期刊文献+
共找到109篇文章
< 1 2 6 >
每页显示 20 50 100
Prion疾病和“proteinonly”假说 被引量:8
1
作者 周筠梅 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第2期95-105,共11页
Prion病是指一类由蛋白质错误折叠导致的具有传染性的疾病 .人类的纹状体脊髓变性病、库鲁病、脑软化病 ,和致死的家族性失眠症以及动物的羊瘙痒病和牛海绵状脑炎即疯牛病 ,都是致死性的神经退行性疾病 ,它们都属于传染性海绵状脑炎 ,统... Prion病是指一类由蛋白质错误折叠导致的具有传染性的疾病 .人类的纹状体脊髓变性病、库鲁病、脑软化病 ,和致死的家族性失眠症以及动物的羊瘙痒病和牛海绵状脑炎即疯牛病 ,都是致死性的神经退行性疾病 ,它们都属于传染性海绵状脑炎 ,统称Prion病 .PrPC 是Prion蛋白在细胞内的正常形式 ,PrPSc是其致病形式 .根据“proteinonly”假说 ,PrPC 向PrPSc的转化是致病的关键步骤 .简要介绍了PrP蛋白的结构特征、PrPC 向PrPSc转化的可能机制、影响PrPC 向PrPSc转化的重要因素和PrP在细胞内的生物学过程等方面的研究进展 ,讨论了Prion疾病的诊断和治疗方法 . 展开更多
关键词 prion疾病 蛋白质 错误折叠 protein only”假说
在线阅读 下载PDF
抗PrP抗体在Prion病研究中的意义 被引量:9
2
作者 刘松岩 林世和 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第2期76-77,共2页
关键词 prion prp抗体 朊蛋白病 研究
在线阅读 下载PDF
铜离子对PrP转基因线虫的影响 被引量:3
3
作者 朱淼 高跃 +6 位作者 李忠义 鞠传静 孟轲音 王雄 郝雯丽 万家余 陈志宝 《黑龙江八一农垦大学学报》 2013年第6期43-47,73,共6页
通过考查铜离子在朊病毒疾病发病过程中的作用,将有助于阐明朊病毒形成及发病机制以及重金属铜离子对朊病毒发病过程的影响,为进一步对朊病毒疾病的防治提供重要依据。实验运用采用转PrP基因线虫模型来研究朊蛋白与铜离子的相互作用。... 通过考查铜离子在朊病毒疾病发病过程中的作用,将有助于阐明朊病毒形成及发病机制以及重金属铜离子对朊病毒发病过程的影响,为进一步对朊病毒疾病的防治提供重要依据。实验运用采用转PrP基因线虫模型来研究朊蛋白与铜离子的相互作用。结果表明,线虫暴露于10-3mol·L-1铜离子浓度条件下,其对食物敏感性会下降,生命周期会减短,产卵数会减少;当线虫暴露于10-4mol·L-1铜离子浓度条件下,会减少以上三种影响;当线虫暴露于10-6mol·L-1铜离子浓度条件下,对线虫几乎没有影响。研究数据显示,在有高浓度铜离子影响情况下,转入朊蛋白102位点突变(dat-1-PrP102Mut)(W102)的线虫比转入朊蛋白(dat-1-PrPWt)(W101)的线虫损伤更严重,转入朊蛋白(W101)的线虫比野生型线虫(N2)损伤更严重。 展开更多
关键词 朊蛋白(prp) 铜离子 食物敏感性 生命周期 产卵数
在线阅读 下载PDF
不同牛PrP合成肽段的抗原性研究 被引量:3
4
作者 赵丽 王健伟 +3 位作者 计融 韩春卉 于修平 洪涛 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第8期681-684,共4页
目的研究PrP多肽的抗原性以及不同偶联方法对多肽免疫原性的影响。方法选择4段牛PrP多肽(BoP1、BoP2、BoP3、BoP4)为半抗原,KLH为载体,MBS、戊二醛两种偶联方法进行偶联,免疫BALB/c小鼠,间接ELISA方法检测小鼠血清中抗体效价,并对两种... 目的研究PrP多肽的抗原性以及不同偶联方法对多肽免疫原性的影响。方法选择4段牛PrP多肽(BoP1、BoP2、BoP3、BoP4)为半抗原,KLH为载体,MBS、戊二醛两种偶联方法进行偶联,免疫BALB/c小鼠,间接ELISA方法检测小鼠血清中抗体效价,并对两种偶联方法进行比较。