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严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染后突发性耳聋发生机制研究进展
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作者 陈晓奉 谢兰丰 《中华耳科学杂志》 CSCD 北大核心 2024年第1期150-153,共4页
严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)引起的新型冠状病毒感染(COVID-19)传播迅速,影响范围广,除了肺部并发症外还包括突发性耳聋。然而,其病理机制尚不清楚。可能的机制包括:病毒直接侵入并损伤耳蜗神经或耳蜗组织;耳蜗微血管血栓... 严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)引起的新型冠状病毒感染(COVID-19)传播迅速,影响范围广,除了肺部并发症外还包括突发性耳聋。然而,其病理机制尚不清楚。可能的机制包括:病毒直接侵入并损伤耳蜗神经或耳蜗组织;耳蜗微血管血栓形成并导致耳蜗血管阻塞;病毒引起细胞因子风暴,导致耳蜗炎症。研究SARS-CoV-2作为突发性感音神经性听力损失病因的作用,可能为疾病的早期诊断、制定治疗策略以最大限度地提高临床恢复和避免不良反应提供机会。 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征冠状病毒2 突发性感音神经性听力损失 发生机制 临床意义
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应用免疫信息学技术预测严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)的抗原表位
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作者 赵健秋 毛燕 +3 位作者 董蓉 佟小雅 张茜 查艳 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期487-494,共8页
目的运用免疫信息学技术预测严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)的B细胞、细胞毒性T淋巴细胞(CTL)和辅助T(Th)细胞的抗原表位.方法从NCBI数据库检索SARS-CoV-2蛋白序列,根据抗原性≥0.5和氨基酸数≥100进行筛选,最终的蛋白序列用... 目的运用免疫信息学技术预测严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)的B细胞、细胞毒性T淋巴细胞(CTL)和辅助T(Th)细胞的抗原表位.方法从NCBI数据库检索SARS-CoV-2蛋白序列,根据抗原性≥0.5和氨基酸数≥100进行筛选,最终的蛋白序列用于后续的抗原肽的预测.用蛋白质结构预测软件Phyre2进行三维结构的预测、蛋白质模型结构的细化软件GalaxyRefine优化蛋白的三维结构,最后用蛋白质结构同源建模SWISS-MODEL系统对优化后的结构进行准确性评估.蛋白序列用于CTL、Th细胞和线性B细胞抗原肽预测,三维结构用于结构性B细胞抗原预测.免疫表位数据库和分析资源(IEDB)预测SARS-CoV-2的CTL和Th细胞抗原表位,B细胞线性抗原肽预测软件Bepipred Linear Epitope Prediction 2.0和B细胞结构抗原肽预测软件ElliPro-Epitope prediction based upon structural protrusion分别预测B细胞线性和结构抗原肽.结果从NCBI数据库获得了27个SARS-CoV-2的蛋白序列,去掉抗原性<0.5和氨基酸数<100的蛋白质后,最终选定9个蛋白进行后续抗原肽预测.最终获得了24个CTL、20个Th细胞、12个B细胞线性表位和16个B细胞结构表位.结论获得的抗原表位可用于后续多表位疫苗的设计,相较于只针对单种蛋白靶点的抗原表位而言,多靶点抗原表位具有更强的免疫原性,这些抗原表位对SARS-CoV-2疫苗而言,具有一定的参考价值. 展开更多
关键词 免疫信息学 2019冠状病毒病(COVID-19) 严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2) 抗原表位
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靶向严重急性呼吸系统综合症冠状病毒2的人工microRNAs设计与思考
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作者 高之煜 曹鑫艳 +8 位作者 顾兰英 范文雨 张镱娴 杜非凡 曹继睿 蒋松 盛金良 孙延鸣 张彦兵 《畜牧兽医科技信息》 2024年第4期59-62,共4页
