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抗日本血吸虫生殖功能分子SIEA26~28kDa单链抗体与EGFP的融合表达及靶向性研究
被引量:
3
1
作者
何卓
汪世平
+6 位作者
周帅锋
秦永华
高冬梅
汪希雅
李林
余路新
徐绍锐
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第8期704-707,共4页
目的体外观察抗日本血吸虫生殖功能分子SIEA26-28kDa单链抗体与日本血吸虫各阶段的靶向部位,探讨单链抗体在抗血吸虫病疫苗研究中的应用价值。方法扩增增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因.克隆至PET32a/SIEA26~28kDa-scFv质粒,构建PET...
目的体外观察抗日本血吸虫生殖功能分子SIEA26-28kDa单链抗体与日本血吸虫各阶段的靶向部位,探讨单链抗体在抗血吸虫病疫苗研究中的应用价值。方法扩增增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因.克隆至PET32a/SIEA26~28kDa-scFv质粒,构建PET32a/EGFP-scFv质粒。转化至感受态E.coli BL21(DE3)中。并诱导表达单链抗体融合蛋白。分析单链抗体融合蛋白与SIEA26~28kDa的结合特异性。单链抗体融合蛋白与日本血吸虫成虫、虫卵切片孵育,荧光显微镜下观测GFP信号。确定特异性单链抗体的靶向性。结果重组质粒PET32a/EGFP-scFv构建成功.Trx-EGFP-scFv融合蛋白高效表达.与SIEA26-28kDa特异性结合。GFP信号主要集中在未成熟卵卵胚.雌虫卵巢、卵黄腺及与生殖系统邻近的肠腔组织。结论SIEA26-28kDa单链抗体与血吸虫未成熟卵胚胎及雌虫生殖系统具有较强的靶向性,具有潜在抗卵胚发育、抗雌虫生殖作用,为SIEA26-28kDa单链抗体在抗日本血吸虫病疫苗免疫靶向方面的研究奠定了基础。
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关键词
日本血吸虫
未成熟卵可溶性抗原(
siea
)
单链抗体(scFv)
增强型绿色荧光蛋白(EGFP)
靶向性
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职称材料
日本血吸虫未成熟卵单链抗体库的构建、筛选及初步应用
被引量:
13
2
作者
何卓
汪世平
+4 位作者
肖小芹
曾少华
刘明社
李林
周帅锋
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2008年第8期921-928,共8页
运用噬菌体展示技术构建日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原(SIEA)单链抗体(scFv)表达文库,以天然分子候选疫苗SIEA26~28ku为靶抗原筛选SIEA单链抗体库,获得特异性单链抗体.并将该scFv基因亚克隆至原核高效表达载体PET32a,诱导SIEA26~28k...
运用噬菌体展示技术构建日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原(SIEA)单链抗体(scFv)表达文库,以天然分子候选疫苗SIEA26~28ku为靶抗原筛选SIEA单链抗体库,获得特异性单链抗体.并将该scFv基因亚克隆至原核高效表达载体PET32a,诱导SIEA26~28ku特异性scFv大量表达.随后以此为探针筛选日本血吸虫尾蚴cDNA文库,以期获得SIEA26~28ku天然分子候选疫苗相关的编码基因.结果显示,所获得的SIEA26~28ku特异性scFv,表达量高,采用该探针初步筛选出相关基因核糖体蛋白S4.SIEA26~28ku特异性scFv的获得,为进一步筛选、分析鉴定抗日本血吸虫病天然分子候选疫苗SIEA26~28ku的编码基因奠定了基础.
