P<0.05);当培养时间延长至1、3、5 d,HGFs在3D-Ti、MP-Ti、3D-H_(2)-TNTs和3D-TNTs上的增殖呈依次递减趋势,各组间比较均有统计学差异(P<0.05),3D-H_(2)-TNTs在细胞培养初期促进细胞生长的优势作用在后期逐渐消失;在3D-H_(2)-TNTs表面培养4 h和1 d时,HGFs的黏附相关基因整联蛋白-β1(integrin-beta 1,ITG-β1)、黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)、黏着斑蛋白(vinculin,VCL)的表达量及FN分泌量较对照组均明显增多(P<0.05)。结论:应用电化学阳极氧化与高温氢化处理相结合的方法,可以在3D打印钛合金表面构建超亲水性的微纳复合生物层,可促进HGFs的早期黏附和增殖,增强细胞黏附相关基因及纤维连接蛋白的表达。 展开更多

关键词 3D打印钛合金 TiO_(2)纳米管 氢化处理 人牙龈成纤维细胞

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人牙龈成纤维细胞和牙周膜成纤维细胞的培养和生物学特征 被引量：19

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作者 徐燕 李颂 +2 位作者 程继光 胡勇 王明丽 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2002年第6期375-377,共3页

目的 :探讨采用不同方法建立体外培养人牙龈成纤维细胞和人牙周膜成纤维细胞并对其生物学特性作初步探讨。方法 :分别采用消化培养法和组织块培养法培养人的牙龈和牙周膜成纤维细胞。通过倒置显微镜活体观察 ,以及光镜、透射电镜、免疫... 目的 :探讨采用不同方法建立体外培养人牙龈成纤维细胞和人牙周膜成纤维细胞并对其生物学特性作初步探讨。方法 :分别采用消化培养法和组织块培养法培养人的牙龈和牙周膜成纤维细胞。通过倒置显微镜活体观察 ,以及光镜、透射电镜、免疫组化和生长曲线等方法对其生物学特性作初步观察。结果 :消化培养法成功率低于组织块培养法。光镜下和透射电镜下观察两种细胞在形态和结构上相似。免疫组化染色证实此两种细胞均来源于中胚层的纤维母细胞。生长曲线表明牙龈成纤维细胞的倍增时间比牙周膜成纤维细胞稍短 ,而牙周膜成纤维细胞的增殖活性比牙龈成纤维细胞高。结论 :组织块培养法适用于此二种细胞的培养。细胞生物学特征方面有许多相似形 。 展开更多

关键词 人牙龈成纤维细胞 牙周膜成纤维细胞 培养 生物学特征

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蜂胶对牙龈卟啉单胞菌及牙龈成纤维细胞的影响 被引量：6

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作者 蒋琳 林居红 +1 位作者 张红梅 朱立芬 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第16期1538-1540,共3页

目的了解蜂胶对牙龈卟啉单胞菌（porphyromonas gingival，Pg）生长的抑制作用及对人牙龈成纤维细胞的毒性作用。方法采用液体稀释法测定蜂胶对Pg的最小杀菌浓度（MBC），用MTT法测定不同浓度蜂胶作用24h后牙龈成纤维细胞的细胞相对增... 目的了解蜂胶对牙龈卟啉单胞菌（porphyromonas gingival，Pg）生长的抑制作用及对人牙龈成纤维细胞的毒性作用。方法采用液体稀释法测定蜂胶对Pg的最小杀菌浓度（MBC），用MTT法测定不同浓度蜂胶作用24h后牙龈成纤维细胞的细胞相对增殖率（RGR），了解蜂胶作用24h后细胞连续7d的增殖回复情况。结果蜂胶对取的MBC为1．56g／L，相当于0．125～0．25mg／L的奥硝唑。蜂胶浓度为MBC时RGR达到70％以上；4g／L蜂胶组的RGR为52．1％，作用细胞24h后，连续7d细胞数持续增加，吸光度逐渐接近阴性对照组。结论蜂胶对Pg的生长有显著抑制作用，且细胞毒性较小，毒性作用可逆。 展开更多