动植物人工miRNAs(artificial miRNAs,amiRNAs)在抗病毒感染中发挥重要作用。然而,有关amiRNAs靶向抑制重症急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)的相关研究未见报道。目的:本研究旨... 动植物人工miRNAs(artificial miRNAs,amiRNAs)在抗病毒感染中发挥重要作用。然而,有关amiRNAs靶向抑制重症急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)的相关研究未见报道。目的:本研究旨在设计靶向SARS-CoV-2的amiRNAs,进一步分析amiRNAs对不同变异株的匹配程度。方法:利用Invitrogen Block-iT RNAi Designer成功设计靶向SARS-CoV-2的amiRNAs。结果:分别命名为amiR-Cov23utr-1、2、3、4;其中amiR-Cov23utr-1、3和4在Omicron BA.5/2022中靶向区域序列十分保守;amiR-Cov23utr-2在Omicron BA.5/2022中的靶点缺失。结论:本研初步设计和分析了靶向SARS-CoV-2的amiRNAs,为后续深入研究amiRNAs抗SARS-CoV-2感染提供了重要基础资料。 展开更多
关键词 重症急性呼吸综合征冠状病毒2 靶向 人工microRNAs 病毒 3′非翻译区
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严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)核酸检测试剂盒临床诊断效能评估 被引量:10
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作者 沈利华 黄菲 +6 位作者 陈祥 熊钻 杨晓玉 李慧 程丰 郭健 龚国富 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期185-190,共6页
目的:了解三种严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)核酸检测试剂盒的检测效果及临床诊断效能。方法:采集40例临床诊断为2019冠状病毒病(COVID-19)和16例非COVID-19住院患者的咽拭子样本。采用湖南圣湘生物科技有限公司(以下简称“... 目的:了解三种严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)核酸检测试剂盒的检测效果及临床诊断效能。方法:采集40例临床诊断为2019冠状病毒病(COVID-19)和16例非COVID-19住院患者的咽拭子样本。采用湖南圣湘生物科技有限公司(以下简称“圣湘公司”)、硕世生物科技股份有限公司(以下简称“硕世公司”)、深圳华大基因股份有限公司(以下简称“华大基因”)SARS-CoV-2核酸RT-PCR检测试剂盒检测上述样本并分析其敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和Kappa值。比较一步裂解法和磁珠法、两种不同核酸提取仪(圣湘公司Natch CS S12C全自动核酸提取系统和西安天隆科技有限公司NP968-C核酸提取仪)磁珠法提取咽拭子样本中病毒核酸的效果及其RT-PCR检测结果的阳性符合率、阴性符合率、总符合率及Kappa值。结果:圣湘公司试剂盒检测SARS-CoV-2核酸的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和Kappa值分别为95.00%、87.50%、95.00%、87.50%和0.825,硕世公司试剂盒分别为90.00%、87.50%、94.74%、77.78%和0.747,华大基因试剂盒分别为82.50%、81.25%、91.67%、65.00%和0.593。一步裂解法和磁珠法提取的病毒核酸检测结果阳性符合率、阴性符合率、总符合率和Kappa值分别为95.24%、100.00%、96.43%、0.909,但一步裂解法仅耗时25 min,而磁珠法需180 min。两种不同核酸提取仪磁珠法提取的RNA检测结果阳性符合率、阴性符合率、总符合率和Kappa值分别为85.00%、100.00%、89.29%和0.764。结论:圣湘公司试剂盒检测SARS-CoV-2核酸效果略优于其他两家公司试剂盒。一步裂解法提取咽拭子样本中总RNA具有操作简单、省时和检测结果符合率较高的优点。 展开更多
关键词 2019冠状病毒 严重急性呼吸综合征冠状病毒2 新型冠状病毒肺炎 诊断技术 聚合酶链反应 诊断效能
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严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(SARS-CoV-2)眼表感染研究进展 被引量:2
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作者 迟凯耀 贾凯 +3 位作者 张祝强 潘禹硕 赵磊 左韬 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2021年第9期892-896,共5页
严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(SARS-CoV-2,又称COVID-19)经眼表传播远较经口鼻传播困难,然而现有证据认为眼表传播仍是一条可能的途径,尤其对于医护人员。本文描述了SARS-CoV-2相关的眼表症状,阐释了眼表SARS-CoV-2入胞的可能机制和... 严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(SARS-CoV-2,又称COVID-19)经眼表传播远较经口鼻传播困难,然而现有证据认为眼表传播仍是一条可能的途径,尤其对于医护人员。本文描述了SARS-CoV-2相关的眼表症状,阐释了眼表SARS-CoV-2入胞的可能机制和与眼表相关的SARS-CoV-2传播机制,并对现有的和未来可能的研究方向进行了剖析,为从眼表考虑临床治疗SARS-CoV-2提供新的思路与方法,帮助人们研发出更多的治疗策略。 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征冠状病毒2型 COVID-19 眼表 感染途径