结果两组动物均出现死亡,戊二醛偶联多肽免疫小鼠出现不同程度的腹水,MBS偶联多肽免疫小鼠未见其它异常反应;戊二醛偶联的4种多肽产生的抗体效价无显著性差异(P>0.05),MBS偶联的KLH-BoP1、KLH-BoP2、KLH-BoP4产生抗体效价无显著性差异(P>0.05),MBS偶联的KLH-BoP3抗体效价低于其它3种多肽(P<0.05);对同一种多肽而言,不同偶联方法KLH-BoP1、KLH-BoP2、KLH-BoP4所产生抗体效价无显著性差异(P>0.05),戊二醛偶联KLH-BoP3产生的抗体效价明显高于MBS偶联KLH-BoP3产生的抗体效价(P<0.05)。结论PrP多肽可作为半抗原刺激小鼠强烈的免疫反应,不同偶联方法,不同肽段抗原性不同,为抗PrP多克隆及单克隆抗体的制备奠定了基础。 展开更多
关键词 朊蛋白 多肽 半抗原 抗原性 载体
在线阅读 下载PDF
酵母双杂交技术筛选朊蛋白PrP23-231互作蛋白 被引量:5
5
作者 宋博翠 陈志宝 +1 位作者 万家余 高宏伟 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第8期34-37,共4页
利用酵母双杂交技术,以pSos-PrP23-231载体为诱饵质粒,筛选小鼠脑cDNA文库中能与朊蛋白PrP23-231相互作用的蛋白。通过一次筛选,三次验证,从小鼠脑cDNA文库中得到2个阳性克隆,通过BLAST序列比对得到2个候选基因序列,并对验证后的阳性克... 利用酵母双杂交技术,以pSos-PrP23-231载体为诱饵质粒,筛选小鼠脑cDNA文库中能与朊蛋白PrP23-231相互作用的蛋白。通过一次筛选,三次验证,从小鼠脑cDNA文库中得到2个阳性克隆,通过BLAST序列比对得到2个候选基因序列,并对验证后的阳性克隆的外源性片段进行测序及同源性分析,得到的蛋白编码基因可能与朊蛋白存在相互作用,其作用可能与疯牛病发病机制有关。 展开更多
关键词 朊蛋白 酵母双杂交 蛋白互作
在线阅读 下载PDF
中国健康人PrP基因129位点密码子多态性研究 被引量:4
6
作者 南善姬 赵节绪 《中国人兽共患病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期140-142,共3页
目的 探索中国健康人PrP基因 12 9位点密码子的多态性。方法 取 6 0名健康人基因组后 ,用PCR法扩增PrP基因的外显子 ,最后用NspⅠ酶切 ,进而对PrP基因 12 9位点多态性进行分析。 结果  6 0例健康人中 ,5 2例为甲硫氨酸(Met) /甲硫氨... 目的 探索中国健康人PrP基因 12 9位点密码子的多态性。方法 取 6 0名健康人基因组后 ,用PCR法扩增PrP基因的外显子 ,最后用NspⅠ酶切 ,进而对PrP基因 12 9位点多态性进行分析。 结果  6 0例健康人中 ,5 2例为甲硫氨酸(Met) /甲硫氨酸 (Met) ,8例为甲硫氨酸 (Met) /缬氨酸 (Val)。结论 东西方人PrP基因 12 9位点密码子Met/Met型、Met/Val型与Val/Val比例不同 ,而且根据现有报道东方人中缺乏Val/Val型。 展开更多
关键词 prp基因129位点密码子 多态性 克-雅氏病 朊蛋白病 疯牛病
在线阅读 下载PDF
牛朊蛋白(bPrP^C)基因的克隆和序列分析 被引量:7
7
作者 吴润 谢庆阁 +1 位作者 刘湘涛 陈豪泰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期318-323,共6页
分别从9头牛(3头牦牛、3头荷斯坦牛和3头秦川黄牛)全血中提取基因组总DNA,用所设计引物以聚合酶链式反应扩增出细胞型朊蛋白(PrPC)基因,并克隆到pMD18-T载体。序列分析表明所克隆的牛PrPC的片段大小为795bp,包含了牛朊蛋白基因的完整编... 分别从9头牛(3头牦牛、3头荷斯坦牛和3头秦川黄牛)全血中提取基因组总DNA,用所设计引物以聚合酶链式反应扩增出细胞型朊蛋白(PrPC)基因,并克隆到pMD18-T载体。序列分析表明所克隆的牛PrPC的片段大小为795bp,包含了牛朊蛋白基因的完整编码区序列,为含单一外显子的完整开放阅读框,与国内外报道的已知序列基本相同。