上皮细胞黏附分子表达与乳腺癌的分子分型及预后 被引量：4

1

作者 李新军 付丽梅 +1 位作者 刘敏 付明霞 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期258-263,共6页

目的:探讨上皮细胞黏附分子(epithelial cell adhesion molecule,Ep CAM)在乳腺癌及其分子亚型中表达的临床病理及预后意义。方法:采用免疫组织化学Max VisionTM法检测835例乳腺浸润性导管癌中Ep CAM的表达,分析其与临床病理特征和预后... 目的:探讨上皮细胞黏附分子(epithelial cell adhesion molecule,Ep CAM)在乳腺癌及其分子亚型中表达的临床病理及预后意义。方法:采用免疫组织化学Max VisionTM法检测835例乳腺浸润性导管癌中Ep CAM的表达,分析其与临床病理特征和预后的关系。结果:Ep CAM的阳性表达与组织学分级、淋巴结转移、肿瘤大小、ER和PR表达、HER2表达和临床分期均有关(均P<0.05),与绝经状态无关(χ2=0.117,P=0.733)。在腺腔A型、腺腔B型(HER2-)、腺腔B型(HER2+)、HER2过表达型及三阴型乳腺浸润性导管癌(invasive ductal carcinoma,IDC)中,Ep CAM的阳性表达率分别为19.2%,73.0%,48.9%,72.2%和62.1%。Log-rank检验和单因素COX分析显示Ep CAM阳性患者的预后较差(均P<0.001),并与三阴型、腺腔B型(HER2-)和HER2过表达型预后有关(均P<0.05)。多因素COX分析显示Ep CAM阳性表达与三阴型和HER2过表达型预后差相关(均P<0.05)。结论:Ep CAM可能与乳腺癌进展有关,并与分子分型相关,在乳腺癌总体上及三阴型和HER2过表达型中是一种独立的预后因子。 展开更多

关键词 乳腺肿瘤 分子亚型 上皮细胞黏附分子

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上皮细胞黏附分子、波形蛋白和N-钙黏素在乳腺癌分子亚型中的表达及相关性 被引量：2

2

作者 付丽梅 刘敏 +1 位作者 于雪梅 李新军 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1137-1142,共6页

目的:研究上皮细胞黏附分子(epithelial cell adhesion molecule,Ep CAM)、波形蛋白(vimentin)、N-钙黏素(N-cadherin)在乳腺癌及其分子亚型中的表达及相关性。方法:通过免疫组织化学方法检测835例乳腺癌组织中Ep CAM,vimentin和N-cadhe... 目的:研究上皮细胞黏附分子(epithelial cell adhesion molecule,Ep CAM)、波形蛋白(vimentin)、N-钙黏素(N-cadherin)在乳腺癌及其分子亚型中的表达及相关性。方法:通过免疫组织化学方法检测835例乳腺癌组织中Ep CAM,vimentin和N-cadherin的表达情况,分析其与乳腺癌临床病理特征的相关性。结果:Ep CAM,vimentin及N-cadherin在835例乳腺癌中的表达率分别为53.4%,11.4%和9.7%;其阳性率随着肿瘤体积增大、组织学级别升高、淋巴结阳性、TNM分期增高、雌激素受体和孕激素受体阴性而增高(均P<0.05)。在腺腔A型、腺腔B型(HER2–)、腺腔B型(HER2+)、HER2过表达型及三阴型中,Ep CAM的阳性表达率分别为19.2%,73.0%,48.9%,72.2%和62.1%;vimentin为3.9%,11.4%,14.1%,11.1%和20.5%;N-cadherin为7.0%,5.7%,12.0%,12.2%和17.4%,差异均有统计学意义(均P<0.05)。在835例乳腺癌及三阴型乳腺癌中Ep CAM表达与vimentin和N-cadherin均呈正相关性。结论:Ep CAM在三阴型乳腺癌中呈高表达,并与上皮间质转化标志物相关,可能参与该型乳腺癌的发展、转移过程。 展开更多

关键词 乳腺癌 上皮细胞黏附分子 上皮间质转化 免疫组织化学

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人上皮细胞黏附分子融合蛋白真核表达载体的构建、表达及初步鉴定 被引量：1

3

作者 王春艳 谢鑫 +3 位作者 宋朝君 金镇勋 欧阳为明 金伯泉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期765-768,共4页

