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高脂血清对人主动脉血管平滑肌细胞增殖的影响及其机制
1
作者 刘晴 汤潜 +2 位作者 王莎莎 韩彦弢 王春波 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第47期61-63,共3页
目的观察高脂血清对人主动脉血管平滑肌细胞(HASMC)增殖的影响,并探讨其机制。方法取对数生长期HASMC细胞分为实验组和和对照组,实验组包括实验1、2、3组,另设空白对照组。对照组常规培养;实验1、2、3组分别加入10%、15%、20%浓度的高... 目的观察高脂血清对人主动脉血管平滑肌细胞(HASMC)增殖的影响,并探讨其机制。方法取对数生长期HASMC细胞分为实验组和和对照组,实验组包括实验1、2、3组,另设空白对照组。对照组常规培养;实验1、2、3组分别加入10%、15%、20%浓度的高脂血清培养;空白对照组仅加培养基无细胞。继续培养6、12、24、48 h,用CCK-8法测算实验组HASMC细胞增殖率;培养24 h时采用实时荧光定量PCR法检测各组HASMC中GRIM-19和p-STAT3 mRNA,采用Western blotting法检测GRIM-19和p-STAT3蛋白。结果相同时间点细胞增殖率实验3组高于实验2组,实验2组高于实验1组,P均<0.05。随着高脂血清培养时间增加,各组HASMC细胞增殖率呈递增趋势,P均<0.05。培养24 h时HASMC中GRIM-19 mRNA和蛋白实验3组低于实验2组,实验2组低于实验1组,P均<0.05;HASMC中p-STAT3 mRNA和蛋白实验3组高于实验2组,实验2组高于实验1组,P均<0.05。结论高脂血清可以促进HASMC增殖。与10%、15%的高脂血清相比,20%高脂血清促进HASMC增殖的效果最为明显。其作用机制可能与GRIM-19下调p-STAT3表达有关。 展开更多
关键词 人主动脉血管平滑肌细胞 细胞增殖 维甲酸干扰素诱导凋亡相关基因 转录信号转导子与激活子3
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黄连素对人主动脉血管平滑肌细胞钙化的作用及其机制 被引量：3
2
作者 张鑫鹏 曾存良 +5 位作者 孙晓磊 何虎强 胥雄飞 曾宏 施森 刘勇 《山东医药》 CAS 2018年第33期1-4,共4页
目的探讨黄连素影响人主动脉血管平滑肌细胞(HASMCs)钙化的作用及机制。方法利用糖基化终末产物(AGEs)建立HASMCs钙化模型,予以不同浓度(10、25、50μmol/L)的黄连素干预。用冯库萨、茜素红染色观察细胞钙化程度,采用细胞内钙含量试剂... 目的探讨黄连素影响人主动脉血管平滑肌细胞(HASMCs)钙化的作用及机制。方法利用糖基化终末产物(AGEs)建立HASMCs钙化模型,予以不同浓度(10、25、50μmol/L)的黄连素干预。用冯库萨、茜素红染色观察细胞钙化程度,采用细胞内钙含量试剂盒测定钙含量,Western blotting检测各组细胞骨保护素(OPG)、骨桥蛋白(OPN)及骨形成蛋白2(BMP2)、细胞外信号调节激酶(ERK)、p38蛋白表达。结果与对照组比较,AGEs组钙化程度、细胞内钙含量升高(P均<0.05),不同浓度黄连素干预HASMCs钙含量呈浓度依赖性减少(P均<0.05);AGEs组OPG、BMP2、OPN、ERK、p38蛋白表达量较对照组明显增高(P均<0.05),不同浓度黄连素呈浓度依赖性地减少HASMCs的OPG、BMP2、OPN、ERK、p38蛋白表达量(P均<0.05)。结论黄连素可抑制AGEs诱导的HASMCs钙化,其机制可能与下调ERK、p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路导致OPG、OPN、BMP2表达减少有关。 展开更多
关键词 黄连素 人主动脉血管平滑肌细胞 血管钙化 糖基化终末产物 丝裂原活化蛋白激酶通路
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miRNA-195在腹主动脉瘤血管平滑肌细胞中作用机制探讨
3
作者 徐妙军 金淦 +1 位作者 刘春江 唐黎明 《浙江临床医学》 2024年第4期483-486,共4页
目的探讨miRNA-195在大鼠腹主动脉瘤中表达及对血管平滑肌细胞的作用。方法建立大鼠腹主动脉瘤模型,实时荧光定量PCR检测miRNA-195在腹主动脉瘤组织中的表达量;血管平滑肌细胞中转染miRNA抑制物,用CCK-8试剂盒检测细胞增殖变化,流式细... 目的探讨miRNA-195在大鼠腹主动脉瘤中表达及对血管平滑肌细胞的作用。方法建立大鼠腹主动脉瘤模型,实时荧光定量PCR检测miRNA-195在腹主动脉瘤组织中的表达量;血管平滑肌细胞中转染miRNA抑制物,用CCK-8试剂盒检测细胞增殖变化,流式细胞仪技术检测细胞凋亡率,蛋白印迹法检测MMP-2、MMP-9和OPN蛋白表达。结果miRNA-195在大鼠腹主动脉瘤组织中呈高表达;血管平滑肌细胞中转染miRNA-195抑制物后,转染组细胞的增殖能力在48 h、72 h和96 h比对照组提高40.5%(P<0.05)、39.7%(P<0.01)、36.1%(P<0.001),且转染组细胞凋亡率比对照组降低35.6%(P<0.001),MMP-2蛋白、MMP-9蛋白和OPN蛋白在转染组中表达量分别比对照组降低45.4%、36.8%和48.8%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论miRNA-195表达升高导致血管平滑肌细胞数量减少,并可能通过上调MMP-2和MMP-9蛋白表达致细胞外基质发生降解,从而促进腹主动脉瘤的形成和发展。 展开更多
