目的:观察P38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)抑制剂SB203580对TNF-α诱导的原代培养大鼠小胶质细胞高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein B1,HMGB1)表达的影响。方法:采用原代培养大鼠小...目的:观察P38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)抑制剂SB203580对TNF-α诱导的原代培养大鼠小胶质细胞高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein B1,HMGB1)表达的影响。方法:采用原代培养大鼠小胶质细胞,设立对照组、TNF-α组(25 ng/m L)、TNF-α(25 ng/m L)+SB 203580组(10μmol/L)、SB203580组(10μmol/L),各组细胞经药物处理16 h后分别用ELISA法检测细胞培养上清中HMGB1的表达情况,Western印迹检测细胞HMGB1和磷酸化p38MAPK表达情况,用反转录PCR检测HMGB1 m RNA表达。结果:经TNF-α刺激后,大鼠小胶质细胞及其培养上清液中HMGB1蛋白表达增高;SB 203580可抑制TNF-α诱导的磷酸化p38 MAPK表达(P<0.01),同时下调HMGB1m RNA和HMGB1蛋白的表达。结论:TNF-α可诱导小胶质细胞晚期炎症因子HMGB1的表达,并且其诱导机制与p38 MAPK被快速激活相关。展开更多
目的探讨p38促分裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)特异性抑制剂SB203580对高脂饮食1型糖尿病小鼠颈动脉血管内损伤后内膜增生的影响。方法选择雄性突变型INS2AKITA小鼠12只及同窝出生的野生型C57BL/6雄性小鼠6只,小鼠分为3组:对照组,高TC饮食...目的探讨p38促分裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)特异性抑制剂SB203580对高脂饮食1型糖尿病小鼠颈动脉血管内损伤后内膜增生的影响。方法选择雄性突变型INS2AKITA小鼠12只及同窝出生的野生型C57BL/6雄性小鼠6只,小鼠分为3组:对照组,高TC饮食组,干预组,每组6只。各组小鼠于颈动脉损伤后28d处死并取右颈总动脉。免疫组织化学检测内膜磷酸化p38MAPK、血管细胞黏附分子1(VCAM-1)及8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)表达。结果与对照组比较,高TC饮食组术后28d管腔面积明显缩小,内膜面积、中膜面积、内膜/中膜面积、磷酸化p38MAPK、VCAM-1、8-OHdG表达水平明显增强(P<0.01)。与高TC饮食组比较,干预组术后28d管腔面积明显增加,内膜面积、中膜面积、内膜/中膜面积明显缩小,VCAM-1、8-OHdG、磷酸化p38MAPK表达明显降低(15.27±3.70 vs 28.39±5.33,P<0.05;8.75±3.32 vs 19.92±5.35,P<0.05;7.69±2.18 vs18.45±3.77,P<0.01)。结论 p38MAPK抑制剂可能主要通过减轻氧化应激及VCAM-1等炎性反应控制糖尿病高脂饮食小鼠颈动脉血管内损伤后内膜增生。展开更多
糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)作为糖尿病的一种常见微血管并发症,已成为全球范围内终末期肾病的主要诱因。近年来,针对双特异性磷酸酶(dual specific phosphatase,DUSP)家族成员的深入研究发现,DUSP在肾脏疾病状态下的表达水平...糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)作为糖尿病的一种常见微血管并发症,已成为全球范围内终末期肾病的主要诱因。近年来,针对双特异性磷酸酶(dual specific phosphatase,DUSP)家族成员的深入研究发现,DUSP在肾脏疾病状态下的表达水平显著降低,推测增强其表达可减轻或改善肾脏疾病症状。DUSP主要功能为介导丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)去磷酸化过程,从而有效抑制MAPK通路的活化,对DN发生与发展发挥重要调控作用。本文旨在深入探讨MAPK与DN和DUSP的相关性,并对DUSP在DN领域的研究进展进行总结,以期为DN诊治提供新视角和重要理论依据。展开更多
骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)具有很强的诱导间充质干细胞定向成骨分化的能力.但对于其所涉及的相关分子机理了解并不深入.利用BMP9重组腺病毒感染间充质干细胞,Western blot检测ERK1/2激酶的磷酸化,ERK1/2的特...骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)具有很强的诱导间充质干细胞定向成骨分化的能力.但对于其所涉及的相关分子机理了解并不深入.利用BMP9重组腺病毒感染间充质干细胞,Western blot检测ERK1/2激酶的磷酸化,ERK1/2的特异性抑制剂PD98059阻断ERK1/2活性,或以RNA干扰抑制ERK1/2表达,通过体外细胞实验和体内动物实验,初步分析和揭示ERK1/2对于BMP9诱导的间充质干细胞成骨分化的调控作用及其可能机制.结果发现:BMP9可以促进ERK1/2激酶的磷酸化,ERK1/2抑制剂PD98059可增强由BMP9诱导的碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)表达和钙盐沉积,并促进由BMP9诱导的Runx2基因的表达和转录活性,以及Smad经典途径的活化;而RNA干扰导致ERK1/2基因沉默同样也可进一步促进BMP9诱导的ALP活性和钙盐沉积,并促进BMP9诱导的间充质干细胞在裸鼠皮下异位成骨.因此,BMP9可以促进ERK1/2蛋白激酶的活化,而阻断ERK1/2蛋白激酶可进一步增强BMP9诱导的成骨分化,ERK1/2极可能对于BMP9诱导的间充质干细胞成骨分化起着负向调控作用.展开更多
