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Application of PCR-SSCP in detecting rpoB drug resistant gene polymorphism of M. tuberculosis L-form from pneumoconiosis patients with tuberculosis
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作者 陆军 江姗 郑昭 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 2006年第5期330-332,共3页
Objective: To study the relationship between the polymorphism of drug resistant gene rpoB and drug resistance against rifampicin(RFP) of M. tuberculosis L-forms, and to evaluate its clinical application. Methods: A to... Objective: To study the relationship between the polymorphism of drug resistant gene rpoB and drug resistance against rifampicin(RFP) of M. tuberculosis L-forms, and to evaluate its clinical application. Methods: A total of 52 clinical isolated strains of M. tuberculosis L-forms were collected. rpoB gene polymorphism was analyzed by polymerase chain reaction and single-strand conformation polymorphism (PCR-SSCP) and conventional antimicrobial susceptibility test (AST). Their results were compared. Results: AST results showed that 38 of 52 clinical isolated strains were drug resistance (73.08%),while PCR-SSCP indicated 65.38% (32/52) rpoB gene polymorphism. There was no statistic significance(χ2= 2.4914) between the 2 methods. Conclusion:Combined the application of PCR-SSCP with AST in detecting rpoB drug resistant gene polymorphism of M. tuberculosis L-form from pneumoconiosis patients with tuberculosis may have advantages at earlier diagnosis and guidance of clinical medications. 展开更多
关键词 PNEUMOCONIOSIS TUBERCULOSIS M. TUBERCULOSIS L-FORM drug-resistance RPOB polymerase chain reaction and single-strand conformation polymorphism antimicrobial susceptibility test
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Detection of the polymorphism at codon 72 in exon 4 of p53 gene by PCR-SSCP
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作者 陈艺华 张素娟 +2 位作者 董敬朋 蔡俊杰 陆药丹 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 1995年第1期10-13,共4页
By employing different gel components and electrophoresis conditions, the PCR-SSCP(polymerase chain reaction-single-stranded conformation polymorphism) method was used to detect the polymorphism(CCC or CGC ) of codon ... By employing different gel components and electrophoresis conditions, the PCR-SSCP(polymerase chain reaction-single-stranded conformation polymorphism) method was used to detect the polymorphism(CCC or CGC ) of codon 72 in exon 4 of p53 gene. The results 展开更多
关键词 P53 GENE polymorphism single-stranded comformation polymorphism(sscp)
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绵羊LHR基因PCR-SSCP多态性与繁殖性状的关联分析 被引量:4
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作者 王利红 高勤学 +3 位作者 张伟 靳春方 李玉春 王锋 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期362-369,共8页
