人乳头瘤病毒16型纳米抗体的筛选及鉴定 被引量：1

1

作者 王若瑜 白崇智 +3 位作者 仲启明 范瑞文 牛林茹 韩鹏程 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CSCD 北大核心 2024年第12期1211-1217,共7页

目的:构建人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1蛋白纳米抗体初级文库,通过筛选鉴定获得一株HPV16 L1特异性纳米抗体。方法:以HPV 16 L1蛋白为抗原对羊驼进行免疫,采用噬菌体展示技术构建初级抗体文库。经3轮淘选,采用ELISA法鉴定阳性克隆,将阳性... 目的:构建人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1蛋白纳米抗体初级文库,通过筛选鉴定获得一株HPV16 L1特异性纳米抗体。方法:以HPV 16 L1蛋白为抗原对羊驼进行免疫,采用噬菌体展示技术构建初级抗体文库。经3轮淘选,采用ELISA法鉴定阳性克隆,将阳性反应最强克隆的VHH序列进行真核表达。经亲和纯化、凝胶过滤层析纯化、SDS-PAGE和WB法鉴定,获得目的纳米抗体;采用表面等离子共振(SPR)技术检测纳米抗体与HPV 16 L1蛋白之间的亲和力,CCK-8法检测纳米抗体对人永生化角质细胞HaCat的毒性,荧光素酶报告基因实验检测纳米抗体对HPV 16假病毒的中和活性。结果:初级文库库容为1.304×10^(10),丰度为6.5×10^(9)个/mL,ELISA法鉴定获得36个阳性克隆。表达、纯化获得蛋白单体与二聚体,经鉴定为目的纳米抗体(命名为Nb)。Nb与HPV 16 L1蛋白结合的亲和力为35.41 nmol/L。Nb实验组HaCat细胞增殖活力与空白组没有显著差异(P>0.05)。与阴性组比较,0.1和1μmol/L Nb均能抑制假病毒感染293FT细胞(均P<0.01)。结论:成功获得一株纯度较好、亲和力较高,对上皮细胞没有明显毒性作用、有效抑制HPV 16假病毒感染293FT细胞的纳米抗体Nb,为防治HPV 16感染提供了有效的候选抗体类药物。 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒16型 噬菌体展示技术 纳米抗体 亲和力

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宫颈癌患者人乳头瘤病毒16型E6基因的克隆及序列分析 被引量：3

2

作者 高艳娥 张菊 +2 位作者 阎小君 宋天保 李丁 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期17-19,共3页

目的　分析中国陕西地区宫颈癌患者人乳头瘤病毒 16型 (HPV16型 )E6基因的结构特点。方法　采用PCR技术扩增了 1例HPV16阳性宫颈癌患者癌组织中HPV16E6基因 ,并对其进行了克隆及全序列分析。结果　成功地克隆了HPV16E6基因 ,与GenBank... 目的　分析中国陕西地区宫颈癌患者人乳头瘤病毒 16型 (HPV16型 )E6基因的结构特点。方法　采用PCR技术扩增了 1例HPV16阳性宫颈癌患者癌组织中HPV16E6基因 ,并对其进行了克隆及全序列分析。结果　成功地克隆了HPV16E6基因 ,与GenBank收录的原型相比 ,E6基因中有 2个碱基发生突变 ,推导其编码的氨基酸有 1个发生了变化。 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒16型 E6基因 宫颈癌 序列分析

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人乳头瘤病毒16型L1基因乳酸杆菌表达载体的构建 被引量：3

3

作者 罗波 段素群 +1 位作者 郑小莉 毛樱逾 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2013年第1期50-52,共3页

目的:构建含人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1基因的乳酸杆菌分泌表达载体。方法:从培养的CasKi细胞中提取DNA为模板,经PCR得到HPV16L1衣壳蛋白基因,将其连接入乳酸杆菌分泌表达载体pVE5523质粒中,并转化入Top10菌中保存。结果:构建的HPV16L1-... 目的:构建含人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1基因的乳酸杆菌分泌表达载体。方法:从培养的CasKi细胞中提取DNA为模板,经PCR得到HPV16L1衣壳蛋白基因,将其连接入乳酸杆菌分泌表达载体pVE5523质粒中,并转化入Top10菌中保存。结果:构建的HPV16L1-pVE5523重组表达载体经PCR鉴定正确;获得的目的基因片段经测序与GenBank公布的HPV16L1基因序列符合。结论:成功构建了HPV16L1-pVE5523表达载体。 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒16型 L1基因 乳酸杆菌 pVE5523 表达载体