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严重急性呼吸综合征冠状病毒2流行期间儿童实体肿瘤诊治中的防控策略 被引量:2
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作者 郑丽丽 王金湖 +6 位作者 吕丹尼 茅君卿 蔡嘉斌 熊洁妮 傅藏藏 单晓敏 叶阿琴 《临床小儿外科杂志》 CAS 2020年第2期104-110,共7页
自2019年12月湖北出现新型冠状病毒感染(corona virus disease 2019,COVID-19)患者以来,该病毒现已逐步扩散至全国各地及境外多个国家。国际病毒分类委员会将致病病毒命名为严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndr... 自2019年12月湖北出现新型冠状病毒感染(corona virus disease 2019,COVID-19)患者以来,该病毒现已逐步扩散至全国各地及境外多个国家。国际病毒分类委员会将致病病毒命名为严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2),人群普遍易感,包括儿童和孕产妇。恶性实体肿瘤患儿因肿瘤本身及化疗、放疗、免疫治疗等综合治疗手段的影响,免疫力较正常儿童低,可能更容易发生感染并进展为重症病例,而保障恶性实体肿瘤综合治疗计划实施的延续性和规范性是提高疗效、获得良好预后的关键之一。疫情期间,如何在做好疫情防控工作的同时保障肿瘤诊疗工作有序进行,是摆在每一个病患和医务人员面前的难题。本文结合COVID-19的传播特点以及有关部门防控COVID-19的要求,针对儿童实体肿瘤诊疗工作中的主要环节,提出疫情期间应考虑实施的措施和策略,建议制定科学的实体肿瘤门诊和病房管理制度,保障急诊手术,合理安排限期手术,适当延期择期手术,保障化疗规律进行,在保护患儿免受SARS-CoV-2感染的同时,确保儿童实体肿瘤综合诊疗工作的连续性。 展开更多
关键词 实体肿瘤 严重急性呼吸综合征冠状病毒2 新型冠状病毒感染 防控策略 儿童
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严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)入胞机制及基于刺突蛋白的疫苗研制策略 被引量:4
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作者 王杨 薛亚娟 符兆英 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期178-184,共7页
严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)利用其刺突(S)吸附与穿入细胞,冠状病毒S蛋白为同源三聚体,每一条肽链分为S1和S2两个区,S1通过其受体结合域(RBD)与细胞膜上的受体结合,S2介导病毒包膜与细胞膜或内体膜融合使病毒核衣壳进入细... 严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)利用其刺突(S)吸附与穿入细胞,冠状病毒S蛋白为同源三聚体,每一条肽链分为S1和S2两个区,S1通过其受体结合域(RBD)与细胞膜上的受体结合,S2介导病毒包膜与细胞膜或内体膜融合使病毒核衣壳进入细胞质。冠状病毒疫苗设计的主要出发点是诱导机体产生针对S蛋白的中和抗体,从而阻止病毒对细胞的吸附与穿入。动物实验和临床试验都已证实,冠状病毒S蛋白能刺激机体产生中和抗体,后者对机体具有保护作用。基于S蛋白的新冠病毒疫苗可以是病毒载体疫苗、重组蛋白疫苗、DNA疫苗、mRNA疫苗或病毒样颗粒疫苗,可以针对S蛋白的全长设计或针对RBD或S蛋白的其他区域设计。 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2) 刺突(S)蛋白 中和抗体 疫苗 综述
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严重急性呼吸综合征冠状病毒2流行期间小儿骨科门急诊及住院手术感染防控建议 被引量:3
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作者 吴春星 宁波 《临床小儿外科杂志》 CAS 2020年第2期98-103,共6页
2019年12月以来,严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)感染导致的肺炎(corona virus disease 2019,COVID-19)开始肆虐武汉,并且波及全国。我院作为上海市儿童SARS-CoV-2感染唯一... 2019年12月以来,严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)感染导致的肺炎(corona virus disease 2019,COVID-19)开始肆虐武汉,并且波及全国。我院作为上海市儿童SARS-CoV-2感染唯一定点接收治疗单位,要求各科室、各部门科学防治,精准施策,全面做好抗疫防疫工作。我们查阅国家公布的有关条例和最新研究,根据SARS-CoV-2理化性质和传染特点,遵从国家、医院制定的防控方案,结合小儿骨科临床实际,制定出适合小儿骨科临床实践的SARS-CoV-2感染防控措施,从小儿骨科门诊、急诊、住院和手术等各环节防控SARS-CoV-2感染,也希望能够为其他小儿外科亚专业及其他医院防控SARS-CoV-2感染提供参考。 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征冠状病毒2 新型冠状病毒感染 小儿骨科 防控策略
