离子交换层析微柱法及亲和电泳法与液相色谱分析法对糖化血红蛋白含量测定的比较 被引量：11

1

作者 陈斌 黄庆 府伟灵 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第9期1124-1125,共2页

目的　探讨微柱法对HbA1C定量检测的意义。方法　采用微柱法、电泳法与HPLC法分别对同一标本进行HbA1C含量测定 ,比较 3种方法对HbA1C含量检测结果。结果　微柱法精确度和重复性好 (批内变异系数CV <1.5 % ,批间CV <5 % ) ,与参... 目的　探讨微柱法对HbA1C定量检测的意义。方法　采用微柱法、电泳法与HPLC法分别对同一标本进行HbA1C含量测定 ,比较 3种方法对HbA1C含量检测结果。结果　微柱法精确度和重复性好 (批内变异系数CV <1.5 % ,批间CV <5 % ) ,与参比方法HPLC经相关处理 ,其相关系数r =0 .945 ,两法具有高度的相关性 (P <0 .0 0 1)。结论　采用微柱法对HbA1C定量测定 ,无须贵重仪器设备 ,是一种简便快速的测定方法 ,能在大多数临床实验室广泛推广。 展开更多

关键词 糖尿病 糖化血红蛋白 液相色谱法 离子交换层析微柱法 亲和电泳法

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快速亲和电泳测定血红蛋白F

2

作者 刘道传 姬小刚 +1 位作者 石泉贵 王毅 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1991年第5期381-383,共3页

血红蛋白F(Hb F)测定,对β地中海贫血的诊断与其它血液病的鉴别诊断,具有重要意义。我们参照文献[1]加以改进,用1滴血、少量缓冲液(<15ml)、低电压(<30V),快速电泳(<7min)的方法,有效地分离了HbF;

关键词 血红蛋白F 亲和电泳

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超声萃取-亲和毛细管电泳-激光诱导荧光法同时测定纺织品和食品塑料包装中16种多环芳烃的含量 被引量：3

3

作者 韦笑笑 周俭 白璐 《理化检验（化学分册）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期194-199,共6页

通过优化背景电解液酸度及背景电解液中硼砂、羧甲基-β-环糊精(CM-β-CD)、二甲基-β-环糊精(DM-β-CD)的浓度,利用多环芳烃(PAHs)与CM-β-CD以及PAHs与DM-β-CD亲和力的差异,提出了提示方法。参考GB/T 28189-2011进行样品前处理,将样... 通过优化背景电解液酸度及背景电解液中硼砂、羧甲基-β-环糊精(CM-β-CD)、二甲基-β-环糊精(DM-β-CD)的浓度,利用多环芳烃(PAHs)与CM-β-CD以及PAHs与DM-β-CD亲和力的差异,提出了提示方法。参考GB/T 28189-2011进行样品前处理,将样品剪成0.5 cm×0.2 cm的细条,分取1 g,加入50 mL环己烷,密封后于50℃超声提取1 h。冷却至室温,过滤,滤液用附激光诱导荧光检测器的高效毛细管电泳仪分析,背景电解液为含30 mmol·L^(-1)CM-β-CD、20 mmol·L^(-1)DM-β-CD和40 mmol·L^(-1)硼砂的混合溶液(pH 5.0),荧光检测波长为325 nm。结果显示:16种PAHs的质量浓度在0.01~0.5 mg·L^(-1)内与峰面积呈线性关系,检出限为0.002~0.040 mg·L^(-1);按照标准加入法进行回收试验,结果为91.4%~104%,测定值的相对标准偏差(n=5)为0.40%~6.3%。方法用于3种纺织品以及5种食品塑料包装的分析,8种样品均不同程度地检出了PAHs。 展开更多

关键词 亲和毛细管电泳法 环糊精 激光诱导荧光检测器 多环芳烃 纺织品 食品塑料包装

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亲和毛细管电泳法测定3种黄酮类化合物与人血清白蛋白的结合常数 被引量：7