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重庆地区1例宫颈癌组织人乳头瘤病毒16型E6,E7基因的结构和变异 被引量：1

4

作者 胡丽娜 徐波 +2 位作者 漆洪波 任红 顾美礼 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期106-108,共3页

目的　报告 1例重庆地区宫颈癌组织人乳头瘤病毒 16型E6、E7基因的结构及其变异。方法　应用聚合酶链式反应(PCR)从宫颈癌组织扩增出人乳头瘤病毒 16型重庆株E6、E7基因 ,分子克隆技术进行基因的克隆 ,测序。结果　成功地扩增出重庆地... 目的　报告 1例重庆地区宫颈癌组织人乳头瘤病毒 16型E6、E7基因的结构及其变异。方法　应用聚合酶链式反应(PCR)从宫颈癌组织扩增出人乳头瘤病毒 16型重庆株E6、E7基因 ,分子克隆技术进行基因的克隆 ,测序。结果　成功地扩增出重庆地区宫颈癌人乳头瘤病毒 16型株E6、E7基因 ,并克隆于质粒载体pBKS( +)。结论　该例宫颈癌组织中人乳头瘤病毒 16型E6、E7与标准株HPV16E6、E7基因的长度相同 ,E6基因无变异 。 展开更多

关键词 宫颈癌 人乳头瘤病毒16型 聚合酶链式反应 PCR 分子克隆

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人乳头瘤病毒16型重组乳球菌疫苗的研制现状 被引量：3

5

作者 李文桂 陈雅棠 《中国感染控制杂志》 CAS 北大核心 2016年第10期802-806,共5页

人乳头瘤病毒16型（human papillomavirus type 16，HPV16）是一类广泛感染人类上皮组织的小 DNA 病毒，能引起人体各种黏膜和皮肤的增生性疾病与肿瘤，与人宫颈癌的发生密切相关。疫苗接种是防治 HPV16感染的有效途径之一，现有疫苗的... 人乳头瘤病毒16型（human papillomavirus type 16，HPV16）是一类广泛感染人类上皮组织的小 DNA 病毒，能引起人体各种黏膜和皮肤的增生性疾病与肿瘤，与人宫颈癌的发生密切相关。疫苗接种是防治 HPV16感染的有效途径之一，现有疫苗的种类包括死疫苗、减毒活疫苗、分子疫苗和DNA 疫苗等，但存在一定的毒副作用，因此尚需研究新型 HPV16疫苗。 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒16型 HPV16 乳球菌 疫苗 综述

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人乳头瘤病毒16型L1和L2晚期蛋白在原核细胞中的表达

6

作者 魏兰兰 谷鸿喜 +2 位作者 韩立群 田厚文 任皎 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2003年第2期13-13,共1页

关键词 人乳头瘤病毒16型 L1 L2 晚期蛋白 原核细胞 表达

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宫颈癌组织中人乳头瘤病毒16型E7基因的DNA改组

7

作者 李艳佳 张佃财 焦建丽 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期420-422,共3页

目的利用DNA改组技术进化人乳头瘤病毒16型E7(HPV16E7)基因,建立HPV16E7基因突变体库。方法从宫颈癌标本中扩增出HPV16E7基因,用脱氧核糖核酸酶(DNaseⅠ)碎片化该基因,切割成50 bp左右的小片段。这些小片段在不外加引物的条件下,利用PC... 目的利用DNA改组技术进化人乳头瘤病毒16型E7(HPV16E7)基因,建立HPV16E7基因突变体库。方法从宫颈癌标本中扩增出HPV16E7基因,用脱氧核糖核酸酶(DNaseⅠ)碎片化该基因,切割成50 bp左右的小片段。这些小片段在不外加引物的条件下,利用PCR反应进行重聚,再将重聚物经过一轮普通PCR扩增。结果电泳切胶回收获得与原片段大小相当的基因片段,改组结果较为成功。结论DNA改组在HPV16E7改组中的应用并成功,有利于从HPV16E7基因突变题库中筛选出高免疫原性的基因型别,并为进一步构建HPV治疗性疫苗奠定基础。 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒16型E7基因 DNA改组 宫颈癌 人乳头瘤病毒疫苗