关键词 蜂胶 牙龈卟啉单胞菌 生长 人牙龈成纤维细胞 细胞毒性

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一氧化碳对肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-1β共同诱导的人牙龈成纤维细胞黏附分子表达的影响 被引量：5

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作者 赵华强 魏玲玲 +4 位作者 侯萌 穆萍萍 魏奉才 宋晖 杨丕山 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期304-307,313,共5页

目的研究一氧化碳对炎性环境下人牙龈成纤维细胞黏附分子表达的影响。方法以50 ng.mL-1的肿瘤坏死因子(TNF)-α和10 ng.mL-1的白细胞介素(IL)-1β刺激加入或不加入500μmol.L-1一氧化碳释放分子(CORM)的人牙龈成纤维细胞,用Western blo... 目的研究一氧化碳对炎性环境下人牙龈成纤维细胞黏附分子表达的影响。方法以50 ng.mL-1的肿瘤坏死因子(TNF)-α和10 ng.mL-1的白细胞介素(IL)-1β刺激加入或不加入500μmol.L-1一氧化碳释放分子(CORM)的人牙龈成纤维细胞,用Western blot法检测细胞间黏附分子(ICAM)-1、血管细胞黏附分子(VCAM)-1的蛋白表达,用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测黏附分子的mRNA表达,用瞬时转染和报告基因测定法分析NF-κB的活性。结果TNF-α和IL-1β共同刺激后,人牙龈成纤维细胞ICAM-1和VCAM-1的mRNA表达和蛋白表达均显著增强。CORM的加入可显著抑制ICAM-1和VCAM-1的表达。CORM可显著降低ICAM-1和VCAM-1诱导的NF-κB的活性。结论一氧化碳有可能成为牙周病治疗的一种极具潜力的新物质。 展开更多

关键词 人牙龈成纤维细胞 牙周炎 黏附分子 一氧化碳

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排龈药物对体外培养人牙龈成纤维细胞的毒性比较 被引量：7

6

作者 刘健 张晓明 +2 位作者 郝鹏杰 惠敏 于焕英 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期202-205,共4页

目的评价6种常用的排龈药物对人牙龈成纤维细胞(HGF)毒性作用的大小,以指导临床选择最佳排龈药物。方法将6种不同体积分数的排龈药物(20%硫酸铝、5%硫酸铝、15.5%硫酸铁、13.3%硫酸铁、0.1%盐酸肾上腺素、0.01%盐酸肾上腺素)分别作用于... 目的评价6种常用的排龈药物对人牙龈成纤维细胞(HGF)毒性作用的大小,以指导临床选择最佳排龈药物。方法将6种不同体积分数的排龈药物(20%硫酸铝、5%硫酸铝、15.5%硫酸铁、13.3%硫酸铁、0.1%盐酸肾上腺素、0.01%盐酸肾上腺素)分别作用于体外培养的HGF,MTT比色法测定细胞的损伤与增殖,透射电镜观察细胞超微结构的变化。结果所有实验药物均能引起细胞的直接损伤与增殖抑制,细胞毒性由小到大分别是0.01%盐酸肾上腺素、0.1%盐酸肾上腺素、5%硫酸铝、20%硫酸铝、硫酸铁,2种体积分数的硫酸铁毒性比较差异无统计学意义(P>0.01)。透射电镜显示2种体积分数的盐酸肾上腺素及5%硫酸铝可引起细胞器数量减少,线粒体及内质网肿胀;20%硫酸铝造成细胞水肿明显,细胞核和染色质分布不均匀;硫酸铁可导致细胞变性。结论0.01%盐酸肾上腺素细胞毒性作用最小,硫酸铁毒性最大。 展开更多

关键词 排龈药物 细胞毒性 人牙龈成纤维细胞

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水蛭素对牙龈成纤维细胞碱性成纤维细胞生长因子和转化生长因子-β_1表达的影响 被引量：7