本次所报道的牛PrP(bPrPC)基因含6个短而富含G-C的元件,可编码八肽Pro-His-Gly-Gly-Gly-Trp-Gly-Gln/Arg或九肽Pro-Gln/His-Gly-Gly-Gly-Gly-Trp/Arg-Gly-Gln。这些bPrPC基因序列相比较,其核苷酸和氨基酸同源性分别在99.0%~100.0%和99.2%~100.0%之间。在整个18个碱基替换中,多数替换是保守的,为同义突变,仅有5个替换引起氨基酸突变,分别为HN200302的W60R、HN200303的S154N、MN200301的A129V、NN200302的Q234R和NN200303的Q94R突变。发现牦牛朊粒基因在126(A→G)、234(G→A)和678(T→C)位的特征性核苷酸替换,但均为同义码替换。 展开更多
关键词 朊蛋白 基因克隆 序列分析 神经变性疾病 疯牛病 朊病毒
在线阅读 下载PDF
PrP蛋白与Shadoo蛋白研究进展 被引量:1
8
作者 王东旭 万家余 +2 位作者 李忠义 孟珂音 高宏伟 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第6期215-217,共3页
朊蛋白(PrP蛋白)在传染性海绵状脑病中具有重要作用,但其生物学功能至今没有明确。Shadoo蛋白是一种与朊蛋白在N端结构上极为相似的新蛋白,SPRN是Shadoo蛋白的结构基因。由于Shadoo蛋白与PrP蛋白具有相同的生物学性质,且它们在脑组织中... 朊蛋白(PrP蛋白)在传染性海绵状脑病中具有重要作用,但其生物学功能至今没有明确。Shadoo蛋白是一种与朊蛋白在N端结构上极为相似的新蛋白,SPRN是Shadoo蛋白的结构基因。由于Shadoo蛋白与PrP蛋白具有相同的生物学性质,且它们在脑组织中重叠表达,因此也被认为是研究朊蛋白的关键因素。文章主要探讨PrP蛋白与Shadoo蛋白在基因结构、蛋白功能、朊病毒感染方面的关系。 展开更多
关键词 朊蛋白 Shadoo蛋白 基因结构 蛋白功能
在线阅读 下载PDF
实时荧光定量PCR检测PrP基因在金黄地鼠脑组织的动态表达 被引量:1
9
作者 宁章勇 赵德明 +4 位作者 杨建民 周向梅 于博 孔小明 尹晓敏 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2007年第9期3-6,共4页
金黄地鼠是研究动物传染性海绵状脑病的理想模型动物之一,其脑组织内朊蛋白基因动态表达数据的测定对探讨该类疾病的发生、发展和分子致病机理具有重要意义。我们利用实时荧光定量RT-PCR技术,对不同年龄金黄地鼠大脑、小脑、丘脑和脑干... 金黄地鼠是研究动物传染性海绵状脑病的理想模型动物之一,其脑组织内朊蛋白基因动态表达数据的测定对探讨该类疾病的发生、发展和分子致病机理具有重要意义。我们利用实时荧光定量RT-PCR技术,对不同年龄金黄地鼠大脑、小脑、丘脑和脑干PrP基因的表达进行了定量。结果发现,脑的四个检测部位都呈现高的表达量,但是同一年龄段不同组织每纳克总RNA中朊蛋白基因的表达量和每毫克组织中朊蛋白基因的表达量有显著的差别,不同组织在不同年龄出现表达高峰。本研究的结果对于探讨朊蛋白的基本功能和脑组织在传染性海绵状脑病病理发生中的作用,提供了基础数据。 展开更多
关键词 金黄地鼠 朊蛋白 基因表达
在线阅读 下载PDF
RNAi抑制PrP表达载体的构建及其在PrP功能研究中的初步应用
10
作者 李玉荣 周向梅 +3 位作者 尹晓敏 杨建民 乔俊文 赵德明 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期337-342,共6页