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人乳头瘤病毒16型E2蛋白表达、纯化及抗血清制备

8

作者 孙宇辉 张沿君 +5 位作者 刘明明 唐丽萍 张光虹 魏兰兰 谷鸿喜 商庆龙 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期940-944,共5页

目的表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)E2蛋白,并制备小鼠抗HPV16 E2血清。方法采用PCR技术扩增HPV16E2基因,构建入pET21b载体,重组表达载体pET21b-HPV16E2经鉴定后转化大肠埃希菌BL21(DE3),诱导表达并鉴定表达产物。经纯化、变性和复性方法... 目的表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)E2蛋白,并制备小鼠抗HPV16 E2血清。方法采用PCR技术扩增HPV16E2基因,构建入pET21b载体,重组表达载体pET21b-HPV16E2经鉴定后转化大肠埃希菌BL21(DE3),诱导表达并鉴定表达产物。经纯化、变性和复性方法,制备可溶性HPV16 E2蛋白。免疫BALB/c小鼠制备抗血清,检测小鼠IFN-γ、CD4^+T细胞、CD8^+T细胞、CD4/CD8比值和抗血清滴度变化。结果酶切和测序结果表明pET21b-HPV16 E2构建成功。表达蛋白相对分子质量(M_r)为42 000,Western blot法证明具有较高特异性。小鼠抗血清效价升高,CD4^+T细胞数量和CD4/CD8比值升高,小鼠IFN-γ无升高。结论成功制备可溶性HPV16 E2蛋白和小鼠抗HPV16 E2高效价的抗血清。 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒16型 E2蛋白 表达 抗血清

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人乳头瘤病毒16型E7基因原核表达载体的构建及表达

9

作者 徐丽娟 温剑平 +1 位作者 史红艳 孙延波 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期661-664,共4页

目的:构建人乳头瘤病毒16型(HPV-16)E7基因原核表达载体,观察目的基因的蛋白表达。方法:人工合成HPV16E7基因核苷酸序列,利用特异性引物通过聚合酶链反应扩增HPV16E7基因,并克隆至pGEX-4T1原核表达载体,构建重组表达载体pGEX-4T1-HPV16... 目的:构建人乳头瘤病毒16型(HPV-16)E7基因原核表达载体,观察目的基因的蛋白表达。方法:人工合成HPV16E7基因核苷酸序列,利用特异性引物通过聚合酶链反应扩增HPV16E7基因,并克隆至pGEX-4T1原核表达载体,构建重组表达载体pGEX-4T1-HPV16-E7。将其转化到工程菌Rosetta后,经IPTG诱导表达,进行E7-GST融合蛋白的SDS-PAGE分析和Ni 2+-NTA亲和层析纯化。结果:E7基因PCR扩增产物和重组表达质粒的双酶切产物经琼脂糖凝胶电泳,均可见300bp的目的基因条带。表达的重组蛋白经SDS-PAGE电泳和纯化后,在相对分子质量约36 000处有特异性表达带,与预期相符。结论:在原核系统中含E7基因的重组质粒可有效表达E7-GST融合蛋白。 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒16型 聚合酶链式反应 原核表达载体

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人乳头瘤病毒16型E5对人宫颈癌SiHa细胞恶性潜能的影响及其机制探讨

10

作者 廖书杰 马丁 邓东锐 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期145-145,共1页

关键词 SIHA细胞 人乳头瘤病毒16型 人宫颈癌 恶性潜能 裸鼠成瘤实验 WESTERN印迹 HPV16型 MTT法检测

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人乳头瘤病毒16型E6、E7反义RNA对人宫颈癌SiHa细胞的恶性逆转作用