目的 :构建pIg EpCAM及pEGFP EpCAM真核表达载体 ,并在COS7细胞中表达。方法 :用PCR扩增EpCAMcDNA ,酶切后分别与pIg及pEGFP两种载体连接 ,用脂质体法转染COS7细胞。用免疫沉淀法检测pIg EpCAM的表达产物 ;用荧光显微镜观察EpCAM GFP的... 目的 :构建pIg EpCAM及pEGFP EpCAM真核表达载体 ,并在COS7细胞中表达。方法 :用PCR扩增EpCAMcDNA ,酶切后分别与pIg及pEGFP两种载体连接 ,用脂质体法转染COS7细胞。用免疫沉淀法检测pIg EpCAM的表达产物 ;用荧光显微镜观察EpCAM GFP的表达。结果 :DNA序列测定的结果显示 ,pIg EpCAM及pEGFP EpCAM载体的构建正确。免疫沉淀的结果显示 ,转染pIg EpCAM的COS7细胞的培养上清中含有相对分子质量 (Mr)为 6 5 0 0 0的融合蛋白 ,该蛋白与抗人IgGFc段的mAb具有良好的免疫反应性。荧光显微镜观察可见 ,转染空载体pEGFP的COS7细胞中绿色荧光均匀地分布于胞质和胞核 ;而转染pEGFP EpCAM的COS7细胞中绿色荧光主要分布于细胞表面。结论 :成功地构建了两种EpCAM的真核表达载体 ,并在COS7细胞中表达 ,为EpCAM的功能研究创造了条件 。 展开更多

关键词 上皮细胞黏附分子 真核表达 增强型绿色荧光蛋白

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上皮细胞黏附分子(EpCAM)在干燥综合征患者唇腺组织上皮细胞的表达与病情严重程度相关 被引量：1

4

作者 程晓静 张葵 +1 位作者 符向辉 吴振彪 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期829-834,共6页

目的探索上皮细胞黏附分子(EpCAM)在干燥综合征(SS)唇腺组织中的表达情况以及其与临床指标的相关性。方法收集57例SS患者及25例健康对照组的唇腺组织,采用免疫组织化学染色法检测唇腺组织中EpCAM细胞外结构域(EpCAM^(EX))及胞内结构域(E... 目的探索上皮细胞黏附分子(EpCAM)在干燥综合征(SS)唇腺组织中的表达情况以及其与临床指标的相关性。方法收集57例SS患者及25例健康对照组的唇腺组织,采用免疫组织化学染色法检测唇腺组织中EpCAM细胞外结构域(EpCAM^(EX))及胞内结构域(EpCAM^(ICD))的表达情况,分析其与临床指标的相关性;重组人肿瘤坏死因子α(rhTNF-α)诱导人脐静脉内皮细胞凋亡后,采用流式细胞术检测其EpCAM^(EX)及EpCAM^(ICD)的表达。结果正常对照组腺上皮细胞膜EpCAM^(EX)高表达,胞质内低表达,胞核不表达;随SS患者病情加重EpCAM^(EX)胞膜表达降低,胞质内EpCAM^(EX)、EpCAM^(ICD)表达增高,且唇腺形态学改变较为突出;EpCAM^(EX)、EpCAM^(ICD)染色评分与SS疾病严重程度呈正相关。且诱导上皮凋亡后,其EpCAM^(EX)表达降低,而EpCAM^(ICD)表达增高。结论SS患者唇腺组织上皮细胞EpCAM^(EX)、EpCAM^(ICD)的表达与SS患者病情严重程度相关,且EpCAM^(EX)、EpCAM^(ICD)的表达与凋亡相关。 展开更多

关键词 干燥综合征 上皮细胞黏附分子(EpCAM) 上皮细胞 内皮细胞

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上皮细胞黏附分子增强细胞间紧密连接促进乳腺癌细胞耐药 被引量：3

5

作者 牛亚楠 高宇 +5 位作者 何倚帆 李克敏 李瑞涵 张文龙 张轩萍 师锐赞 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期809-815,共7页