关键词 腹主动脉瘤 miRNA-195 血管平滑肌细胞
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血管平滑肌细胞调节性死亡参与主动脉瘤发生发展的作用研究
4
作者 韩雪钰 刘欣 杨波 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2024年第3期352-354,共3页
主动脉瘤是一种以主动脉局部或弥漫病理性扩张达到正常血管直径1.5倍及以上为主要病理特征,在65岁以上老年人中患病率超过10%的临床常见大血管疾病^([1])。主动脉瘤一旦发生瘤体破裂,引发的失血性休克和血流动力学紊乱极其凶险,对人类... 主动脉瘤是一种以主动脉局部或弥漫病理性扩张达到正常血管直径1.5倍及以上为主要病理特征,在65岁以上老年人中患病率超过10%的临床常见大血管疾病^([1])。主动脉瘤一旦发生瘤体破裂,引发的失血性休克和血流动力学紊乱极其凶险,对人类生命健康构成重大威胁。然而,主动脉瘤通常发病隐匿,大多数患者在瘤体破裂时缺乏明显的临床症状。目前,尚无有效治疗的药物,外科手术是预防和应对瘤体急性破裂的主要手段。 展开更多
关键词 肌细胞 平滑肌 主动脉 主动脉瘤 细胞凋亡 坏死性凋亡 细胞焦亡 铁死亡 血管平滑肌细胞
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消皮素B在人主动脉夹层组织中的表达变化及对主动脉平滑肌细胞焦亡、炎症反应的影响
5
作者 沈小艳 谢孝平 +1 位作者 李博文 王志维 《山东医药》 CAS 2024年第11期6-10,共5页
目的观察人主动脉夹层组织消皮素B(GSDMB)表达变化,并探讨GSDMB对人主动脉平滑肌细胞(HASMCs)焦亡和炎症反应的影响。方法收集主动脉夹层患者的主动脉夹层组织、器官捐献者的主动脉组织(正常对照组织)各8例份,采用Western blotting法检... 目的观察人主动脉夹层组织消皮素B(GSDMB)表达变化,并探讨GSDMB对人主动脉平滑肌细胞(HASMCs)焦亡和炎症反应的影响。方法收集主动脉夹层患者的主动脉夹层组织、器官捐献者的主动脉组织(正常对照组织)各8例份,采用Western blotting法检测GSDMB蛋白表达。将对数生长期的HASMCs分为NC-siRNA组(转染NC-siRNA)、脂多糖(LPS)组(LPS作用)、GSDMB-siRNA组(转染GSDMB-siRNA)、GSDMB-siRNA+LPS组(LPS作用后转染GSDMB-siRNA),另将HASMCs分为空载质粒组(转染空载质粒)、LPS作用组(LPS作用)、GSDMB过表达组(转染GSDMB过表达质粒)、GSDMB过表达+LPS组(LPS作用后转染GSDMB过表达质粒),采用Western blotting法检测细胞GSDMB、半胱氨酸蛋白酶4(Caspase-4)、消皮素D(GSDMD)、N-消皮素D(N-GSDMD)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)蛋白表达,流式细胞术检测细胞焦亡率,ELISA法检测细胞上清液白细胞介素18(IL-18)、白细胞介素1β(IL-1β)水平。结果主动脉夹层组织与正常对照组织GSDMB蛋白相对表达量分别为0.88±0.16、0.62±0.15,二者比较P<0.05。与NC-siRNA组比较,LPS组GSDMB、Caspase-4、GSDMD、N-GSDMD、MMP-9、MMP-2蛋白相对表达量和细胞焦亡率及细胞上清液IL-18、IL-1β水平均升高,GSDMB-siRNA组仅GSDMB蛋白相对表达量降低(P均<0.05)。与LPS组比较,GSDMB-siRNA+LPS组GSDMB、Caspase-4、GSDMD、N-GSDMD、MMP-9、MMP-2蛋白相对表达量和细胞焦亡率及细胞上清液IL-18、IL-1β水平均降低(P均<0.05)。与空载质粒组比较,LPS作用组GSDMB、Caspase-4、GSDMD、N-GSDMD、MMP-9、MMP-2蛋白相对表达量和细胞焦亡率及细胞上清液IL-18、IL-1β水平均升高(P均<0.05),GSDMB过表达组仅GSDMB蛋白相对表达量升高(P<0.05)。与LPS作用组比较,GSDMB过表达+LPS组GSDMB、Caspase-4、GSDMD、N-GSDMD、MMP-9、MMP-2蛋白相对表达量和细胞焦亡率及细胞上清液IL-18、IL-1β水平均升高(P均<0.05)。结论人主动脉夹层组织GSDMB表达升高;GSDMB不会影响正常HASMCs的焦亡和炎症反应,但会通过Caspase-4介导的非经典途径正向调控LPS诱导的HASMCs焦亡和炎症反应。 展开更多