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作者 郑怡 禤坤 +1 位作者 南澜 莫水学 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期6-10,共5页

目的观察水蛭素对人牙龈成纤维细胞(HGFs)碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)及转化生长因子-β1(TGF-β1)表达变化的规律,探讨水蛭素影响牙龈改建的可能作用机制。方法体外培养并鉴定HGFs,利用不同浓度的水蛭素分别作用于正常(对照组)和受... 目的观察水蛭素对人牙龈成纤维细胞(HGFs)碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)及转化生长因子-β1(TGF-β1)表达变化的规律,探讨水蛭素影响牙龈改建的可能作用机制。方法体外培养并鉴定HGFs,利用不同浓度的水蛭素分别作用于正常(对照组)和受长期机械外力作用后增生的HGFs(实验组),通过实时定量聚合酶链反应法和免疫细胞化学法检测TGF-β1及b FGF的表达。结果未加入水蛭素时,受长期机械外力作用后,实验组促进HGFs增殖胶原合成的TGF-β1表达升高,而抑制胶原合成的b FGF表达降低(P<0.05)。加入水蛭素干预增生的HGFs后,可正向调节b FGF表达,而负向调节TGF-β1的表达(P<0.05)。结论外力作用干扰了HGFs胶原合成与降解之间的平衡,水蛭素可能通过调节这一平衡而促进牙龈改建过程。 展开更多

关键词 水蛭素 人牙龈成纤维细胞 转化生长因子-Β1 碱性成纤维细胞生长因子

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一氧化碳对炎症环境下人牙龈成纤维细胞黏附分子表达影响的机制研究 被引量：3

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作者 赵华强 侯萌 +3 位作者 魏玲玲 穆萍萍 宋晖 杨丕山 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期420-424,共5页

目的研究一氧化碳对炎症环境下人牙龈成纤维细胞(HGF)黏附分子表达影响的分子机制。方法体外培养HGF,以50 ng.mL-1的TNF-α和10 ng.mL-1的IL-1β刺激加入或不加入500μmol.L-1一氧化碳释放分子-3(CORM-3)的HGF;分别在刺激10、20 min后... 目的研究一氧化碳对炎症环境下人牙龈成纤维细胞(HGF)黏附分子表达影响的分子机制。方法体外培养HGF,以50 ng.mL-1的TNF-α和10 ng.mL-1的IL-1β刺激加入或不加入500μmol.L-1一氧化碳释放分子-3(CORM-3)的HGF;分别在刺激10、20 min后收集部分细胞,用Western blot法检测丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)通路中细胞外调节蛋白激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)和p38的磷酸化水平;在刺激4 h后用Western blot法检测核转录因子-κB(NF-κB)的核内表达;在部分实验中,HGF在TNF-α、IL-1β及CORM-3刺激前以鸟苷酸环化酶特异性抑制剂1H-[1,2,4]噁二唑[4,3-α]喹喔啉-1-酮(ODQ)预处理8 h,刺激24 h后用Western blot法检测细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达。结果在TNF-α和IL-1β刺激细胞10min后,MAPK通路中p38、ERK和JNK的磷酸化水平即有明显升高,CORM-3能够明显抑制p38的磷酸化,而对ERK和JNK的磷酸化水平无明显影响;4 h后,CORM-3可明显抑制NF-κB-p65的核内表达。ODQ不能改变CORM-3对TNF-α和IL-1β共同刺激下ICAM-1表达水平的影响,说明CORM-3的作用并非通过鸟苷酸环化酶系统实现。结论一氧化碳对炎症环境下HGF黏附分子表达的抑制作用可能是通过对NF-κB的活性抑制和对MAPK p38磷酸化水平的抑制作用来实现的。 展开更多

关键词 人牙龈成纤维细胞 核转录因子-ΚB 一氧化碳释放分子 丝裂原激活蛋白激酶

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白细胞介素-10对人牙龈成纤维细胞分泌白细胞介素-1β的抑制作用 被引量：3