4

作者 周新 汪子明 +5 位作者 邹明强 郑静 宋大千 郑健 王璐 张寒琦 《吉林大学学报（理学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期669-672,共4页

采用亲和毛细管电泳技术,对木犀草素、槲皮素和山柰酚3种黄酮类化合物与人血清白蛋白(HSA)的结合常数进行研究,利用药物淌度变化和蛋白浓度的关系,计算得到木犀草素、槲皮素和山柰酚与HSA的结合常数分别为9.76×105mol/L,1.24×... 采用亲和毛细管电泳技术,对木犀草素、槲皮素和山柰酚3种黄酮类化合物与人血清白蛋白(HSA)的结合常数进行研究,利用药物淌度变化和蛋白浓度的关系,计算得到木犀草素、槲皮素和山柰酚与HSA的结合常数分别为9.76×105mol/L,1.24×106mol/L和3.79×105mol/L.结果表明,此法可以作为研究药物与蛋白相互作用的一种简便可行方法. 展开更多

关键词 亲和毛细管电泳 木犀草素 槲皮素 山柰酚 人血清白蛋白 结合常数

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亲和毛细管电泳间接紫外检测法测定金属络合物的亲和常数 被引量：7

5

作者 夏之宁 刘勇 +1 位作者 张小川 屈鹏程 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期219-221,共3页

采用亲和毛细管电泳间接紫外检测方法 ,根据“峰漂移”模型 ,通过迁移时间的测定 ,可以获得在水体系中有极低亲和常数的金属络合物的亲和常数。将该方法分别应用于镁离子 柠檬酸体系和锰离子 酒石酸体系 ,在 pH为 5 .0 1,运行电压为 2... 采用亲和毛细管电泳间接紫外检测方法 ,根据“峰漂移”模型 ,通过迁移时间的测定 ,可以获得在水体系中有极低亲和常数的金属络合物的亲和常数。将该方法分别应用于镁离子 柠檬酸体系和锰离子 酒石酸体系 ,在 pH为 5 .0 1,运行电压为 2 0kV ,缓冲溶液组成为咪唑和醋酸的条件下 ,测定了缓冲溶液中加入不同浓度配体后金属离子迁移时间的变化 ,经过数据处理后得出它们的亲和常数对数值分别是 3.2 7和 2 .2 8,与文献值较为一致。该方法适用于结合比为 展开更多

关键词 亲和毛细管电泳 间接紫外检测 亲和常数 镁离子 锰离子 柠檬酸 酒石酸 金属络合物 测定

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亲和毛细管电泳技术及其应用 被引量：7

6

作者 王京兰 钱小红 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期342-345,共4页

对近几年新发展起来的亲和毛细管电泳技术（ACE）的原理、分类及方法作了简要介绍，着重介绍了亲和毛细管区带电泳、毛细管亲和凝胶电泳、胶束电动色谱中的亲和电泳、亲和毛细管等电聚焦、亲和探针毛细管电泳等过程和方法。对ACE在分子... 对近几年新发展起来的亲和毛细管电泳技术（ACE）的原理、分类及方法作了简要介绍，着重介绍了亲和毛细管区带电泳、毛细管亲和凝胶电泳、胶束电动色谱中的亲和电泳、亲和毛细管等电聚焦、亲和探针毛细管电泳等过程和方法。对ACE在分子生物学、生物化学中的应用及该技术在亲和常数测定、核酸片段识别、竞争免疫分析、药物先导化合物的筛选等方面的应用也作了介绍。 展开更多

关键词 毛细管电泳 亲和毛细管电泳 蛋白质 核酸

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亲和毛细管电泳法和荧光法研究氟喹诺酮类药物与牛血清白蛋白的相互作用 被引量：11

7

作者 张黎伟 张新祥 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2008年第4期694-699,共6页

