目的:研究微小RNA(microRNA,miR)-218-5p靶向调控三磷酸腺苷结合盒超家族G家族第2个成员(ATP-binding cassette sub-family G member 2,ABCG2)基因对Tca-8113细胞的增殖、迁移和侵袭的影响,并探讨其机制。方法:运用实时荧光定量聚合酶...目的:研究微小RNA(microRNA,miR)-218-5p靶向调控三磷酸腺苷结合盒超家族G家族第2个成员(ATP-binding cassette sub-family G member 2,ABCG2)基因对Tca-8113细胞的增殖、迁移和侵袭的影响,并探讨其机制。方法:运用实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)与Western blot检测Tca-8113细胞和NOK细胞中miR-218-5p和ABCG2的表达。通过双荧光素酶报告基因实验检测miR-218-5p和ABCG2靶向关系。用脂质体法将miR-218-5p mimic、ABCG2小干扰RNA(interfering RNA,siRNA)、miR-218-5p mimic+pcDNA-ABCG2分别转染至Tca-8113细胞中,噻唑蓝(methyl thiazol tetrazolium,MTT)法、Transwell法检测Tca-8113细胞的增殖、迁移和侵袭。结果:与NOK细胞比较,Tca-8113细胞miR-218-5p呈显著低表达,ABCG2呈显著高表达(P<0.05)。过表达miR-218-5p、抑制ABCG2均可抑制Tca-8113细胞的增殖和迁移(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实miR-218-5p与ABCG2的靶向结合关系。过表达ABCG2可逆转上调miR-218-5p对Tca-8113细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论:上调miR-218-5p的表达可靶向调控ABCG2,抑制Tca-8113细胞的增殖、迁移和侵袭,将可为口腔鳞状细胞癌的治疗提供新的靶点。展开更多
目的肿瘤高表达多药耐药相关转运蛋白三磷酸腺苷结合转运蛋白G家族成员2(ATP-binding cassette super family G member 2,ABCG2)是造成耐药及化疗失败的主要原因。文中旨在探讨环磷酰胺体内干预后肾上腺皮质癌细胞中ABCG2表达的意义。方...目的肿瘤高表达多药耐药相关转运蛋白三磷酸腺苷结合转运蛋白G家族成员2(ATP-binding cassette super family G member 2,ABCG2)是造成耐药及化疗失败的主要原因。文中旨在探讨环磷酰胺体内干预后肾上腺皮质癌细胞中ABCG2表达的意义。方法 BALB/C-nu裸鼠共10只,雌雄不拘,随机数表法分为对照组和环磷酰胺组,每组5只。将SW-13细胞注射入裸鼠皮下建立裸鼠皮下移植瘤模型,环磷酰胺组予腹腔注射环磷酰胺,对照组予注射等量等渗盐水,并对获得的2组瘤体组织进行原代培养。用免疫组化法(阳性肿瘤细胞百分比<10%者为阴性,≥10%为阳性)和流式细胞法分别检测瘤体组织及原代细胞株ABCG2的表达。结果流式细胞法检测ABCG2在环磷酰胺组细胞中表达率[(97.89±1.36)%]高于对照组细胞[(81.88±8.31)%],差异有统计学意义(P<0.05),免疫组化结果提示环磷酰胺组瘤体组织中ABCG2表达阳性率[(69.1±1.83)%]高于对照组[(53.4±1.65)%],差异有统计学意义(P<0.05)。结论多药耐药基因ABCG2参与肾上腺皮质癌耐药,可能为肾上腺皮质癌干预靶点。展开更多
背景与目的:三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(adenosine triphosphate-binding cassette superfamily G member 2,ABCG2)在多种肿瘤细胞中表达,能通过外排抗癌药物参与肿瘤耐药。本研究的目的旨在探讨人胶质瘤细胞对焦脱镁叶绿酸甲...背景与目的:三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(adenosine triphosphate-binding cassette superfamily G member 2,ABCG2)在多种肿瘤细胞中表达,能通过外排抗癌药物参与肿瘤耐药。本研究的目的旨在探讨人胶质瘤细胞对焦脱镁叶绿酸甲酯(pyropheophorbide-a methyl ester,MPPa)介导的光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)杀伤效应的敏感性及其与ABCG2的关系。