乳腺癌是致死率很高的恶性肿瘤,由ABCG2(ATP-binding cassette G2)介导的多药耐药(multidrug resistance,MDR)是导致其化疗失败的重要原因,探讨ABCG2介导的耐药机制并探寻其关键分子是当前亟待解决的难题。上皮细胞黏附分子(epithelial ... 乳腺癌是致死率很高的恶性肿瘤,由ABCG2(ATP-binding cassette G2)介导的多药耐药(multidrug resistance,MDR)是导致其化疗失败的重要原因,探讨ABCG2介导的耐药机制并探寻其关键分子是当前亟待解决的难题。上皮细胞黏附分子(epithelial cell adhesion molecule,EpCAM)参与多种肿瘤耐药,且与乳腺癌MDR密切相关,但它在ABCG2介导的乳腺癌耐药中的作用尚未阐明。本研究目的在于探究EpCAM对于ABCG2介导的乳腺癌细胞的多药耐药的调节作用及其机制。CCK8细胞毒性结果证实,相对于人乳腺癌药物敏感株MCF-7,耐药株MCF-7/MX对米托蒽醌(mitoxantrone,MX)的耐药性显著增强;Western印迹结果显示,与MCF-7相比,MCF-7/MX细胞中ABCG2高表达,EpCAM表达上调。siRNA法敲低MCF-7/MX细胞中EpCAM可下调其ABCG2表达,并恢复对MX的敏感性。倒置显微镜观察细胞形态,发现敲低EpCAM可减少MCF-7/MX细胞间连接。免疫荧光双染法观察到EpCAM与密封蛋白1(claudin 1)在MCF-7/MX细胞共定位;进一步Western印迹结果表明,敲低EpCAM减少MCF-7/MX细胞中密封蛋白1表达。综上所述,EpCAM可能通过与密封蛋白1相互作用,增强细胞间紧密连接,促进ABCG2介导的乳腺癌多药耐药。 展开更多

关键词 上皮细胞黏附分子 乳腺癌 细胞间紧密连接 密封蛋白1 耐药

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核内不均一核糖核蛋白D和上皮细胞黏附分子在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及其意义

6

作者 班硕丰 张诗晨 +2 位作者 孙一丹 王婧 韩冰 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期589-593,共5页

目的:探讨核内不均一核糖核蛋白D(hnRNPD)和上皮细胞黏附分子(EpCAM)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)组织和正常口腔黏膜组织中的表达及其与OSCC患者临床病理特征的关系,阐明其在OSCC发生发展中的作用。方法:选取术前均未经放、化疗的38例OSCC... 目的:探讨核内不均一核糖核蛋白D(hnRNPD)和上皮细胞黏附分子(EpCAM)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)组织和正常口腔黏膜组织中的表达及其与OSCC患者临床病理特征的关系,阐明其在OSCC发生发展中的作用。方法:选取术前均未经放、化疗的38例OSCC患者的肿瘤组织(OSCC组)和11例正常拔牙患者的口腔黏膜组织(对照组),采用免疫组织化学染色法检测OSCC组织和正常口腔黏膜组织中hnRNPD和EpCAM表达水平,并分析不同临床病理特征OSCC患者肿瘤组织中hnRNPD和EpCAM表达水平,采用Spearman相关性检验分析OSCC组织中hnRNPD和EpCAM表达的相关性。结果:与对照比较,OSCC组肿瘤组织中hnRNPD和EpCAM表达水平升高(Z=-4.936,P=0.000;Z=-2.780,P=0.005);不同性别和年龄OSCC患者肿瘤组织中EpCAM蛋白表达水平差异有统计学意义(Z=-2.471,P=0.013;Z=-1.967;P=0.049);不同临床病理特征OSCC患者肿瘤组织中hnRNPD表达水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。hnRNPD和EpCAM表达水平相关性较弱(ρ=0.227,P=0.17)。结论:OSCC患者肿瘤组织中hnRNPD和EpCAM表达水平上调,两者促进了OSCC的发生发展。 展开更多

关键词 口腔鳞状细胞癌 核内不均一核糖核蛋白D 上皮细胞黏附分子 免疫组织化学

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上皮细胞黏附分子抗体杂交瘤细胞RP-PCR产物中的可变区假轻链基因序列的鉴定和去除

7

作者 柳耀 冯维博 +6 位作者 蒲雪茵 张倩 刘婷婷 杨舒雅 王静 孙元杰 张葵 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期81-84,共4页