目的:探讨小干扰RNA抑制高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1,HMGB1)表达后对p38MAPK通路的影响,从而了解HMGB1影响子宫内膜癌侵袭与转移的机制。方法:运用RNA干扰技术,设计合成4条HMGB1sh RNA,将HMGB1沉默效果最好的HMGB1 sh ...目的:探讨小干扰RNA抑制高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1,HMGB1)表达后对p38MAPK通路的影响,从而了解HMGB1影响子宫内膜癌侵袭与转移的机制。方法:运用RNA干扰技术,设计合成4条HMGB1sh RNA,将HMGB1沉默效果最好的HMGB1 sh RNA转染子宫内膜癌HEC-1A细胞,通过RT-PCR和Western印迹技术检测转染后细胞HMGB1及p38MAPK在基因和蛋白水平的表达情况,MTT实验检测转染后细胞生长活力状态。结果:RTPCR和Western印迹结果均证实HMGB1 sh RNA载体成功抑制HMGB1和p38MAPK在HEC-1A细胞中m RNA和蛋白的表达(P<0.05);MTT结果显示HMGB1 sh RNA转染后HEC-1A细胞生长明显受抑(P<0.05)。结论:HMGB1表达下调可有效抑制子宫内膜癌细胞HEC-1A的增殖、侵袭和转移,此过程可能通过p38MAPK信号通路进行调节。展开更多
文摘目的探讨p38促分裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)特异性抑制剂SB203580对高脂饮食1型糖尿病小鼠颈动脉血管内损伤后内膜增生的影响。方法选择雄性突变型INS2AKITA小鼠12只及同窝出生的野生型C57BL/6雄性小鼠6只,小鼠分为3组:对照组,高TC饮食组,干预组,每组6只。各组小鼠于颈动脉损伤后28d处死并取右颈总动脉。免疫组织化学检测内膜磷酸化p38MAPK、血管细胞黏附分子1(VCAM-1)及8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)表达。结果与对照组比较,高TC饮食组术后28d管腔面积明显缩小,内膜面积、中膜面积、内膜/中膜面积、磷酸化p38MAPK、VCAM-1、8-OHdG表达水平明显增强(P<0.01)。与高TC饮食组比较,干预组术后28d管腔面积明显增加,内膜面积、中膜面积、内膜/中膜面积明显缩小,VCAM-1、8-OHdG、磷酸化p38MAPK表达明显降低(15.27±3.70 vs 28.39±5.33,P<0.05;8.75±3.32 vs 19.92±5.35,P<0.05;7.69±2.18 vs18.45±3.77,P<0.01)。结论 p38MAPK抑制剂可能主要通过减轻氧化应激及VCAM-1等炎性反应控制糖尿病高脂饮食小鼠颈动脉血管内损伤后内膜增生。
文摘糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)作为糖尿病的一种常见微血管并发症,已成为全球范围内终末期肾病的主要诱因。近年来,针对双特异性磷酸酶(dual specific phosphatase,DUSP)家族成员的深入研究发现,DUSP在肾脏疾病状态下的表达水平显著降低,推测增强其表达可减轻或改善肾脏疾病症状。DUSP主要功能为介导丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)去磷酸化过程,从而有效抑制MAPK通路的活化,对DN发生与发展发挥重要调控作用。本文旨在深入探讨MAPK与DN和DUSP的相关性,并对DUSP在DN领域的研究进展进行总结,以期为DN诊治提供新视角和重要理论依据。
文摘目的:探讨小干扰RNA抑制高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1,HMGB1)表达后对p38MAPK通路的影响,从而了解HMGB1影响子宫内膜癌侵袭与转移的机制。方法:运用RNA干扰技术,设计合成4条HMGB1sh RNA,将HMGB1沉默效果最好的HMGB1 sh RNA转染子宫内膜癌HEC-1A细胞,通过RT-PCR和Western印迹技术检测转染后细胞HMGB1及p38MAPK在基因和蛋白水平的表达情况,MTT实验检测转染后细胞生长活力状态。结果:RTPCR和Western印迹结果均证实HMGB1 sh RNA载体成功抑制HMGB1和p38MAPK在HEC-1A细胞中m RNA和蛋白的表达(P<0.05);MTT结果显示HMGB1 sh RNA转染后HEC-1A细胞生长明显受抑(P<0.05)。结论:HMGB1表达下调可有效抑制子宫内膜癌细胞HEC-1A的增殖、侵袭和转移,此过程可能通过p38MAPK信号通路进行调节。
