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初次卵裂时间是猪克隆胚胎发育潜能的重要标识 被引量:6
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作者 罗学明 肖炜 +5 位作者 冯冲 龙川 闫军 薛振华 云鹏 潘登科 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1339-1345,共7页
初次卵裂时间与哺乳动物胚胎发育潜能有关.比较了不同初次卵裂时间(20~24 h,早期;25~36 h,中期;37~48 h,晚期;20~48 h,对照)的猪孤雌(parthenogenetic,PA)、体细胞核移植(somatic cell nucleartransfer,SCNT)胚胎的囊胚发育率、扩... 初次卵裂时间与哺乳动物胚胎发育潜能有关.比较了不同初次卵裂时间(20~24 h,早期;25~36 h,中期;37~48 h,晚期;20~48 h,对照)的猪孤雌(parthenogenetic,PA)、体细胞核移植(somatic cell nucleartransfer,SCNT)胚胎的囊胚发育率、扩张囊胚发育率和囊胚细胞数,评价其体外发育能力.发现早期卵裂的PA胚胎发育到第6天的囊胚发育率显著高于中期、晚期以及对照组(P<0.05;54.0%vs.19.6%,5.4%,18.7%).扩张囊胚发育率,早裂胚胎同样优于其他组.早期卵裂的SCNT胚胎发育到第6天的囊胚比率高于中期卵裂胚胎(32.2%vs.23.5%),而晚期卵裂胚胎发育到囊胚的比率最低(6.3%).早期卵裂的SCNT胚胎发育到第6天的扩张囊胚比率显著高于其余各组(P<0.05;18.9%vs.5.9%、3.1%、7.4%).囊胚细胞数在早期、中期、晚期三组之间表现出下降趋势.将早期卵裂的SCNT胚胎与未经挑选的对照组胚胎分别进行移植,观察其体内发育能力.移植早裂SCNT胚胎的受体在产仔数和克隆效率上均明显高于未经挑选胚胎的受体(4.7 vs.2.1;3.9%vs.0.9%),说明早裂胚胎着床后具有更强的发育能力.以上结果表明:初次卵裂时间可以作为猪克隆胚胎发育潜能的重要标识,选择早裂的胚胎进行移植,有助于提高克隆效率. 展开更多
关键词 体细胞核移植 初次卵裂时间 发育潜能
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运输温度与时间对猪孤雌胚胎发育的影响 被引量:2
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作者 张卫红 闫军 +3 位作者 冯冲 龙川 张兆旺 潘登科 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第13期5998-5999,6013,共3页
[目的]比较不同运输温度与时间对猪孤雌胚胎发育的影响,确立猪克隆胚胎的最佳运输温度与时间。[方法]研究不同温度(37、38、39℃)对孤雌胚胎卵裂率、囊胚率的影响;不同时间(2、3、4 h)对孤雌胚胎卵裂率、囊胚率的影响。[结果]培养3 h后,... [目的]比较不同运输温度与时间对猪孤雌胚胎发育的影响,确立猪克隆胚胎的最佳运输温度与时间。[方法]研究不同温度(37、38、39℃)对孤雌胚胎卵裂率、囊胚率的影响;不同时间(2、3、4 h)对孤雌胚胎卵裂率、囊胚率的影响。[结果]培养3 h后,在39℃运输时,孤雌胚胎的卵裂率和囊胚率与37℃、38℃的卵裂率和囊胚率相比,差异显著(P<0.05);培养3 h后,孤雌胚胎的卵裂率和囊胚率与培养2 h、4 h的卵裂率和囊胚率相比,差异显著(P<0.05)。[结论]在39℃,3 h内进行孤雌胚胎的运输,能获得较高的卵裂率、囊胚率。 展开更多
关键词 运输时间 运输温度 孤雌胚胎 卵裂率 囊胚率
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体外受精不同时间等因素对体外受精效果的影响 被引量:3
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作者 佟桂芝 韩永胜 王洪宝 《中国奶牛》 2010年第7期31-33,共3页
本试验对牛体外受精不同时间、不同的培养液成分和培养方法等对奶牛体外受精后的卵裂率、囊胚发育率的影响进行了研究。试验包括:(1)牛体外受精不同时间(8h、20h)对奶牛体外受精后的卵裂率、囊胚发育率的影响;(2)不同的培养液成分对奶... 本试验对牛体外受精不同时间、不同的培养液成分和培养方法等对奶牛体外受精后的卵裂率、囊胚发育率的影响进行了研究。试验包括:(1)牛体外受精不同时间(8h、20h)对奶牛体外受精后的卵裂率、囊胚发育率的影响;(2)不同的培养液成分对奶牛体外受精早期胚胎发育的影响。研究结果表明:(1)牛体外受精时间20h对奶牛体外受精后的卵裂率(78%)好于体外受精8h组(76%),但囊胚发育率前者不如后者好(20.51%VS23.68%),两者间差异不显著(P>0.05)。(2)作为早期胚胎的培养液IVD101、TCM199培养系的卵裂率分别为76%、74%,而囊胚率却分别为22.37%、22.97%,TCM199培养系好于IVD-101,但两者间差异不显著(P>0.05)。 展开更多