分别采用亲和毛细管电泳法和荧光法对6种氟喹诺酮类药物(司帕沙星、洛美沙星、左氧氟沙星、诺氟沙星、培氟沙星和氟罗沙星)与牛血清白蛋白的相互作用进行考察.结合比均为1∶1,结合常数在104L/mol量级,热力学参数表明体系间的相互作用力... 分别采用亲和毛细管电泳法和荧光法对6种氟喹诺酮类药物(司帕沙星、洛美沙星、左氧氟沙星、诺氟沙星、培氟沙星和氟罗沙星)与牛血清白蛋白的相互作用进行考察.结合比均为1∶1,结合常数在104L/mol量级,热力学参数表明体系间的相互作用力以范德华作用力和氢键力为主.另外,亲和毛细管电泳实验结果表明,缓冲溶液pH值和离子强度增大会造成结合常数在一定程度上的减小,使相互作用减弱.同时,荧光猝灭实验结合紫外光谱扫描说明体系间为静态猝灭.所得到的数据对进一步研究氟喹诺酮类药物的作用机理、提高药效和开发新一代氟喹诺酮类药物具有一定的参考意义. 展开更多

关键词 亲和毛细管电泳 荧光光谱法 氟喹诺酮 牛血清白蛋白 相互作用

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基于适配体亲和毛细管电泳-激光诱导荧光检测的凝血酶分析 被引量：2

8

作者 张月侠 宋茂勇 +2 位作者 李涛 赛道建 汪海林 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期333-336,共4页

以一种高亲和力适配体作为亲和荧光探针,以自建的毛细管电泳-激光诱导荧光(CE-LIF)检测装置为基础,建立了一种高灵敏、快速测定人凝血酶的方法。荧光标记的凝血酶适配体特异性地与凝血酶结合并形成稳定的凝血酶-适配体复合物,采用CE-LI... 以一种高亲和力适配体作为亲和荧光探针,以自建的毛细管电泳-激光诱导荧光(CE-LIF)检测装置为基础,建立了一种高灵敏、快速测定人凝血酶的方法。荧光标记的凝血酶适配体特异性地与凝血酶结合并形成稳定的凝血酶-适配体复合物,采用CE-LIF对复合物进行分离检测,从而测定凝血酶浓度。探讨了盐离子种类及浓度对适配体与凝血酶结合的影响,并在选定的电泳条件下对凝血酶检测的线性范围、检出限和重现性进行了测定。结果表明,盐离子存在的条件下适配体与凝血酶的亲和力降低,不利于两者的结合;人血清溶液中,凝血酶浓度在0.25～10nmol/L范围内与复合物峰面积具有良好的线性相关性(r2=0.991),检出限(S/N=3)为55.6pmol/L;精密度和回收率测定结果均能满足分析的要求。 展开更多

关键词 亲和毛细管电泳 激光诱导荧光检测 凝血酶 适配体 血清

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亲和毛细管电泳法测定茶碱人血清白蛋白的结合常数 被引量：3

9

作者 周大炜 王怀锋 李发美 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期36-39,共4页

目的 :测定茶碱与人血清白蛋白的结合平衡常数。方法 :亲和毛细管电泳法 ,以 2 0mmol/LpH7 4的磷酸盐缓冲液 (含氨基乙酸 0 . 5mol/L ,EDTA 1mmol/L)为运行缓冲液 ,茶碱作为运行缓冲液的添加剂 ,样品为含 5 %丙酮的 30 μmol/L人血清白... 目的 :测定茶碱与人血清白蛋白的结合平衡常数。方法 :亲和毛细管电泳法 ,以 2 0mmol/LpH7 4的磷酸盐缓冲液 (含氨基乙酸 0 . 5mol/L ,EDTA 1mmol/L)为运行缓冲液 ,茶碱作为运行缓冲液的添加剂 ,样品为含 5 %丙酮的 30 μmol/L人血清白蛋白溶液 ,采用更加可靠的描述性指标———淌度比 (M)估算了茶碱与人血清白蛋白的结合平衡常数 ,检测波长为 2 14nm。结果 :测得的茶碱与人血清白蛋白的结合平衡常数与文献值基本吻合。结论 :亲和毛细管电泳法可用于茶碱 蛋白结合常数的快速测定。 展开更多