关键词 消皮素B 主动脉夹层 人主动脉平滑肌细胞 细胞焦亡 炎症反应 半胱氨酸蛋白酶4
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利血平对大鼠主动脉血管平滑肌细胞自噬的影响 被引量：3
6
作者 王顺民 杨晓丹 +2 位作者 曾勇 黄露 雍苏南 《中国医药导报》 CAS 2020年第16期4-7,I0004,共5页
目的探讨利血平与大鼠主动脉血管平滑肌细胞(RA-VSMC)自噬的关系。方法用含利血平或者厄尔平衡盐缓冲液(EBSS)培养基体外培养RA-VSMC,MTT法检测对照组、5μmol/L利血平组、10μmol/L利血平组、20μmol/L利血平组、50μmol/L利血平组RA-V... 目的探讨利血平与大鼠主动脉血管平滑肌细胞(RA-VSMC)自噬的关系。方法用含利血平或者厄尔平衡盐缓冲液(EBSS)培养基体外培养RA-VSMC,MTT法检测对照组、5μmol/L利血平组、10μmol/L利血平组、20μmol/L利血平组、50μmol/L利血平组RA-VSMC的细胞活力;mRFP-GFP-LC3双荧光体系示踪RA-VSMC的自噬小体;实时荧光定量PCR(qPCR)以及蛋白免疫印迹(WB)实验检测对照组、10μmol/L利血平组、50μmol/L利血平组和EBSS组RA-VSMC自噬相关基因LC3和Beclin1的表达。结果MTT结果显示,与对照组比较,5μmol/L利血平组、10μmol/L利血平组、20μmol/L利血平组和50μmol/L利血平组细胞活力均显著降低(P<0.05或P<0.01);mRFP-GFP-LC3双荧光体系结果显示,对照组和10μmol/L利血平组细胞中无明显自噬小体,50μmol/L利血平组和EBSS组细胞形成明显自噬小体;qPCR结果显示,与对照组比较,10μmol/L利血平组LC3 mRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05),50μmol/L利血平组和EBSS组LC3 mRNA表达水平显著升高(P<0.05或P<0.01);10μmol/L利血平组、50μmol/L利血平组和EBSS组Beclin1 mRNA表达水平显著升高(P<0.01);WB结果显示,与对照组比较,10μmol/L利血平组、50μmol/L利血平组和EBSS组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比率显著升高(P<0.01),10μmol/L利血平组、50μmol/L利血平组和EBSS组Beclin1蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。结论利血平可能通过自噬机制调控VSMC的增殖。 展开更多
关键词 利血平 血管平滑肌细胞 增殖 自噬
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血管平滑肌细胞凋亡在腹主动脉瘤发病中的作用 被引量：3
7
作者 景在平 吴建秋 《中国现代普通外科进展》 CAS 2001年第2期84-85,共2页
目的 :探讨腹主动脉瘤 (AAA)中膜血管平滑肌细胞 (VSMC)密度降低的机制。方法 :选取人体肾下AAA及正常腹主动脉组织 (NA)标本 ,采用免疫组化及原位末端DNA标记技术 ,测定中膜VSMC、凋亡细胞及其相关蛋白 ;计算机图像分析并计算VSMC密度... 目的 :探讨腹主动脉瘤 (AAA)中膜血管平滑肌细胞 (VSMC)密度降低的机制。方法 :选取人体肾下AAA及正常腹主动脉组织 (NA)标本 ,采用免疫组化及原位末端DNA标记技术 ,测定中膜VSMC、凋亡细胞及其相关蛋白 ;计算机图像分析并计算VSMC密度及凋亡指数。结果 :与NA相比 ,AAA中膜VSMC密度降低 ,VSMC凋亡指数及其相关蛋白P5 3、P2 1明显增加 ,而bcl 2无显著变化。结论 :VSMC凋亡在细胞水平参与腹主动脉结构损伤与重构 ,促进AAA形成。 展开更多
关键词 腹主动脉瘤 血管平滑肌细胞 凋亡
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重组腺病毒介导的人p27kip1基因高表达对体外培养的大鼠主动脉血管平滑肌细胞迁移的影响 被引量：2
8
作者 吴宗贵 潘晓明 +1 位作者 章卫平 曹雪涛 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 2002年第2期112-114,共3页