通过聚合酶链式反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)分析方法检测绵羊品种(湖羊、晋中绵羊和陵川半细毛羊)促黄体素受体(luteinizing hormone receptor,LHR)基因外显子11核酸序列的单核苷酸多态性,并研究该基因多态性对湖羊性早熟和产羔数的... 通过聚合酶链式反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)分析方法检测绵羊品种(湖羊、晋中绵羊和陵川半细毛羊)促黄体素受体(luteinizing hormone receptor,LHR)基因外显子11核酸序列的单核苷酸多态性,并研究该基因多态性对湖羊性早熟和产羔数的影响。结果表明:在6对引物扩增产物中,只有引物P2和P6的扩增片段具有多态性,引物P2扩增区存在2种基因型,分别为LL和LM型,在3个绵羊品种中均未检测到MM型;引物P6扩增区存在6种不同的SSCP带型,经序列比对分析存在T2053A、A2044T和G2003A的错义突变。湖羊和晋中绵羊P2扩增区基因型分布差异不显著(P>0.05),而与陵川半细毛羊均存在极显著差异(P<0.01);P6扩增区的2 053、2 044、2 003位点各基因型分布在湖羊和晋中绵羊间差异不显著(P>0.05),而与陵川半细毛羊间存在显著差异。P2扩增位点仅陵川半细毛羊的基因分布不符合哈迪-温伯格定律;P6扩增区湖羊和晋中绵羊在各突变位点的等位基因频率处于群体平衡状态,陵川半细毛羊除2 003突变位点基因分布处于群体不平衡状态外,其余突变位点的等位基因频率分布符合哈迪-温伯格定律;LHR外显子11区不同基因型湖羊各胎次产羔数差异不显著(P>0.05),表明LHR外显子11对湖羊的性早熟和高繁殖力性状没有显著影响。 展开更多
关键词 促黄体素受体基因 聚合酶链式反应-单链构象多态性 繁殖力 湖羊 晋中绵羊 陵川半细毛羊
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利用PCR-SSCP及克隆分析对HERG基因突变的新发现(英文) 被引量:1
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作者 杨平 戴德哉 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期66-68,共3页
为研究QT延长综合征(LQTS)致病的分子遗传学基础。我们在PCR基础上建立SSCP方法对LQT患者和正常对照者HERG基因的突变进行研究。并且利用克隆技术对突变进行确证。通过SSCP分析,在1例正常对照者中发现异常... 为研究QT延长综合征(LQTS)致病的分子遗传学基础。我们在PCR基础上建立SSCP方法对LQT患者和正常对照者HERG基因的突变进行研究。并且利用克隆技术对突变进行确证。通过SSCP分析,在1例正常对照者中发现异常条带,该突变无法用直接测序确证,因此我们将其转入质粒,克隆后再进行测序。结果提示在HERG基因752位点(5′→3′)异常插入9个碱基。突变型为杂合子。突变导致蛋白通道氨基酸序列中插入GlyAlaGly。与其他已报道的突变不同,本文所发现的3个氨基酸的插入突变不是LQTS发生的遗传基础。 展开更多
关键词 QT延长综合征 HERG基因 突变 PCR-sscp
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PCR-SSCP法检测结核分枝杆菌L型rpsL耐药基因 被引量:1
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作者 陆军 叶松 金强 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期107-108,共2页
目的探索尘肺结核患者感染的结核分枝杆菌(MT)L型的耐药基因rpsL突变与耐受链霉素(SM)的关系。方法用PCR-SSCP方法检测rpsL基因,与采用常规SM药敏试验(AST法)的结果进行对比分析。结果采用AST法检测,52株结核分枝杆菌L型临床分离株中共... 目的探索尘肺结核患者感染的结核分枝杆菌(MT)L型的耐药基因rpsL突变与耐受链霉素(SM)的关系。方法用PCR-SSCP方法检测rpsL基因,与采用常规SM药敏试验(AST法)的结果进行对比分析。结果采用AST法检测,52株结核分枝杆菌L型临床分离株中共有26株(50.0%)耐SM;PCR-SSCP法检出rpsL基因突变率为40.4%(21/52),2种方法检测耐药株的符合率为80.8%。结论结核杆菌L型对SM的耐药与rpsL基因突变有关。 展开更多
关键词 尘肺 结核分枝杆菌L型 耐药 RPSL基因 聚合酶链反应-单链构象多态性分析
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应用PCR-SSCP检测β地中海贫血基因突变
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作者 朱益军 刘敬忠 吴冠芸 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 1993年第6期25-27,共3页
关键词 β 地中海贫血 检测 基因
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马尾松表达序列标签多态性初步分析 被引量:12
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作者 尹佟明 李东 +2 位作者 陈颖 黄敏仁 王明庥 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第6期176-180,共5页