11

作者 司马妮 王薇 徐茜 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期369-369,共1页

通过真核表达载体介导HPV16型E6、E7基因反义RNA在SiHa细胞中的表达，探讨反义RNA能否降低E6、E7基因的表达和诱导细胞凋亡。利用pEGFP构建HPV16型E6、E7基因反义RNA的真核表达载体并转染SiHa细胞。利用RT-PCR和Western blot技术检测转... 通过真核表达载体介导HPV16型E6、E7基因反义RNA在SiHa细胞中的表达，探讨反义RNA能否降低E6、E7基因的表达和诱导细胞凋亡。利用pEGFP构建HPV16型E6、E7基因反义RNA的真核表达载体并转染SiHa细胞。利用RT-PCR和Western blot技术检测转染后E6、E7基因的mRNA和蛋白的变化，利用MTT法检测SiHa细胞转染后细胞增殖活性，利用流式细胞仪和激光共聚焦显微镜检测转染后细胞的凋亡情况。 展开更多

关键词 HPV16型E6 SIHA细胞 反义RNA 人乳头瘤病毒16型 E7基因 逆转作用 人宫颈癌 诱导细胞凋亡

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安徽省人乳头瘤病毒16型全基因组的结构特征

12

作者 孙云峰 江彤 陈传俊 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2014年第10期1456-1460,共5页

目的克隆安徽省人乳头状瘤病毒16型(HPV16)全基因组,分析HPV16全基因组序列并了解其结构特征。方法收集5例安徽省宫颈癌病理组织标本并提取总DNA,设计4对特异性引物分段克隆HPV16全基因组,测序后进行序列拼接及核苷酸序列分析。结果检测... 目的克隆安徽省人乳头状瘤病毒16型(HPV16)全基因组,分析HPV16全基因组序列并了解其结构特征。方法收集5例安徽省宫颈癌病理组织标本并提取总DNA,设计4对特异性引物分段克隆HPV16全基因组,测序后进行序列拼接及核苷酸序列分析。结果检测到1个宫颈癌病理样本中含有HPV16并获得全基因组序列,序列全长7 906 nts(GenBank登录号:KC935953)。序列比对显示,安徽HPV16(HPV16-Anhui)与泰国HPV16和日本HPV16的全基因组核苷酸序列相似性最高,达99.5%。系统关系树分析显示,HPV16-Anhui与其他7个HPV16型聚成1个单独的分支。结论获得安徽省首例HPV16全基因组核苷酸序列,HPV16-Anhui与不同地区HPV16亲缘关系均较近且基因组变异性较小。 展开更多

关键词 人乳头状瘤病毒16型 全基因组 克隆 序列分析

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新疆维吾尔族妇女宫颈癌组织中乳头瘤病毒16型E6基因的克隆和序列分析 被引量：24

13

作者 马正海 钱东 +5 位作者 马纪 林仁勇 闻明 钟哲 张富春 张秋云 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第3期400-404,共5页

为了分析新疆南部地区维吾尔族妇女宫颈癌组织中HPV16型E6基因结构特点 ,从中国新疆南部地区维吾尔族妇女宫颈癌活检组织标本中提取DNA ,以宫颈癌活检组织标本DNA为模板进行PCR扩增 ,获得HPV16E6基因 ,将其克隆到pUCm T载体上 ,并对其... 为了分析新疆南部地区维吾尔族妇女宫颈癌组织中HPV16型E6基因结构特点 ,从中国新疆南部地区维吾尔族妇女宫颈癌活检组织标本中提取DNA ,以宫颈癌活检组织标本DNA为模板进行PCR扩增 ,获得HPV16E6基因 ,将其克隆到pUCm T载体上 ,并对其进行基因全序列分析 .PCR检测结果显示宫颈癌组织中HPV16E6阳性率为 82 35 % (14/17) ;测序结果显示 ,新疆株HPV16E6基因全长 45 6bp ,大小与德国标准株一致 .E6基因的第 2 47位碱基发生T→G突变 ,并由此引起所编码的氨基酸亦发生改变 .上述结果表明 ,中国新疆南部地区维吾尔族妇女宫颈癌患者组织中HPV16E6的基因结构与德国标准株HPV16E6基因之间存在差异 . 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒16型 宫颈癌 E6基因 核苷酸序列分析新疆 维族妇女

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16型人乳头瘤病毒衣壳蛋白在真核细胞中的表达

14

作者 魏兰兰 谷鸿喜 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2001年第4期17-18,共2页