目的　探讨重组腺病毒介导的p2 7kip1基因及其蛋白产物高表达对血管平滑肌细胞 (VSMCs)迁移的抑制作用。方法　将含人p2 7kip1cDNA的重组腺病毒 (Adhp2 7kip1)及含 β 半乳糖苷酶基因的重组腺病毒 (AdLacZ)在体外转染原代大鼠主动脉VSM... 目的　探讨重组腺病毒介导的p2 7kip1基因及其蛋白产物高表达对血管平滑肌细胞 (VSMCs)迁移的抑制作用。方法　将含人p2 7kip1cDNA的重组腺病毒 (Adhp2 7kip1)及含 β 半乳糖苷酶基因的重组腺病毒 (AdLacZ)在体外转染原代大鼠主动脉VSMCs,用Westernblot及Boyden趋化小室检测外源性p2 7kip1蛋白在细胞内的表达及对VSM Cs迁移的影响。结果　转染后 2 4h ,Adhp2 7kip1转染的VSMCs内p2 7kip1蛋白高表达 ,而AdLacZ转染的VSMCs内仅显示极低水平的内源性p2 7kip1蛋白表达 ;Boyden趋化小室检测显示未转染的VSMCs、AdLacZ及Adhp2 7kip1转染的VSMCs血清诱导后的迁移细胞数分别为 139± 2 6、10 6± 16及 6 8± 14。结论　外源性p2 展开更多
关键词 细胞迁移 体外培养 经皮冠状动脉腔内成形术 血管再狭窄 血管平滑肌 重组腺病毒 P27KIPL基因
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阿魏酸对兔主动脉血管平滑肌细胞骨架F-actin的作用 被引量：1
9
作者 张娴 曾星 +2 位作者 孙景波 欧润妹 黄羽 《中国医药导报》 CAS 2009年第19期37-38,共2页
目的:观察阿魏酸对兔血管平滑肌细胞骨架F-actin的作用。方法:兔血管平滑肌细胞用含20%灭活胎牛血清的高糖DMEM培养,在阿魏酸作用24h后,用鬼笔环肽标记细胞骨架蛋白F-actin后,用流式细胞仪检测荧光强度,用激光共聚焦显微镜观察细胞骨架... 目的:观察阿魏酸对兔血管平滑肌细胞骨架F-actin的作用。方法:兔血管平滑肌细胞用含20%灭活胎牛血清的高糖DMEM培养,在阿魏酸作用24h后,用鬼笔环肽标记细胞骨架蛋白F-actin后,用流式细胞仪检测荧光强度,用激光共聚焦显微镜观察细胞骨架蛋白的变化。结果:阿魏酸作用24h后,流式细胞检测结果显示,细胞骨架蛋白F-actin荧光强度明显减弱,与对照组比较,有显著性差异。激光共聚焦显微镜观察可见细胞形态明显变长,荧光减弱,与对照组比较,荧光密度减弱。结论:阿魏酸对兔血管平滑肌骨架蛋白F-actin的形成有抑制作用。 展开更多
关键词 阿魏酸:血管平滑肌细胞 F-ACTIN
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光谱CT定量增强参数对肾细胞癌与肾血管平滑肌脂肪瘤的诊断价值
10
作者 席晓旭 陈志晔 《分子影像学杂志》 2025年第2期218-222,共5页
目的探讨光谱CT定量增强参数动脉增强分数(AEF)和细胞外容积(ECV)在肾细胞癌(RCC)与肾血管平滑肌脂肪瘤(RAML)鉴别中的诊断价值。方法对2021年1月~2024年5月于解放军总医院海南医院放射诊断科行肾脏光谱CT三期增强的RCC患者(n=27)及肾... 目的探讨光谱CT定量增强参数动脉增强分数(AEF)和细胞外容积(ECV)在肾细胞癌(RCC)与肾血管平滑肌脂肪瘤(RAML)鉴别中的诊断价值。方法对2021年1月~2024年5月于解放军总医院海南医院放射诊断科行肾脏光谱CT三期增强的RCC患者(n=27)及肾血管平滑肌脂肪瘤患者(n=27)的能谱基数据进行处理,生成AEF图及ECV图,分别测量肿瘤及对侧正常肾脏皮质的AEF及ECV值。采用独立样本t检验及Mann-Whitney U检验进行组间比较,采用ROC曲线评价其诊断效能。结果RCC的AEF及ECV值大于RAML的AEF及ECV值(P_(AEF)<0.0001,P_(ECV)<0.0001),RCC的AEF值与对侧正常肾脏皮质的AEF值的差异无统计学意义(P=0.406),RCC的ECV值小于对侧正常肾脏皮质的ECV值(P<0.0001),RAML的AEF及ECV值均小于对侧正常肾脏皮质的AEF值(P_(AEF)<0.0001,P_(ECV)<0.0001)。AEF、ECV值诊断RCC的曲线下面积分别为0.566、0.992,AEF敏感度为37.1%、特异度为85.2%,ECV敏感度为96.3%、特异度为100%;AEF、ECV值诊断RAML的ROC曲线下面积分别为0.818、1.000,AEF敏感度为77.8%、特异性为88.9%,ECV敏感度及特异度均为100%。结论光谱CT定量增强参数AEF及ECV不仅可检出RCC及RAML,且对于两者鉴别具有较高的诊断价值。 展开更多
关键词 动脉增强分类 细胞外容积 肾细胞癌 肾血管平滑肌脂肪瘤 光谱CT
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SD大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞组织贴块法培养及鉴定 被引量：6
11
