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miR-122-5p靶向ADAM10调控Notch信号通路对人卵巢癌细胞SKOV-3的上皮-间质转化的抑制作用 被引量:11
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作者 李根林 刘杰 +2 位作者 谢晶 余芙蓉 胡意 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第1期54-59,共6页
目的研究miR-122-5p对人卵巢癌细胞SKOV-3上皮-间质转化(EMT)的影响,阐明其可能机制。方法常规体外培养人卵巢癌细胞SKOV-3,将miR-122-5p模拟物(miR-122-5p mimic)及其阴性对照(mimic NC)转染至SKOV-3细胞,分为空白对照组(Blank组)、mim... 目的研究miR-122-5p对人卵巢癌细胞SKOV-3上皮-间质转化(EMT)的影响,阐明其可能机制。方法常规体外培养人卵巢癌细胞SKOV-3,将miR-122-5p模拟物(miR-122-5p mimic)及其阴性对照(mimic NC)转染至SKOV-3细胞,分为空白对照组(Blank组)、mimic NC组和miR-122-5p mimic组,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组细胞miR-122-5p和ADAM10 mRNA的表达水平;Western blot检测各组细胞ADAM10蛋白的表达水平;生物信息学预测miR-122-5p与ADAM10靶向匹配,采用双荧光素酶报告系统验证两者在SKOV-3细胞中的靶向关系。再将miR-122-5p mimic和ADAM10过表达质粒(pcDNA-ADAM10)分别或同时转染至SKOV-3细胞中,分为空白对照组(Blank组)、miR-122-5p mimic组、ADAM10过表达组(pc-ADAM10组)和miR-122-5p mimic+pc-ADAM10组,采用Transwell检测SKOV-3细胞的迁移和侵袭能力;Western blot检测细胞Notch信号通路相关蛋白Notch1、HES1和HEY1,EMT相关蛋白Snail、E-cadherin和N-cadherin的表达水平。结果 miR-122-5p mimic组SKOV-3细胞中miR-122-5p的表达水平较mimic NC组的升高(P<0.01),表明miR-122-5p mimic稳定转染至SKOV-3细胞。miR-122-5p mimic组SKOV-3细胞中ADAM10 mRNA和蛋白的表达水平较mimic NC组的降低(P<0.01),双荧光素酶报告系统证实ADAM10是miR-122-5p靶基因。与Blank组比较,miR-122-5p mimic组SKOV-3细胞发生迁移和侵袭的数量降低(t=6.004,P<0.05;t=7.289,P<0.01),而pc-ADAM10组的升高(t=13.181,P<0.001;t=11.504,P<0.01);miR-122-5p mimic组细胞的Notch、HES1、HEY1、Snail和N-cadherin蛋白表达水平下降(P<0.05,P<0.01),而pc-ADAM10组的上升(P<0.01);miR-122-5p mimic组细胞的E-cadheirn蛋白表达水平上升(P<0.01),而pc-ADAM10组的下降(P<0.01)。与pc-ADAM10组比较,miR-122-5p mimic+pc-ADAM10能减弱pc-ADAM10的促EMT作用,且下调Notch信号通路活性。结论 miR-122-5p通过阻断Notch信号通路抑制人卵巢癌细胞SKOV-3的EMT,其机制可能与miR-122-5p靶向抑制ADAM10的表达有关。 展开更多
关键词 人卵巢癌细胞skov-3 上皮-间质转化 NOTCH信号通路 去整合素金属蛋白酶10
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沉默MACC1的表达对卵巢癌细胞系SKOV-3顺铂化疗敏感性的影响 被引量:7
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作者 李霞 史惠蓉 +1 位作者 邓佑兴 张瑞涛 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2016年第1期92-95,共4页
目的:探讨沉默结肠癌转移相关基因1(MACC1)对卵巢癌上皮性癌细胞SKOV-3顺铂化疗敏感性的影响。方法:SKOV-3细胞分为shRNA转染组(重组质粒psuper-EGFP-s3转染)、空质粒转染组(psuper-EGFP-neo转染)和对照组(未作转染),采用RT-PCR法和West... 目的:探讨沉默结肠癌转移相关基因1(MACC1)对卵巢癌上皮性癌细胞SKOV-3顺铂化疗敏感性的影响。方法:SKOV-3细胞分为shRNA转染组(重组质粒psuper-EGFP-s3转染)、空质粒转染组(psuper-EGFP-neo转染)和对照组(未作转染),采用RT-PCR法和Western blot法检测各组细胞MACC1 mRNA和蛋白的表达,MTT法检测细胞对顺铂的耐药性。结果:3组SKOV-3细胞MACC1 mRNA和蛋白表达比较,差异有统计学意义(P<0.05),shRNA转染组较未转染组和空质粒组下降。shRNA转染组对顺铂的IC50较对照组和空质粒转染组下降(P<0.05)。结论:沉默MACC1的表达能增加卵巢癌SKOV-3细胞对顺铂的敏感性。 展开更多
关键词 结肠癌转移相关因子1 RNA干扰 顺铂敏感性 卵巢 skov-3细胞