为了构建HPV16型晚期蛋白重组杆状病毒 ,并使其在昆虫细胞中获得高效表达。首先构建 2株重组杆状病毒转移质粒 ,分别携带人乳头瘤病毒晚期基因L1及L1和L2 ,再用线性化的杆状病毒DNA与该重组杆状病毒转移质粒共转染sf9昆虫细胞进行同源重... 为了构建HPV16型晚期蛋白重组杆状病毒 ,并使其在昆虫细胞中获得高效表达。首先构建 2株重组杆状病毒转移质粒 ,分别携带人乳头瘤病毒晚期基因L1及L1和L2 ,再用线性化的杆状病毒DNA与该重组杆状病毒转移质粒共转染sf9昆虫细胞进行同源重组 ,获得 2株重组杆状病毒。经鉴定该重组病毒中有目的基因存在且可表达所编码的L1或L2 晚期蛋白。结果表明HPV16型晚期蛋白在昆虫细胞中获得成功表达 。 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒16型 病毒样颗粒 重组杆状病毒 衣壳蛋白 真核细胞 表达

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人乳头瘤病毒16和52型双荧光等温多自配引发扩增的检测方法 被引量：5

15

作者 崔玉伟 牟颖 +4 位作者 马莉 丁雄 方宗宇 王焰 吴青青 《吉林大学学报（理学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期1017-1023,共7页

应用等温多自配引发扩增(IMSA)技术,分别针对人乳头瘤病毒(HPV)16型的E7和52型的E6基因序列设计6条特异性引物,并在检测体系中加入羟基萘酚蓝(HNB)和SYBR GreenⅠ的混合双荧光指示剂,建立快速检测人乳头瘤病毒的双荧光IMSA方法.结果表明... 应用等温多自配引发扩增(IMSA)技术,分别针对人乳头瘤病毒(HPV)16型的E7和52型的E6基因序列设计6条特异性引物,并在检测体系中加入羟基萘酚蓝(HNB)和SYBR GreenⅠ的混合双荧光指示剂,建立快速检测人乳头瘤病毒的双荧光IMSA方法.结果表明:340μmol/L HNB与1∶10 000SYBR GreenⅠ混合构建的双荧光指示剂在IMSA反应体系中具有明确的指示效果,455nm蓝光激发下阳性反应管双荧光显色为黄绿色,阴性反应管双荧光显色为橘红色;该方法对HPV16和HPV52型检测限分别达60,600拷贝/μL,可特异性检出样品中HPV16和HPV52,与临床检测结果比对无差异. 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒16型 人乳头瘤病毒52型 等温多自配引发扩增 双荧光

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信号诱导增殖相关蛋白1和16、18型人乳头瘤病毒E6蛋白在宫颈癌中的表达及临床意义 被引量：2

16

作者 李东林 蔡晶 +2 位作者 况燕 曹晋 王泽华 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期754-758,共5页

目的:探讨信号诱导增殖相关蛋白1(SIPA1)和16、18型人乳头瘤病毒E6蛋白(HPV16/18E6)在宫颈癌中的表达及其与临床病理之间的关系。方法:Western blot检测宫颈癌C33A、HT3、SiHa、HeLa和CaSki细胞株中HPV16/18E6和SIPA1蛋白表达;免疫组织... 目的:探讨信号诱导增殖相关蛋白1(SIPA1)和16、18型人乳头瘤病毒E6蛋白(HPV16/18E6)在宫颈癌中的表达及其与临床病理之间的关系。方法:Western blot检测宫颈癌C33A、HT3、SiHa、HeLa和CaSki细胞株中HPV16/18E6和SIPA1蛋白表达;免疫组织化学Envi-sion法检测正常宫颈组织(40例)和宫颈癌组织(174例)石蜡标本中HPV16/18E6和SIPA1蛋白;分析SIPA1和HPV16/18E6相互之间及其与宫颈癌盆腔淋巴结转移之间的关系。结果:宫颈癌细胞系中SIPA1与HPV16/18E6表达呈负相关。SIPA1在正常宫颈组织和宫颈癌组织中阳性率分别为87.5%和58.6%,差异有高度统计学意义(χ2=11.78,P=0.001);SIPA1蛋白在有和无盆腔淋巴结转移时阳性率分别为19.0%和71.2%,差异有高度统计学意义(χ2=21.45,P=0.000),且SIPA1阴性者发生淋巴结转移风险高于阳性者(OR=5.011,95%CI2.311～10.866,P<0.01)。HPV16/18E6在正常宫颈组织和宫颈癌组织中的阳性率分别为30.0%和79.3%,差异有高度统计学意义(χ2=37.72,P=0.000);HPV16/18E6在有和无淋巴结转移时阳性率分别为97.6%和73.5%,差异有高度统计学意义(χ2=11.31,P=0.001),HPV16/18E6阳性者淋巴结转移风险高于阴性者(OR=14.794,95%CI1.960～111.634,P<0.01)。宫颈癌组织中SIPA1与HPV16/18E6蛋白呈负相关(r=-0.249,P<0.001)。结论:SIPA1蛋白表达与HPV感染有关,HPV16/18E6有抑制SIPA1表达的作用,SIPA1在抑制宫颈癌的淋巴结转移中发挥着重要作用,可作为宫颈癌盆腔淋巴结转移的早期预测因子。 展开更多