关键词 亲和毛细管电泳法 荼碱 结合常数 人血清白蛋白

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软骨藻酸作用蛋白质的亲和毛细管电泳筛选 被引量：2

10

作者 王晓倩 高铁 +1 位作者 洪专 屈锋 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期673-677,共5页

基于亲和毛细管电泳,定性比较了血浆、肠道及细胞线粒体中所选的9种重要功能蛋白质与神经毒性生物毒素——软骨藻酸(domoic acid,DA)的相互作用。以DA淌度比变化量ΔM与蛋白质浓度L作图,根据斜率值大小可比较DA与蛋白质作用的相对强弱... 基于亲和毛细管电泳,定性比较了血浆、肠道及细胞线粒体中所选的9种重要功能蛋白质与神经毒性生物毒素——软骨藻酸(domoic acid,DA)的相互作用。以DA淌度比变化量ΔM与蛋白质浓度L作图,根据斜率值大小可比较DA与蛋白质作用的相对强弱。结果如下:可与DA相互作用的有6种蛋白质,作用强弱为:人凝血酶>细胞色素C≈胰蛋白酶≈免疫球蛋白E(Ig E)≈核糖核酸酶A>λ核酸外切酶;而铁蛋白、转铁蛋白、凝集素与DA未表现出相互作用和亲和力。实验表明,亲和毛细管电泳具有高效、快速、所需样品量低的优点,可用于DA作用靶蛋白的筛选,为DA的毒性机制研究和毒性防护提供基础信息。 展开更多

关键词 亲和毛细管电泳 软骨藻酸 蛋白质 相互作用

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亲和毛细管电泳法测定牛血清白蛋白和加替沙星的结合常数 被引量：6

11

作者 姚之 张浩波 +1 位作者 武艺 郭怀忠 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期930-933,共4页

利用亲和毛细管电泳法对牛血清白蛋白(BSA)与加替沙星(GT)间的结合反应及其相互作用做了初步探索,并应用淌度比(M)作为指标测定了两者的结合常数。以20mmol/L pH7.4的磷酸盐缓冲液作为运行缓冲液,分别以GT和BSA作为添加剂,另一组分为进... 利用亲和毛细管电泳法对牛血清白蛋白(BSA)与加替沙星(GT)间的结合反应及其相互作用做了初步探索,并应用淌度比(M)作为指标测定了两者的结合常数。以20mmol/L pH7.4的磷酸盐缓冲液作为运行缓冲液,分别以GT和BSA作为添加剂,另一组分为进样样品,内标为二甲基甲酰胺,于214nm波长下检测。两种测定条件下得到的结合常数分别为4.4×104L/mol和4.2×104L/mol,与传统的荧光淬灭法测得的结果基本一致。该方法具有简单、高效的优点。 展开更多

关键词 亲和毛细管电泳 牛血清白蛋白 加替沙星 结合常数

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亲和毛细管电泳研究

12

作者 娄在祥 王洪新 《粮食与油脂》 2006年第6期14-16,共3页

该文对近几年新发展的亲和毛细管电泳(ACE)优点、原理进行简要介绍,且介绍ACE在分子生物学、生物化学应用及其在亲和常数测定、竞争免疫分析、药物先导化合物筛选、核酸片段识别等方面应用。

关键词 毛细管电泳 亲和毛细管电泳 蛋白质

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压力驱动亲和毛细管电泳法研究3种龙血素与人血清白蛋白的结合作用 被引量：7