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作者 于新波 杨丕山 葛少华 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期238-240,共3页

目的 :探讨白细胞介素_10 (IL_10 )在牙周炎症反应中的抑制作用。方法 :用细胞培养法、酶联免疫吸附分析法(ELISA)检测细胞培养液上清中的IL_1β浓度 ;用MTT法检测人牙龈成纤维细胞 (HGF)对细菌脂多糖 (LPS)、IL_10的增殖反应。结果 :LP... 目的 :探讨白细胞介素_10 (IL_10 )在牙周炎症反应中的抑制作用。方法 :用细胞培养法、酶联免疫吸附分析法(ELISA)检测细胞培养液上清中的IL_1β浓度 ;用MTT法检测人牙龈成纤维细胞 (HGF)对细菌脂多糖 (LPS)、IL_10的增殖反应。结果 :LPS以剂量依赖方式诱导HGF产生IL_1β,6h达最大分泌量 ;IL_1β的分泌可被IL_10抑制 ,10ng/mlIL_10作用 2 4h抑制效应达最大 ;LPS对HGF具有促增殖作用 ,而IL_10对HGF的增殖无影响。结论 :IL_10是一种抑制牙周炎症反应的细胞因子。 展开更多

关键词 抑制作用 白细胞介素类 人牙龈成纤维细胞 牙周炎

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富血小板血浆对人牙龈成纤维细胞增殖和迁移的影响 被引量：3

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作者 施六霞 狄昌萍 +1 位作者 徐艳 金岳龙 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期942-945,共4页

目的:体外研究不同浓度的机采富血小板血浆(PRP)对人牙龈成纤维细胞(HGFs)的增殖和迁移的影响。方法:不同浓度PRP(1%、5%、10%、20%、30%、50%),加入到原代培养的人牙龈成纤维细胞,无血清培养液为阴性对照,10%新生小牛血清为阳性对照,... 目的:体外研究不同浓度的机采富血小板血浆(PRP)对人牙龈成纤维细胞(HGFs)的增殖和迁移的影响。方法:不同浓度PRP(1%、5%、10%、20%、30%、50%),加入到原代培养的人牙龈成纤维细胞,无血清培养液为阴性对照,10%新生小牛血清为阳性对照,培养时间为3、5、7天,四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞增殖效果,Transwell系统测定细胞迁移效果。结果:PRP有明显促进增殖作用,不同浓度PRP与阴性对照组均有明显差异(P<0.01),且随着时间递增,增殖效果也明显增强(P<0.01)。在细胞迁移效果中,各浓度组均比阴性对照组效果好。结论:PRP对HGFs功能有明显促进效果,在一定浓度范围有浓度依赖性。 展开更多

关键词 人牙龈成纤维细胞 富血小板血浆 TRANSWELL

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微沟槽形貌对人牙龈成纤维细胞黏附及细胞周期推进影响的研究 被引量：3

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作者 赖颖真 林珊 陈江 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期89-95,共7页

目的:研究钛微沟槽形貌对人牙龈成纤维细胞黏附及细胞周期推进的影响。方法:用光刻技术在硅片表面制作钛微沟槽形貌,沟槽宽度(等于间隔)分别为15、30、60μm,沟槽深度为5μm和10μm,分组为T15/5、T15/10、T30/5、T30/10、T60/5、T60/10... 目的:研究钛微沟槽形貌对人牙龈成纤维细胞黏附及细胞周期推进的影响。方法:用光刻技术在硅片表面制作钛微沟槽形貌,沟槽宽度(等于间隔)分别为15、30、60μm,沟槽深度为5μm和10μm,分组为T15/5、T15/10、T30/5、T30/10、T60/5、T60/10,光滑钛(T0)表面为对照组,测量材料表面微沟槽形貌,将体外培养的人牙龈成纤维细胞(HGFs)接种于材料表面,用免疫荧光和流式细胞仪周期分析观察细胞黏附形态及细胞周期推进的差异。结果:T0组表面细胞排列不规则,沟槽表面细胞均顺沟槽排列,T60/10组细胞周期S期比例始终高于其他各组,T30组居中,T15组最小,但仍高于对照T0组,宽度大的沟槽组(T60,T30)沟槽深度的增加促进细胞周期S期比例的增加,而沟槽宽度小的T15组,沟槽加深减少S期比例。结论:本实验所设计的沟槽尺寸均能诱导细胞顺着沟槽排列,随着沟槽的宽度增加、深度增大越有利于促进细胞周期的推进。 展开更多