关键词 宫颈癌 肿瘤转移 信号诱导增殖相关蛋白1 16、18型人乳头瘤病毒E6蛋白 免疫组织化学

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16型人乳头状瘤病毒E6、E7与宫颈癌、宫颈炎关系的初步研究

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作者 徐波 胡丽娜 +1 位作者 顾美礼 任红 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2000年第4期371-372,379,共3页

目的　了解重庆地区宫颈癌、宫颈炎发病与16型人乳头状瘤病毒（HPV16）E6、E7的关系。 方法　运用PCR，分子生物学技术进行HPV16 E6、E7的扩增和克隆。结果　重庆地区宫颈癌、宫颈炎组织中HPV16 E6,E7总检出率分别为70%和65%。 结论　... 目的　了解重庆地区宫颈癌、宫颈炎发病与16型人乳头状瘤病毒（HPV16）E6、E7的关系。 方法　运用PCR，分子生物学技术进行HPV16 E6、E7的扩增和克隆。结果　重庆地区宫颈癌、宫颈炎组织中HPV16 E6,E7总检出率分别为70%和65%。 结论　重庆地区HPV16感染与宫颈癌、宫颈炎的发生相关。E7原癌蛋白可能与宫颈癌发生早期有关，而E6原癌蛋白可能与宫颈癌形成晚期关系密切。 展开更多

关键词 16型人乳头状瘤病毒 宫颈癌 宫颈炎 PCR

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宫颈组织和细胞中BRD4在HPV16病毒复制中的作用

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作者 王乐 李伟欣 +5 位作者 董杨柳 赵先 朱鑫丽 张雪晨 者湘漪 潘泽民 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第6期1080-1085,共6页

目的探讨宫颈鳞状细胞癌和宫颈上皮内瘤变Ⅰ级(CINI)组织中复制相关溴结构域蛋白4(BRD4)与人乳头瘤病毒(HPV)16型(HPV16)病毒载量的关系,确定BRD4降解剂MZ1对宫颈癌细胞病毒载量的影响。方法收集HPV16阳性的宫颈癌标本30例和非宫颈癌标... 目的探讨宫颈鳞状细胞癌和宫颈上皮内瘤变Ⅰ级(CINI)组织中复制相关溴结构域蛋白4(BRD4)与人乳头瘤病毒(HPV)16型(HPV16)病毒载量的关系,确定BRD4降解剂MZ1对宫颈癌细胞病毒载量的影响。方法收集HPV16阳性的宫颈癌标本30例和非宫颈癌标本30例,通过实时荧光定量PCR检测标本病毒载量,免疫组织化学和Western blot分析BRD4的表达情况。结果宫颈癌标本组病毒载量明显高于非宫颈癌标本组,差异有统计学意义(P<0.01)。免疫组织化学结果显示,BRD4在宫颈癌标本中的表达水平高于非癌标本,差异有统计学意义(P<0.05)。BRD4的表达与病毒载量高低呈正相关,差异有统计学意义(P<0.001)。结论BRD4可能参与了HPV16病毒的复制,BRD4降解剂MZ1可以抑制HPV16病毒的复制。 展开更多