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卵巢癌细胞株SKOV-3ipl对缺氧的适应及其与VEGF、Bcl-2蛋白表达的关系 被引量:3
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作者 祝亚平 丰有吉 +1 位作者 李惠敏 谢东华 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2003年第3期207-210,214,共5页
目的 :研究卵巢癌细胞株SKOV 3ipl在缺氧条件下的适应力及其与VEGF、Bcl 2蛋白表达的关系。方法 :贴壁培养卵巢癌细胞株SKOV 3ipl在缺氧条件下培养 (85 %N2 ,5 %CO2 ,1 0 %H2 ,极低氧浓度 :<1 0 0×1 0 - 6 ) ,在不同缺氧时相收... 目的 :研究卵巢癌细胞株SKOV 3ipl在缺氧条件下的适应力及其与VEGF、Bcl 2蛋白表达的关系。方法 :贴壁培养卵巢癌细胞株SKOV 3ipl在缺氧条件下培养 (85 %N2 ,5 %CO2 ,1 0 %H2 ,极低氧浓度 :<1 0 0×1 0 - 6 ) ,在不同缺氧时相收集细胞 ,应用免疫细胞化学PARP标记检测细胞凋亡、免疫细胞化学检测VEGF的表达 ,Westernblot检测PCNA及Bcl 2蛋白表达的改变。结果 :缺氧培养 8至 1 6小时后 ,凋亡细胞增加 (与缺氧 0小时相比 ,P <0 .0 1 ) ,PCNA表达下降 (与缺氧 0小时相比 ,P <0 .0 1 )、VEGF无表达 ;缺氧 2 4小时后细胞凋亡与 0小时相比 ,差异无显著性 ,PCNA表达回升 ,Bcl 2蛋白及VEGF表达明显升高 (与缺氧 0小时相比 ,P <0 .0 1 )。结论 :卵巢癌细胞株SKOV 3ipl在缺氧培养 8至 1 6小时内发生凋亡、细胞增殖抑制 ,2 4小时后对缺氧耐受 ,细胞增殖 ;细胞对缺氧的适应可能与VEGF及Bcl 展开更多
关键词 卵巢 细胞 skov-3ipl 缺氧 适应 VEGF BCL-2蛋白 表达
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穿心莲内酯对卵巢癌细胞株SKOV-3侵袭与凋亡的影响 被引量:5
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作者 苏芳静 张斌 田林燕 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期1328-1331,共4页
目的:观察穿心莲内酯对卵巢癌细胞株SKOV-3侵袭与凋亡的影响并探讨初步的作用机制。方法:CCK-8法检测不同浓度(0、5、10、20和40μmol/L)的穿心莲内酯对SKOV-3细胞作用不同时间(12、24、36和48h)后,SKOV-3细胞存活率的变化;Transwell法... 目的:观察穿心莲内酯对卵巢癌细胞株SKOV-3侵袭与凋亡的影响并探讨初步的作用机制。方法:CCK-8法检测不同浓度(0、5、10、20和40μmol/L)的穿心莲内酯对SKOV-3细胞作用不同时间(12、24、36和48h)后,SKOV-3细胞存活率的变化;Transwell法与TUNEL法分别检测SKOV-3细胞侵袭能力与凋亡能力的变化;Western blot法检测p-PI3K、p-Akt与p-mTOR蛋白水平的变化。结果:CCK-8法检测结果显示,随着浓度增加与培养时间延长,穿心莲内酯对SKOV-3细胞存活率的抑制程度增强;采用20μmol/L穿心莲内酯培养SKOV-3细胞36h后,SKOV-3细胞的侵袭数明显降低,凋亡数明显增加(P<0.05),p-PI3K、p-Akt与p-mTOR的蛋白水平明显降低(P<0.05)。结论:穿心莲内酯能够抑制卵巢癌细胞SKOV-3的活力与侵袭能力,增强凋亡能力,这可能与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路有关。 展开更多
关键词 穿心莲内酯 卵巢癌细胞 PI3K/Akt/mTOR信号通路
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miR-455-3p通过靶向调控转脂蛋白4抑制卵巢癌细胞SKOV-3的增殖、迁移及上皮间质转化 被引量:12
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作者 谢婷婷 苏瑛 +1 位作者 吴利英 于月成 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期306-311,共6页
目的:探讨miR-455-3p对卵巢癌细胞SKOV-3增殖、迁移能力及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响,并研究其作用机制。方法:人卵巢上皮细胞株IOSE80、卵巢细胞系SKOV-3和A2780细胞培养完成后,将miR-455-3p mimic及... 目的:探讨miR-455-3p对卵巢癌细胞SKOV-3增殖、迁移能力及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响,并研究其作用机制。方法:人卵巢上皮细胞株IOSE80、卵巢细胞系SKOV-3和A2780细胞培养完成后,将miR-455-3p mimic及其阴性对照分别瞬时转染至细胞中。qPCR实验检测IOSE80、SKOV-3和A2780细胞miR-455-3p和转脂蛋白4(fatty acid-binding protein 4,FABP4)mRNA表达水平,Wb检测FABP4和EMT相关蛋白的表达水平,CCK-8法检测细胞增殖活性,Transwell实验用于评估细胞迁移能力,生物信息学预测miR-455-3p的靶基因,应用双荧光素酶报告基因验证miR-455-3p与FABP4的靶向关系。