关键词 软组织 种植体 微沟槽 人牙龈成纤维细胞 接触诱导 细胞周期

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微沟槽形貌对人牙龈成纤维细胞黏附形态及增殖的影响 被引量：3

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作者 赖颖真 陈江 林珊 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期515-519,共5页

目的:观察微沟槽形貌对人牙龈成纤维细胞(HGFs)黏附形态和增殖的影响。方法:在钛表面设计不同沟槽尺寸,利用光刻技术制作微沟槽形貌,沟槽宽度与间隔分别为15、30、60μm,沟槽的深度为5μm和10μm,分组为T15/5,T15/10,T30/5,T30/10,T60/5... 目的:观察微沟槽形貌对人牙龈成纤维细胞(HGFs)黏附形态和增殖的影响。方法:在钛表面设计不同沟槽尺寸,利用光刻技术制作微沟槽形貌,沟槽宽度与间隔分别为15、30、60μm,沟槽的深度为5μm和10μm,分组为T15/5,T15/10,T30/5,T30/10,T60/5,T60/10,光滑钛(T0)表面为对照组,环境扫描电镜(ESEM)观察各组材料表面微沟槽形貌,接种HGFs后,通过扫描电镜和CCK-8实验观察分析不同沟槽尺寸上方细胞黏附和增殖差异。结果:T0组表面细胞排列不规则,其余组沟槽表面细胞均顺着沟槽排列,T60/10组沟槽表面细胞的增殖幅度最大,增殖时间最长。结论:本实验所设计的沟槽尺寸均能成功诱导细胞顺着沟槽排列,随着沟槽的宽度增加深度增大越有利于促进细胞增殖。 展开更多

关键词 软组织 种植体 微沟槽 人牙龈成纤维细胞(HGFs) 接触诱导 细胞增殖

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排龈时间与药物对牙龈成纤维细胞的毒性比较研究 被引量：5

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作者 张晓明 惠敏 刘健 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期248-251,共4页

目的:研究不同排龈药物与不同排龈时间对人牙龈成纤维细胞(HGF)毒性作用的影响,指导临床选择最佳排龈药物和排龈时间。方法:MTT比色测定细胞活性,透射电镜观察直接损伤后细胞超微结构的变化,排龈药物pH值测定。结果:0.1%盐酸肾上腺素的... 目的:研究不同排龈药物与不同排龈时间对人牙龈成纤维细胞(HGF)毒性作用的影响,指导临床选择最佳排龈药物和排龈时间。方法:MTT比色测定细胞活性,透射电镜观察直接损伤后细胞超微结构的变化,排龈药物pH值测定。结果:0.1%盐酸肾上腺素的细胞毒性作用最小,排龈时间5 min细胞毒性小于10 min,硫酸铁的细胞毒性最大。结论:健康患者可采用0.1%盐酸肾上腺素进行排龈;伴有心血管系统疾病的患者,可采用20%硫酸铝替代0.1%盐酸肾上腺素;临床上使用硫酸铁排龈时应适当降低其浓度。 展开更多

关键词 排龈药物 细胞毒性 人牙龈成纤维细胞

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蜂胶及自制蜂胶奥硝唑合剂对人牙龈成纤维细胞的毒性作用 被引量：2