13

作者 钱凯 陈旭 陈沁 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1061-1065,共5页

采用压力驱动的亲和毛细管电泳技术(P-ACE)分别研究了生理酸度条件下(p H 7.4)3种黄酮类化合物龙血素A、龙血素B和剑叶龙血素C与人血清白蛋白(HSA)之间的相互作用。利用蛋白淌度变化和药物浓度的关系,计算得出上述三者与HSA的结合常数K... 采用压力驱动的亲和毛细管电泳技术(P-ACE)分别研究了生理酸度条件下(p H 7.4)3种黄酮类化合物龙血素A、龙血素B和剑叶龙血素C与人血清白蛋白(HSA)之间的相互作用。利用蛋白淌度变化和药物浓度的关系,计算得出上述三者与HSA的结合常数Ka分别为0.414×105,0.252×105,1.816×105L/mol。结果表明,P-ACE可作为研究药物与蛋白相互作用的简便可行方法。 展开更多

关键词 亲和毛细管电泳 龙血素A 龙血素B 剑叶龙血素C 人血清白蛋白 结合常数

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埃索美拉唑及其光学异构体的亲和毛细管电泳手性拆分 被引量：2

14

作者 陈蕾 杨平 季一兵 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期444-449,共6页

以牛血清白蛋白为手性添加剂,建立埃索美拉唑对映体杂质检查的亲和毛细管电泳方法,并采用荧光光谱、圆二色光谱法,通过研究埃索美拉唑及光学异构体与牛血清白蛋白作用的热力学参数、焓熵驱动过程及蛋白构象变化对其拆分机理进行探讨。... 以牛血清白蛋白为手性添加剂,建立埃索美拉唑对映体杂质检查的亲和毛细管电泳方法,并采用荧光光谱、圆二色光谱法,通过研究埃索美拉唑及光学异构体与牛血清白蛋白作用的热力学参数、焓熵驱动过程及蛋白构象变化对其拆分机理进行探讨。建立的电泳分离条件为：未涂层石英毛细管柱（50 cm×50μm,有效长度41.5 cm）,以pH 8.0的20mmol/L磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲液（含250μmol/L牛血清白蛋白和7%正丙醇）作为运行缓冲液,正向运行电压30kV,柱温25℃,检测波长302 nm,压力进样（5 kPa,5 s）。在优化的实验条件下,埃索美拉唑与其对映体的分离度大于1.8,对映体杂质的最低检测限和定量限分别为0.8和2.0μg/mL,在2-20μg/mL浓度范围内线性关系良好;平均回收率为100.4%,RSD小于2.0%。该方法可用于埃索美拉唑原料药的对映体杂质检查。 展开更多

关键词 亲和毛细管电泳 埃索美拉唑 手性拆分 牛血清白蛋白 对映体杂质

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亲和毛细管电泳技术在蛋白质-DNA相互作用研究中的应用 被引量：2

15

作者 余方志 章大鹏 +2 位作者 袁征 赵强 汪海林 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1133-1142,共10页