结果:与正常卵巢上皮细胞IOSE80相比,卵巢癌细胞SKOV-3和A2780中miR-455-3p低表达(均P<0.05),而FABP4高表达(均P<0.05)。此外,过表达miR-455-3p明显抑制SKOV-3细胞的增殖和迁移能力(均P<0.05)。过表达miR-455-3p通过上调E-cadherin表达、下调N-cadherin和Vimentin表达而抑制EMT进程(均P<0.05)。FABP4是miR-455-3p的靶基因,且miR-455-3p能特异性结合FABP4 3’-UTR,并负调控其表达水平(P<0.05)。过表达FABP4能够明显逆转miR-455-3p对SKOV-3细胞增殖和迁移的抑制作用(均P<0.05)。结论:miR-455-3p在卵巢癌中作为一个抑癌蛋白,通过靶向调控FABP4从而抑制卵巢癌细胞增殖、迁移及EMT,有望成为卵巢癌新的潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 卵巢 skov-3细胞 miR-455-3p 转脂蛋白4 上皮间质转化 增殖 迁移
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雷帕霉素联合顺铂对卵巢癌SKOV-3细胞增殖的抑制作用 被引量:3
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作者 段钊 杨雪梅 +3 位作者 邢兰瑛 潘艳艳 王艳华 李虹 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期493-496,共4页
目的探讨雷帕霉素单独及联合顺铂应用对人卵巢癌SKOV-3细胞生长的影响及可能的分子机制。方法体外培养人卵巢癌SKOV-3细胞,实验组分别采用不同浓度的雷帕霉素、顺铂及40nmol/L雷帕霉素+10μmol/L顺铂作用,MTT法检测上述药物对细胞的增... 目的探讨雷帕霉素单独及联合顺铂应用对人卵巢癌SKOV-3细胞生长的影响及可能的分子机制。方法体外培养人卵巢癌SKOV-3细胞,实验组分别采用不同浓度的雷帕霉素、顺铂及40nmol/L雷帕霉素+10μmol/L顺铂作用,MTT法检测上述药物对细胞的增殖抑制率;流式细胞仪检测分析细胞凋亡率及细胞周期分布变化。结果雷帕霉素单独及联合顺铂应用均可显著抑制人卵巢癌SKOV-3细胞的增殖,其作用呈现时间-剂量依赖性,且两药联合作用时抑制率显著增高(P<0.05),显示两药有协同作用;流式细胞仪检测显示雷帕霉素能使卵巢癌SKOV-3发生G1期阻滞,同时可诱导细胞凋亡,其凋亡率随用药浓度增加而增加。结论雷帕霉素和顺铂可显著地抑制人卵巢癌SKOV-3细胞的增殖,阻滞细胞周期并诱导细胞凋亡,且两药联合应用时呈现协同作用。 展开更多
关键词 雷帕霉素 顺铂 卵巢skov-3细胞 细胞周期 细胞凋亡
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PUMA介导大蒜素诱导人卵巢癌耐顺铂SKOV-3/DDP细胞凋亡 被引量:5
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作者 吴金兰 万慧芳 +3 位作者 涂硕 朱伟锋 余乐涵 万福生 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1573-1579,共7页
目的探讨p53上调凋亡调控因子(PUMA)在大蒜素诱导人上皮性卵巢癌耐顺铂细胞株(SKOV-3/DDP)细胞凋亡中的作用。方法将SKOV-3/DDP细胞随机分为4组:正常对照组、大蒜素组(于培养基中加入终质量浓度为20μg/mL大蒜素作用细胞48 h)、顺铂组(5... 目的探讨p53上调凋亡调控因子(PUMA)在大蒜素诱导人上皮性卵巢癌耐顺铂细胞株(SKOV-3/DDP)细胞凋亡中的作用。方法将SKOV-3/DDP细胞随机分为4组:正常对照组、大蒜素组(于培养基中加入终质量浓度为20μg/mL大蒜素作用细胞48 h)、顺铂组(5μg/mL)、大蒜素+顺铂组。MTT法检测细胞存活率,荧光显微镜和流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR和Western-blot检测PUMA、bax及bcl-2的基因表达。结果与对照组比较,大蒜素组SKOV-3/DDP细胞凋亡率有明显的增加(P<0.05),且作用呈剂量依赖性,PUMA,Bax mRNA和蛋白表达上调,Bcl-2 mRNA和蛋白表达下调(P<0.05);与大蒜素组比较,顺铂+大蒜素组的细胞生长抑制率及凋亡率均有显著增加(P<0.05),Bax表达上调及Bcl-2表达下调的程度大于单用组(P<0.05);用特异性SiRNA沉默PUMA后,大蒜素组细胞凋亡率呈显著性下降(P<0.05)。结论 PUMA在介导大蒜素诱导SKOV-3/DDP细胞凋亡中发挥了关键性作用。 展开更多
关键词 p53上调凋亡调控因子(PUMA) 大蒜素 skov-3/DDP细胞 人卵巢 凋亡
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6种抗肿瘤中药注射液对卵巢癌细胞中ATF3 mRNA表达的影响 被引量:10
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作者 张湘奇 陈君君 +4 位作者 杨姣 石美智 祁美娟 肖霄 韩永龙 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期779-784,共6页