目的发现制备上皮细胞黏附分子(EpCAM)基因工程抗体时,在SP2/0细胞出现的假轻链并去除。方法从EpCAM单克隆抗体的杂交瘤细胞中逆转录提取RNA后,采用特定引物对目的序列进行PCR扩增,对扩增产物利用BCIⅥ限制性核酸内切酶进行酶切筛选,对... 目的发现制备上皮细胞黏附分子(EpCAM)基因工程抗体时,在SP2/0细胞出现的假轻链并去除。方法从EpCAM单克隆抗体的杂交瘤细胞中逆转录提取RNA后,采用特定引物对目的序列进行PCR扩增,对扩增产物利用BCIⅥ限制性核酸内切酶进行酶切筛选,对酶切产物进行测序。结果来源于SP2/0细胞的EpCAM单克隆抗体杂交瘤细胞中存在异常抗体轻链序列(假轻链基因),特异的酶切可以筛选出有效的轻链基因序列。结论酶切法可以去除EpCAM基因工程抗体杂交瘤细胞中的假轻链基因,为消除针对EpCAM的基因工程抗体制备中的假轻链提供了可靠的方法。 展开更多

关键词 上皮细胞黏附分子 假轻链 抗体制备

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一种结肠癌干细胞上皮-间质转化分层模型的建立和验证 被引量：3

8

作者 李鹏 马晓莹 +3 位作者 李小嘉 金文琪 丁旭枫 郭修田 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期100-110,共11页

背景与目的:肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSC)是肿瘤中具有干细胞特性的一类细胞,同时具有自我更新能力及多向分化潜能。CSC在肿瘤转移过程中起着重要作用。上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)与恶性肿瘤浸润、转... 背景与目的:肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSC)是肿瘤中具有干细胞特性的一类细胞,同时具有自我更新能力及多向分化潜能。CSC在肿瘤转移过程中起着重要作用。上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)与恶性肿瘤浸润、转移及与肿瘤患者预后紧密联系。本研究以CSC是否经EMT为标准,建立一种新型结肠癌干细胞EMT分层模型,以评价不同活性物质对不同分型的结肠癌干细胞表型的影响。并用当下研究成熟的抑癌基因miR-139-5p及其靶向抑制的转录因子4(transcription factor 4,TCF4)蛋白验证上述模型的可行性,为临床研究提供理论依据。方法:以CD44和细胞上皮黏附分子/上皮特异性抗原(epithelial cell adhesion molecule/epithelial specific antigen,EpCAM/ESA)为结肠癌干细胞标志物,采用流式细胞术分选皮下移植瘤中CD44+ESA+、CD44+ESA-细胞亚群和转移瘤中CD44+ESA+、CD44+ESA-细胞亚群,分别命名为Epi-S、Epi-P、pEMT-S和pEMT-P,亲本细胞株HCT116作为后续实验的阴性对照;验证分选后不同细胞亚群的多药耐药性、克隆形成能力以及干性转录因子SOX2、OCT4和EMT相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、vimentin的表达情况;检测miR-139-5p过表达、TCF4敲低对Epi-P和pEMT-P以及TCF4过表达对Epi-S和pEMT-S CSC侵袭能力与EMT标志分子E-cadherin、N-cadherin和vimentin蛋白的影响。结果:相较于HCT116亲本细胞株,Epi-S、Epi-P、pEMT-S和pEMT-P共4种CSC分型均对奥沙利铂(oxaliplatin,LOHP)和氟尿嘧啶(fluorouracil,5-FU)产生了不同程度的抗性;干性相关转录因子OCT4和SOX2在4种CSC分型中表达均升高,与亲本细胞株相比,差异有统计学意义(P<0.05);上皮相关标志物E-cadherin、N-cadherin和vimentin在4种CSC分型中表达均升高,与亲本细胞株相比,差异有统计学意义(P<0.05);过表达miR-139-5p或敲低TCF4均能抑制Epi-P和pEMT-P结肠癌干细胞亚型的侵袭能力(P<0.01);在表型稳定未经历EMT的上皮亚系Epi-S中,过表达TCF4能够显著促进其侵袭能力(P<0.01);Epi-P和pEMT-P中过表达miR-139-5p和敲低TCF4,上皮标志物E-cadherin表达增加,间充质标志物N-cadherin和vimentin表达下降。结论:以CD44和ESA为结肠癌干细胞标志物分选出的4种分型具有不同表型可塑性,该模型可用来评价不同生物活性物质对结肠癌干细胞上皮-间质转化的影响。 展开更多

关键词 结肠癌干细胞 CD44 上皮细胞黏附分子 上皮-间质转化

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嵌合抗原受体T细胞免疫疗法在晚期胃癌中的应用进展 被引量：1

9

作者 王皓 黎正行 罗天航 《海军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期1336-1342,共7页