We reported our preliminary study on mapping of the expressed sequence tag (EST) using single-stranded DNA conformation polymorphism (SSCP) on polymerase chain reaction (PCR) product. Five ESTs primer pairs, developed... We reported our preliminary study on mapping of the expressed sequence tag (EST) using single-stranded DNA conformation polymorphism (SSCP) on polymerase chain reaction (PCR) product. Five ESTs primer pairs, developed from nuclear genes including CAD(cinnamyl-alcohol dehydrgenase), CHS(chalcone synthase), NIR(nitrite reductase), ARA554 (cDNA expressed in differentiating xylem in Pinus taedae) and GS(glutamine synthetase), were selected to optimize the experimental protocol and generate mapping markers in the megagemtophytes from a single tree of Pinus massoniana. Our ultimate goal was to use SSCP approach to construct a transcriptional map for comparative mapping studies in P. massoniana. The efficiency to construct a transcriptional map in P. massoniana based on the published EST primer pairs derived from other pine species critically depended on the successful amplification of EST fragments and the ratio of the heterozygous loci revealed in P.massoniana. In this study, 3 (60) out of 5 tested EST primer pairs were succeeded in amplification, however, only 1(20) gene was heterozygous in the tested tree. The ratio of heterozygous loci detected in this study was similar to that revealed by anonymous marker in P.taeda. Therefore, a low efficiency would be expected if the map would be constructed using single pedigree. The segregation ratio of loci revealed by primer pairs would be higher if multiple pedigrees would be used. We proposed that consensus mapping approach based on multiple-pedigree should be used for EST mapping and therefore to increase the efficiency of EST mapping. 展开更多
关键词 马尾松 表达序列标签 单链构象多态性 遗传图谱
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毛细管电泳联合激光诱导荧光技术检测结直肠癌hMLH1基因突变 被引量:2
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作者 陆爱国 冯波 +1 位作者 郑民华 许国旺 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期25-27,共3页
目的 建立毛细管电泳 (CE)联合激光诱导荧光检测 (LIF)技术 ,分析单链构象多态性 (SSCP) ,检测人结直肠癌hMLH1基因点突变的方法。方法 PCR扩增 4 2例散发性结直肠癌患者与 2 0例健康志愿者外周血基因组DNAhMLH1基因 12外显子 ,采用CE... 目的 建立毛细管电泳 (CE)联合激光诱导荧光检测 (LIF)技术 ,分析单链构象多态性 (SSCP) ,检测人结直肠癌hMLH1基因点突变的方法。方法 PCR扩增 4 2例散发性结直肠癌患者与 2 0例健康志愿者外周血基因组DNAhMLH1基因 12外显子 ,采用CE LIF进行SSCP分析 ,对异常片段进行测序鉴定 ;研究不同筛分介质 (线性聚丙烯酰胺LPA)浓度、分离温度与分离电压对CE行为的影响。结果  4 2例患者中有 4例 (9.5 2 % )突变 ,CE测序证实为T115 1A的杂合子点突变 ;2 0例健康志愿者未发现突变。较高浓度的LPA(4 %~ 6 % ) ,2 0℃分离温度与 9kV分离电压有助于单链DNA峰分离。结论 调整适宜的LPA浓度、分离温度与分离电压可提高CE分析SSCP的效率 ,应用CE LIF技术SSCP分析检测hMLH1基因点突变快速、高效、重复性好 。 展开更多
关键词 HMLH1基因 LPA 结直肠癌 sscp 点突变 联合 健康志愿者 测序 毛细管电泳 单链DNA
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海南地方猪POU1F1基因多态性与体质量的相关性 被引量:1
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作者 孙瑞萍 魏立民 +4 位作者 郑心力 刘圈伟 黄丽丽 晁哲 王峰 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期187-191,共5页