目的考察消癌平注射液、艾迪注射液、华蟾素注射液、复方苦参注射液、斑蝥酸钠维生素B_6注射液、参芪扶正注射液对卵巢癌细胞A2780、SK-OV-3中转录激活因子3(ATF3)mRNA表达的影响。方法 6种不同浓度中药注射液作用于卵巢癌细胞24 h后,MT... 目的考察消癌平注射液、艾迪注射液、华蟾素注射液、复方苦参注射液、斑蝥酸钠维生素B_6注射液、参芪扶正注射液对卵巢癌细胞A2780、SK-OV-3中转录激活因子3(ATF3)mRNA表达的影响。方法 6种不同浓度中药注射液作用于卵巢癌细胞24 h后,MTT法、RT-PCR法分别检测细胞增殖率、ATF3 mRNA表达。结果各中药注射液均有抑制卵巢癌细胞增殖的作用,并呈浓度依赖性。其中,华蟾素注射液可在抑制细胞增殖的同时抑制ATF3 mRNA表达,斑蝥酸钠维生素B_6注射液显著上调该因子mRNA表达,一定浓度消癌平注射液、艾迪注射液、复方苦参注射液、参芪扶正注射液对其mRNA表达也呈下调作用。结论 6种抗肿瘤中药注射液对卵巢癌细胞中ATF3 mRNA表达有抑制或诱导作用,其机制可能与中药活性成分影响肿瘤发展和转移有关。 展开更多
关键词 抗肿瘤中药注射液 转录激活因子3(ATF3) 卵巢癌细胞
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DcR3 RNA干扰对卵巢癌细胞株CAOV3增殖能力的影响 被引量:2
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作者 林静娴 彭勇 +2 位作者 遇桂芳 曾琼 钟婷 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第16期2601-2604,共4页
目的:利用RNA干扰(RNAi)技术沉默卵巢癌细胞系CAOV3细胞中诱骗受体3(Dc R3)基因的表达,并探讨其对卵巢上皮性腺癌(卵巢癌)细胞增殖能力的影响。方法:构建Dc R3 si RNA,并转染至卵巢癌CAOV3细胞中,在细胞内被识别并降解CAOV3细胞中的Dc R... 目的:利用RNA干扰(RNAi)技术沉默卵巢癌细胞系CAOV3细胞中诱骗受体3(Dc R3)基因的表达,并探讨其对卵巢上皮性腺癌(卵巢癌)细胞增殖能力的影响。方法:构建Dc R3 si RNA,并转染至卵巢癌CAOV3细胞中,在细胞内被识别并降解CAOV3细胞中的Dc R3 m RNA。实验分为3组:Dc R3 si RNA组、空白对照组和非特异性si RNA组(阴性对照组)。通过实时荧光定量(Real-time PCR,RT-PCR)检测Dc R3m RNA表达水平的变化。利用MTT实验观察Dc R3 si RNA对卵巢癌细胞株CAOV3增殖能力的影响。结果 :Dc R3 si RNA组细胞中Dc R3 m RNA的表达水平明显降低,与非特异性si RNA组及空白对照组相比,差异有显著性(P<0.05)。转染Dc R3 si RNA的细胞增殖能力明显下降,与非特异性si RNA组及空白对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:Dc R3 si RNA能在细胞内被识别并降解CAOV3细胞中的Dc R3 m RNA,从而发挥抑制卵巢癌细胞增殖的能力。 展开更多
关键词 诱骗受体3 RNA干扰 卵巢癌细胞 增殖能力
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3-甲基腺嘌呤对低氧状态下上皮性卵巢癌细胞自噬、迁移和侵袭的影响 被引量:2
10
作者 唐中园 张宁 +1 位作者 狄文 李卫平 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1152-1156,共5页
目的·检测3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)对低氧状态下上皮性卵巢癌细胞(epithelial ovarian carcinoma,EOC)自噬、迁移和侵袭的影响。方法·不同浓度的3-MA处理低氧环境下EOC细胞,Western blotting检测自噬相关蛋白LC3... 目的·检测3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)对低氧状态下上皮性卵巢癌细胞(epithelial ovarian carcinoma,EOC)自噬、迁移和侵袭的影响。方法·不同浓度的3-MA处理低氧环境下EOC细胞,Western blotting检测自噬相关蛋白LC3的表达,透射电子显微镜观察自噬体的生成,噻唑蓝比色法、黏附试验、Transwell迁移试验和Matrigel侵袭试验分别测定EOC细胞的增殖、黏附、迁移和侵袭能力。结果·3-MA可以抑制低氧环境诱导的LC3-Ⅱ表达增加以及自噬体生成。低氧环境下,5.00 mmol/L的3-MA作用24 h可显著降低EOC细胞存活率(P=0.000);2.50 mmol/L的3-MA作用6 h后,细胞的黏附能力显著降低(P=0.007);1.25 mmol/L和2.50 mmol/L的3-MA均可抑制低氧环境下EOC细胞的迁移和侵袭能力(均P<0.01)。结论·3-MA在抑制低氧状态下EOC细胞自噬的同时,具有抗细胞迁移和侵袭的作用。 展开更多
关键词 3-甲基腺嘌呤 自噬 上皮性卵巢癌细胞 低氧 迁移 侵袭
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姜黄素联合顺铂对人卵巢癌SKOV-3细胞增殖的抑制作用 被引量:1
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作者 范引侠 王艳华 邢兰瑛 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期658-660,667,共4页