14

作者 蒋琳 林居红 李小玉 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期124-128,共5页

目的:了解蜂胶及自制蜂胶奥硝唑合剂对人牙龈成纤维细胞的毒性作用,为蜂胶及合剂的临床推广应用提供理论依据。方法:人牙龈成纤维细胞在不同浓度的蜂胶、奥硝唑和自制蜂胶奥硝唑合剂中体外培养24h,用MTT法测定细胞相对增殖率(RGR);选择... 目的:了解蜂胶及自制蜂胶奥硝唑合剂对人牙龈成纤维细胞的毒性作用,为蜂胶及合剂的临床推广应用提供理论依据。方法:人牙龈成纤维细胞在不同浓度的蜂胶、奥硝唑和自制蜂胶奥硝唑合剂中体外培养24h,用MTT法测定细胞相对增殖率(RGR);选择细胞增殖率约为50%的药物浓度组,重新培养细胞24h,更换成不含药物的培养液连续培养7d,每天用MTT法测定吸光度值,了解细胞增殖回复情况。结果:0.5g/L蜂胶组的RGR达到93.9%,与蜂胶其他2组间的差别有统计学意义(P<0.05);奥硝唑溶液加入蜂胶后,对应浓度组比较,两合剂组的平均吸光度值均大于奥硝唑组,其中当奥硝唑浓度为0.4g/L和0.8g/L时,差别有统计学意义(P<0.05);细胞增殖率约为50%的药物浓度组更换新鲜培养液后,细胞数均持续增加,到第7天,吸光度值与阴性对照组接近。结论:蜂胶对人牙龈成纤维细胞的毒性较小,不会增加奥硝唑的细胞毒性,并且毒性作用是可逆的;蜂胶及自制蜂胶奥硝唑合剂作为牙周病局部用药,具有进一步的研究价值。 展开更多

关键词 蜂胶 蜂胶奥硝唑合剂 人牙龈成纤维细胞 细胞毒性

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热休克蛋白27在烟草烟雾提取物介导的牙龈成纤维细胞损伤中的表达变化 被引量：3

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作者 周芹 孙睿男 朱震坤 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期17-22,共6页

目的观察在不同质量分数烟草烟雾提取物（CSE）干预下，热休克蛋白（HSP）27在人牙龈成纤维细胞（HGFs）损伤过程中的表达。方法取原代培养并经过鉴定的3～8代HGFs，采用细胞划痕试验检测不同刺激质量分数（0、2．5％、5．0％、12．5％... 目的观察在不同质量分数烟草烟雾提取物（CSE）干预下，热休克蛋白（HSP）27在人牙龈成纤维细胞（HGFs）损伤过程中的表达。方法取原代培养并经过鉴定的3～8代HGFs，采用细胞划痕试验检测不同刺激质量分数（0、2．5％、5．0％、12．5％、25．0％、50．0％）的CSE对HGFs体迁移的影响，并采用Westernblot方法检测HSP27在HGFs中的表达。结果CSE质量分数越高，细胞的迁移能力越弱；HSP27在正常HGFs中呈弱阳性表达，在CSE刺激后的HGFs中呈强阳性表达，且随CSE质量分数的增高，HSP27的相对表达量有逐渐增高的趋势，与细胞迁移能力相反。结论HSP27在CSE介导的HGFs损伤中表达升高，在CSE介导的上皮损伤中有重要作用。 展开更多

关键词 烟草烟雾提取物 热休克蛋白27 人牙龈成纤维细胞 上皮损伤

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种植体穿龈部分氮化钛纳米涂层对牙龈成纤维细胞粘附和增殖的影响 被引量：2

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作者 潘夏薇 赖颖真 陈江 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2017年第2期154-157,共4页