本文旨在构建有效抑制朊蛋白(Prion protein,PrP)表达的重组质粒,并以此为工具控制PrP表达,从而探讨PrP对细胞SOD活性的影响。设计并化学合成1对含有发夹结构的寡核苷酸片段(shPrP),退火后与表达载体pG-super(Hairpin siRNA expressing ... 本文旨在构建有效抑制朊蛋白(Prion protein,PrP)表达的重组质粒,并以此为工具控制PrP表达,从而探讨PrP对细胞SOD活性的影响。设计并化学合成1对含有发夹结构的寡核苷酸片段(shPrP),退火后与表达载体pG-super(Hairpin siRNA expressing vector)定向连接,构建重组质粒pG-super-shPrP。对重组子进行PCR鉴定,测序正确后,脂质体法转染C6细胞,采用实时荧光定量RT-PCR检测PrP mRNA的表达水平,以验证pG-super-shPrP的抑制效率;结果表明:重组质粒pG-super-shPrP构建成功,且显著降低C6细胞PrP mRNA表达(P<0.05),抑制效率为34.2%。利用pG-super、pG-super-shPrP分别转染C6细胞,并检测细胞SOD总活性及SOD表达水平,探讨PrP对细胞SOD活性的影响及其作用机制,结果表明PrP促进细胞SOD的活性(P<0.01),但对细胞SOD的表达量无影响,即PrP对SOD活性的促进作用与SOD1的表达量无关。本研究在成功构建了PrP的RNA干扰表达质粒的基础上,利用此质粒,在细胞水平上揭示了PrP对细胞SOD活性的促进作用。 展开更多
关键词 RNAI C6细胞 朊蛋白 表达 超氧化物歧化酶
在线阅读 下载PDF
重组PrP102-242在COS-1中的表达及表达产物的检测
11
作者 丁耀忠 刘永生 +2 位作者 陈浩泰 刘文倩 张杰 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1097-1100,共4页
目的重组的PrP102-242在COS-1细胞中的稳定表达以及表达产物的检测。方法重组表达载体pCI-PrP102-242转染COS-1细胞后,经不同浓度的G418筛选后获得稳定的细胞系,然后用间接免疫荧光、间接ELISA和Western blot检测目的蛋白的表达。结果... 目的重组的PrP102-242在COS-1细胞中的稳定表达以及表达产物的检测。方法重组表达载体pCI-PrP102-242转染COS-1细胞后,经不同浓度的G418筛选后获得稳定的细胞系,然后用间接免疫荧光、间接ELISA和Western blot检测目的蛋白的表达。结果间接免疫荧光、间接ELISA和Western blot检测到目的蛋白在COS-1细胞中的表达。结论目的蛋白PrP102-242在COS-1细胞中的成功表达为下一步研究PrPc的结构和功能奠定了基础。 展开更多
关键词 朊蛋白 COS-1细胞 间接免疫荧光检测技术
在线阅读 下载PDF
海马内注射PrP^C抗体对APPswe/PSEN1^(dE9)转基因小鼠学习和记忆的影响 被引量:1
12
作者 张海英 刘亦恒 +6 位作者 付媛 陈鹏程 陆睿 李剑星 陈明会 杨浩池 张雨生 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期443-449,共7页
目的观察海马内注射PrP^C抗体后,对APPswe/PSEN1^(dE9)转基因小鼠认知缺陷的影响。方法选8月龄雄APPswe/PSEN1^(dE9)转基因小鼠双侧海马内注射PrP^C抗体EP1802Y 2μL或PBS 2μL,C57Bl/6J野生型小鼠为正常对照。2月后,通过旷场实验、新... 目的观察海马内注射PrP^C抗体后,对APPswe/PSEN1^(dE9)转基因小鼠认知缺陷的影响。方法选8月龄雄APPswe/PSEN1^(dE9)转基因小鼠双侧海马内注射PrP^C抗体EP1802Y 2μL或PBS 2μL,C57Bl/6J野生型小鼠为正常对照。2月后,通过旷场实验、新物体识别实验、Morris水迷宫实验、条件性恐惧测试及免疫组化,观察APPswe/PSEN1^(dE9)转基因小鼠行为学及海马内Aβ1-42表达的变化。结果旷场实验中,假手术组与实验组相比,中央活动时间和活动总路程均无明显差异(P>0.05);新物体识别实验中,假手术组分辨指数与实验组分辨指数相比,无显著性差异(P>0.05);在Morris水迷宫实验的空间探索测试中,与正常组相比,假手术组和实验组穿越平台次数显著性减少(P<0.05)。并且假手术组与实验组游泳路程相比,具有显著性差异(P<0.05);在条件恐惧实验中,各组之间无显著性差异;免疫组化的结果显示,实验组小鼠海马内Aβ1-42表达下调。结论 PrP^C抗体可以部分改善APPswe/PSEN1^(dE9)转基因小鼠的认知能力,提示海马内封闭PrP^C蛋白与Aβ寡聚体结合的位点后,或许可以降低Aβ寡聚体毒性。 展开更多