胃癌是最常见的恶性肿瘤之一,当前我国胃癌就诊患者仍以进展期为主,晚期患者就诊时多已失去手术治疗的机会,而传统的放疗、化疗和靶向治疗效果并不理想。嵌合抗原受体(CAR)-T细胞(CAR-T)免疫疗法作为一种新的治疗手段,在血液系统恶性肿... 胃癌是最常见的恶性肿瘤之一,当前我国胃癌就诊患者仍以进展期为主,晚期患者就诊时多已失去手术治疗的机会,而传统的放疗、化疗和靶向治疗效果并不理想。嵌合抗原受体(CAR)-T细胞(CAR-T)免疫疗法作为一种新的治疗手段,在血液系统恶性肿瘤中疗效显著,也为胃癌的免疫治疗开辟了新途径。然而,由于胃癌的异质性、肿瘤微环境免疫抑制、肿瘤靶抗原逃逸及脱靶毒性等问题,使得CAR-T免疫疗法在胃癌治疗中的应用存在挑战。本文综述了CAR的结构及CAR-T治疗原理、CAR-T治疗晚期胃癌的主要靶点及治疗现状,并探讨了CAR-T治疗胃癌面临的挑战,旨在为晚期胃癌的临床免疫治疗提供新思路。 展开更多

关键词 胃肿瘤 免疫疗法 嵌合抗原受体T细胞 密封蛋白18.2 自然杀伤细胞活化型受体 上皮细胞黏附分子

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TRPP2通过UPR/AFT6/EpCAM信号通路调节口腔鳞状细胞癌的迁移和侵袭 被引量：1

10

作者 梁珠珠 陈澍 +2 位作者 孙倩玉 沈兵 薛浩伟 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第11期2024-2032,2064,共10页

目的研究瞬时受体多囊蛋白2(TRPP2)在口腔鳞状上皮细胞的表达及其对口腔鳞状细胞癌(OSCC)侵袭和迁移的影响,初步探讨TRPP2影响OSCC转移的潜在信号通路。方法利用规律性成簇间隔短回文重复序列核酸酶9(CRISPR-Cas9)慢病毒质粒转染技术,构... 目的研究瞬时受体多囊蛋白2(TRPP2)在口腔鳞状上皮细胞的表达及其对口腔鳞状细胞癌(OSCC)侵袭和迁移的影响,初步探讨TRPP2影响OSCC转移的潜在信号通路。方法利用规律性成簇间隔短回文重复序列核酸酶9(CRISPR-Cas9)慢病毒质粒转染技术,构建TRPP2敲低的OSCC模型。免疫蛋白印迹技术(Western blot)验证TRPP2蛋白敲低效果。CCK-8实验和克隆形成实验检测TRPP2对OSCC增殖的影响。RT-qPCR法检测TRPP2对OSCC转移相关的靶基因。Western blot和qRT-PCR检测与靶基因EpCAM及其与未折叠蛋白反应(UPR)相关转录因子表达。利用侵袭实验和划痕实验检测TRPP2对OSCC侵袭和迁移能力的影响。结果与口腔上皮细胞HOK相比,OSCC中TRPP2显著高表达。敲低TRPP2,OSCC增殖和克隆形成能力显著增强。与对照组相比,TRPP2敲低转录谱中共494个差异基因显著表达,其中234个基因表达上调,260个基因下调。其中与细胞黏附相关的上皮细胞黏附分子(EpCAM)基因上调表达。此外,与UPR相关基因PERK、ATF6、GRP78表达上调,而与HOK细胞相比,OSCC中ATF6与EpCAM表达下调。敲低TRPP2,OSCC中ATF6与EpCAM表达上调,并降低细胞迁移和侵袭能力。ATF6抑制剂ceapin-A7(5.0μmol/L)可恢复TRPP2敲低的OSCC迁移和侵袭能力。结论TRPP2在OSCC中显著高表达。敲低TRPP2,OSCC增殖能力增强,迁移和侵袭能力受抑制。TRPP2通过激活UPR介导EpCAM的表达,进而影响OSCC的侵袭和迁移能力。 展开更多

关键词 口腔鳞状细胞癌 瞬时受体多囊蛋白2 未折叠蛋白反应 内质网应激 上皮细胞黏附分子 细胞迁移和侵袭

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OX-LDL介导内皮细胞损伤及其对TLR-4和EpCAM表达的影响 被引量：6

11

作者 陈为 张葵 +2 位作者 张宸豪 李强 李妍 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1144-1149,共6页