采用PCR-SSCP、PCR-RFLP技术,对海南五指山猪封闭群及其近交系、海南黑猪2个品系(临高猪、屯昌猪)的POU1F1基因外显子4、外显子5、外显子6、内含子3的多态性进行研究。结果表明:猪POU1F1基因外显子5、外显子6不存在多态性,内含子3、外显... 采用PCR-SSCP、PCR-RFLP技术,对海南五指山猪封闭群及其近交系、海南黑猪2个品系(临高猪、屯昌猪)的POU1F1基因外显子4、外显子5、外显子6、内含子3的多态性进行研究。结果表明:猪POU1F1基因外显子5、外显子6不存在多态性,内含子3、外显子4存在2个等位基因和3种基因型;在外显子4基因座上,五指山猪、临高猪、屯昌猪呈Hardy-Weinberg平衡状态,五指山猪近交系呈不平衡状态,4个猪种群的遗传多态性均处于中度多态(0.25<PIC<0.5);在内含子3位点,4个猪种群均呈Hardy-Weinberg平衡状态,五指山猪和五指山猪近交系群体的遗传多态性均处于中度多态(0.25<PIC<0.5),临高猪、屯昌猪2个猪种群处于高度多态(PIC>0.5);利用SPSS软件分析五指山猪POUIF1基因内含子3和外显子4基因的多态性与其3个生长阶段体质量的相关性,发现引物P1与P4不同基因型个体体质量的差异均不显著。 展开更多
关键词 五指山猪 POU1F1基因 限制性片段长度多态性聚合酶链反应 单链构象多态
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生活污水人工渠自净过程及原生动物演替 被引量:1
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作者 赵阳国 任南琪 王爱杰 《哈尔滨工业大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第6期870-873,共4页
为探讨小城镇生活污水人工渠自净的可行性及原生动物的响应过程,采用传统的生化分析方法并结合最新的基因指纹技术,对哈尔滨双城市居民生活污水水体自净过程中的水质变化以及相应的指示性原生动物的动态演替进行分析.结果表明,化学需氧... 为探讨小城镇生活污水人工渠自净的可行性及原生动物的响应过程,采用传统的生化分析方法并结合最新的基因指纹技术,对哈尔滨双城市居民生活污水水体自净过程中的水质变化以及相应的指示性原生动物的动态演替进行分析.结果表明,化学需氧量(COD)为140 mg/L的生活污水,经由约9 km的人工渠,通过沉降、化学分解、生物代谢等作用,降至40 mg/L以下,碱度逐渐从1000 mg/L下降至250 mg/L,pH从7.3上升至8.0;总磷含量由2.0 mg/L逐渐降低至1.3 mg/L.在整个过程中的原生动物种类较少,主要有草履虫属、四膜虫属和鞭毛虫属.鞭毛虫属一直是优势原生动物,草履虫属和四膜虫属在寡污带出现,最后消失.居民生活污水在人工渠中通过较长的自净流程(≥9 km)达到排放的要求,注入松花江支流拉林河. 展开更多
关键词 生活污水 水体自净 单链构象多态性(sscp) 原生动物
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Study on mitochondrial DNA diversity among 7 inbred strains of mice
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作者 戴纪刚 肖颖彬 +2 位作者 张国强 闵家新 魏泓 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 2006年第3期164-168,共5页
Objective:To study the genetic variation of mitochondrial DNA (mtDNA) among common laboratory strains of inbred mice. Methods: The genetic polymorphism of mtDNA among 4 classical laboratory strains of inbred mice ... Objective:To study the genetic variation of mitochondrial DNA (mtDNA) among common laboratory strains of inbred mice. Methods: The genetic polymorphism of mtDNA among 4 classical laboratory strains of inbred mice and 3 inbred strains of mice established in China was analyzed by polymerase chain reaction coupled with restriction fragment length polymorphism(PCR-RFLP) and PCR coupled with single-stranded conformation polymorphism(PCR-SSCP). Results: With regard to the D-loop (Displacement loop, D-loop), tRNA^ Met+Glu+Ile, and ND3 (NADH dehydrogenase subunit 3, ND3) gene fragments of mtDNA from these mice,no variation was revealed by PCR-RFLP at 46 restriction enzyme sites. Further analyzed by PCR-SSCP,the D-loop 5'fragment and 3'end fragment of mtDNA from these mice also showed no genetic variation. Conclusion: Owing to maternal mode of inheritance of mtDNA,the results indicate that these common inbred strains of mice share the same maternal lineage. 展开更多
关键词 inbred strains mtDNA polymerase chain reaction coupled with restriction fragment length polymorphism PCR coupled with single-stranded conformation polymorphism polymorphism
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