方法:选取处于对数生长期的胶质瘤细胞株U87、A172,分别经MPPa-PDT或MPPa-PDT+烟曲霉毒素C(fumitremorgin C,FTC)处理后,采用CCK-8法检测细胞活性;采用蛋白[质]印迹法(Western blot)检测细胞内ABCG2的表达;流式细胞技术法检测未光照前各组细胞内MPPa的含量;AnnexinⅤ-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率;DCFH-DA染色观察细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生。结果:MPPa-PDT能抑制A172、U87细胞的活性,且呈一定的光能量依赖性,A172达到半数致死量所需光能量密度为U87的8倍;A172较U87细胞对MPPa-PDT不敏感;A172细胞内高表达的ABCG2影响MPPa在细胞内的聚集;抑制ABCG2后,不仅可以增强MPPa-PDT对A172细胞的杀伤作用,同时可增加MPPa-PDT触发产生的ROS的量及细胞对MPPa的摄取。结论:人胶质瘤细胞株A172对MPPa-PDT相对不敏感,并且产生这种现象的机制可能是ABCG2外排MPPa,减少MPPa的细胞内聚集,进而减弱光敏剂活化后对肿瘤细胞的杀伤作用。展开更多
文摘目的肿瘤高表达多药耐药相关转运蛋白三磷酸腺苷结合转运蛋白G家族成员2(ATP-binding cassette super family G member 2,ABCG2)是造成耐药及化疗失败的主要原因。文中旨在探讨环磷酰胺体内干预后肾上腺皮质癌细胞中ABCG2表达的意义。方法 BALB/C-nu裸鼠共10只,雌雄不拘,随机数表法分为对照组和环磷酰胺组,每组5只。将SW-13细胞注射入裸鼠皮下建立裸鼠皮下移植瘤模型,环磷酰胺组予腹腔注射环磷酰胺,对照组予注射等量等渗盐水,并对获得的2组瘤体组织进行原代培养。用免疫组化法(阳性肿瘤细胞百分比<10%者为阴性,≥10%为阳性)和流式细胞法分别检测瘤体组织及原代细胞株ABCG2的表达。结果流式细胞法检测ABCG2在环磷酰胺组细胞中表达率[(97.89±1.36)%]高于对照组细胞[(81.88±8.31)%],差异有统计学意义(P<0.05),免疫组化结果提示环磷酰胺组瘤体组织中ABCG2表达阳性率[(69.1±1.83)%]高于对照组[(53.4±1.65)%],差异有统计学意义(P<0.05)。结论多药耐药基因ABCG2参与肾上腺皮质癌耐药,可能为肾上腺皮质癌干预靶点。
文摘目的:探讨不同分子靶向药物对高表达与低表达ATP结合转运蛋白G超家族成员2(ATP-binding cassette super-family Gmember 2,ABCG2)的人耐药鼻咽癌CNE2/DDP细胞(分别简写为ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP)表面NKG2D配体(natural killer group 2 member Dligands,NKG2DLs)表达的诱导作用及其对NK细胞杀伤敏感性的影响。方法:免疫磁珠法分选ABCG2highCNE2/DDP、ABCG2lowCNE2/DDP细胞及NK细胞。流式细胞术检测分选细胞的纯度和不同分子靶向药物(硼替佐米、索拉非尼、舒尼替尼)处理前后ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP细胞NKG2DLs的表达率。LDH释放法检测不同药物处理前后ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP细胞对NK细胞杀伤的敏感性。结果:ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP细胞表面ABCG2的表达率分别为(91.40±2.32)%和(1.70±0.24)%。分选后NK细胞中CD3-CD16+CD56+细胞的比例达90%以上。药物处理前,ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP细胞MICA、MICB、ULBP1、ULBP2和ULBP3呈弱表达;经不同分子靶向药物处理后,5种NKG2DLs的表达率均明显上升(P<0.01),以舒尼替尼处理后NKG2DLs的表达率升高最明显。随着NKG2DLs表达的上调,ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP细胞对NK细胞杀伤的敏感性也随之升高。结论:不同分子靶向药物可诱导耐药鼻咽癌CNE2/DDP细胞NKG2DLs的表达,以舒尼替尼的诱导作用最强,且肿瘤细胞NKG2DLs的表达与其对NK细胞杀伤敏感性之间存在线性关系。