目的:明确氮化钛纳米(TiN)涂层对人牙龈成纤维细胞(HGF)粘附形态和增殖的影响,作为选择合适的种植体穿龈部分涂层的依据之一。方法:利用磁控溅射技术制作氮化钛(TiN)和对照Ti涂层,测量各组材料表面形貌、元素含量、粗糙度和亲水性,原代... 目的:明确氮化钛纳米(TiN)涂层对人牙龈成纤维细胞(HGF)粘附形态和增殖的影响,作为选择合适的种植体穿龈部分涂层的依据之一。方法:利用磁控溅射技术制作氮化钛(TiN)和对照Ti涂层,测量各组材料表面形貌、元素含量、粗糙度和亲水性,原代培养人牙龈成纤维细胞(HGF),通过扫描电镜SEM和CCK-8观察分析不同纳米涂层上方细胞粘附和增殖差异。结果:TiN组表面HGF粘附形态与Ti组相似,而HGF增殖幅度大于对照Ti。结论:本实验所设计的氮化钛(TiN)涂层利于促进HGF增殖,推荐作为种植体穿龈部分涂层。 展开更多

关键词 软组织 种植体 氮化钛(TiN)纳米涂层 人牙龈成纤维细胞(HGF) 细胞增殖

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反复熔铸钴铬烤瓷合金对人牙龈成纤维细胞的体外细胞毒性实验 被引量：1

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作者 林泓磊 张长源 +2 位作者 郑明 林东红 程辉 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2012年第7期669-672,共4页

目的:评价反复熔铸后钴铬合金的细胞毒性。方法:原代培养人牙龈成纤维细胞(HGFs),按照ISO10993标准,制备经1～3次熔铸钴铬烤瓷合金浸提液,CCK-8法测定其对HGFs增殖的影响,倒置相差显微镜观察HGFs生长情况,初步评价经1～3次熔铸后钴铬烤... 目的:评价反复熔铸后钴铬合金的细胞毒性。方法:原代培养人牙龈成纤维细胞(HGFs),按照ISO10993标准,制备经1～3次熔铸钴铬烤瓷合金浸提液,CCK-8法测定其对HGFs增殖的影响,倒置相差显微镜观察HGFs生长情况,初步评价经1～3次熔铸后钴铬烤瓷合金的生物相容性。结果:经1～3次熔铸后的钴铬烤瓷合金细胞毒性级为1～2级,各实验组细胞形态良好,经2、3次熔铸的钴铬烤瓷合金A值与经1次熔铸的钴铬烤瓷合金差异无统计学意义。结论:初步认为经1～3次后熔铸的钴铬烤瓷合金具有较好的生物相容性。 展开更多

关键词 反复熔铸 CCK-8 钴铬烤瓷合金 体外细胞毒性 人牙龈成纤维细胞

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卡波济肉瘤相关疱疹病毒体外感染人牙龈成纤维细胞初探 被引量：1

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作者 吴婴南 倪杰 +2 位作者 卢春 秦娣 朱玲 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期138-142,共5页

目的:探索卡波济肉瘤相关疱疹病毒(Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus,KSHV)体外感染人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblast,HGF)的途径和方法,为研究KSHV导致口腔卡波济肉瘤病变的机制提供依据。方法:用12-O-十四烷... 目的:探索卡波济肉瘤相关疱疹病毒(Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus,KSHV)体外感染人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblast,HGF)的途径和方法,为研究KSHV导致口腔卡波济肉瘤病变的机制提供依据。方法:用12-O-十四烷酰佛波醇-13-乙酯(12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate,TPA)刺激人原发性渗出性淋巴瘤(primary effusion lymphoma,PEL)细胞系的BC-3细胞,收集细胞上清(含KSHV病毒颗粒),感染HGF细胞。观察细胞病变效应(cytopatric effect,CPE),采用RT-PCR和Western blot分别检测HGF细胞内KSHV编码基因的转录情况和蛋白表达水平。结果:KSHV感染HGF细胞后可出现CPE;感染后采用RT-PCR可检测到不同时间点ORF26和ORF73基因的转录;感染后12 h可检测到vIL-6蛋白的表达。结论:KSHV可感染HGF细胞并建立潜伏感染,为进一步研究KSHV导致的口腔KS发病机制提供了较好的体外模型。 展开更多