关键词 细胞型朊蛋白 阿尔茨海默病 APPswe/PSEN1^dE9转基因小鼠
在线阅读 下载PDF
人doppel蛋白及其类似蛋白PrPΔ32-121对SH-SY5Y细胞的细胞毒性作用
13
作者 徐琨 王新 +7 位作者 田婵 石崧 王桂荣 石琦 周瑞敏 姜惠英 楚雍烈 董小平 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期32-35,46,共5页
目的体外观察细胞瞬时表达的人Dpl(doppel)蛋白对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的作用,并与其结构类似蛋白——截短型PrP(PrPΔ32-121)加以比较。方法通过PCR方法获得人PRND基因及截短型PRNP基因并克隆至真核表达载体,瞬时转染SH-SY5Y细胞... 目的体外观察细胞瞬时表达的人Dpl(doppel)蛋白对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的作用,并与其结构类似蛋白——截短型PrP(PrPΔ32-121)加以比较。方法通过PCR方法获得人PRND基因及截短型PRNP基因并克隆至真核表达载体,瞬时转染SH-SY5Y细胞后,观察蛋白表达及其定位情况;采用MTT实验检测转染细胞的生长状态;用流式细胞仪、Western blot等方法检测转染细胞的凋亡状态。结果两种蛋白均可在转染细胞中表达,并存在于细胞膜上;MTT结果显示,在转染24 h后均出现明显的细胞毒性作用;细胞凋亡相关实验发现,转染细胞AnnexinV/PI双染阳性细胞数量增多,pro-casepase-3和Bcl-2因子水平降低。结论瞬时表达的Dpl蛋白与截短型PrP可产生类似的神经细胞毒性作用,并诱导启动细胞凋亡过程。 展开更多
关键词 doppel蛋白 朊蛋白 细胞毒性作用 细胞凋亡
在线阅读 下载PDF
PrP106-126对BV-2小胶质细胞NO含量影响及作用机制
14
作者 李玉荣 武现军 +3 位作者 吴浩 陈立功 霍书英 高玉红 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期114-118,共5页
朊蛋白多肽PrP106-126可激活小胶质细胞并产生活性物质。探讨PrP106-126作用于BV-2小胶质细胞对NO生成状况影响,从酶学角度检测其作用机制。在细胞培养液中加入50μmol.L-1PrP106-126,培养48 h后检测培养液NO含量,采用实时定量RT-PCR检... 朊蛋白多肽PrP106-126可激活小胶质细胞并产生活性物质。探讨PrP106-126作用于BV-2小胶质细胞对NO生成状况影响,从酶学角度检测其作用机制。在细胞培养液中加入50μmol.L-1PrP106-126,培养48 h后检测培养液NO含量,采用实时定量RT-PCR检测细胞内iNOs和nNOs在mRNA表达水平。结果表明,PrP106-126显著提高细胞培养液中NO含量(9.34倍,P<0.01),且iNOs和nNOs表达水平均极显著提高(11.60倍和4.36倍,P<0.01),从而为解释朊病发生机制提供基础数据。 展开更多
关键词 朊病毒 prp106-126(prionpe ptide106-126) 小胶质细胞BV-2 NO INOS NNOS
在线阅读 下载PDF
多肽PrP106-126对小脑颗粒神经元凋亡相关基因表达的影响
15
作者 童双 吴新涛 +4 位作者 黄志强 于梦 刘荣昌 王衡 宁章勇 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第7期34-38,共5页