目的探讨姜黄素及其联合顺铂对体外培养人卵巢癌SKOV-3细胞增殖的抑制作用。方法将SKOV-3细胞培养并分别单独加入不同浓度姜黄素(5、10、20、40、80μmol/L)、顺铂(10μmol/L)及联合作用后,用MTT法检测SK-OV-3细胞增殖情况。流式细胞术... 目的探讨姜黄素及其联合顺铂对体外培养人卵巢癌SKOV-3细胞增殖的抑制作用。方法将SKOV-3细胞培养并分别单独加入不同浓度姜黄素(5、10、20、40、80μmol/L)、顺铂(10μmol/L)及联合作用后,用MTT法检测SK-OV-3细胞增殖情况。流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期分布。结果 MTT法检测结果显示,不同浓度姜黄素组,随着药物浓度增加,作用时间延长,细胞的增殖抑制率上升(P<0.05);联合用药组明显高于单一用药组(P<0.05)。流式细胞术结果显示,姜黄素能使卵巢癌SKOV-3细胞发生G2/M期阻滞,诱导细胞凋亡;随着姜黄素用药浓度增加,细胞凋亡率增高。结论姜黄素对卵巢癌SKOV-3细胞增殖具有抑制作用,在一定范围内,这种抑制作用呈剂量-时间依赖性;姜黄素、顺铂联合应用具有协同作用。 展开更多
关键词 姜黄素 顺铂 卵巢skov-3细胞 卵巢 细胞凋亡
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GnRH激动剂曲普瑞林对卵巢癌细胞OVCAR3生长的抑制作用及对GnRHⅠ受体、GnRHⅡ受体表达的影响 被引量:4
12
作者 李敏 张艳赏 +1 位作者 张明明 闫萍 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第27期3119-3122,共4页
目的观察促性腺激素释放激素(GnRH)激动剂曲普瑞林对卵巢癌细胞生长的抑制作用并探讨其对GnRHⅠ受体、GnRHⅡ受体表达的影响。方法选用不同浓度曲普瑞林刺激卵巢癌细胞OVCAR3后,采用MTT方法检测其对细胞的增殖活性的影响,并运用RT-PCR方... 目的观察促性腺激素释放激素(GnRH)激动剂曲普瑞林对卵巢癌细胞生长的抑制作用并探讨其对GnRHⅠ受体、GnRHⅡ受体表达的影响。方法选用不同浓度曲普瑞林刺激卵巢癌细胞OVCAR3后,采用MTT方法检测其对细胞的增殖活性的影响,并运用RT-PCR方法,检测曲普瑞林对卵巢癌细胞OVCAR3 GnRHⅠ受体、GnRHⅡ受体表达的影响。结果 10-7mol/L浓度的曲普瑞林作用细胞24 h后,其增殖抑制率为(41.07±0.43)%,随着浓度的增加(10-6 mol/L,10-5 mol/L,10-4 mol/L,10-3 mol/L,10-2 mol/L),抑制率逐渐增加,分别为(50.56±0.76)%、(69.86±1.05)%、(65.43±0.87)%、(62.09±1.24)%、(58.69±0.87)%;以10-5 mol/L浓度的曲普瑞林抑制率最高,有统计学意义(P<0.05);以10-5mol/L浓度的曲普瑞林作用于细胞24 h、48 h、72 h后,增殖抑制率分别是(69.86±1.08)%、(58.69±0.98)%、(48.56±1.02)%,最终是作用时间在24 h时抑制率最高,有统计学意义(P<0.05)。GnRHⅠ受体、GnRHⅡ受体的表达:在曲普瑞林10-5mol/L浓度作用于细胞24 h后最高。结论曲普瑞林对卵巢癌细胞OVCAR3生长有抑制作用,GnRHⅠ受体、GnRHⅡ受体表达变化与GnRH激动剂的作用机制有关。 展开更多
关键词 人卵巢癌细胞OVCAR3 曲普瑞林 促性腺激素释放激素 促性腺激素释放激素Ⅰ受体 促性腺激素释放激素Ⅱ受体 聚合酶链反应
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缺氧诱导因子-1α过表达可使卵巢癌细胞株SKOV3的E-钙黏蛋白下调 被引量:1
13
作者 高蜀君 丰有吉 +1 位作者 孙红 殷莲华 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期441-444,共4页
目的探讨缺氧诱导因子-1α(Hypoxia-inducible factor1α,HIF-1α)和E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)在人卵巢浆液性肿瘤细胞SKOV3缺氧不同时间的表达及其相互作用关系。方法在细胞缺氧培养不同时间段,分别采用Western blotting和RT-PCR... 目的探讨缺氧诱导因子-1α(Hypoxia-inducible factor1α,HIF-1α)和E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)在人卵巢浆液性肿瘤细胞SKOV3缺氧不同时间的表达及其相互作用关系。方法在细胞缺氧培养不同时间段,分别采用Western blotting和RT-PCR技术检测HIF-1α和E-cad的蛋白和RNA表达变化;同时用HIF-1α抑制剂雷帕霉素作用于细胞,检测上述各指标的变化。结果随着缺氧时间的延长,HIF-1α蛋白表达逐渐上升,缺氧16h达到高峰,24h仍处于较高水平(P<0.05),而HIF-1α的mRNA表达变化无明显改变(P>0.05);E-cad缺氧8h表达明显下降(P<0.05),缺氧24h表达仅为对照组的6.37%(P<0.05);雷帕霉素可以从蛋白水平抑制HIF-1α表达,防止E-cad在缺氧环境中的降低。结论HIF-1α过表达可通过下调E-cad从而降低SKOV3细胞的黏附能力,由此可能启动肿瘤细胞从原发灶脱落继而转移的第一步。 展开更多
关键词 卵巢癌细胞SKOV3 缺氧 缺氧诱导因子-1Α E-钙黏蛋白
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内皮祖细胞对卵巢癌细胞SKOV3生物学功能的影响 被引量:1