作者 申红远 白静 +2 位作者 汤喆 刘秀华 王禹 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2014年第8期850-852,共3页
目的建立SD大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMC）组织贴块培养法并进行鉴定。方法无菌条件下取大鼠胸主动脉,4-6h后加入含20%胎牛血清的DMEM培养液,原代培养2周并用免疫荧光染色对培养的VSMC进行鉴定。结... 目的建立SD大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMC）组织贴块培养法并进行鉴定。方法无菌条件下取大鼠胸主动脉,4-6h后加入含20%胎牛血清的DMEM培养液,原代培养2周并用免疫荧光染色对培养的VSMC进行鉴定。结果组织贴块法成功培养了大鼠胸主动脉VSMC,5-7d细胞迁出,10-14d细胞融合至80%进行传代。体外培养的VSMC可传至20代,培养的细胞呈典型的＂峰谷＂样生长,免疫荧光染色鉴定细胞纯度达95%。结论组织贴块法培养大鼠胸主动脉VSMC培养体系稳定,操作简单、方便,纯度较高,免疫荧光是鉴定VSMC的较佳方法。 展开更多
关键词 主动脉 胸 肌 平滑 血管 肌细胞 平滑肌 细胞融合 组织培养技术 荧光免疫测定
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腹主动脉瘤血管平滑肌细胞凋亡和自噬研究 被引量：8
12
作者 杜亚豪 郑月宏 +1 位作者 田翠 李汇华 《中华老年多器官疾病杂志》 2010年第3期217-221,共5页
目的探讨血管平滑肌细胞(SMC)凋亡和自噬与腹主动脉瘤(AAA)发病的关系。方法采用原位末端DNA标记(TUNEL)技术观察AAA和人正常主动脉组织中SMC凋亡的情况,并用免疫组织化学分析其中LC3的蛋白表达。提取AAA和正常主动脉组织RNA,采用RT-PC... 目的探讨血管平滑肌细胞(SMC)凋亡和自噬与腹主动脉瘤(AAA)发病的关系。方法采用原位末端DNA标记(TUNEL)技术观察AAA和人正常主动脉组织中SMC凋亡的情况,并用免疫组织化学分析其中LC3的蛋白表达。提取AAA和正常主动脉组织RNA,采用RT-PCR方法检测其中与自噬相关的基因Beclin1、Atg4b、Bnip3、Vps34的表达。结果 AAA组织中凋亡的SMC明显高于正常主动脉组织(P<0.05);LC3蛋白在AAA中的表达高于正常主动脉组织(P<0.05);AAA中Beclin1、Atg4b、Bnip3、Vps34表达水平明显高于正常主动脉组织(P<0.05)。结论 SMC凋亡和自噬在AAA的发病中起重要作用。 展开更多
关键词 主动脉瘤 腹 细胞凋亡 自噬 肌 平滑 血管
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大鼠胸主动脉平滑肌细胞的培养与鉴定 被引量：11
13
作者 马丽 刘苏健 +2 位作者 邓勇志 孙宗全 栗一帆 《中国心血管病研究》 CAS 2007年第5期363-365,共3页
目的探讨以简便、高效的方法获取血管平滑肌细胞,为相关研究提供实验材料。方法采用组织贴块法进行原代培养,胰酶消化法传代,并应用相差显微镜和平滑肌肌动蛋白对细胞进行形态学和免疫组化鉴定。结果90%的组织块接种存活,培养5代的平滑... 目的探讨以简便、高效的方法获取血管平滑肌细胞,为相关研究提供实验材料。方法采用组织贴块法进行原代培养,胰酶消化法传代,并应用相差显微镜和平滑肌肌动蛋白对细胞进行形态学和免疫组化鉴定。结果90%的组织块接种存活,培养5代的平滑肌细胞纯度达98%以上。镜下可见培养细胞呈典型的“峰-谷状”样生长,免疫组化染色显示胞浆内平滑肌肌动蛋白阳性表达。结论本法简便、可靠,短期内可获大量高纯度、功能良好的血管平滑肌细胞,可作为研究心血管疾病良好的体外模型。 展开更多
关键词 肌 平滑 血管 细胞 培养的 大鼠 主动脉
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抵抗素样分子影响大鼠主动脉壁血管平滑肌细胞收缩作用的机制
14
作者 段淑香 张洪强 +2 位作者 杨永曜 张红明 徐庆国 《山东医药》 CAS 2018年第33期36-38,42,共4页
目的探讨抵抗素样分子(RELMɑ)对大鼠主动脉平滑肌细胞的收缩作用及其机制。方法取大鼠主动脉去内皮血管环,利用Powerlab四道生理仪记录加入RELMα、AngⅡ、肌球蛋白轻链激酶(MLCK)抑制剂及等量平衡液处理前后的血管张力变化。采用贴壁... 目的探讨抵抗素样分子(RELMɑ)对大鼠主动脉平滑肌细胞的收缩作用及其机制。方法取大鼠主动脉去内皮血管环,利用Powerlab四道生理仪记录加入RELMα、AngⅡ、肌球蛋白轻链激酶(MLCK)抑制剂及等量平衡液处理前后的血管张力变化。采用贴壁法培养大鼠主动脉平滑肌细胞并分为正常对照组、阳性对照组(1×10^(-7)mol/L AngⅡ)、RELMα刺激组(4×10^(-8)mol/L RELMα)、RELMα+钙调素(CaM)抑制剂组(RELMα+W-7)、RELMα+MLCK抑制剂组(RELMα+ML-7),采用Western blotting法检测各组大鼠主动脉平滑肌细胞CaM、MLCK蛋白表达。