试验旨在研究多肽PrP106-126对小脑颗粒神经元凋亡相关基因表达的影响。本研究利用多肽PrP106-126作用于小脑颗粒神经细胞,对该多肽影响小脑颗粒神经细胞凋亡基因的表达进行了检测。结果表明:bax、caspase-3和myc基因在PrP106-126多肽... 试验旨在研究多肽PrP106-126对小脑颗粒神经元凋亡相关基因表达的影响。本研究利用多肽PrP106-126作用于小脑颗粒神经细胞,对该多肽影响小脑颗粒神经细胞凋亡基因的表达进行了检测。结果表明:bax、caspase-3和myc基因在PrP106-126多肽作用后表达显著增加,而bcl-2基因表达明显下降,进一步验证了bax、caspase-3和myc基因具有诱导凋亡作用,而bcl-2基因则具有抑制凋亡作用。 展开更多
关键词 传染性海绵体脑病 朊蛋白 小脑颗粒神经细胞 细胞凋亡
在线阅读 下载PDF
奶牛PrP^c结构蛋白多肽合成与免疫学特性分析
16
作者 杨建民 赵德明 +2 位作者 郝永新 王辉暖 李宁 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2007年第1期3-7,共5页
目的预测奶牛PrPc结构蛋白抗原表位,人工合成特定序列奶牛PrPc多肽用于抗体制备,同时为研究特定表位结构蛋白的功能特性提供有效手段。方法运用Goldenkey分子生物学软件对牛PrPc结构蛋白的抗原表位及其二级结构进行了分析比较,结合现有... 目的预测奶牛PrPc结构蛋白抗原表位,人工合成特定序列奶牛PrPc多肽用于抗体制备,同时为研究特定表位结构蛋白的功能特性提供有效手段。方法运用Goldenkey分子生物学软件对牛PrPc结构蛋白的抗原表位及其二级结构进行了分析比较,结合现有牛PrPc单克隆抗体识别表位从中筛选了一段显示表位特征的氨基酸残基序列,应用固相合成法合成15个氨基酸残基的奶牛PrPc多肽,并利用MBS法将其与KLH偶连制成免疫原,应用于动物免疫及多克隆抗体的制备,对该多抗与PrPc的反应性进行了检测。结果偶连后的牛PrPc多肽具有免疫原性,并获得了抗牛PrPc多克隆抗体。结论奶牛PrPc合成肽抗原的获得和应用,可以部分替代天然抗原,为进一步制备PrP单克隆抗体,以及Prion疾病的深入研究提供了有利条件,同时为研究特定表位结构蛋白的功能特性提供了新的途径。 展开更多
关键词 prp^c 合成肽 KLH 免疫学特性 奶牛
在线阅读 下载PDF
马麝朊蛋白(PrP)基因的克隆和序列分析
17
作者 陈豪泰 吴润 刘湘涛 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2005年第3期292-296,共5页
从马麝的全血中提取基因组总DNA,用所设计引物以聚合酶链式反应扩增出细胞型朊蛋白(PrPC)基因,并克隆到pMD18-T载体。序列分析表明所克隆的马麝PrP基因片段大约为771bp,包含了朊蛋白基因的完整编码区序列,即包含在单一外显子内的完整开... 从马麝的全血中提取基因组总DNA,用所设计引物以聚合酶链式反应扩增出细胞型朊蛋白(PrPC)基因,并克隆到pMD18-T载体。序列分析表明所克隆的马麝PrP基因片段大约为771bp,包含了朊蛋白基因的完整编码区序列,即包含在单一外显子内的完整开放阅读框,与国外报道的同科动物PrP基因序列基本相同。马麝PrP基因含5个短而富含G-C的元件,可编码5个八肽(九肽)重复Pro-His-Gly-Gly-Gly-Trp-Gly-Gln或Pro-Gln/His-Gly-Ala/Gly-Gly–Gly-Trp-Gly-Gln,其氨基酸序列含有24个氨基酸的N-端信号肽和23个氨基酸的C-端信号肽。与白尾鹿(Odocoileusvirginianus)和麋鹿(Cervuselaphus)的PrP基因相比,其核苷酸序列和推导氨基酸序列同源性分别为97.4%、97.9%和98.1%、97.7%。共发生15个碱基替换,其中10个为同义码替换,5个为异义突变,即G57A、S100N、N173S、T177N和M208I。 展开更多
关键词 马麝 朊蛋白基因 克隆 序列分析
在线阅读 下载PDF
中国黄牛PrP^c成熟蛋白的原核表达和抗原性分析
18
作者 吴晓东 王长杰 王志亮 《中国动物检疫》 CAS 2002年第4期23-24,共2页