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严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)疫苗研究进展 被引量:1
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作者 葛新斌 渠淇淦 +5 位作者 王泽光 张舜耕 池岩 单春慧 刘瑞寒 赵清 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期946-951,共6页
2019冠状病毒病(COVID-19)是严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)感染引起的,SARS-CoV-2病毒毒株不断突变、进化。疫苗研究是控制COVID-19最直接、最有效的方式,根据制备机制不同,SARS-CoV-2疫苗分为灭活病毒疫苗、减毒活疫苗、mRN... 2019冠状病毒病(COVID-19)是严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)感染引起的,SARS-CoV-2病毒毒株不断突变、进化。疫苗研究是控制COVID-19最直接、最有效的方式,根据制备机制不同,SARS-CoV-2疫苗分为灭活病毒疫苗、减毒活疫苗、mRNA疫苗、DNA疫苗、病毒载体疫苗、病毒样颗粒疫苗和蛋白亚单位疫苗等。其中,病毒蛋白亚单位疫苗因其安全性、有效性高具有广泛应用前景,病毒核衣壳蛋白免疫原性高,可变性较低,可作为疫苗制备新方向。我们通过梳理SARS-CoV-2疫苗研究进展、疫苗安全性、疫苗免疫效率等方面,总结疫苗研究的发展现状,并提出可能的研制策略,以期为今后防疫工作提供参考。 展开更多
关键词 急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2) 疫苗 S蛋白 综述
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严重急性呼吸综合征冠状病毒2膜蛋白对宿主细胞pre-mRNA 3'UTR加工的影响 被引量:1
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作者 欧阳歆 曾先燕 +7 位作者 谷斌 娄哲琦 黄进 谭正宗 于倩 车雨 钱昱舟 朱勇 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2022年第10期1866-1873,共8页
目的研究严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)膜蛋白对宿主细胞mRNA前体(pre-mRNA)3’非翻译区(UTR)加工的影响。方法本研究以人肺上皮细胞系A549为模型,利用瞬时转染在细胞内过表达SARS-CoV-2膜蛋白;利用RNA-Seq测序技术及生物信... 目的研究严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)膜蛋白对宿主细胞mRNA前体(pre-mRNA)3’非翻译区(UTR)加工的影响。方法本研究以人肺上皮细胞系A549为模型,利用瞬时转染在细胞内过表达SARS-CoV-2膜蛋白;利用RNA-Seq测序技术及生物信息学分析方法,系统性描绘宿主细胞选择性多聚腺苷酸化(alternative polyadenylation,APA)事件;Metascape数据库对发生显著APA变化的基因进行功能富集分析;RT-qPCR验证靶基因3’UTR长度变化;蛋白质免疫印迹(Western blot)检测目的蛋白表达水平。结果SARS-CoV-2膜蛋白外源表达后宿主细胞内共813个基因发生显著APA变化。GO和KEGG分析显示,差异APA基因广泛参与有丝分裂细胞周期、调节细胞应激等生物过程,涉及病毒感染和蛋白质加工等。从中进一步筛选出AKT1基因,在IGV软件中显示3’UTR延长;RT-qPCR验证AKT1基因的3’UTR长度变化趋势;Western blot结果显示AKT1蛋白磷酸化水平增加。结论SARS-CoV-2膜蛋白潜在影响宿主pre-mRNA的3’UTR加工,其中参与多种病毒性生物过程的AKT1基因3’UTR延长,且其编码的蛋白质功能在细胞内被激活。 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征冠状病毒2膜蛋白 选择性多聚腺苷酸化 PRE-MRNA 3’非翻译区
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严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)刺突蛋白的B细胞及T细胞抗原表位的生物信息学分析 被引量:1
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作者 陶佳 李莎莎 +3 位作者 杨继辉 张婷瑞 吕咏雪 赵巍 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期49-56,共8页