结果加入等量平衡液、AngⅡ、RELMα、RELMα+MLCK处理后,血管环血管张力分别为7.27%±2.23%、59.97%±5.56%、85.07%±3.06%、11.02%±2.41%。与加入等量平衡液、AngⅡ比较,加入RELMα后血管张力升高;再加入ML-7后血管张力下降,且低于加入AngⅡ者,差异均有统计学意义(P均<0.05)。大鼠主动脉平滑肌细胞CaM蛋白表达RELMα刺激组(1.41±0.33)高于正常对照组(0.24±0.08)、阳性对照组(0.62±0.20),MLCK蛋白表达RELMα刺激组(1.29±0.30)高于正常对照组(0.23±0.15)、阳性对照组(0.60±0.27),差异均有统计学意义(P均<0.05)。RELMα+CaM抑制剂组CaM蛋白、RELMα+MLCK抑制剂组MLCK蛋白表达分别较相应RELMα刺激组降低(P均<0.05)。结论 RELMα/FIZZ1可引起大鼠主动脉平滑肌细胞收缩,其机制可能与Ca^(2+)-CaM-MLCK途径相关。 展开更多
关键词 平滑肌细胞 主动脉 抵抗素样分子α 血管环 钙调素 肌球蛋白轻链激酶 大鼠
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温肾化痰方对动脉粥样硬化模型大鼠主动脉血管平滑肌细胞凋亡及细胞内胆固醇酯的影响 被引量：9
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作者 巫燕慧 林海丹 +2 位作者 陈英男 张忠 黄若兰 《西部中医药》 2022年第3期14-19,共6页
目的:探讨温肾化痰方对氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)诱导的动脉粥样硬化模型大鼠主动脉血管平滑肌细胞凋亡及细胞内胆固醇酯的影响。方法:将大鼠主动脉血管平滑肌细胞分为正常组(10%Gibco)、对照组(ox-LD... 目的:探讨温肾化痰方对氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)诱导的动脉粥样硬化模型大鼠主动脉血管平滑肌细胞凋亡及细胞内胆固醇酯的影响。方法:将大鼠主动脉血管平滑肌细胞分为正常组(10%Gibco)、对照组(ox-LDL 70 mg/L+10%Gibco)及低剂量(ox-LDL 70 mg/L+温肾化痰方5.256 g/kg)、中剂量(ox-LDL 70 mg/L+温肾化痰方10.053 g/kg)、高剂量中药组(ox-LDL 70 mg/L+温肾化痰方20.106 g/kg)。MTT法检测大鼠主动脉血管平滑肌细胞存活率。流式细胞术(FCM)检测大鼠主动脉血管平滑肌细胞凋亡水平;荧光分析法测定各组细胞内胆固醇及胆固醇酯含量。结果:与正常组比较,对照组主动脉平滑肌细胞存活率下降,凋亡率升高,总胆固醇及胆固醇酯水平升高(均P<0.01);与对照组比较,各中药组主动脉平滑肌细胞存活率增加,凋亡率降低,总胆固醇及胆固醇酯水平降低(P<0.01);与低剂量中药组比较,中、高剂量中药组主动脉平滑肌细胞存活率增加,凋亡率降低(P<0.01),总胆固醇及胆固醇酯水平降低(P<0.01);与中剂量中药组比较,高剂量中药组主动脉平滑肌细胞存活率增加,凋亡率降低(P<0.01),总胆固醇及胆固醇酯水平降低(P<0.01),呈现浓度依赖性。结论:温肾化痰方可抑制ox-LDL诱导的动脉粥样硬化模型大鼠主动脉血管平滑肌细胞凋亡,提高存活率;降低总胆固醇及胆固醇酯水平,保护血管平滑肌细胞,延缓动脉粥样硬化进程。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 血管平滑肌细胞 凋亡 胆固醇酯 温肾化痰方
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致动脉粥样硬化不同因素对大鼠腹腔巨噬细胞和主动脉平滑肌细胞分泌表达Tenascin-C的影响 被引量：3
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作者 梁春 吴宗贵 +1 位作者 丁健 葛均波 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 2002年第2期115-118,共4页