关键词 宫颈癌 溴结构域蛋白4 人乳头瘤病毒16型 病毒载量 MZ1

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HPV16型E6蛋白在外阴上皮内非瘤样病变和外阴鳞癌中的表达 被引量：4

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作者 周静 肖松舒 +1 位作者 邓新粮 崔超美 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期225-230,共6页

目的:检测人乳头状瘤病毒(HPV)16-E6蛋白在外阴上皮内非瘤样病变(NNEDV)、外阴鳞癌(VSCC)中的表达,探讨HPV16-E6蛋白是否为NNEDV病因及与VSCC的相关性。方法:采用免疫组织化学SP法检测HPV16-E6在15例正常外阴组织,40例NNEDV及45例VSCC... 目的:检测人乳头状瘤病毒(HPV)16-E6蛋白在外阴上皮内非瘤样病变(NNEDV)、外阴鳞癌(VSCC)中的表达,探讨HPV16-E6蛋白是否为NNEDV病因及与VSCC的相关性。方法:采用免疫组织化学SP法检测HPV16-E6在15例正常外阴组织,40例NNEDV及45例VSCC中的蛋白表达情况。结果:HPV16-E6蛋白在正常外阴皮肤组无表达,在NNEDV及VSCC中阳性表达率分别为30%和66.67%,差异均有统计学意义(P<0.05)。在NNEDV组中,HPV16-E6蛋白在鳞状上皮增生(SH)型及硬化性苔藓(LS)型阳性率分别为35%和25%,差异无统计学意义(P>0.05),但均较正常外阴皮肤组升高(P<0.05),较VSCC组降低(P<0.05)。HPV16-E6在VSCC的表达阳性率为66.67%,阳性率随临床分期的增高而增高,I期和II期,I期和III期比较差异均有统计学意义(P<0.017),但II期和III期比较差异无统计学意义(P>0.017)。随着肿瘤分化程度的增高,阳性率逐渐降低,高分化和低分化,中分化和低分化比较差异均有统计学意义(P<0.017),但高分化和中分化比较差异无统计学意义(P>0.017)。有淋巴结转移者HPV16-E6阳性表达率高于无淋巴结转移者(P<0.05)。结论:HPV感染可能是NNEDV的病因之一。HPV16-E6蛋白表达升高可能与VSCC发生、发展相关。 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒16型E6蛋白 外阴上皮内非瘤样病变 外阴鳞癌

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广东地区HPV16型L1基因的序列分析及其毕赤酵母表达载体的构建 被引量：2

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作者 刘红 宇丽 +5 位作者 周羽竝 莫宏波 刘萍 李发涛 李冬艳 罗京资 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期115-120,共6页

目的:分析广东地区人乳头瘤病毒(HPV)16型L1基因结构特点;构建广东分离株HPV16 L1毕赤酵母分泌型表达载体。方法:采用PCR技术从广东地区宫颈癌组织中扩增HPV16 L1基因,克隆入毕赤酵母表达载体pPICZαC,测序并对HPV16 L1基因进行序列分... 目的:分析广东地区人乳头瘤病毒(HPV)16型L1基因结构特点;构建广东分离株HPV16 L1毕赤酵母分泌型表达载体。方法:采用PCR技术从广东地区宫颈癌组织中扩增HPV16 L1基因,克隆入毕赤酵母表达载体pPICZαC,测序并对HPV16 L1基因进行序列分析。结果:成功扩增了广东地区HPV16 L1基因,并构建了其毕赤酵母表达载体pPICZαC-HPV16 L1。广东分离株HPV16 L1基因序列与德国标准株相比有16处不同,同源性为98.99%,其编码的氨基酸序列有8处发生改变;与中国标准株比较有9处不同,同源性为99.18%,其编码的氨基酸序列有4处发生变化;发现在HPV16 L1基因序列中nt5 649、nt5 652、nt5 654、nt5 657、nt5 692、nt5 693,6个位点存在突变。结论:广东地区HPV16 L1基因序列与德国标准株、中国标准株相比较均存在差异;成功构建广东地区HPV16 L1真核表达载体。 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒16型 广东 L1基因 突变 毕赤酵母

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