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作者 罗艳梅 梁志清 +1 位作者 陈振波 阎萍 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期191-195,共5页
目的:通过在卵巢癌细胞SKOV3中使用血管内皮生长因子(VEGF)抗体贝伐单抗,了解脐血内皮祖细胞(EPCs)对卵巢癌细胞SKOV3增殖、迁移、黏附和凋亡能力的影响。方法:在成功建立EPCs和卵巢癌细胞SKOV3体外培育模型后,将实验分为SKOV3单独培养... 目的:通过在卵巢癌细胞SKOV3中使用血管内皮生长因子(VEGF)抗体贝伐单抗,了解脐血内皮祖细胞(EPCs)对卵巢癌细胞SKOV3增殖、迁移、黏附和凋亡能力的影响。方法:在成功建立EPCs和卵巢癌细胞SKOV3体外培育模型后,将实验分为SKOV3单独培养组(SKOV3组),SKOV3+EPCs共培养组(SKOV3+EPCs组),SKOV3+100μg/ml的贝伐单抗共培养组(SKOV3+贝伐单抗组)和SKOV3+EPCs+100μg/ml的贝伐单抗共培养组(SKOV3+EPCs+贝伐单抗组),并比较4组SKOV3的增殖、凋亡、迁移和黏附能力的变化。结果:①SKOV3+EPCs组SKOV3的增殖能力、穿膜细胞数和OD值高于SKOV3组(P<0.05,P<0.01);②SKOV3+贝伐单抗组SKOV3的增殖能力、穿膜细胞数、凋亡率低于SKOV3组(P<0.05,P<0.01):③SK—OV3+EPCs+贝伐单抗组SKOV3的增殖活性、穿膜细胞数、凋亡率低于SKOV3+EPCs组(P<0.05,P<0.01),而OD值显著高于SKOV3+EPCs组(P<0.01)。结论:共培养条件下EPCs能促进SKOV3生物学功能,贝伐单抗则相反,EPCs能协同贝伐单抗抑制SKOV3的生物学功能。 展开更多
关键词 内皮祖细胞 卵巢癌细胞SKOV3 贝伐单抗 体外
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不同磁感应强度的微秒脉冲磁场对卵巢癌细胞SKOV3的影响 被引量:1
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作者 米彦 芮少琴 +3 位作者 储贻道 张晏源 唐均英 龙映妃 《高电压技术》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第8期2494-2500,共7页
雷电μs脉冲电磁场的危害越来越严重,却鲜有人研究此μs脉冲电磁场对人的影响。为研究μs脉冲磁场的生物电磁效应机制以及对人体健康的影响,使用人卵巢癌细胞株SKOV3作为实验对象,采用实验室自制的μs脉冲磁场发生器产生不同磁感应强度... 雷电μs脉冲电磁场的危害越来越严重,却鲜有人研究此μs脉冲电磁场对人的影响。为研究μs脉冲磁场的生物电磁效应机制以及对人体健康的影响,使用人卵巢癌细胞株SKOV3作为实验对象,采用实验室自制的μs脉冲磁场发生器产生不同磁感应强度的μs脉冲磁场(磁感应强度为1~200 m T,上升时间为800 ns,脉冲宽度为8.4μs,频率为8 Hz)处理细胞3 d时间,每天间隔12 h时间处理1次,每次处理时间为1 h。处理结束后24 h时间分别使用噻唑蓝(MTT)和流式细胞术(flow cytometry method,FCM)来检测细胞的增殖抑制率和凋亡率。结果显示:增殖抑制率与脉冲磁场的磁感应强度不呈现趋势变化关系,且增殖抑制率均低于5%,μs脉冲磁场对SKOV3细胞的增殖抑制率不具有统计学意义(概率P〉0.05);肿瘤细胞的凋亡率与脉冲磁场的磁感应强度也不呈现趋势变化关系,且凋亡率均低于12%,脉冲磁场对SKOV3细胞的凋亡也不具有统计学意义(概率P〉0.05)。研究结果揭示:不同磁感应强度(1~200 m T)的μs脉冲磁场对卵巢癌细胞SKOV3无显著影响。 展开更多
关键词 μs脉冲磁场 磁感应强度 卵巢癌细胞SKOV3 MTT 流式细胞 生物电磁效应
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体外稳定转染的重组质粒pEgr-hp53联合辐射对人卵巢癌SKOV-3细胞周期进程及增殖的影响
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作者 董丽华 刘锋 +1 位作者 李艳博 龚守良 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期357-360,368,共5页
目的:探讨体外稳定转染的pEgr-hp53重组质粒联合辐射对人卵巢癌SKOV-3细胞周期及增殖的影响,阐明其抑制肿瘤细胞增殖的机制。方法:脂质体包裹重组质粒pEgr-hp53和pcDNA3.1体外转染SKOV-3细胞所表达的SKOV-3-hp53和SKOV-3-vect分别接... 目的:探讨体外稳定转染的pEgr-hp53重组质粒联合辐射对人卵巢癌SKOV-3细胞周期及增殖的影响,阐明其抑制肿瘤细胞增殖的机制。方法:脂质体包裹重组质粒pEgr-hp53和pcDNA3.1体外转染SKOV-3细胞所表达的SKOV-3-hp53和SKOV-3-vect分别接受0、0.5、2.0和5.0 GyX射线照射,即8个实验组,通过绘制生长陆线评价肿瘤细胞增殖速度,流式细胞术检测肿瘤细胞周期进程的变化。结果:与0 Gy组比较,体外稳定转染的SKOV-3-hp53经不同剂量x射线(0.5、2.0和5.0 Gy)照射后2d细胞数均明显降低(P〈0.05或P〈0.01),并随照射剂量的加大和照后时间的延长下降更为明显;与0 Gy组比较,G0/G1期细胞百分数均明显增高(P〈O.001),G2/M期不同程度降低。SKOV-3-hp53照射组细胞数均明显低于其相应的SKOV-3-vect照射组,0.5 Gy照后4~8d、2.0 Gy照后2d和5.0 Gy照后6d细胞数均明显降低(P〈0.05或P〈0.01);G0/G1期细胞百分数明显增高(P〈O.01),G2/M期明显下降(P〈0.01)。结论:体外稳定转染的pEgr-hp53联合辐射可使人卵巢癌SKOV-3细胞周期阻滞于G1期,并抑制肿瘤细胞增殖。电离辐射激活Egr-1启动子,使p53基因表达增强,加强了对肿瘤细胞生长的抑制作用。 展开更多