目的使用生物信息学方法预测严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)刺突蛋白(S蛋白)的结构特点,并预测可能的B细胞和T细胞表位。方法从NCBI数据库中获取SARS-CoV-2的S蛋白氨基酸序列,通过蛋白质基本性质分析工具ProtParam分析S蛋白... 目的使用生物信息学方法预测严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)刺突蛋白(S蛋白)的结构特点,并预测可能的B细胞和T细胞表位。方法从NCBI数据库中获取SARS-CoV-2的S蛋白氨基酸序列,通过蛋白质基本性质分析工具ProtParam分析S蛋白的理化性质;利用综合性序列工具软件Lasergene和蛋白质二级结构分析软件SOMPA分析S蛋白二级结构;蛋白质同源物/类似物Y识别引擎Phyre2和分子图像观察软件Rasmol构建并分析S蛋白三级结构;B细胞表位预测工具ABCpred、BepiPred和BcePred预测S蛋白的B细胞抗原表位;利用免疫表位数据库IEDB预测S蛋白的T细胞抗原表位。结果S蛋白由1273个氨基酸组成,理论等电点为6.24,原子组成为C_(6336)H_(9770)N_(1656)O_(1894)S_(54),属于稳定亲水性蛋白。Lasergene软件的Gramier-Robson方法预测显示:α螺旋占23.5%、β折叠占53.7%、转角区域占14.9%、无规则卷曲占8.33%;Lasergene软件的Chou-Fasman方法预测显示:α螺旋占20.9%,β折叠占35.5%,β转角占35.2%。同时,使用SOPMA在线服务工具分析S蛋白二级结构,其中α螺旋占28.59%,延长链占23.25%,β转角占3.38%,无规则卷曲占44.78%。ABCpred、BepiPred和BcePred分别预测S蛋白的潜在B细胞抗原表位数量为5个、11个、6个。IEDB预测的CD8^(+)T细胞表位和CD4^(+)T细胞表位结果中分别选择各人类白细胞抗原(HLA)基因型亲和力最好的5个表位。结论采用生物信息学方法预测SARS-CoV-2的S蛋白具有多个B细胞及T细胞抗原表位。 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2) 刺突蛋白/S蛋白 生物信息学 B细胞表位 T细胞表位
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严重急性呼吸综合征冠状病毒2型4种结构蛋白特性分析
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作者 李雪 任林柱 《中国动物检疫》 CAS 2020年第10期92-98,共7页
为深入了解严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(SARS-CoV-2)S、M、E、N蛋白的分子生物学特征和基本结构特征,选取S、M、E、N蛋白序列进行生物信息学分析和预测,使用DNAstar、SignalP、TMHHM、PSORT Prediction、BUSCA和ABCpred软件,分析并... 为深入了解严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(SARS-CoV-2)S、M、E、N蛋白的分子生物学特征和基本结构特征,选取S、M、E、N蛋白序列进行生物信息学分析和预测,使用DNAstar、SignalP、TMHHM、PSORT Prediction、BUSCA和ABCpred软件,分析并相互验证4种蛋白的结构域特征和S蛋白的潜在B细胞抗原表位,结果预测出了4种结构蛋白的功能结构域,并分析预测出S蛋白潜在的B细胞抗原表位为25~29、75~81、112~116、148~152、773~779 aa。研究结果可为SARS-CoV-2相关的分子生物学和结构生物学研究提供参考,并为疫苗开发等提供理论依据。 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(SARS-CoV-2) 结构蛋白 结构域特征 抗原表位 生物信息学分析 分子生物学
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严重急性呼吸综合征冠状病毒2咽拭子核酸检测法假阴性调查分析 被引量:7
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作者 常颜信 徐明霖 +3 位作者 傅晓辉 尹磊 万旭英 张迁 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期592-595,共4页
目的探讨严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)咽拭子核酸检测法的假阴性率,并分析其原因,为稳固我国新型冠状病毒肺炎(COVID-19)防控工作提供参考。方法对2020年2月19日至3月20日湖北省妇幼保健院光谷院区收治的1452例COVID-19患... 目的探讨严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)咽拭子核酸检测法的假阴性率,并分析其原因,为稳固我国新型冠状病毒肺炎(COVID-19)防控工作提供参考。方法对2020年2月19日至3月20日湖北省妇幼保健院光谷院区收治的1452例COVID-19患者的咽拭子核酸检测结果进行回顾性分析,将出院前检测结果为阳性之前的阴性结果判定为假阴性,统计假阴性患者例数。随访出院患者,筛选出院后再次核酸检测阳性(复阳)的患者,分析出院前病毒核酸检测连续阴性次数和核酸复阳的关系。结果1452例COVID-19患者中男592例(40.77%)、女860例(59.23%)。212例(14.60%)咽拭子核酸检测结果曾出现假阴性。共随访到28例(1.93%)出院后复阳患者,连续2次核酸检测阴性的918例患者中有24例(2.61%)复阳,高于连续3次及以上核酸检测阴性患者的复阳率(0.75%,4/534),差异有统计学意义(χ^2=6.21,P=0.0127)。结论SARS-CoV-2咽拭子核酸检测法具有一定比例的假阴性,是患者出院后核酸复阳的原因之一。建议出院前由不同检测者进行多次、连续检测,满足连续3次及以上核酸检测阴性的出院标准可以降低复阳率。 展开更多