关键词 奶牛 卵巢 培养液 体外受精时间 卵裂率 囊胚率
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五指山小型猪不同时间采集原核胚的效果研究
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作者 王占贺 冯书堂 +1 位作者 陶涛 王彦玲 《北京农学院学报》 1997年第3期36-40,共5页
本试验拟探索出采集五指山小型猪原核胚的最佳时间.结果表明,五指山小型猪供体母猪,在注射HCG后33~34h手术冲卵是最为理想时间,所得胚胎100%为原核胚.注射HCG后52~58h手术采卵,原核胚所占比例为63.6%.注射HCG后62~72h采卵... 本试验拟探索出采集五指山小型猪原核胚的最佳时间.结果表明,五指山小型猪供体母猪,在注射HCG后33~34h手术冲卵是最为理想时间,所得胚胎100%为原核胚.注射HCG后52~58h手术采卵,原核胚所占比例为63.6%.注射HCG后62~72h采卵,原核胚下降比例更大,只有19.1%. 展开更多
关键词 五指山 原核胚 采胚时间
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小型猪克隆胚胎体外培养阶段的优化 被引量:2
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作者 杨希祥 李智方 +4 位作者 龙川 冯冲 储明星 潘登科 李娟 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第7期182-186,共5页
本试验从卵母细胞卵丘多少和初次卵裂时间早晚2个方面进行研究,旨在改善小型猪克隆方案的体外培养环节,提高克隆效率。将卵母细胞按卵丘多少分成3组,比较卵母细胞的成熟效果,取成熟效果好的卵母细胞进行后续试验;PA和SCNT试验均按... 本试验从卵母细胞卵丘多少和初次卵裂时间早晚2个方面进行研究,旨在改善小型猪克隆方案的体外培养环节,提高克隆效率。将卵母细胞按卵丘多少分成3组,比较卵母细胞的成熟效果,取成熟效果好的卵母细胞进行后续试验;PA和SCNT试验均按初次卵裂时间早晚分成3组,在体外培养条件下,比较胚胎的卵裂率和囊胚率。结果表明,卵丘多的卯母细胞体外成熟39~40 h和卵丘少的卵母细胞体外成熟41~42 h,比不区分卵丘多少的卵母细胞体外成熟39~42 h的成熟效果要好;初次卵裂时间发生在26 h以前的胚胎比26 h之后的胚胎在数量和质量上都明显优越,前者胚胎的卯裂率和囊胚率显著高于后者,此结果在孤雌激活(parthenogenetic,PA)胚胎和体细胞核移植(somatic cell nucleartransfer,SCNT)胚胎的体外试验中均得到验证。本研究完善了小型猪克隆方案的体外培养环节,为器官异种移植提供相关技术参考。 展开更多
关键词 小型猪 异种移植 初次卵裂时间 体细胞核移植
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H5和H7亚型高致病性禽流感病毒新型冻干微芯片双重荧光定量RT-PCR方法的建立和初步应用 被引量:5
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作者 高晓艺 韩焘 +8 位作者 王乃迪 王传彬 杨林 王新杰 高姗姗 孙晓明 胡祥钰 石玉祥 刘玉良 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期911-917,共7页
为建立鉴别检测H5和H7亚型高致病性禽流感病毒(HPAIV)双重荧光定量RT-PCR检测方法,本研究根据已登录的H5和H7亚型HPAIV HA基因裂解位点序列差异分别设计引物和探针,对反应体系各条件优化后首次建立了同时鉴别检测H5与H7亚型HPAIV的新型... 为建立鉴别检测H5和H7亚型高致病性禽流感病毒(HPAIV)双重荧光定量RT-PCR检测方法,本研究根据已登录的H5和H7亚型HPAIV HA基因裂解位点序列差异分别设计引物和探针,对反应体系各条件优化后首次建立了同时鉴别检测H5与H7亚型HPAIV的新型冻干微芯片双重荧光定量RT-PCR方法。特异性试验结果显示,该方法除对H5和H7亚型HPAIV检测结果为阳性外,对其它几种常见的禽病病原检测结果均为阴性,该方法特异性强;敏感性试验结果显示,该方法检测下限为病毒浓度1×101TCID50/mL,而常规荧光定量RT-PCR检测下限为1×102TCID50/mL,敏感性高;标准曲线分析后结果显示,本研究所建立方法的扩增效率比常规荧光定量RT-PCR高,二者相关系数均为0.997;批内和批间重复性试验结果显示,Ct值的变异系数均小于2%以下,重复性高。临床样品检测结果显示,该方法所需样本微量仅为1μL^2μL;操作简便、快速,检测过程<40 min,可用于现场检测;而且利用该方法与常规荧光定量PCR方法以及测序对临床样品进行检测,三者结果完全吻合。本研究所建立的新型冻干微芯片双重荧光定量RT-PCR检测方法为H5和H7亚型HPAIV监测和临床检测提供了可行的技术手段。 展开更多