将中国黄牛PrPc 成熟蛋白基因重组质粒b -pET11a -PrPc(本室构建 )转化大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达。SDS -PAGE电泳显示表达产物的分子量约为23KD ,大小与预计相符 ;免疫印迹 (WesternBlotting)试验进一步证实 ,中国黄牛PrPc 成熟蛋白获... 将中国黄牛PrPc 成熟蛋白基因重组质粒b -pET11a -PrPc(本室构建 )转化大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达。SDS -PAGE电泳显示表达产物的分子量约为23KD ,大小与预计相符 ;免疫印迹 (WesternBlotting)试验进一步证实 ,中国黄牛PrPc 成熟蛋白获得了正确的表达 ,且与大肠杆菌BL21(DE3) 展开更多
关键词 中国黄牛 prp^c成熟蛋白 表达 抗原性
在线阅读 下载PDF
关岭牛朊蛋白基因23 bp和12 bp插入/缺失的多态性及其对牛海绵状脑病抗性的影响
19
作者 王弋丹 宋大军 +1 位作者 和晓明 王波 《云南农业大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第2期50-57,共8页
【目的】分析关岭牛朊蛋白(prion protein,PRNP)基因23 bp和12 bp插入/缺失位点的多态性及其在抗牛海绵状脑病(bovine spongiform encephalopathy,BSE)中的潜在作用。【方法】对130头关岭牛的PRNP基因23 bp和12 bp插入/缺失位点进行PCR... 【目的】分析关岭牛朊蛋白(prion protein,PRNP)基因23 bp和12 bp插入/缺失位点的多态性及其在抗牛海绵状脑病(bovine spongiform encephalopathy,BSE)中的潜在作用。【方法】对130头关岭牛的PRNP基因23 bp和12 bp插入/缺失位点进行PCR扩增和测序,分析其BSE抗病基因的多态性及特征。【结果】关岭牛PRNP 23 bp基因型以插入(insertion,Ⅰ)和缺失(deletion,D)的杂合子(ID)为主,频率为0.469;12 bp以插入纯合型(Ⅱ)为主,频率为0.600;23 bp和12 bp插入型等位基因频率分别为0.481和0.777。在单倍型中,I23I12和D23I12占主导地位,频率分别为0.457和0.320,均高于普通牛(Bos taurus),显示出其独特性;其中,D23I12型的频率明显高于已知BSE易感性牛种。【结论】关岭牛PRNP基因的23 bp和12 bp多态性特征表现出较高的BSE抗病水平,为中国地方牛种的抗病性分子育种提供了重要参考。 展开更多
关键词 关岭牛 朊蛋白基因(PRNP) 多态性 牛海绵状脑病(BSE) 抗病性
在线阅读 下载PDF
Protein A磁珠检测朊病毒方法的建立 被引量:2
20
作者 李奇 杨阳 +3 位作者 吕鹏 宋博翠 白宗瑞 陈志宝 《黑龙江八一农垦大学学报》 2009年第3期73-75,94,共4页
建立Protein A磁珠法检测朊病毒,将朊病毒抗体IH2包被后的Protein A磁珠与蛋白酶K消化过的攻毒小鼠脑组织匀浆液混合,经免疫沉淀缓冲液温和洗脱杂蛋白,再经0.2M甘氨酸将目的蛋白洗脱并且利用聚丙酰胺凝胶电泳检测。通过聚丙酰胺凝胶电... 建立Protein A磁珠法检测朊病毒,将朊病毒抗体IH2包被后的Protein A磁珠与蛋白酶K消化过的攻毒小鼠脑组织匀浆液混合,经免疫沉淀缓冲液温和洗脱杂蛋白,再经0.2M甘氨酸将目的蛋白洗脱并且利用聚丙酰胺凝胶电泳检测。通过聚丙酰胺凝胶电泳检测出25KD的目的蛋白带,经与正常未消化的朊蛋白条带相比较,证实检测出朊病毒。Protein A磁珠具有高效特异的与抗体IgG结合的特点,与多克隆抗体混合后可有效结合IgG。该方法较免疫组织化学和Western-blot技术简便快速,且磁珠可以回收再使用,使成本低廉。 展开更多
关键词 protein A磁珠 朊蛋白(prpC) 朊病毒(prpSC) 免疫沉淀
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 6 下一页 到第
使用帮助 返回顶部