蛋白质-DNA的相互作用在决定细胞命运的许多过程中发挥重要作用,对蛋白质-DNA相互作用的分子机制研究有利于对基本生命过程的理解,为相关疾病的临床治疗及药物筛选提供理论指导。另一方面,利用一些已知的蛋白质-DNA相互作用可以帮助开... 蛋白质-DNA的相互作用在决定细胞命运的许多过程中发挥重要作用,对蛋白质-DNA相互作用的分子机制研究有利于对基本生命过程的理解,为相关疾病的临床治疗及药物筛选提供理论指导。另一方面,利用一些已知的蛋白质-DNA相互作用可以帮助开发先进的生物工程和生命分析技术,为相关研究提供有力的技术支持。因此,建立灵敏、快速的分析方法用于表征蛋白质-DNA的相互作用十分重要。高效毛细管电泳(capillary electrophoresis,CE)技术因其超高的分离效率、极低的样品消耗与较短的分析时间等优势被广泛应用于化学、生命科学和环境科学等多个研究领域。其中,亲和毛细管电泳(affinity capillary electrophoresis,ACE)技术已经成为考察分子间相互作用的重要研究工具。这篇文章综述了亲和毛细管电泳技术自建立以来在蛋白质-DNA相互作用分析方面的研究进展,并对经典的研究工作进行了着重介绍,主要包括三方面的内容:(1)亲和毛细管电泳技术简介;(2)利用亲和毛细管电泳技术进行蛋白质-DNA相互作用的基础分子机制研究;(3)利用已知的蛋白质-DNA相互作用发展针对目标分子及目标反应的亲和毛细管电泳检测技术。本文还对该领域的未来发展趋势进行了展望与探讨,提出应从以下两个方面增强亲和毛细管电泳技术的分析能力:(1)充分发挥CE技术样品消耗少和高通量等优势,分别发展针对少量珍贵生物样品的高灵敏检测方法和针对大量未知因素的高通量筛选方法;(2)结合DNA测序及质谱技术快速筛选、鉴定未知的蛋白质-DNA相互作用的精确靶点。 展开更多

关键词 亲和毛细管电泳 蛋白质-DNA相互作用 亲和分析 综述

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亲和毛细管电泳法和荧光猝灭法分析α-乳白蛋白与离子液体相互作用

16

作者 贾娜尔.吐尔逊 王晓娅 +1 位作者 谭瑞康 李德强 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第15期183-188,共6页

以溴化1-乙基-3-甲基咪唑(1-ethyl-3-methylimidazolium bromide,[C2mim]Br)为原料,采用中和法合成氨基酸离子液体1-乙基-3-甲基咪唑-2-氨基-1,3-戊二酸盐(1-ethyl-3-methylimidazolium 1-aminopropane-1,3-dicarboxylic acid salt,[C2m... 以溴化1-乙基-3-甲基咪唑(1-ethyl-3-methylimidazolium bromide,[C2mim]Br)为原料,采用中和法合成氨基酸离子液体1-乙基-3-甲基咪唑-2-氨基-1,3-戊二酸盐(1-ethyl-3-methylimidazolium 1-aminopropane-1,3-dicarboxylic acid salt,[C2mim][Glu])。分别采用亲和毛细管电泳法和荧光猝灭法考察α-乳白蛋白与[C2mim][Glu]、α-乳白蛋白与[C2mim]Br的相互作用。结果得到二者结合常数均在10~6 L/mol量级,且α-乳白蛋白-[C2mim][Glu]的结合常数大于α-乳白蛋白-[C2mim]Br,结合比约为1∶1。实验结果为进一步研究α-乳白蛋白与离子液体相互作用机理、开发高效环境友好的α-乳白蛋白萃取体系具有一定的参考意义。 展开更多

关键词 Α-乳白蛋白 氨基酸离子液体 亲和毛细管电泳 结合常数 荧光猝灭法

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新型亲和技术及其应用 被引量：1

17

作者 徐静娟 《江南学院学报》 2001年第4期68-70,共3页

亲和层析是基于生物分子间特异性的亲和作用而建立的分离纯化技术。

关键词 亲和层析 亲和过滤 亲和萃取 亲和沉淀 亲和电泳 分离纯化 生物体

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维生素C稳定性及其与牛血清白蛋白亲和作用的研究 被引量：6

18

作者 刘海兴 刘凤芹 +3 位作者 于爱民 万丽梅 李丽敏 韩立坤 《分析科学学报》 CAS CSCD 2007年第1期82-84,共3页

采用亲和毛细管电泳法对维生素C(VC)和牛血清白蛋白(BSA)亲和作用进行了研究。测得VC和BSA的亲和常数为2.94×103L/mol。同时对VC在水、40mmol/L NaCl、40 mmol/L磷酸盐和5%葡萄糖溶液中的稳定性进行了研究。最后计算得到了在溶液... 采用亲和毛细管电泳法对维生素C(VC)和牛血清白蛋白(BSA)亲和作用进行了研究。测得VC和BSA的亲和常数为2.94×103L/mol。同时对VC在水、40mmol/L NaCl、40 mmol/L磷酸盐和5%葡萄糖溶液中的稳定性进行了研究。最后计算得到了在溶液中分解的反应速率常数及活化能数据。 展开更多