目的:研究氧化型低密度脂蛋白(OX-LDL)对血管内皮细胞的损伤效应及其对Toll样受体4(TLR-4)和上皮细胞黏附分子(EpCAM)表达的影响。方法:培养人脐静脉内皮细胞ECV-304,实验分为对照组和实验组(25、50、100和200mg·L-1 OX-LDL),处理... 目的:研究氧化型低密度脂蛋白(OX-LDL)对血管内皮细胞的损伤效应及其对Toll样受体4(TLR-4)和上皮细胞黏附分子(EpCAM)表达的影响。方法:培养人脐静脉内皮细胞ECV-304,实验分为对照组和实验组(25、50、100和200mg·L-1 OX-LDL),处理后细胞继续培养24h,台盼蓝拒染法检测细胞活力;流式细胞术检测活性氧(ROS)水平、线粒体膜电位(MMP)、细胞周期与凋亡以及EpCAM和TLR-4表达水平。结果:与对照组比较,25、50、100和200mg·L-1 OX-LDL组ECV-304细胞内ROS水平升高,细胞活力和MMP下降(P<0.05)。与对照组比较,25和50mg·L-1 OX-LDL组S期细胞百分率升高,而G0/G1期细胞略减少,SubG1期细胞(凋亡细胞)随OX-LDL浓度增加而增加。与对照组比较,50mg·L-1 OX-LDL组24h时ECV-304细胞膜表面TLR-4和EpCAM表达水平均明显升高(P<0.05)。结论:OX-LDL具有提高内皮细胞ROS水平、降低细胞活力和MMP以及诱导细胞凋亡等损伤效应,此过程中ECV-304细胞中TLR-4和EpCAM水平升高。 展开更多

关键词 氧化型低密度脂蛋白 血管内皮细胞 活性氧 上皮细胞黏附分子 TOLL 样受体-4

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肝癌细胞系Huh-7中EpCAM^+细胞亚群的肿瘤干细胞样特性 被引量：2

12

作者 葛丽丽 杨小昂 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2012年第3期306-309,共4页

目的:观察从肝癌细胞系Huh-7中分选出的EpCAM+细胞亚群的肿瘤干细胞样特性。方法:采用免疫磁珠法从Huh-7细胞中分离EpCAM+和EpCAM-细胞亚群,比较其体外增殖、克隆形成、分化、耐药和体内成瘤能力。结果:EpCAM+细胞体外增殖能力强于EpCAM... 目的:观察从肝癌细胞系Huh-7中分选出的EpCAM+细胞亚群的肿瘤干细胞样特性。方法:采用免疫磁珠法从Huh-7细胞中分离EpCAM+和EpCAM-细胞亚群,比较其体外增殖、克隆形成、分化、耐药和体内成瘤能力。结果:EpCAM+细胞体外增殖能力强于EpCAM-细胞(P<0.001);EpCAM+细胞克隆形成数高于EpCAM-细胞(P<0.001);分选后随着培养时间的延长,EpCAM+细胞的比率逐渐降低;加入顺铂培养后,EpCAM+细胞亚群的比率增加(P<0.001);1×103个EpCAM+细胞接种裸鼠皮下4周即可成瘤,而在相同条件下,EpCAM-细胞至少需要接种1×105个和接种更长的时间才能成瘤。结论:EpCAM+细胞亚群具有肝癌干细胞样特性,EpCAM可作为分离纯化肝癌干细胞的一个标志物。 展开更多

关键词 肝癌 肿瘤干细胞 上皮细胞黏附分子

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AC133和EpCAM在人肺腺癌中的表达及双阳性细胞的分选

13

作者 赵振国 罗福康 +4 位作者 安江宏 段玉忠 孙建国 朱波 陈正堂 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期487-490,共4页

目的:通过双重免疫荧光染色法检测人肺腺癌组织标本中AC133以及上皮细胞黏附分子(EpCAM)的表达,并以流式细胞术分选AC133+EpCAM+细胞,为后续人肺腺癌干细胞研究提供实验基础。方法:取人肺腺癌组织标本,冰冻切片,进行双重免疫荧光染色,... 目的:通过双重免疫荧光染色法检测人肺腺癌组织标本中AC133以及上皮细胞黏附分子(EpCAM)的表达,并以流式细胞术分选AC133+EpCAM+细胞,为后续人肺腺癌干细胞研究提供实验基础。方法:取人肺腺癌组织标本,冰冻切片,进行双重免疫荧光染色,通过激光共聚焦显微镜检测腺癌组织内AC133和EpCAM的表达。以胶原酶和分散酶将新鲜肺腺癌组织标本制为单细胞悬液,滤除其中的胶原并去除红细胞后,以AC133和EpCAM共同标记单细胞,上流式细胞仪进行分选。结果:在人肺腺癌标本中具有AC133和EpCAM的表达;通过流式细胞术可分选到AC133和EpCAM共表达细胞。结论:验证了人肺腺癌组织中AC133和EpCAM的表达情况;通过流式细胞术分选获得AC133和EpCAM双标记阳性细胞,可为人肺腺癌干细胞的后续研究提供实验基础。 展开更多