关键词 pEgr-hp53重组质粒 人卵巢skov-3细胞 细胞周期 细胞增殖
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人磷脂磷酸水解酶3基因真核表达载体的构建及其对卵巢癌细胞生长的抑制作用
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作者 李留霞 乔玉环 +6 位作者 王淼 郭瑞霞 赵国强 张孝艳 周蔚 张建好 赵先兰 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2009年第1期69-74,共6页
目的:构建人磷脂磷酸水解酶3(hLPP3)基因的真核表达载体pLenExpress-hLPP3并转染卵巢癌细胞系SKOV3细胞,初步观察重组表达载体对卵巢癌细胞的转染效率、目的基因表达情况及对卵巢癌细胞生长的影响。方法:采用RT-PCR法从正常胎盘组织中提... 目的:构建人磷脂磷酸水解酶3(hLPP3)基因的真核表达载体pLenExpress-hLPP3并转染卵巢癌细胞系SKOV3细胞,初步观察重组表达载体对卵巢癌细胞的转染效率、目的基因表达情况及对卵巢癌细胞生长的影响。方法:采用RT-PCR法从正常胎盘组织中提取hLPP3基因,先克隆入克隆载体pGEM-T easy质粒得到pGEM-T-hLPP3,再用BamHⅠ和XhoⅠ进行双酶切,切下的hLPP3基因亚克隆入真核表达载体pLenExpress,得到pLenEx-press-hLPP3重组质粒,采用脂质体转染法转染卵巢癌细胞系SKOV3细胞。实验分为3组:A组为实验组(转染表达hLPP3基因重组质粒)、B组为空质粒对照(转染空表达质粒)、C组为无转染对照。荧光显微镜观察细胞转染效率,实时荧光定量PCR法检测hLPP3 mRNA的表达,化学法测定转染前后细胞上清液中溶血磷脂酸(LPA)含量的变化,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡情况。结果:重组表达质粒经限制性酶切鉴定得到与hLPP3基因长度一致(936bp)的酶切产物,测序分析证实,目的基因序列与GenBank上登录的hLPP3基因(BC009196)序列完全一致。荧光显微镜下见A、B2组SKOV3细胞内有大量绿色荧光信号,转染率分别为67%和69%,C组细胞中无荧光信号。实时荧光定量PCR测定显示A组细胞中hLPP3 mRNA的相对表达量较B、C组明显增加(A、B、C组分别为0.5109±0.0584、0.1499±0.0255、0.1433±0.0181,P<0.05)。A组卵巢癌细胞上清液中的LPA含量较B、C组明显下降[A、B、C组分别为(2.37±0.76)μmol/L、(6.71±2.03)μmol/L、(6.84±1.49)μmol/L,P<0.05];流式细胞仪检测显示A组卵巢癌细胞凋亡率明显增加[A、B、C组分别为(30.50±2.12)%、(1.26±0.43)%、(0.10±0.03)%,P<0.05],细胞周期无明显变化。结论:成功构建了表达目的基因hLPP3的重组真核表达载体pLenEx-press-hLPP3,并能高效转染卵巢癌细胞系SKOV3细胞,使细胞中hLPP3基因表达水平明显升高。增强hLPP3基因表达可以降低细胞外LPA水平,诱导细胞凋亡,抑制卵巢癌细胞的生长。 展开更多
关键词 人磷脂磷酸水解酶3 卵巢癌细胞 真核表达载体 转染
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白藜芦醇通过调控IL-6/JAK2/STAT3信号通路对卵巢癌SKOV-3细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响 被引量:23
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作者 李根林 刘杰 +2 位作者 谢晶 余芙蓉 胡意 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第5期706-711,共6页
目的探讨白藜芦醇(Rev)通过调控IL-6/JAK2/STAT3信号通路对卵巢癌SKOV-3细胞增殖迁移的影响。方法根据药物处理将细胞分为SKOV-3空白组(CON)、白藜芦醇低浓度处理组(Rev-L)、白藜芦醇中浓度处理组(Rev-M)和白藜芦醇高浓度处理组(Rev-H)... 目的探讨白藜芦醇(Rev)通过调控IL-6/JAK2/STAT3信号通路对卵巢癌SKOV-3细胞增殖迁移的影响。方法根据药物处理将细胞分为SKOV-3空白组(CON)、白藜芦醇低浓度处理组(Rev-L)、白藜芦醇中浓度处理组(Rev-M)和白藜芦醇高浓度处理组(Rev-H)。CCK-8检测SKOV-3细胞的增殖;流式细胞术检测SKOV-3细胞的凋亡;细胞划痕愈合实验检测SKOV-3细胞的迁移;Transwell实验检测SKOV-3细胞的侵袭;Western blot法检测各组细胞的转移相关蛋白、凋亡相关蛋白及IL-6/JAK2/STAT3信号通路相关蛋白的表达水平。结果与CON组比较,白藜芦醇处理组SKOV-3细胞凋亡率增加,增殖能力降低,细胞的迁移侵袭能力减弱;凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)表达水平下降;Bcl-2家族促凋亡蛋白(Bax)、活化的半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved Caspase-3)表达水平上调,转移相关蛋白钙黏着蛋白E(E-cadherin)表达水平上调,N-cadherin和波形蛋白(Vimentin)表达水平下调;IL-6/JAK2/STAT3信号通路活性降低。结论Rev能通过下调IL-6/JAK2/STAT3信号通路活性,促进卵巢癌SKOV-3细胞凋亡,抑制卵巢癌SKOV-3细胞的增殖迁移以及侵袭。 展开更多