关键词 新型冠状病毒肺炎 严重急性呼吸综合征冠状病毒2 咽拭子核酸检测法 假阴性反应 核酸复阳
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上海2株严重急性呼吸综合征冠状病毒2的分离与鉴定 被引量:6
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作者 彭浩然 李成忠 +13 位作者 唐海琳 薛建亚 陈志辉 梁雪松 朱咏梅 夏炳辉 朱勇喆 吴俊杰 赵兰娟 任浩 江亮亮 何燕华 戚中田 赵平 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期365-370,共6页
目的从新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者鼻/咽拭子样本中分离、培养严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)。方法将来自上海市COVID-19患者的3份鼻/咽拭子样本以TPCK胰酶处理,然后接种Vero E6细胞;待大部分细胞出现明显病变时,取细胞... 目的从新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者鼻/咽拭子样本中分离、培养严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)。方法将来自上海市COVID-19患者的3份鼻/咽拭子样本以TPCK胰酶处理,然后接种Vero E6细胞;待大部分细胞出现明显病变时,取细胞培养上清用qRT-PCR法检测病毒核酸,并用反转录PCR扩增病毒受体结合区(RBD)基因片段;将病毒扩增培养后感染接种于96孔板中的Vero E6细胞,观察细胞病变效应,并用免疫荧光法检测病毒蛋白。结果2份COVID-19患者鼻/咽拭子样本接种的Vero E6细胞出现明显细胞病变效应,细胞培养上清中检测出新复制产生的SARS-CoV-2核酸,扩增出的RBD序列与早期分离出的SARS-CoV-2相应序列完全一致;病毒感染的Vero E6细胞病变迅速,并能与SARS-CoV-2核衣壳蛋白(N蛋白)单克隆抗体、刺突蛋白(S蛋白)单克隆抗体及COVID-19患者恢复期血清发生反应。结论从2份COVID-19患者鼻/咽拭子样本中成功分离出SARS-CoV-2,为后续开展SARS-CoV-2感染与致病机制研究、防治药物与疫苗的研发奠定了基础。 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征冠状病毒2 新型冠状病毒肺炎 鼻拭子 咽拭子 病毒分离
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严重急性呼吸综合征冠状病毒2流行期间儿内科患儿收住院及其感染防控管理建议 被引量:12
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作者 徐虹 罗飞宏 +4 位作者 黄瑛 沈茜 王传清 张崇凡 《中国循证儿科杂志》 CSCD 北大核心 2020年第1期10-14,共5页
2019年12月以来,我国由严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)感染[1,2]导致的新型冠状病毒肺炎(COVID-19)发病例数及重症例数持续快速攀升,截至2020年2月11日全国累计报告确诊病例42382例,疑似病例23589例.流行病学调查数据显示,不... 2019年12月以来,我国由严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)感染[1,2]导致的新型冠状病毒肺炎(COVID-19)发病例数及重症例数持续快速攀升,截至2020年2月11日全国累计报告确诊病例42382例,疑似病例23589例.流行病学调查数据显示,不同年龄段人群对SARS-CoV-2普遍易感,呼吸道飞沫和接触是主要传播途径,气溶胶和消化道等传播陆续也有报道,临床症状不典型[3-7].全国部分省、直辖市和自治区先后启动了重大突发公共卫生事件一级响应.距离湖北省各市启动"封城"措施已超过2周,全国各地春节返程人流增加,使疫情防控面临新的挑战. 展开更多
关键词 流行病学调查 疫情防控 发病例数 严重急性呼吸综合征冠状病毒 疑似病例 数据显示 传播途径
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严重急性呼吸综合征冠状病毒2变异体对全球疫情防控的影响分析 被引量:1
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作者 胡尔雅 周敏 +3 位作者 曾雯辉 罗燕 严紫东 马健 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2022年第10期1827-1847,共21页