关键词 AC133 上皮细胞黏附分子 人肺腺癌干细胞 流式细胞术

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靶向EpCAM的CAR-T细胞抗肝癌细胞的体外杀伤性研究 被引量：1

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作者 王松 张炳兰 张秉强 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第18期1947-1954,共8页

目的研究靶向上皮细胞黏附分子(epithelial cell adhesion molecule,EpCAM)的嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor-T cells,CAR-T)在体外对数种肝癌细胞的杀伤效能。方法采用流式细胞术检测4种人肝癌细胞(SK-hep1、hep-G2、HuH... 目的研究靶向上皮细胞黏附分子(epithelial cell adhesion molecule,EpCAM)的嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor-T cells,CAR-T)在体外对数种肝癌细胞的杀伤效能。方法采用流式细胞术检测4种人肝癌细胞(SK-hep1、hep-G2、HuH7和BEL-7402)EpCAM的表达情况;通过慢病毒载体构建靶向EpCAM的CAR-T细胞;流式细胞术检测CAR分子的表达情况并分析CAR-T的CD3/4/8表型;为分析杀伤效应,将效应细胞和靶细胞共培养后,收集上清液,通过乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放实验检测LDH释放情况,酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞因子IFN-γ和TNF-α的释放情况。结果EpCAM在hep-G2、HuH7和BEL-7402中高表达,而在SK-hep1中不表达。流式细胞术表明靶向EpCAM-CAR在慢病毒感染后的T细胞中表达率高达43.21%。流式细胞术分析CAR-T细胞CD3/4/8表型,高达95.1%的外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)为CD3阳性,其中CD8+T细胞占61.40%、CD4^(+)T细胞占32.13%。LDH释放实验提示CAR-T对EpCAM阳性人肝癌细胞hep-G2、HuH7和BEL-7402有更强的直接杀伤能力(P<0.01);ELISA实验提示EpCAM阳性人肝癌细胞hep-G2、HuH7和BEL-7402诱导CAR-T细胞释放更多的IFN-γ和TNF-α(P<0.05,P<0.01),而对于EpCAM阴性的SK-hep1肿瘤细胞,CAR-T组与未转染T细胞对照组IFN-γ和TNF-α的释放量无显著差异,此外,这2种细胞因子水平随着E∶T比值的增加而增加。结论相对未转染的T细胞,在体外,EpCAM-CAR-T细胞对EpCAM阳性的肝癌细胞具有更强的杀伤能力,能使其释放出更多的LDH、IFN-γ和TNF-α。 展开更多

关键词 上皮细胞黏附分子 嵌合抗原受体T细胞 CAR-T 肝癌

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EPCAM、CD44和CD24在胃癌组织中的表达及其临床意义 被引量：11

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作者 杨世斌 肖隆斌 +3 位作者 许峰峰 吴文辉 李守智 李明哲 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期1224-1229,共6页