关键词 口腔卡波济肉瘤 卡波济肉瘤相关疱疹病毒 人牙龈成纤维细胞 感染

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pEGFP-N1/hIL-1ra重组真核表达载体的构建及其在人牙龈成纤维细胞中的瞬时表达 被引量：1

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作者 苏毅 何雅丽 +2 位作者 王子露 李建民 徐艳 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1533-1536,1577,共5页

目的:构建重组人白细胞介素1受体拮抗剂(rhIL-1ra)基因真核表达载体pEGFP-N1/hIL-1ra,瞬时转染人牙龈成纤维细胞并检测其表达,为牙周炎症的基因治疗提供实验基础。方法:TRIzol法提取人乳腺癌组织总RNA进行RT-PCR,将纯化的扩增产物hIL-1r... 目的:构建重组人白细胞介素1受体拮抗剂(rhIL-1ra)基因真核表达载体pEGFP-N1/hIL-1ra,瞬时转染人牙龈成纤维细胞并检测其表达,为牙周炎症的基因治疗提供实验基础。方法:TRIzol法提取人乳腺癌组织总RNA进行RT-PCR,将纯化的扩增产物hIL-1ra与克隆载体pMD18-T连接、转化,测序正确后将重组体pMD18-T/hIL-1ra与真核表达质粒pEGFP-N1分别进行双酶切,连接后转化感受态细菌E.coliTOP10。将构建正确的pEGFP-N1/hIL-1ra重组质粒DNA瞬时转染人牙龈成纤维细胞,荧光显微镜观察绿色荧光的表达,RT-PCR方法检测其基因的表达。结果:构建的pEGFP-N1/hIL-1ra真核表达载体经PCR及双酶切鉴定均表明人IL-1ra基因已与pEGFP-N1正确重组。瞬时转染人牙龈成纤维细胞后能观察到绿色荧光,RT-PCR可得到目的片段。结论:成功构建了重组质粒pEGFP-N1/hIL-1ra,瞬时转染人牙龈成纤维细胞后检测到其基因水平的表达,为炎性细胞因子拮抗剂基因用于牙周炎抗炎治疗奠定了实验基础。 展开更多

关键词 重组人白细胞介素1受体拮抗剂 真核表达载体 瞬时转染 人牙龈成纤维细胞

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热休克蛋白在白细胞介素-1β诱导人牙龈成纤维细胞损伤中的表达 被引量：1

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作者 周芹 朱震坤 +2 位作者 孙睿男 徐欣 马跃 《国际口腔医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第4期411-414,共4页

目的观察热休克蛋白(HSP)27、70和90在白细胞介素(IL)-1β诱导的人牙龈成纤维细胞(HGF)损伤过程中的表达。方法原代培养人HGF,以蛋白质印迹技术检测不同质量浓度的IL-1β诱导后HSP27、HSP70、HSP90在HGF中的表达,运用细胞划痕实验观察HG... 目的观察热休克蛋白(HSP)27、70和90在白细胞介素(IL)-1β诱导的人牙龈成纤维细胞(HGF)损伤过程中的表达。方法原代培养人HGF,以蛋白质印迹技术检测不同质量浓度的IL-1β诱导后HSP27、HSP70、HSP90在HGF中的表达,运用细胞划痕实验观察HGF的体外迁移能力变化。结果经IL-1β诱导后,HGF中HSP70和HSP90的表达量无明显变化,HSP27的表达量明显上调并随IL-1β诱导质量浓度的增加而增加。同时细胞划痕实验显示,随着HSP27表达量的增加,HGF的迁移能力明显降低。结论 HSP在经IL-1β诱导的人HGF损伤过程中的表达情况各不相同,其中HSP27在IL-1β诱导的HGF炎症损伤中的表达升高,其表达量与HGF体外愈合能力呈负相关关系。HSP27在上皮炎症损伤中起着关键性的作用,但具体作用机制还有待进一步的研究。 展开更多

关键词 白细胞介素-1Β 热休克蛋白 人牙龈成纤维细胞 组织炎症

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