由严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)引起的新型冠状病毒肺炎(COVID-19,简称新冠肺炎)的出现,对国际公众健康构成了严重威胁,伴随COVID-19大流行而来的是SARS-CoV-2基因组的不断突变,尤其是受关注的变异体(variants of concern,V... 由严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)引起的新型冠状病毒肺炎(COVID-19,简称新冠肺炎)的出现,对国际公众健康构成了严重威胁,伴随COVID-19大流行而来的是SARS-CoV-2基因组的不断突变,尤其是受关注的变异体(variants of concern,VOCs)给全球COVID-19疫情防控带来了挑战。本文综述了SARS-CoV-2的突变情况和现阶段主要流行的VOCs的特征,总结了现有及潜在的COVID-19预防、诊断和治疗手段,并通过分析SARS-CoV-2变异体对全球COVID-19疫情防控措施的影响,提出合理的建议,以期为今后可能爆发的大范围流行病的防控提供理论依据。 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征冠状病毒2 突变 变异体 疫情防控 新冠肺炎
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严重急性呼吸综合征冠状病毒2 DNA疫苗与重组亚单位疫苗在小鼠中诱导中和抗体的效力分析 被引量:3
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作者 徐铮昊 王诚 +7 位作者 余润芷 丁翠玲 何燕华 江亮亮 彭浩然 吴俊杰 赵平 戚中田 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期474-480,共7页
目的探讨以严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)受体结合区(RBD)和表面刺突蛋白(S蛋白)S1亚基为疫苗靶抗原诱导中和抗体的效果。方法构建SARS-CoV-2 RBD与小鼠IgG1 Fc段(mFc)融合蛋白表达质粒pVRC-RBD-mFc,转染人胚肾细胞293T并进... 目的探讨以严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)受体结合区(RBD)和表面刺突蛋白(S蛋白)S1亚基为疫苗靶抗原诱导中和抗体的效果。方法构建SARS-CoV-2 RBD与小鼠IgG1 Fc段(mFc)融合蛋白表达质粒pVRC-RBD-mFc,转染人胚肾细胞293T并进行培养。用蛋白质印迹法检测细胞培养上清中的RBD-mFc融合蛋白,用微量中和实验检测细胞培养上清中的RBD-mFc及CHO细胞重组表达的SARS-CoV-2 S1与人IgG1 Fc段(S1-hFc)融合蛋白对SARS-CoV-2感染的抑制作用。分别用质粒pVRC-RBD-mFc及S1-hFc融合蛋白通过肌内注射接种BALB/c小鼠,用ELISA检测小鼠血清中的抗-S1 IgG,用微量中和实验检测小鼠血清的病毒中和活性。结果pVRC-RBD-mFc质粒转染293T细胞的培养上清中可检测到RBD-mFc融合蛋白,超滤浓缩的细胞培养上清及S1-hFc融合蛋白均呈浓度依赖性抑制SARS-CoV-2对Vero E6细胞的感染;经pVRC-RBD-mFc质粒及S1-hFc融合蛋白免疫的小鼠血清中均可检测出抗-S1 IgG,且能中和SARS-CoV-2的感染;S1-hFc融合蛋白免疫小鼠血清的抗体滴度及病毒中和活性均高于质粒pVRC-RBD-mFc免疫小鼠血清(P均<0.01)。结论SARS-CoV-2 RBD和S1蛋白均可能作为有效的疫苗抗原,重组亚单位疫苗较DNA疫苗能更有效地诱导中和抗体。 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征冠状病毒2 DNA疫苗 亚单位疫苗 中和抗体
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严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染致神经系统损伤的研究现状 被引量:1
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作者 马佩佩 洪帆 +1 位作者 徐涛 陈菊祥 《海军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期294-300,共7页
新型冠状病毒肺炎(COVID-19)除损伤呼吸系统外,还可累及神经系统,甚至造成严重的临床后果。本文从致病机制、临床症状及治疗预后3个方面阐述了严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)对神经系统损伤的研究现状,系统性归纳了COVID-19... 新型冠状病毒肺炎(COVID-19)除损伤呼吸系统外,还可累及神经系统,甚至造成严重的临床后果。本文从致病机制、临床症状及治疗预后3个方面阐述了严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)对神经系统损伤的研究现状,系统性归纳了COVID-19神经系统病变的病理机制,为COVID-19的诊断和治疗提供新思路。 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征冠状病毒2 病理机制 神经系统损害 临床特征 诊断 治疗