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关键词
日本血吸虫
未成熟虫卵可溶性抗原(
siea
)
单链抗体(scFv)
噬菌体展示抗体库
CDNA文库
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职称材料
题名
抗日本血吸虫生殖功能分子SIEA26~28kDa单链抗体与EGFP的融合表达及靶向性研究
被引量:
3
1
作者
何卓
汪世平
周帅锋
秦永华
高冬梅
汪希雅
李林
余路新
徐绍锐
机构
中南大学湘雅医学院
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第8期704-707,共4页
基金
国家重点基础研究发展计划(973)(GrantNo.2007CB513108)
湖南省"十一.五"重大专项(No.2006SK1001)
湖南省"十一.五"重点学科建设专项经费(No.2007-985-2)联合资助
文摘
目的体外观察抗日本血吸虫生殖功能分子SIEA26-28kDa单链抗体与日本血吸虫各阶段的靶向部位,探讨单链抗体在抗血吸虫病疫苗研究中的应用价值。方法扩增增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因.克隆至PET32a/SIEA26~28kDa-scFv质粒,构建PET32a/EGFP-scFv质粒。转化至感受态E.coli BL21(DE3)中。并诱导表达单链抗体融合蛋白。分析单链抗体融合蛋白与SIEA26~28kDa的结合特异性。单链抗体融合蛋白与日本血吸虫成虫、虫卵切片孵育,荧光显微镜下观测GFP信号。确定特异性单链抗体的靶向性。结果重组质粒PET32a/EGFP-scFv构建成功.Trx-EGFP-scFv融合蛋白高效表达.与SIEA26-28kDa特异性结合。GFP信号主要集中在未成熟卵卵胚.雌虫卵巢、卵黄腺及与生殖系统邻近的肠腔组织。结论SIEA26-28kDa单链抗体与血吸虫未成熟卵胚胎及雌虫生殖系统具有较强的靶向性,具有潜在抗卵胚发育、抗雌虫生殖作用,为SIEA26-28kDa单链抗体在抗日本血吸虫病疫苗免疫靶向方面的研究奠定了基础。
关键词
日本血吸虫
未成熟卵可溶性抗原(
siea
)
单链抗体(scFv)
增强型绿色荧光蛋白(EGFP)
靶向性
Keywords
Schistosoma japonicum
soluble fluorescence protein (EGFP)
targeting ability immature egg antigen (siea)
single-chain Fv antibody
enhanced green
分类号
R383.2 [医药卫生—医学寄生虫学]
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职称材料
题名
日本血吸虫未成熟卵单链抗体库的构建、筛选及初步应用
被引量:
13
2
作者
何卓
汪世平
肖小芹
曾少华
刘明社
李林
周帅锋
机构
中南大学湘雅医学院寄生虫学系
湖南师范大学第三附属医院
山西省长治医学院寄生虫学教研室
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2008年第8期921-928,共8页
基金
国家重点基础研究发展计划(973)(2007CB513108)
国家高技术研究发展计划(863)(2004AA2Z3530)
+1 种基金
湖南省"十一.五"重大专项(2006SK1001)
湖南省"十一.五"重点学科建设专项经费(07-985-2)联合资助项目~~
文摘
运用噬菌体展示技术构建日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原(SIEA)单链抗体(scFv)表达文库,以天然分子候选疫苗SIEA26~28ku为靶抗原筛选SIEA单链抗体库,获得特异性单链抗体.并将该scFv基因亚克隆至原核高效表达载体PET32a,诱导SIEA26~28ku特异性scFv大量表达.随后以此为探针筛选日本血吸虫尾蚴cDNA文库,以期获得SIEA26~28ku天然分子候选疫苗相关的编码基因.结果显示,所获得的SIEA26~28ku特异性scFv,表达量高,采用该探针初步筛选出相关基因核糖体蛋白S4.SIEA26~28ku特异性scFv的获得,为进一步筛选、分析鉴定抗日本血吸虫病天然分子候选疫苗SIEA26~28ku的编码基因奠定了基础.
关键词
日本血吸虫
未成熟虫卵可溶性抗原(
siea
)
单链抗体(scFv)
噬菌体展示抗体库
CDNA文库
Keywords
Schistosoma japonicum, soluble
immature
egg
antigen
(siea
), single-chain Fv antibody (scFv), phage display antibody library, cDNA library
分类号
R383 [医药卫生—医学寄生虫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
抗日本血吸虫生殖功能分子SIEA26~28kDa单链抗体与EGFP的融合表达及靶向性研究
何卓
汪世平
周帅锋
秦永华
高冬梅
汪希雅
李林
余路新
徐绍锐
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
日本血吸虫未成熟卵单链抗体库的构建、筛选及初步应用
何卓
汪世平
肖小芹
曾少华
刘明社
李林
周帅锋
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2008
13
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职称材料
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