关键词 H5亚型禽流感 H7亚型禽流感 HA裂解位点 双重荧光定量RT-PCR 微芯片
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发育潜能不同的猪孤雌胚胎差异表达基因的筛选 被引量:1
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作者 陆芳 罗学明 +2 位作者 龙川 王希彪 潘登科 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第10期130-134,共5页
本试验以猪孤雌胚胎为材料,根据初次卵裂时间的早晚划分出发育能力不同的2组胚胎,比较其母源mRNAs丰度。利用mRNA差异显示技术(mRNAdifferential display reverse transcription PCR,DDRT-PCR)筛选出2组胚胎中表达丰度不同的母源mRNAs... 本试验以猪孤雌胚胎为材料,根据初次卵裂时间的早晚划分出发育能力不同的2组胚胎,比较其母源mRNAs丰度。利用mRNA差异显示技术(mRNAdifferential display reverse transcription PCR,DDRT-PCR)筛选出2组胚胎中表达丰度不同的母源mRNAs,并经反Northern blotting验证,结果发现,有8条差异表达的阳性cDNA片段(E1-E4;L1-L4),克隆、测序后与GenBank数据库进行同源性比对分析,其中6条(E1、E2、E4、L1、L2、L4)与已知ESTs有较高的同源性,E3与人CPEB2的同源性为97%,L3与人hnRNPA1的同源性为89%。因此,CPEB2和hnRNPA1是影响胚胎发育能力的重要候选基因。 展开更多
关键词 孤雌胚胎 初次卵裂时间 母源mRNA 胚胎质量 DDTR-PCR
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配子共孵育时间对水牛卵母细胞体外受精的影响 被引量:3
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作者 杨红远 胡钟仁 +1 位作者 汤守琨 洪琼花 《黑龙江动物繁殖》 2009年第6期1-2,共2页
试验对比了配子共孵育17 h、18 h、20 h、21 h、22 h、23 h和24 h对卵裂率的影响。结果表明,延长精卵共孵育时间使卵裂率有下降的趋势,卵裂率最高的共孵育时间为18 h,在17~24 h的共孵育时间内,卵裂率具有明显的波动。
关键词 配子 共孵育 卵裂率 水牛
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巴戟天中环烯醚萜苷和蒽醌在电喷雾离子源负离子模式下的质谱裂解行为 被引量:10
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作者 赵祥升 杨美华 +1 位作者 吴海峰 舒晓燕 《质谱学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第3期342-350,共9页
利用电喷雾-四极杆-飞行时间串联质谱(ESI-Q-TOF MS/MS)技术,在负离子模式下,探讨巴戟天中4种环烯醚萜苷和2种蒽醌成分的质谱裂解途径。通过[M-H]-获得化合物的相对分子质量信息,进一步对[M-H]-进行碰撞诱导解离,获得相应化合物的裂解... 利用电喷雾-四极杆-飞行时间串联质谱(ESI-Q-TOF MS/MS)技术,在负离子模式下,探讨巴戟天中4种环烯醚萜苷和2种蒽醌成分的质谱裂解途径。通过[M-H]-获得化合物的相对分子质量信息,进一步对[M-H]-进行碰撞诱导解离,获得相应化合物的裂解途径。结果表明,环烯醚萜苷主要的裂解途径是首先脱去母环上的功能基团,如中性丢失H_2O、CO_2、CH_3COOH和糖单元等部分;其次是二氢吡喃环和糖环的断裂,m/z113、101为环烯醚萜苷母环断裂的特征碎片离子。蒽醌类化合物的裂解行为是连续失去CO,也可以失去CO_2。这些质谱裂解行为的研究有助于环烯醚萜苷和蒽醌类化合物的结构解析,也可为其他同类化合物的鉴定提供依据。 展开更多
关键词 巴戟天 电喷雾-四极杆-飞行时间串联质谱(ESI-Q-TofMS/MS)环烯醚萜苷 蒽醌 裂解行为
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