目的:联合检测95例胃癌组织中上皮细胞黏附分子(EPCAM)、白细胞分化抗原44(CD44)和白细胞分化抗原24(CD24)的表达情况,分析这3种蛋白与胃癌临床病理资料及预后之间的关系。方法:应用免疫组织化学法检测95例经手术切除并有明确病理诊断... 目的:联合检测95例胃癌组织中上皮细胞黏附分子(EPCAM)、白细胞分化抗原44(CD44)和白细胞分化抗原24(CD24)的表达情况,分析这3种蛋白与胃癌临床病理资料及预后之间的关系。方法:应用免疫组织化学法检测95例经手术切除并有明确病理诊断为胃癌的标本中EPCAM、CD44和CD24的表达。分析95例胃癌临床病理资料与这3种蛋白阳性表达之间的关系。结果:(1)EPCAM阳性56例(58.95%),CD44阳性41例(43.16%),CD24阳性56例(58.95%)。其中EPCAM+CD44+30例(31.58%),EPCAM+CD24+45例(47.37%),CD44+CD24+32例(33.68%),EPCAM+CD44+CD24+25例(26.32%)。(2)EPCAM与年龄、肿瘤浸润深度、WHO组织学分型有关;CD44与BORRMANN分型、WHO组织学分型、CEA值有关;CD24与浸润深度、肿瘤位置、WHO组织学分型、脏器侵犯有关;三者阳性与浸润深度、肿瘤位置、WHO组织学分型有关(P<0.05)。(3)EPCAM、CD44阳性组的生存率与阴性组比较差异有统计学意义(P<0.05及P<0.01);EPCAM+CD44+CD24+与EPCAM-CD44-CD24-的生存率比较差异有统计学意义(P<0.05);EPCAM-CD44+CD24+与EPCAM-CD44-CD24-的生存率比较有统计学意义(P<0.05)。结论:EPCAM、CD44和CD24在胃癌组织中表达阳性率高,可作为胃癌诊断的初筛实验。 展开更多

关键词 上皮细胞黏附分子 CD44 CD24 胃肿瘤

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CK19和EpCAM在胃癌组织中表达的循证分析 被引量：4

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作者 彭云香 毛静涛 +1 位作者 魏君 侯治富 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期296-299,共4页

目的:探讨细胞角蛋白19(CK19)和上皮细胞黏附分子(EpCAM)在胃癌组织中表达的循证实验诊断学价值。方法:应用组织芯片-免疫组化技术检测胃黏膜上皮细胞组织芯片(胃癌31例,良性病变7例,正常胃黏膜16例)中CK19和EpCAM表达差异性,并对染色... 目的:探讨细胞角蛋白19(CK19)和上皮细胞黏附分子(EpCAM)在胃癌组织中表达的循证实验诊断学价值。方法:应用组织芯片-免疫组化技术检测胃黏膜上皮细胞组织芯片(胃癌31例,良性病变7例,正常胃黏膜16例)中CK19和EpCAM表达差异性,并对染色结果进行循证分析。结果:良性病变和胃癌组织中CK19和EpCAM的表达率显著高于正常胃黏膜组织(P<0.05);EpCAM与胃癌的淋巴结转移(b=1.376,P<0.05)、浸润深度(rs=0.514,P<0.05)及TNM分期(rs=0.581,P<0.05)呈正相关关系;并联实验的真实性、可靠性和收益性较CK19和EpCAM单独实验、串联实验高。结论:CK19和EpCAM与胃癌的发生和发展相关,CK19和EpCAM并联实验在胃癌的循征实验诊断中价值较高。 展开更多

关键词 组织芯片 胃肿瘤 细胞角蛋白19 上皮细胞黏附分子 循证诊断

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E-cad及EpCAM在子宫内膜癌中的表达及意义 被引量：5

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作者 周猷伟 方旖骅 +1 位作者 杨媛媛 颜士杰 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2014年第5期629-632,共4页

目的研究上皮型钙黏素(E-cad)及上皮细胞黏附分子(EpCAM)在子宫内膜癌中的表达及其在子宫内膜癌的发生、发展和预后中的意义。方法应用免疫组化PV法检测30例正常增生期子宫内膜、30例单纯性增生子宫内膜、30例复杂型或伴不典型增生子宫... 目的研究上皮型钙黏素(E-cad)及上皮细胞黏附分子(EpCAM)在子宫内膜癌中的表达及其在子宫内膜癌的发生、发展和预后中的意义。方法应用免疫组化PV法检测30例正常增生期子宫内膜、30例单纯性增生子宫内膜、30例复杂型或伴不典型增生子宫内膜和40例子宫内膜癌中Ecad及EpCAM的表达情况,并结合临床进行分析。结果 E-cad在正常增生期子宫内膜至癌性内膜的发展过程中以及随着子宫内膜癌患者肌层浸润深度的增加、淋巴转移及FIGO临床分期的增加,其表达阳性率逐渐下降,EpCAM则反之(P<0.05);E-cad及EpCAM在子宫内膜癌组织中的表达呈负相关(P<0.05)。结论子宫内膜癌中E-cad蛋白的低表达与EpCAM蛋白的高表达和两者之间的负相关与子宫内膜癌的恶性程度及预后有关,同时提示了以Wnt信号通路为基础的分子靶向治疗的可能性。 展开更多

关键词 子宫内膜癌 上皮型钙黏素 上皮细胞黏附分子

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