目的　观察一些致动脉粥样硬化因素对培养的大鼠腹腔巨噬细胞和主动脉平滑肌细胞分泌表达Tenascin C的影响。方法　体外分离培养大鼠腹腔巨噬细胞和主动脉平滑肌细胞 ,同步后分别加入不同刺激因子采用Westernbolt及逆转录聚合酶链反应 (... 目的　观察一些致动脉粥样硬化因素对培养的大鼠腹腔巨噬细胞和主动脉平滑肌细胞分泌表达Tenascin C的影响。方法　体外分离培养大鼠腹腔巨噬细胞和主动脉平滑肌细胞 ,同步后分别加入不同刺激因子采用Westernbolt及逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)的方法检测Tenascin C蛋白和mRNA水平表达。结果　Tenascin C在两种细胞的对照组中均不表达 ,低密度脂蛋白刺激组只有少量表达 ,其余各刺激组均呈高水平表达。加入氧化修饰低密度脂蛋白 (oxLDL) 2h后即有Tenascin C的表达 ,6h时达高峰 ,可持续到 2 4h。oxLDL与Tenascin C蛋白的表达呈明显的浓度依赖性。结论　oxLDL等致动脉粥样硬化刺激因子可在转录水平上调Tenascin C基因的表达 ,从而促进血管平滑肌细胞和巨噬细胞分泌表达高水平的Tenascin C ,这可能是动脉粥样硬化中Tenascin 展开更多
关键词 Tenascin-c蛋白 动脉粥样梗化 腹腔 巨噬细胞 主动脉平滑肌细胞 细胞外基质 AS 分泌表达 RT-PCR法
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miRNA-21通过TPM1参与高糖诱导的人主动脉平滑肌细胞表型转化与增殖 被引量：2
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作者 贾珊 刘晓唤 +9 位作者 马维冬 张春艳 张岩 吴皓宇 胡艳超 郑阳 范雅洁 姚智会 王聪霞 葛淼 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期310-314,326,共6页
目的探讨miRNA-21在高糖诱导的人主动脉平滑肌细胞表型转化与增殖中的作用,以及对靶基因原肌球蛋白1(tropomyosin 1,TPM1)表达的影响。方法体外培养人主动脉平滑肌原代细胞,利用脂质体转染miRNA-21mimic和inhibitor至细胞中,BrdU法检测... 目的探讨miRNA-21在高糖诱导的人主动脉平滑肌细胞表型转化与增殖中的作用,以及对靶基因原肌球蛋白1(tropomyosin 1,TPM1)表达的影响。方法体外培养人主动脉平滑肌原代细胞,利用脂质体转染miRNA-21mimic和inhibitor至细胞中,BrdU法检测高糖刺激miRNA-21过表达和缺失情况下人主动脉平滑肌细胞的增殖情况,荧光定量PCR检测转染前后高糖刺激时细胞miRNA-21和TPM1的表达情况,Western blot检测人主动脉平滑肌细胞中TPM1、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、平滑肌蛋白22α(smooth muscle 22alpha,SM22α)的表达情况。结果 10、20、25mmol/L D-葡萄糖刺激时人主动脉平滑肌细胞较正常对照组(0.613±0.022)显著增殖(0.725±0.026、0.913±0.024、1.513±0.082),差异有统计学意义(P<0.01);10、20、25mmol/L D-葡萄糖刺激时miRNA-21表达较对照组升高1.1、2.0、3.1倍(P<0.01);正常组细胞转染miRNA-21mimic后细胞增殖能力增强1.6倍,转染miRNA-21inhibitor后高糖组细胞增殖能力减弱(P<0.01);转染miRNA-21mimic后TPM1表达减弱,SM22α表达下调,OPN表达增加(P<0.01),转染miRNA-21inhibitor后TPM1表达上调,SM22α表达上调,OPN表达减少(P<0.01)。结论 miRNA-21可下调细胞TPM1的表达,从而促进人主动脉平滑肌细胞表型转化与增殖。 展开更多
关键词 MIRNA-21 高糖 人主动脉平滑肌细胞(HASMC) 表型转化 增殖 原肌球蛋白1(TPM1) 骨桥蛋白(OPN)、平滑肌蛋白22α(SM22α)
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缺氧诱导有丝分裂因子收缩大鼠主动脉壁血管平滑肌细胞的途径探讨
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作者 张洪强 段淑香 +1 位作者 杨永曜 徐庆国 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2019年第11期1196-1198,共3页
目的 探讨发现于炎症区域1(FIZZ1)对大鼠主动脉平滑肌细胞(RASMC)的收缩作用机制。方法 采用贴壁法培养RASMC,随机分为正常对照组,阳性对照组(血管紧张素Ⅱ终浓度1×10^-7 mol/L),FIZZ1刺激组、2倍FIZZ1刺激组和4倍FIZZ1刺激组(分别... 目的 探讨发现于炎症区域1(FIZZ1)对大鼠主动脉平滑肌细胞(RASMC)的收缩作用机制。方法 采用贴壁法培养RASMC,随机分为正常对照组,阳性对照组(血管紧张素Ⅱ终浓度1×10^-7 mol/L),FIZZ1刺激组、2倍FIZZ1刺激组和4倍FIZZ1刺激组(分别用1×10^-8 mol/L、2×10^-8 mol/L和4×10^-8 mol/L FIZZ1),调钙蛋白(CaM)抑制剂组和肌球蛋白轻链激酶(MLCK)抑制剂组(分别采用FIZZ1+CaM抑制剂W-7或MLCK抑制剂ML-7),各组分别刺激RASMC 48h。