关键词 白藜芦醇 卵巢 skov-3细胞 IL-6/JAK2/STAT3信号通路
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3,3'-二吲哚甲烷阻断STAT3通路影响卵巢癌细胞增殖、凋亡的实验研究 被引量:3
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作者 徐长华 邹明花 张献全 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第16期1674-1678,共5页
目的观测3,3'-二吲哚甲烷(3,3'-Diindolylmethane,DIM)对体外培养的人卵巢癌细胞SKOV3、A2780增殖、凋亡的影响,并观察信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)、p-STAT3及凋亡相... 目的观测3,3'-二吲哚甲烷(3,3'-Diindolylmethane,DIM)对体外培养的人卵巢癌细胞SKOV3、A2780增殖、凋亡的影响,并观察信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)、p-STAT3及凋亡相关蛋白在凋亡过程中的变化,探讨STAT3信号通路在DIM抑制卵巢癌细胞增殖、诱导其凋亡中的作用。方法采用MTT法检测不同浓度(50、100、200、400μmol/L)的DIM在不同的时间点(24、48、72、96 h)对SKOV3、A2780细胞增殖的影响;倒置显微镜、Hoechst33342染色观察细胞形态的变化;流式细胞术检测DIM对SKOV3、A2780细胞凋亡率和细胞周期的影响;Western blot检测DIM对STAT3、p-STAT3、caspase3、mcl-1、survivin蛋白表达的影响。结果 DIM对SKOV3、A2780细胞的增殖具有明显的抑制作用,与对照组相比具有显著性差异(P<0.05或P<0.01),并呈现时间和剂量依赖性。分别以100、150μmol/L DIM作用于SKOV3细胞48 h后,凋亡率分别为(16.41±3.58)%和(31.58±12.35)%,对照组的凋亡率为(5.16±2.07)%,3组间差异有统计学意义(P<0.05)。75μmol/L DIM作用于A2780细胞24 h后,G1、G2期细胞比例增加,S期细胞比例降低。DIM能上调caspase-3蛋白表达(P<0.05),下调mcl-1、survivin及p-STAT3蛋白的表达(P<0.05),但对STAT3总蛋白的表达则无明显影响。结论 DIM能显著抑制卵巢癌SKOV3、A2780细胞的增殖、诱导其凋亡。上述作用可能是通过抑制STAT3的活化,进而下调mcl-1、survivin蛋白的表达并上调caspase-3蛋白表达而起作用的,DIM有可能成为一种有效的抗卵巢癌药物。 展开更多
关键词 3 3'-二吲哚甲烷 人卵巢癌细胞 增殖 凋亡 信号传导和转录活化因子3
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MiR⁃216a调节JAK2/STAT3通路抑制卵巢癌细胞的转移和上皮⁃间质转化 被引量:3
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作者 吴新华 顾晓荔 胡滨 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第18期2303-2308,共6页
目的本研究旨在探究微小RNA⁃216a(miR⁃216a)是否通过调节Janus激酶2(JAK2)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)途径调控卵巢癌(ovarian cancer,OC)细胞的转移和上皮⁃间质转化(EMT)。方法qRT⁃PCR检测卵巢癌组织和细胞中miR⁃216a表达水平;Tra... 目的本研究旨在探究微小RNA⁃216a(miR⁃216a)是否通过调节Janus激酶2(JAK2)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)途径调控卵巢癌(ovarian cancer,OC)细胞的转移和上皮⁃间质转化(EMT)。方法qRT⁃PCR检测卵巢癌组织和细胞中miR⁃216a表达水平;Transwell检测迁移和侵袭能力;Western blot和免疫荧光检测EMT相关蛋白表达;Western blot分析JAK2/STAT3途径相关蛋白表达。结果miR⁃216a在卵巢癌组织和细胞中的表达下调(P<0.05)。上调miR⁃216a削弱卵巢癌细胞迁移、侵袭和EMT,同时抑制JAK2/STAT3通路激活(P<0.05)。过表达JAK2可逆转上调miR⁃216a对以上指标的影响(P<0.05)。结论miR⁃216a可能通过抑制JAK2/STAT3通路抑制卵巢癌细胞的转移和EMT。 展开更多
关键词 微RNA⁃216a JANUS激酶2 信号转导和转录激活因子3 卵巢癌细胞 转移 上皮-间质转化
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