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严重急性呼吸道综合征冠状病毒疫苗研究现状 被引量:6
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作者 叶迅 孟夏 +3 位作者 董继斌 梁旻 胡放 陈红专 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第3期331-334,共4页
冠状病毒被认为是新近爆发的严重急性呼吸道综合征的病原体 .迄今公共数据库中已发表了不同国家和地区分离的 12个SARS病毒株基因组完整序列 .突起蛋白是冠状病毒的主要抗原 ,包含许多抗原决定簇 .SARS冠状病毒突起蛋白的相对保守性为... 冠状病毒被认为是新近爆发的严重急性呼吸道综合征的病原体 .迄今公共数据库中已发表了不同国家和地区分离的 12个SARS病毒株基因组完整序列 .突起蛋白是冠状病毒的主要抗原 ,包含许多抗原决定簇 .SARS冠状病毒突起蛋白的相对保守性为有效疫苗的开发奠定了很好的研究基础 .灭活或减毒的冠状病毒疫苗存在一定的局限性和危险性 . 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征 冠状病毒 疫苗 突起蛋白 SARS 基因组
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稳定表达TMPRSS2蛋白Vero-E6细胞系的建立及其对新型冠状病毒增殖影响的研究
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作者 吴正双 兰婷 +9 位作者 郭瑶 陈合凤 吉克的渠 王雪 温志远 王金良 钟功勋 葛金英 陈伟业 步志高 《中国预防兽医学报》 北大核心 2025年第8期860-866,共7页
为构建稳定表达跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)的Vero-E6细胞系,并分析其对新型冠状病毒增殖的影响,本研究采用同源重组的方法,将经PCR扩增获得的TMPRSS2和IRES-mCherry基因克隆至真核表达质粒pCAGGSpuro中,构建重组质粒pCAGGS-TMPRSS2-IRE... 为构建稳定表达跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)的Vero-E6细胞系,并分析其对新型冠状病毒增殖的影响,本研究采用同源重组的方法,将经PCR扩增获得的TMPRSS2和IRES-mCherry基因克隆至真核表达质粒pCAGGSpuro中,构建重组质粒pCAGGS-TMPRSS2-IRES-mCherry,经酶切和测序鉴定正确。将1μg/mL~10μg/mL嘌呤霉素加入Vero-E6细胞中加压培养14 d,每天观察细胞死亡情况。以细胞100%死亡的最低浓度为嘌呤霉素的最适浓度。结果显示,5μg/mL~10μg/mL嘌呤霉素培养的Vero-E6细胞全部死亡,其余浓度嘌呤霉素处理后仍有细胞存活。因此,确定其最适浓度为5μg/mL。将pCAGGS-TMPRSS2-IRES-mCherry转染Vero-E6细胞,并以5μg/mL嘌呤霉素筛选培养72 h,采用有限稀释法将单克隆细胞传代,7 d后通过荧光显微镜观察,选择红色荧光较强且仅有1个细胞形成的集落传代,将获得的细胞命名为Vero-E6-TMPRSS2。采用RT-PCR和western blot分别检测该细胞及其不同代次细胞(第5、10、15和20代)中TMPRSS2基因的转录和蛋白的表达水平。将嵌合病毒VSVΔG-S_(BA.1.1)-EGFP分别感染Vero-E6-TMPRSS2细胞和对照Vero-E6细胞,培养至12 h和24 h时观察荧光,并在感染后不同时间取上清液,采用Reed-Muench法测定各时间点病毒的TCID_(50),绘制病毒的生长曲线。RT-PCR结果显示,Vero-E6-TMPRSS2细胞及其不同代次均扩增出1596 bp的目的基因片段;Western blot结果显示,该细胞及不同代次的该细胞均在57.7 ku处出现特异性条带,而对照Vero-E6细胞则无任何基因片段和蛋白条带。荧光观察结果显示,VSVΔG-S_(BA.1.1)-EGFP接种后不同时间出现绿色荧光的Vero-E6-TMPRSS2细胞数量均明显多于该病毒接种的Vero-E6细胞;生长曲线结果显示,感染Vero-E6细胞后72 h VSVΔG-S_(BA.1.1)-EGFP的病毒滴度最高达10^(6.5)TCID_(50)/mL;而在感染Vero-E6-TMPRSS2细胞后36 h VSVΔGS_(BA.1.1)-EGFP的病毒滴度最高达10^(8.6)TCID_(50)/mL。上述结果表明,本研究首次建立了稳定表达TMPRSS2基因的Vero-E6-TMPRSS2细胞系,且Vero-E6-TMPRSS2细胞通过表达的TMPRSS2显著促进VSVΔG-S_(BA.1.1)-EGFP的快速增殖与复制,该结果为后续新冠病毒的基础研究及其疫苗的生产奠定了基础并提供了有力的工具。 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征冠状病毒2 跨膜丝氨酸蛋白酶2 VERO-E6细胞
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