用RT-PCR测定各组CaM和MLCK mRNA表达。结果 4倍FIZZ1刺激组CaM mRNA显著高于正常对照组和阳性对照组,差异有统计学意义(1.22±0.31 vs 0.28±0.06和0.60±0.10,P<0.05)、且MLCK mRNA表达水平显著高于正常对照组和阳性对照组,差异有统计学意义[(7.92±2.60)×10^-4 vs (2.01±1.08)×10^-4和(4.80±1.21)×10^-4,P<0.05]。CaM抑制剂组和MLCK抑制剂组较3个FIZZ1刺激组CaM和MLCK mRNA表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论FIZZ1可能通过Ca2+-CaMMLCK途径引起RASMC收缩。 展开更多
关键词 肌细胞 平滑肌 缺氧 有丝分裂 高血压 肺性 肌球蛋白轻链激酶 主动脉
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缬沙坦对血管紧张素Ⅱ诱导的牛主动脉血管平滑肌增殖及迁移的影响 被引量：2
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作者 胡斌 李书国 周敬群 《河南医学研究》 CAS 2002年第4期325-328,共4页
目的 :观察血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )及缬沙坦对培养的牛主动脉血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖、迁移的作用。方法 :取新生小牛胸主动脉采用贴块法培养平滑肌细胞 ,分成对照组、AngⅡ组、缬沙坦组、缬沙坦加AngⅡ组 ,干预后分别测定3 H 胸腺嘧... 目的 :观察血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )及缬沙坦对培养的牛主动脉血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖、迁移的作用。方法 :取新生小牛胸主动脉采用贴块法培养平滑肌细胞 ,分成对照组、AngⅡ组、缬沙坦组、缬沙坦加AngⅡ组 ,干预后分别测定3 H 胸腺嘧啶 (3 H TdR)掺入量和计数迁移的细胞。结果 :AngⅡ (1μmol/L)作用 2 4h能使VSMC的3 H TdR的掺入量、细胞迁移数较对照组增多 ;与AngⅡ组相比 ,AngⅡ加用缬沙坦 (10 0 μmol/L)使3 H TdR的掺入量与细胞迁移数明显减少 ;与对照组相比 ,单用缬沙坦使3 H TdR的掺入量亦明显减少。结论 :AngⅡ对VSMC有促增殖、迁移作用 ,能被缬沙坦拮抗 。 展开更多
关键词 缬沙坦 血紧张素Ⅱ 血管平滑肌细胞 细胞增殖 细胞迁移 动物实验
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前胡丙素对肾血管性高血压大鼠主动脉平滑肌中AT1受体反应性的影响 被引量：1
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作者 陈建鸣 支建明 《山西医科大学学报》 CAS 1999年第4期291-292,共2页
目的　观察前胡丙素（ｐｒａｅｒｕｐｔｏｒｉｎ Ｃ，Ｐｒａ－ Ｃ）对肾血管性高血压（ｒｅｎａｌｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ．ＲＨ） 模型大鼠主动脉平滑肌中ＡＴ１受体变化的影响。方法　两肾一夹Ｗｉｓｔａｒ 大鼠，术后５ 周给予Ｐｒ... 目的　观察前胡丙素（ｐｒａｅｒｕｐｔｏｒｉｎ Ｃ，Ｐｒａ－ Ｃ）对肾血管性高血压（ｒｅｎａｌｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ．ＲＨ） 模型大鼠主动脉平滑肌中ＡＴ１受体变化的影响。方法　两肾一夹Ｗｉｓｔａｒ 大鼠，术后５ 周给予Ｐｒａ － Ｃ〔２０ ｍｇ／（ｋｇ·ｄ） ，ｉｇ〕，观察大鼠主动脉的血管紧张素（ＡｎｇⅡ）受体第一亚型（ＡＴ１） 的反应性。结果　Ｐｒａ－ Ｃ明显降低ＲＨ 大鼠血压和主动脉对Ａｎｇ Ⅱ的反应性，用药２ 周、４ 周后血压明显下级，分别由治疗前的（２３－６ ±２－１） 降到（１８－６ ±１－８）和（１５－８±１－９） ｋＰａ（Ｐ＜ ０－０１） ；主动脉对Ａｎｇ Ⅱ的最大收缩反应（Ｅｍａｘ） 较对照组（８６３－１６ ±４１－０７）ｍｇ 明显为低，分别为（５４７－２７±３４－５０）ｍｇ，（４８３－１６ ±３１－２６）ｍｇ（Ｐ＜ ０－０１） ，量效曲线向右下移位。结论　Ｐｒａ－ Ｃ 降低血压作用与主动脉ＡＴ１ 受体反应性下降有关。 展开更多
关键词 前胡丙素 高血压 肾血管性 主动脉平滑肌
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