关键词 亲和毛细管电泳 维生素C 亲和常数 稳定性

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毛细管电泳法研究牛血清白蛋白与盐酸异丙肾上腺素的相互作用 被引量：7

19

作者 刘春叶 张雪娇 +2 位作者 苗延青 赵灵芝 赵敏 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期313-317,共5页

本研究分别采用区段-区段动力学毛细管电泳法(Plug-Plug Kinetic Capillary Electrophoresis,ppKCE),及以药物为添加剂的亲和毛细管电泳法(Affinity Capillary Electrophoresis,ACE)对盐酸异丙肾上腺素(Hydrochloric Acid Isoproterenol... 本研究分别采用区段-区段动力学毛细管电泳法(Plug-Plug Kinetic Capillary Electrophoresis,ppKCE),及以药物为添加剂的亲和毛细管电泳法(Affinity Capillary Electrophoresis,ACE)对盐酸异丙肾上腺素(Hydrochloric Acid Isoproterenol,HAI)与牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin,BSA)的结合作用进行研究。实验结果显示,ppKCE法可同时测得HAI与BSA相互作用体系的结合速率常数kon和离解速率常数koff分别为163.60L·mol-1·s-1、3.50×10-2±0.95×10-2s-1(n=3)。ppKCE法和ACE法测得HAI与BSA的结合常数Kb分别为4.67×103 L·mol-1、6.02×103 L·mol-1,两种方法所得结果能够较好吻合。证明毛细管电泳法在药物-蛋白相互作用研究领域的可靠性,可用于测定药物与蛋白的相互作用,从而用于新药筛选研究。 展开更多

关键词 区段-区段动力学毛细管电泳法 亲和毛细管电泳 结合常数

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快速展示糖苷水解酶活性架构单点突变导致结合力变化的电泳技术

20

作者 吴秀芸 刘淑萍 +2 位作者 赵越 陈冠军 王禄山 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2018年第5期560-566,共7页

酶分子在长期进化过程中形成一系列氨基酸残基组成的活性架构,参与底物的识别、结合与催化过程,而活性架构中相应氨基酸残基是如何影响酶分子结合底物的能力,进而影响酶分子的催化效率,一直是酶分子理性改造研究的热点.利用亲和电泳技术... 酶分子在长期进化过程中形成一系列氨基酸残基组成的活性架构,参与底物的识别、结合与催化过程,而活性架构中相应氨基酸残基是如何影响酶分子结合底物的能力,进而影响酶分子的催化效率,一直是酶分子理性改造研究的热点.利用亲和电泳技术,可以快速展示内切纤维素酶Tr Cel12A和木聚糖酶Tl Xyn A活性架构中不同突变体的催化活性及其迁移率的变化,进而通过在不同底物浓度凝胶中蛋白质相对迁移率变化程度的定量回归分析,发现由氨基酸单点突变导致蛋白质迁移率的相对变化,可以定量表征酶分子突变前后结合底物能力的变化.亲和电泳测定的有效阻滞常数Kb值与等温滴定量热法和荧光光谱法测定的相关参数比较具有明显相关性.由于亲和电泳技术在测定酶分子与底物的结合能力时具有简便、快速、灵敏的特点,因而可作为常规生化实验室常规普筛技术来检测突变文库中系列突变体导致结合力的变化. 展开更多

关键词 亲和电泳 结合力 定量测定 等温滴定量热法 荧光光谱法

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